含苦参碱的药物组合物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明的技术方案涉及药物组合物，具体地说是含苦参碱的药物组合物及其应用。
【背景技术】
[0002]分泌性腹泻是一种常见的疾病，其临床表现为每日大便量超过1L(重者多达10L以上);大便为水样，无脓血；血浆-粪质渗透差；粪便的pH多为中性或碱性；禁食48小时后腹泻仍持续存在，大便量仍大于500ml/24h。引起分泌性腹泻最主要原因是异常的介质，各种异常的介质可激活小肠和大肠细胞膜上的cAMP，胞内cAMP含量剧增，使细胞质钙离子含量增高，导致肠道分泌增加，大量水分、碳酸氢钠、氯化物和钾离子丧失。因此开发治疗分泌性腹泻的特效药有重要意义。
[0003]研究表明，钙激活氯通道TMEM16A的过表达是导致分泌性腹泻的一个重要因素(Ousingsawat J, Mirza M, Tian Y, et al.Rotavirus toxin NSP4 induces diarrhea byactivat1n of TMEM16A and inhibit1n of Na+absorpt1n.Pflugers Arch[J].PflilgersArchiv-European Journal of Phys1logy, 2011，461 (5): 579-589.)。TMEM16A广泛分布于人的小肠和回肠，研究表明通过抑制TMEM16A的表达，通过施加特异性抑制剂对TMEM16A通道进行抑制，可以有效的减弱肠道收缩的力度和频率，能有效治疗分泌性腹泻并且可以阻止氯离子的丧失，因此TMEM16A通道是治疗分泌性腹泻的一个重要的药物靶点。对于我国中医医药界来说，查找和研发能够治疗分泌性腹泻的特效中草药用作抑制TMEM16A的特异性抑制剂是义不容辞的紧迫任务。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是:提供含苦参碱的药物组合物及其应用，是一种用于治疗TMEM16A/CaCCs离子通道相关疾病的药物，在治疗分泌性腹泻方面效果显著。
[0005]本发明解决该技术问题所采用的技术方案是:含苦参碱的药物组合物，是由以苦参碱为活性成分，辅以药学上可接受的载体组成。
[0006]上述含苦参碱的药物组合物，所述药学上可接受的载体为淀粉、糖粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、甘露醇或其中2?6种的混合物，所述活性成分的苦参碱与辅以药学上可接受的载体质量比为1: 0.5?1.5。
[0007]上述含苦参碱的药物组合物，所述药物组合物的组成方式为口服型给药。
[0008]上述含苦参碱的药物组合物，所述药物组合物的组成方式为口服型给药的剂型为散剂、颗粒、胶囊、片剂、滴丸或口服液。
[0009]上述含苦参碱的药物组合物，所述药物组合物的组成方式为非口服型给药。
[0010]上述含苦参碱的药物组合物，所述药物组合物的组成方式为非口服型给药的剂型为注射剂。
[0011]上述含苦参碱的药物组合物，其中苦参碱购自阿拉丁试剂有限公司，CAS号:519-02-8，其他所涉及的成分原料均可通过公知途径获得，所述药物组合物的口服型给药和所述药物组合物的非口服型给药的配置方法均使用药学上公知的可接受的形式，其配制方法是本领域的技术人员所能掌握的。
[0012]上述含苦参碱的药物组合物的应用，作为TMEM16A离子通道抑制剂，用于治疗TMEM16A/CaCCs离子通道相关疾病。
[0013]上述含苦参碱的药物组合物的应用，所述用于治疗TMEM16A/CaCCs离子通道相关疾病是用于治疗人的分泌性腹泻疾病。
[0014]上述含苦参碱的药物组合物的应用，所述用于治疗TMEM16A/CaCCs离子通道相关疾病是用于治疗牛、马、羊、狗、猫、猪或鼠的分泌性腹泻疾病。
[0015]上述含苦参碱的药物组合物的应用，作为TMEM16A离子通道抑制剂是上述含苦参碱的药物组合物中的任意一种剂型。
