控制肝纤维化、丙型肝炎病毒和相关病症的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及控制丙型肝炎病毒(HCV)和相关的病症。本发明披露内容还涉及控制 肝纤维化。本发明披露内容涉及给予包含五聚体A型原花青素、三聚体原花青素和四聚体原 花青素的组合物，可选地所述组合物与可药用赋形剂一起给予，以用于控制肝纤维化、丙型 肝炎病毒和相关的病症。该组合物在丙型肝炎病毒进入细胞的阶段起到抑制剂的作用。该 组合物抑制不同基因型的丙型肝炎病毒。
【背景技术】
[0002] 丙型肝炎是一种由丙型肝炎病毒(HCV)引起的感染性疾病，主要感染肝脏。
[0003] 2012年7月WHO的情况说明指出，约1亿5千万人慢性感染有丙型肝炎病毒，并且每 年有超过3,50,000人死于与丙型肝炎相关的肝病。丙型肝炎病毒通过接触受感染的人的血 液、血液制品和使用污染的注射器来传播。
[0004] 当第一次发生HCV感染时，约75%的人没有症状。其余25%的人会报告疲劳、食欲 不振、肌肉痛或者发烧。在感染的该早期阶段，皮肤或眼睛发黄(黄疸)较罕见。当肝脏不能 清除病毒时，个体称为慢性携带者。数十年之后，慢性感染最终导致肝硬化，其会导致肝细 胞肝癌(HCC)并且最终造成肝衰竭。无临床症状的HCV感染使得在早期阶段对其非常难以检 测。这是早期治疗困难的主要原因。因此，丙型肝炎经常被称为"沉默的疾病"。目前还没有 用于预防丙型肝炎的疫苗。因此需要应该在市场上能够获得的显示出不同的作用机制作用 于这种慢性而且复杂的疾病的药物。
[0005] 丙型肝炎病毒(HCV)是肝炎病毒属的原型成员，其属于黄病毒科。基于基因组差异 的确定，HCV已被分类为如下基因型和其各个亚型：
[0008] HCV基因型1、2和3广泛分布于整个世界并且已被大量流行病学、自然课程和治疗 研究所关注。如在文献中所知的，HCV感染不仅更取决于于其基因型，而且还倾向于其各个 亚型。因此，每一种基因型和亚型造成的HCV感染都具有不同的特征。
[0009] HCV是一种迅速发生突变的病毒。由迅速发生突变的病毒引起的感染表现出高水 平的遗传多样性。然而，病毒突变速率增加与感染的时期、病毒多样性的最终水平和传播株 的平均复制速率显著相关。由于HCV的高突变率，该病毒在非常短的时间内显示出对多种药 物的耐药性。因此，这些药物不再能够破坏该突变病毒。因此，需要研究和鉴定这样的药物： 其可更好地耐受快速突变的HCV，并且作用于不同的基因型和其亚型。
[00?0]文献暗示了迄今为止在HCV治疗中施用的药物有:抗病毒药物，例如利巴韦林、聚 乙二醇干扰素(Peginterferon)等，蛋白酶抑制剂例如波西普韦、特拉匹韦等，以及索非布 韦（Sofosbuvir)，其是另一种直接作用的抗病毒药物。然而这些药物要么直接作用抗病毒， 要么是通过阻断对于传染性病毒颗粒形成所必需的蛋白质前体的蛋白质水解切割的蛋白 酶抑制剂。然而，现有技术中并不存在这种作为针对HCV感染的进入抑制剂的药物。这种类 型的药物干扰病毒体与人类细胞的结合、融合以及病毒体进入人类细胞。通过阻断这个步 骤，这样的药剂减慢了疾病的发展。
[0011] HCV的基因型Ia是在早期HVC诊断测试的发展中使用的原型序列，并且经常发现其 与在世界范围内传播的静脉药物滥用HCV的基因型Ib相关，其原则上经由输血传播并且目 前是最常见的基因型。
[0012] 在美国，所有慢性肝病中的约40 %由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起，并且HCV-相关 的肝硬化是成人中原位肝移植(OLT)的最常见指征。在移植后的HCV感染仍然是一个问题， 并且复发肝感染是导致移植失败的主要原因。在95%的患者中，在原位肝移植(OLT)之后会 复发丙型肝炎病毒(HCV)感染。
[0013] 与加速疾病复发相关的风险因子是在移植前病毒载量升尚、供体年龄较大、缺血 时间较长、巨细胞病毒共感染、免疫抑制的强度和HIV共感染。
[0014] 移植后丙型肝炎复发的治疗也存在问题并且存在诸多争议。副作用很常见并且会 导致剂量降低或治疗停止。对于那些由于丙型肝炎复发而出现代偿失调性肝硬化的患者而 言，会考虑再次移植。因此，需要开发这样的药物，其能够通过阻断预先存在的病毒从血清 进入肝脏来限制移植物的再感染。
[0015] 美国的研究表明，HCV基因型Ia和Ib在患有慢性丙型肝炎的患者中是主要的基因 型。基因型与获毒的模式和组织学表现并不相关。相比于具有基因型2a或2b的患者，具有 HCV基因型Ia或Ib的患者具有更严重的肝病且对于干扰素治疗具有更低的响应速率。
