040]
[0041] 通过表1中的比较可以看出，利用本发明的方法制备的精制心可舒片，在人参皂苷 Re、人参皂苷Rbl、人参皂苷Rgl、三七皂苷RU丹酚酸B、金丝桃苷、葛根异黄酮、去氢木香内 酯木香烃内酯等药效成分的含量上，明显优于现有技术中的心可舒片、心可舒胶囊，差异极 其显著。
[0042] 实验2生物利用度的检测及比较
[0043] 通过人体试验测定精制心可舒片(实施例1制备)和心可舒片在不同时刻血浆中葛 根素的浓度，绘制血药浓度-时间曲线，计算精制心可舒片和心可舒片主要药动学参数及相 对生物利用度。
[0044] ( - )材料与方法
[0045] (1)仪器与药品
[0046]岛津高效液相色谱仪(SH)检测器），HC2518高速离心机(科大创新股份有限公司）， XW-80A型混合器;精制心可舒片(批号：150124)、心可舒片(批号150124)、去离子水均为本 公司自制，四氢呋喃和乙腈为色谱纯，其他化学试剂均为分析纯。
[0047] (2)受试者
[0048] 健康男性志愿者8名，平均年龄22.5 ± 0.9岁（22-24岁），67.9 ±6.5kg，平均身高 171.2±5.2cm，试验前进行体格检查，心、肝肾功能均为正常。试验前两周内未服用其它任 何药物，试验期间禁止服用其它药物及烟、酒等。
[0049] (二)试验方案
[0050] (1)试验设计
[0051] 采用单剂量自身对照交叉试验方法，每个受试者均随机先后接受精制心可舒片或 心可舒片2次试验。每次试验间隔为7d。受试前禁食12h，服用药物4h后给予统一标准餐。 [0052] (2)给药与采血
[0053] 8名志愿者随机分成两组，每组4人，经12h禁食后，一组于当日清晨空腹口服精制 心可舒片4片，另一组口服心可舒片4片，用温开水150ml送服，服药4h后统一进标准餐。服药 前及服药后他、111、211、311、411、611、811、1211、1611、2011、2411、3011、3611、4811静脉取血。
[0054](三)结果与讨论
[0055] (1)血药浓度测定结果
[0056] 8名健康受试者口服精制心可舒片或心可舒片后在不同时间的血药浓度数据分别 经数学平均，绘制血药浓度一一时间曲线，如图1所示。
[0057] (2)主要药动学参数
[0058]利用软件求算药动学参数，用梯形法以实测浓度计算药时曲线下面积AUC，相对生 物利用度F=AUC制/AUCi藤。
[0059] 计算结果显示：精制心可舒片和心可舒片达峰时间tmax分别为（6.88 ± 0.4)h和 (8 · 35 ±0 · I )h，P>0 · 05，无显著性差异。峰值血药浓度cmax分别为(206 · 25 ± 22 · 94)ng · L-1及 (152.95±19.11)即.1/1，？〈0.05，有显著性差异。主要药动学参数结果见表2。
[0062] (3)相对生物利用度
[0063] 精制心可舒片和心可舒片的厶1]〇)11~4811分别为（4843.97±155.80)叫.11.1/ 1与 (3285.49±128.68)ng · h · L-S经t检验，P〈0.05,有显著差别。精制心可舒片对心可舒片的 相对生物利用度为147.44%。
[0064] (4)讨论
[0065] 本试验结果显示精制心可舒片血药浓度及药-时曲线下面积明显大于心可舒片， 且经软件计算得出，精制心可舒片对心可舒片的相对生物利用度为147.44%，精制心可舒 片生物利用度明显大于心可舒片。表明精制心可舒片更利于机体吸收。
[0066] 实验3精制心可舒片抗心肌缺血作用研究
[0067] (1)药品和试剂:受试品:精制心可舒片(实施例1制备），批号：150124;阳性对照1: 心可舒片（山东沃华医药科技股份有限公司生产，批号150124);阳性对照2:心可舒胶囊(重 庆希尔安药业生产，批号20140915)盐酸利多卡因注射液（lidocaine hydrochlorate injection)，批号20150911，山东华鲁制药有限公司生产；3%戊巴比妥钠 （sodium pentobarbital)，批号141208,北实纵横科技发展有限公司；1 %氯化三苯基四氮唑（TTC)， 批号1412B41，SIGMA公司产品；0.2%肝素钠注射液，批号140901，山东鲁抗辰欣药业有限公 司。乳酸脱氢酶(LDH)测试药盒:批号150042,肌酸激酶(CK)测试药盒:批号141003,均为北 京中生北控生物科技股份有限公司生产。