[0016]上述含苦参碱的药物组合物的应用，所涉及的治疗操作方法是本技术领域的技术人员所能掌握的。
[0017]本发明的有益效果是:与现有技术相比，本发明突出的实质性特点如下:
[0018](1)本发明的发明人通过查询传统中医药典籍，发现中草药苦参对于“湿热泻痢，肠风便血”具有良好的治疗效果。中药著作《日华子》中写道:“杀疳虫。炒带烟出为末，饭饮下，治肠风泻血并热痢”，而通过大量艰辛的研究发现在治疗腹泻方面起作用的主要是其中的苦参碱。苦参碱是由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成的，是一种单一成分生物碱，属于常见中草药，对人体副作用小，《中药大辞典》第二版1758页，“苦参碱功能主治清热燥湿，祛风杀虫。主治湿热泻痢，肠风便血，黄疸，小便不利，水肿，带下，阴痒，麻风，皮肤瘙痒，适度疮疡”。
[0019](2)近年来，钙激活氯通道TMEM16A通道电流的抑制剂相继被发现，比如CaCCinh-A01，T16Ainh-A01，DIDS，NPPB等，但钙激活氯通道TMEM16A电流的抑制剂基本都是化学合成物，目前在天然产物小分子药物方面的探索很少，而这些化学合成药物对细胞伤害较大，在高浓度下细胞存活时间较短，对于后期药物研发是一个非常严重的问题，因此积极开发对细胞伤害较小的天然产物小分子药物具有重要意义。
[0020]试验证明，通过本发明的含苦参碱的药物组合对豚鼠回肠平滑肌收缩具有显著抑制作用，并通过电生理实验证明其对钙激活氯通道TMEM16A的外向电流抑制率达90 %，半数有效抑制浓度在100 μΜ以内。这为研制分泌性腹泻的有效治疗药物打开了一扇大门。
[0021]与现有技术相比，本发明的显著进步如下:
[0022](1)本发明的含苦参碱的药物组合能明显抑制ΤΜΕΜ16Α通道，抑制率可达到90%，为分泌性腹泻方面的疾病治疗提供了潜在的应用前景。
[0023](2)本发明的含苦参碱的药物组合对ΤΜΕΜ16Α通道的抑制效率与目前所发现的其它抑制剂相比更高，其半数抑制浓度在100 μ Μ以内。
[0024](3)苦参碱是一种天然产物化合物，是从豆科植物野苦参中提取的单一成份生物碱，来源丰富，属于常见中草药，提取简单，经济实用。
[0025](4)本发明的含苦参碱的药物组合配置方法简单，成本低廉。
[0026](5)本发明的含苦参碱的药物组合的应用方法简单，容易操作。
【附图说明】
[0027]下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
[0028]图1为实施例13中，通过激光共聚焦扫描显微镜观察到的转染钙激活氯通道TMEM16A的CH0细胞的荧光效果对比图，其中:
[0029]图1A与图1C为不同视野下，未加入Ca2+和苦参碱时，转染钙激活氯通道TMEM16A和YFP的CH0细胞荧光图；
[0030]图1B为在与1A相同视野下加入600nM Ca2+后，转染钙激活氯通道TMEM16A和YFP的CH0细胞荧光图；
[0031]图1D为在与1C相同视野下加入100口1苦参碱后的转染钙激活氯通道11^116八和YFP的CH0细胞在加入600nM Ca2+后的荧光图；
[0032]图2为实施例14中，在加入苦参碱前后，转染钙激活氯通道TMEM16A的CH0细胞的电流变化典型电流图，其中:
[0033]图2A为未灌流苦参碱的转染钙激活氯通道TMEM16A的CH0细胞被600nM Ca2+激活的典型电流图；
[0034]图2B为转染钙激活氯通道TMEM16A的CH0细胞被600nM Ca2+激活，再灌流苦参碱后的典型电流图；
[0035]图3为实施例14中，在转染钙激活氯通道TMEM16A的CH0细胞被600nM Ca2+激活后，加入含100 μΜ苦参碱的浴液后电流随时间的变化图，以及在用无苦参碱的浴液冲洗后电流随时间的变化图；
[0036]图4为实施例15中，Eaet引起豚鼠回肠收缩反应增强，