一种组合物及其在抗病毒药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及有机合成和药物化学领域，具体设及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 单纯瘤疹病毒1型Ofe巧essimplexvirus,服V-1)和单纯瘤疹病毒2型Ofe巧es simplexvirus,服V-2)属于瘤疹科病毒，服V-I和服V-2不仅引起口唇或生殖粘膜瘤疹，同 时也是引起脑炎、肝炎、全身严重感染甚至宫内感染的重要病原。
[0003] 呼吸道合胞病毒巧espiratcxrySyn巧tialVirus,RSV)主要引起呼吸系统感染， 在婴幼儿、老年W及免疫缺陷人群引起严重肺炎，是人类上呼吸道感染的重要病原之一。
[0004] 甲型流感病毒（InfluenzaAvirus,Flu-A)属于正粘科病毒，在人类和其他生物 每年都有小范围的流行，引起上呼吸系统感染。大流行时，可引起严重呼吸系统感染，甚者 引起肺炎、脑炎甚至死亡。
[0005] 上述=种病毒的治疗目前已有的药物存在毒性大、安全性低的问题，从天然产物 中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物 最有重要价值。
[0006] 本发明设及的化合物I是一个2010年发表（MengShaoetal. , 2010.Psiguadials AandB,TwoNovelMeroterpenoidswithUnusualSkeletonsfromtheLeavesof Psidiumguajava.OrganicLetters12(2010)5040 - 5043)的化合物，我们对化合物I进行 了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物 IV制备了组合物，并对该组合物抗病毒活性进行了评价，其具有抗病毒活性。
【发明内容】
[0007] 本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合 物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为45%和55%。
[0008]
[0009] 本发明公开的组合物可W制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0010] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗病毒作用。本发明的药学上可接 受的盐具有同样的药效。
[0011] 组合物的体外实验表明，组合物具有很强的抗服V-1、服V-2、RSV和fluA的活性， 因此本发明的组合物有望被用于制备新型抗病毒药物。
[0012] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加W限定。
【具体实施方式】 阳01引实施例1化合物PsiguadialA的制备
[0014]化合物PsiguadialA(I)的制备方法参照Meng化ao等人发表的文献（Meng化ao etal. , 2010.PsiguadialsAandB,TwoNovelMeroterpenoidswithUnusualSkeletons fromtheLeavesofPsidiumguajava.OrganicLetters12(2010)5040 - 5043)的方法。
[0015]
[0016] 实施例2PsiguadialA的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0017] 将化合物I(474mg，1.OOmmol)溶于20血苯，向溶液中加入四下基漠化锭灯BAB) (0. 16g)，1，2-二漠乙烧（7. 520g，40.OOmmol)和12血的50 %氨氧化钢溶液。混合物在35摄 氏度揽拌化。化之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烧萃取两次，合并有机相溶液。然 后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涂3次，再用无水硫酸钢干燥，最后减压浓缩去 除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:0. 5， v/v)，收集栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的栋色粉末（502mg，73% )。 阳0化]咱NMR巧OOMHz,DMSO-de) 5 10. 44 (S, 2H)，7. 24 (S, 2H)，7. 20 化J= 10.OHz, 3H)，4 .31 (s, 4H), 3. 89 (s, 1H), 3. 74 (s, 4H), 2. 30 (s, 1H), 2. 12 (s, 1H), 2. 02 (s, 1H), 1. 92 (s, 1H), 1 .79 (S, 1H)，1. 73 (S, 1H)，1. 51 化J= 19.8Hz, 3H)，0. 99 (S, 3H)，0. 95 化J= 4. 7Hz, 7H)，0.8 5(s，3H)，0. 53(s, 1H)，0. 43(s, 1H).
[0019] "cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 69 (S)，170. 54 (S)，165. 42 (S)，163. 38 (S)，142. 7 2 (S)，129. 71 (S)，127. 96 (S)，127. 08 (S)，118. 00 (S)，116. 82 (S)，114. 82 (S)，72. 73 (S)，40. 19 (S)，34. 75 (S)，34. 32 (S)，31. 75 (S)，30. 93 (S)，28. 09 (S)，26. 43 (S)，24. 48 (S)，23. 74 (S) ，21. 18 (S)，20. 77 (S)，19. 99 (S)，14. 39 (S).
[0020] HRMS(ES〇m/z[M+田+calcdforC3化击。05:689. 1300;found689. 1303.