[0016] 目前的发明
[0017]利用每周一次聚乙二醇化干扰素注射和每天两次口服利巴韦林的二联治疗是用 于所有HCV基因型（除基因型1之外）的标准治疗。相比于那些具有基因型2或3的患者，具有 基因型1感染的患者对于聚乙二醇化干扰素和利巴韦林具有显著较低的响应速率，其需要 更高剂量的利巴韦林并且会受益于更加长期的治疗。当存在利用HCV蛋白酶抑制剂的禁忌 症或排除情况(例如与HBV或HIV共感染或者使用某些药物）时，二联治疗也适合于基因型1 的治疗。在治疗中使用的药物利巴韦林本身就具有用药警告，例如溶血性贫血警告(主要在 治疗的最初两周内）、妊娠警告(在治疗前需要进行阴性妊娠试验)和呼吸警告(对于需要辅 助通风的患者)等。
[0018] 利用HCV蛋白酶抑制剂(PI)如波西普韦(Victrelis?)或特拉匹韦（Incivek?)，与 聚乙二醇化干扰素和利巴韦林联用的三联治疗是仅对于HCV的基因型1的优选治疗方法。三 联治疗中包括的药物显示出主要的副作用，如聚乙二醇干扰素会使致命的或威胁生命的神 经精神性病症、自身免疫病症、缺血性病症和传染性病症恶化。此外，仍存在两种蛋白酶抑 制剂、波西普韦和特拉匹韦会导致搔痒症、肌痛、疲劳、味觉障碍、恶心、呕吐、厌食、贫血症、 嗜中性白血球减少症等。因此，该治疗的有效性是变化的并且仅在50 %具有基因型1丙型肝 炎病毒的患者中有效。这并不能适用于任何其他HCV基因型的治疗。
[0019] 提示用于治疗基因型1感染的另一种治疗方法是索非布韦与聚乙二醇化干扰素和 利巴韦林的联合治疗。该治疗已显示出反作用，例如头痛、疲劳、恶心、失眠和贫血症等，以 及对于怀孕妇女的禁忌症。
[0020] 因此，需要研究和鉴定作用于这种慢性疾病和并发症的药物，其对于快速突变的 HCV具有更好的耐受性并且作用于HCV的不同基因型和各个亚型，其显示出不同的作用机制 并且能够通过阻断现有病毒从血清进入肝脏来限制移植物的再感染，并且从而防止由肝衰 竭或肝移植后导致的HCV感染的进一步复发。本文披露内容的目的在于解决现有技术的缺 陷。
[0021] 肝纤维化是由于慢性肝损伤导致的常见病理生理学，其特征在于肝脏中细胞外基 质的过度累积。氧化应激在肝纤维化的发病机理中起到关键作用。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)是一种多组分酶复合物，其产生响应于大范围刺激物的活性氧簇 (ROS)。除了吞噬细胞N0X2之外，还存在六种非吞噬细胞NOX蛋白。在肝脏中，NOX以吞噬细胞 形式和非吞噬细胞形式中被功能性表达。NOX-来源的ROS有助于由酒精、毒性胆汁酸等引起 的各种类型的肝病。
[0022] 最近的证据表明，吞噬细胞N0X2和非吞噬细胞NOX同种型（包括NOXl和N0X4)在肝 星形细胞中介导不同的纤维化作用，其中肝星形细胞是肝脏中主要的纤维化细胞类型。NOX 在肝纤维化中的关键作用提供了获得在患有慢性肝病的患者中治疗肝纤维化的药理学NOX 抑制剂的理论基础。
[0023] Bhaskaran等人（US 2011/0039923 Al)披露了包含浓度范围为约55%w/w至约 99 % w/w的五聚体原花青素类黄酮、浓度范围各自为约0.5 % w/w至约35 % w/w的三聚体和四 聚体原花青素的组合物。该文献还披露了用于制备所述组合物的方法。而且，该文献教导了 所述组合物用于治疗和控制HIV感染、AIDS和流感病毒感染。然而，该文献并未暗示或教导 利用所述化合物来控制肝纤维化和抑制HCV感染并预防HCV感染向肝衰竭的进一步进展和 与HCV感染相关的病症，例如急性肝感染、慢性感染、肝硬化、肝癌(肝细胞肝癌)和终末期肝 病。
[0024] Bhaskaran等人(W02012/014165 Al)披露了控制支气管收缩病症的方法，所述方 法包括可选地与一种或多种药用赋形剂给予包含范围为约55 % w/w至约99 % w/w的五聚体A 型原花青素、浓度范围各自为约0.5 % w/w至约35 % w/w的三聚体原花青素和四聚体原花青 素的组合物。其还披露了支气管收缩病症选自包含变应性鼻炎、哮喘和慢性阻塞性肺病的 组或它们的任意组合。然而，该文献并未暗示或教导利用所述组合物来控制肝纤维化和抑 制HCV感染并作为抑制丙型肝炎病毒进入的抑制剂起作用、抑制不同基因型的HCV、预防再 次发生HCV感染引起的随后的肝衰竭或肝移植以及控制与HCV感染相关的病症，例如急性肝 感染、慢性感染、肝硬化、肝癌(肝细胞肝癌)和终末期肝病。
[0025]本文披露内容通过提供在丙型肝炎病毒进入阶段进行抑制的方法以及通过给予 包含五聚体A型原花青素、三聚体原花