一种对慢性酒精性肝损伤具保护作用的组合物及制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于功能食品及医药领域,涉及包含赶黄草提取物制备以及该提取物与低 聚壳聚糖、虫草多糖的一种对慢性酒精性肝损伤具保护作用组合物及制备方法。
【背景技术】
[0002] 通过合理的功能食品来预防疾病的发生一直是人们关注的热点,植物性食品中存 在大量的非营养性生物活性物质或者称为植物化学物质,具有广泛的生物活性作用和促进 健康及防治疾病的作用,酚酸和多糖则是其中非常重要的一类,具有抗氧化、抗炎以及调节 血脂等多种生理功能(Hu,2003 ;Loo, 2003)。
[0003] 近年来,我国因长期饮酒造成的慢性肝损伤人群数量越来越多,慢性肝损伤进 一步发展会导致酒精性肝炎、肝硬化及肝癌等严重疾病,酒精对肝脏损伤是一种众所周 知的现象,明显的肝损伤标志是细胞酶渗入到血衆中(Baldi,Burra,Plebani,&Salvagni ni,1993),威胁人们的健康。通过动物实验发现,长期酒精摄入导致动物体重降低,此与先 前报道一致(Lieber,1994),这可能是由于食物摄入量减少和代谢紊乱所致。
[0004] 在肝细胞中,酒精性氧化压力可引起酒精性肝病,酒精诱导肝脏病理变化包括 肝肿大和血清学变化,伴随着谷丙转氨酶(AST),谷草转氨酶(ALT)和γ-谷氨酰转移酶 (GGT)活性的增加。
[0005] ALT和AST是肝功能的可靠的指标,人体组织内虽然含有大量基质特异性转氨酶, 但血清中只发现两种:天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)。在正常情况下,肝 细胞膜能将细胞内的酶保持在细胞内,维持肝细胞和肝窦状间隙之间存在的一个明显酶浓 度梯度(Gradient)。血清酶ALT和AST的增高表明细胞透性、损害或者肝细胞坏死的增加 (Goleberg&Watts,1965)。越来越多的证据表明酒精导致肝脏不正常,因为氧化压力直接损 害细胞膜(Halliwell, 1999)。Obi,Usenu, &0sayande(1998)研究H.Rosainensis赶黄草组 合物能显著降低血清中谷丙转氨酶(AST)和谷草转氨酶(ALT)的降低。GGT是细胞膜结合 酶,血清GGT增高是诱导剂使肝脏合成酶增加的结果。乙醇能增强酶的诱导。GGT在肝内主 要位于内质网,而酒精中毒的最早期作用为内质网损伤,膜结合蛋白酶GGT被释放到血液 中(Sillanaukee, 1996)〇
[0006] 脂质过氧化是自由基引起的一系列的反应。机体内存在着大量多不饱和脂肪酸 (PUFA),它极易受到氧化作用的损伤,产生有细胞毒性的脂质过氧化物。酒精的脂质过氧化 反应的主要毒性是直接损伤细胞膜,使细胞内PUFA过氧化,也使内质网溶酶体和线粒体等 生物膜结构破坏,导致一系列的功能紊乱。脂质过氧化机制是八十年代后公认的两大酒精 性肝损伤机制之一。酒精性肝损伤与氧化压力的增加和自由基介导组织伤害的密切相关性 在大鼠和人中已经得到了广泛的验证(Lieber,2000;Minanaetal.2002)。
[0007] 长期酒精深入导致肝组织氧化应激加剧,导致脂质过氧化和抗氧化酶活性降低。 自由基清除酶如SOD,GST和GSH-Px是对抗氧化伤害的第一道防线。
[0008] GSH-Px是细胞内抗氧化防御体系的主要成员之一,是清除H202与许多有机氢过氧 化物的重要酶,与SOD-起,通过清除可以减轻和阻断脂质过氧化的引发作用。
[0009] GSTs是一种多基因家族同工酶,可催化GSH聚合为有害物质,保护细胞免受活性 氧起重要作用(Wilce&Parker, 1994 ;Hayes&Pulford, 1995)。乙醇或者其代谢物可能是GST 同工酶的目标物,GST酶活降低可能产生毒性(Alin,Danielson, &Mannervik, 1985)。
[0010] 丙二醛(MDA)水平被广泛用于脂质过氧化指标。