[0021]
阳02引实施例3PsiguadialA的0-(四氨化咯基）乙基衍生物（III)的合成 [002引将化合物II(344mg，0. 5mmol)溶于20血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (690mg，5.Ommol),舰化钟（168mg，1.0mmol)和[I比咯烧（2840mg，40mmol)，混合物加热回流 6h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烧萃取4次，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:1. 5,v/v)，收集黄色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物III的黄色粉末（223. 8mg，67% )。 W24]'HNMR(500MHz,DMS〇-d6) 5 10. 43 (s, 2H) , 7. 2I(s, 2H) , 7. 15 (d,J= 10.OHz, 3H)，3. 99 (d,J= 19. 6Hz, 5H)，2. 57 (s, 4H)，2. 43 (s, 8H)，2. 21 (s,IH)，I. 95 (s,IH)， I. 85 (d,J= 7.甜z, 2H)，I. 78 (s,IH)，I. 62 (d,J= 12. 9Hz, 9H)，I. 39 (s, 2H)，I. 37 (s,IH)，I. 25 (s,IH)，0. 93 (s, 3H)，0. 90 (s, 6H)，0. 83 (s, 3H)，0. 46 (s,IH)，0. 21 (s,IH). 阳0巧]"cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 52 (S)，170. 23 (S)，164. 97 (S)，163. 14 (S)，142. 38(S)，129. 22 (S)，127. 70 (S)，126. 72 (S)，117. 54 (S)，116. 59 (S)，114. 44 (S) ,69. 04 (S) ,54. 36 (d,J= 16.6Hz)，39. 83 (S)，34. 29 (S)，34. 09 (S)，30. 56 (S)，27. 62 (S)，26. 19 (S)，24. 93 ( s), 24. 03 (S)，23. 47 (S)，20. 81 (S)，20. 41 (S)，19. 54 (S)，14.Il(S).
[0026]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC42H5挪05:669. 4267 ;found:669. 4261。
[0027]
阳02引实施例4PsiguadialA的0-(吗嘟基）乙基衍生物（IV)的合成[0029]将化合物II(344mg，0. 5mmol)溶于20血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (690mg，5.Ommol)，舰化钟（168mg，1.Ommol)和吗嘟（1742mg，20mmol)，混合物加热回流化。 反应结束后将反应液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烧萃取2次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:1. 5,v/v)，收集黄色 集中洗脱带即得到化合物IV的黄色胶状固体（252.Img, 72% )。 W30]IhNMR巧OOMHz,DMS0-d6) 5 10. 53(S,2H)，8. 69- 6. 34 (m, 5H)，4. 11 (dd,J=30. 6,16. 3Hz，5H)，3. 61(t，J= 9. 4Hz,細），2. 74(t，J= 14. 3Hz，4H)，2. 56(t，J= 9. 3Hz, 8H)，2. 30 - 2. 13 (m,IH)，2. 07 -I. 62 (m, 5H)，I. 57 -I. 28 (m, 4H)，I. 06 (s, 3H)，I. 02 ( s, 6H)，0. 94 (d,J= 12. 9Hz, 3H)，0. 61 (d,J=I. 5Hz,IH)，0. 32 (dt,J= 21. 0, 17. 3Hz,IH). 阳的1 ] "cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 63(S)，170. 36(S)，165. 06(S)，163. 25(S)，142. 4 9(S)，129. 33(S)，127. 81(S)，126. 83(S)，117. 65(S)，116. 70(S)，114. 55(S)，69. 15(S)，66. 69 (S)，54. 73 (S)，52. 73 (S)，39. 83 (S)，34. 62 (S)，34. 09 (S)，30. 56 (S)，27. 95 (S)，26. 19 (S) ，24. 14 (S)，23. 58 (S)，20. 92 (S)，20. 41 (S)，19. 87 (S)，14.Il(S).
[0032]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdfor〔42馬挪〇7:701. 4166 ;found:701. 4163。
[0033]
[0034] 实施例5组合物抗病毒活性
[0035](一）实验例：组合物对瘤疹病毒的作用研究：
[0036] (1)细胞株与病毒株：
[0037] 人胚肾细胞（肥K293,为服V-1、服V-2病毒敏感细胞）购自美国Clontech公司； 单纯瘤疹病毒1型化SV-1)Sm44株、单纯瘤症病毒2型化SV-2) 333株引自中国CDC病毒病 研究所。 阳〇3引 似细胞毒性测定：
[0039] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的45mg化合物III的粉末和研磨之后过 200目网的55mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到IOOmg组 合物，使用时用水溶解运IOOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[0040] 参照文献（汪受传，王霖，陈超等，清肺口服液含药血清对病毒抑制作用的实验研 究，南京中医药大学学报，2008 ;24(1) :25~27)的方法，将各样品W2倍比做系列稀释 (2°一 5)，然后按稀释顺序横向接种于96板孔中的肥K293上，每孔100祉，每稀释度纵向重 复3孔（A、B、C行），平行设微孔板D的1~6孔为细胞对照，7~12孔不接种细胞为空白 对照，显微镜下每日观察CPE，连续观察7山中性红染色，在540nm波长测定OD值，将实验组 与细胞对照组OD值相比计算细胞存活率，用Reed-Muench方法计算药物半数细胞中毒浓度 (TDso)O 柳41] (4)抑毒试验：
[004