[0068] (2)动物:杂种犬，雌雄兼用，体重：12.8± 1.7kg，由山东大学实验动物中心提供。
[0069] (3)仪器：SC-3型电动呼吸机(上海医疗设备厂）；MFV-3200型电磁流量计（日本光 电产品）；RM-6000四道生理记录仪（日本光电产品）；Steellex LG-R-80D型血液粘度仪（中 勤世帝科学仪器有限公司）。
[0070] (4)步骤:动物以戊巴比妥钠30mg/kg静脉注射麻醉，分离左侧颈总动脉，插管连接 压力换能器，记录血压。气管插管进行辅助呼吸。沿左侧第4肋间开胸，缝心包床。分离主动 脉弓，放置电磁流量计探头，测量心输出量。心尖插管，连接压力换能器，测量心室内压。缝 置16导联心外膜电极连接心电放大器，记录心外膜心电图。腹部开口，分离十二指肠备给药 用。各项指标稳定15min后，记录正常值作为实验前数据，采用两步结扎法结扎冠脉左前降 支，并于正式结扎即刻给药，模型组给与等容量的生理盐水。分别在结扎前，结扎即刻，结扎 后5，10，15，30，45，60，90，120，150，180min记录心外膜心电图；于结扎前和结扎后30，60， 120,180min记录动物血流动力学指标;分别于预扎前和结扎后180min时间点心脏取血，测 定全血粘度和血清中LDH及CK含量。试验结束时取心脏，自心尖到结扎点平均切成五片，1 % TTC染色，拍照，将图片输入计算机，以图像分析软件计算梗塞面积与所切心肌组织面积之 比。
[0071 ] (5)结果:如表3~表7所不。由表3~表7可见，与模型组比较，心可舒片给药后15分 钟，心肌缺血的范围开始缩小，给药后30分钟时间点的上述结果与模型组比较有显著性差 异;给药5分钟时，心肌缺血的严重程度与模型组比较已有缓解，于30分钟时间点两组该项 指标有显著性差异，30分钟后缺血程度与模型组比较虽然没有统计学意义，但仍维持较低 水平直到实验结束；缺血3小时后，心肌梗死百分比和血清中LDH、CK水平均明显低于模型 组。
[0072] 精制心可舒片给药后，5分钟开始即见动物心肌缺血的范围缩小，并始终维持在此 水平，其中结扎后1〇、15、30、45、60、120、180分钟时间点缺血范围与模型组比较有显著性差 异;给药/结扎5分钟时，心肌缺血的严重程度与模型组比较已有所缓解，且始终维持较低水 平直到实验结束，其中30和60分钟时间点两组间有显著性差异；心肌梗死比例以及血清学 指标与模型组比较亦有显著性差异。与精制心可舒组相似，心可舒胶囊组心肌缺血范围与 模型组相近，而心肌缺血严重程度自给药/结扎后5分钟开始有所缓解，虽然与模型组比较 没有统计学意义，但仍维持较低水平直到实验结束；心肌梗死比例与模型组比较虽有所降 低，但没有统计学意义，血清学指标(LDH、CK)与心可舒片组相似。
[0073] 心可舒片给药后可缓解缺血程度，缩小缺血范围，表现出抗心肌缺血作用，而精制 心可舒片表现出更佳的抗缺血作用，缺血范围上，心可舒片出现一定的波动，而精制心可舒 片作用稳定，始终维持较低水平，缺血程度上，与心可舒片相比，精制心可舒片在缺血初始 阶段表现出更好的保护作用，ST段抬高数值较心可舒片组低。由此可见，在抗心肌缺血方 面，精制心可舒片具有确切的疗效，且优于心可舒片。
[0074] (6)结论:精制心可舒片十二指肠给药可明显减轻冠脉结扎造成的犬急性心肌缺 血性损伤，其作用强度优于心可舒片。
[0076] 表5.精制心可舒片对麻醉犬冠脉结扎3小时后心肌梗塞范围的影响(X 土 SD)
[0078] 与模型组相比，*Ρ〈0·05。
[0079] 表6.精制心可舒片对麻醉犬冠脉结扎后血清中LDH水平的影响(X 土 SD，U/L)
[0081 ] 与模型组相比，*Ρ〈0·05。
[0082] 表7.精制心可舒片对麻醉犬冠脉结扎后血清中CK水平的影响(X 土 SD，U/L)
[0084] 与模