[0011] 在抗氧化体系中,非酶促抗氧化剂例如GSH等在生物体系中保护细胞免受脂质过 氧化起到了很大的作用。GSH耗竭被认为是酒精性脂肪肝发生的重要机理之一。GSH的 降低可能是由于酒精等物质引发自由基过多导致过度使用清除剂造成的(Lieber,1997 ; Bjorneboeetal. , 1986)〇
[0012] 脂肪肝已被定义为超过5%脂滴或者总脂肪超过5%肝重量(Salt,2004)。脂肪的 聚集是对酒精过多摄入最早最普通的反应。酒精性脂肪肝的通常特点是肝脏肿大,血清和 肝组织的TG水平的增加,伴随着脂滴的形成(Zengetal.,2008)。在目前的研究中,酒精 导致肝指标显著增加,血清和肝组织TG和TCH水平显著升高(P〈0. 05),这表明酒精造成典 型脂肪肝。
[0013] 通过开发研究安全的保肝护肝的功能食品,可以帮助酒精引起的慢性肝损伤人士 逐步恢复健康。目前的护肝产品大多是植物来源的粗提取或者植物粉碎做成的茶,虽然也 有一定的保健效果,但是其成分不能确定,质量难以保证。
[0014] 赶黄草始载于明代《救荒本草》,具有清热解毒、退黄化湿,活血散瘀,利水消肿之 功效,是苗族民间治疗肝病的经验方,苗族人世代习用,称她为"神仙草"。现代研究表明赶 黄草内含多种有效成份均对肝损伤具保护作用,能恢复肝脏功能,减低饮酒及药物对肝脏 的损害,抑制肝纤维化、肝硬化,并对甲肝、乙肝、慢性活动性肝炎具有显著的治疗作用。
[0015] 壳寡糖(C0S)也叫壳聚寡糖,是将壳聚糖经酶水解或化学法水解等方法处理而得 到的一种水溶性较好、分子量在2KD以下的低聚糖。壳寡糖克服了甲壳素不溶于水的缺点, 能很好地经肠道被人体吸收。大量的研究证明,壳寡糖具有很好的免疫调节功能,其可增强 单核巨噬细胞NK细胞以及中性粒细胞的吞噬功能、淋巴细胞增殖分化等功能,具有一定的 抗炎性。研究表明壳寡糖还具有一定的酒精肝损伤的保护作用(刘红云等,[J]壳寡糖对 急性酒精性肝损伤保护作用的研究,中国现代医学杂志,20 (3) :350-353)
[0016] 虫草多糖为冬虫夏草主要效用成分,具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、降血糖等活 性,由于冬虫夏草资源稀缺价格昂贵,大部分保健食品原料采用虫草真菌经生物发酵培养, 从菌丝体中提取有效成分,包括提取的虫草菌丝体多糖具有与天然虫草相同的作用,虫草 菌丝体多糖具有提高免疫和抑制免疫损伤作用,同时研究发现虫草多糖对化学性肝损伤具 有保护作用(方士英等,虫草多糖对小鼠化学性肝损伤的保护作用,安徽医科大学学报, 2004, 39(3)201-203)。
[0017] 采用现代生物分离技术将天然产物进行分离,对其组成进行分析鉴定,确定具有 生物活性的组分,是开发新一代护肝功能食品的方法。本发明选用赶黄草、壳聚糖、虫草菌 丝体等为原料,进行制备工艺优化,并对该功能食品组合进行活性评价,确定最佳配方和制 备工艺。
[0018] 虽然赶黄草、壳寡糖、虫草多糖都对肝损伤具有保护作用,但是彼此之间组合在一 起是否可以达到理想的保护效果还未有过研究。
【发明内容】
[0019] 本发明的目的在于提供一种对慢行酒精性肝损伤具有保护作用的组合物,该组合 物具有较强的抗氧化、抗炎及免疫活性。
[0020] 本发明的另一目的在于提供上述组合物的制备方法。
[0021] 为了实现上述目的,本发明提供一种对慢性酒精性肝损伤具保护作用的组合物, 原料由如下重量份组成:赶黄草提取物1~5重量份、壳寡糖0. 5~1重量份、虫草多糖1~ 2重量份和糊精1~2重量份。
[0022] 优选地,原料由如下重量份组成:赶黄草提取物1重量份、壳寡糖0. 8重量份、虫草 多糖1重量份和糊精1重量份。
[0023] 进一步地,所述组合物中总酸酸含量为50mg/g~200mg/g,多糖含量为100mg/g~ 400mg/g〇
[0024] 进一步地,所述壳寡糖的平均分子量为1500。
[0025] 本发明还提供一种上述对慢性酒精性肝损伤具保护作用的组合物的制备方法,包 括如下步骤:
[0026] 1)赶黄草提取物制备
[0027] 取赶黄草花或叶,粉碎机粉碎,加入与赶黄草重量等量的lw/v%氢氧化钠溶液 浸泡2小时,然后加入醋酸调节pH到6,再用10倍赶黄草重量的90 %乙醇提取,提取温 度50°C,提取