-128小时内，功能材料3的降解速率为0.078 ± 0.0013mg/h〇
[0102] 2、机械强度
[0103] 将未交联N服和邸C的胶原支架材料与实施例1中的交联NHS和抓C得到的功能材料 2分别浸泡于生理盐水中10分钟后，用綴子夹材料中部提起材料，胶原支架材料较为柔软， 受重力影响两端明显下垂（图3中A)，而交联N服和邸C得到的功能材料则在生理盐水浸泡后 仍具有一定力学弹性，可较好的伸展（图3中B)。表明交联剂处理可提高材料的力学强度，运 将有利于移植后更好的保持材料原有形态，促进材料两端细胞的迁移和轴突的生长。
[0104] 实施例3、实施例1的功能材料在修复大鼠脊髓损伤中的应用
[0105] 选用24只200g左右的大鼠制备鼠脊髓损伤模型，制备方法如下:将大鼠麻醉后，打 开T11-T13椎板暴露脊髓组织，将T12段的脊髓切除2-3mm(由于脊髓回缩，两断端之间的长 度约为5mm)，得到鼠脊髓损伤模型，共得到24只鼠脊髓损伤模型。将运24只鼠脊髓损伤模型 随机分为=组，每组8只，一组为对照组，另一组为实验组，第=组为未修复对照组。将制备 鼠脊髓损伤模型的当周记为第I周。
[0106] 在第1周，通过填充的方式将实施例1的功能材料2桥接在实验组的每只大鼠脊髓 损伤的近端和远端，然后将功能材料严密缝合在硬脊膜上，修复手术后将该组大鼠在护理 条件下喂养3个月，得到术后实验组大鼠。
[0107] 在第1周，通过填充的方式将实施例1的胶原支架材料桥接在对照组的每只大鼠脊 髓损伤的近端和远端，然后将功能材料严密缝合在硬脊膜上，修复手术后将该组大鼠在护 理条件下喂养3个月，得到术后对照组大鼠。
[0108] 未修复对照组不进行任何脊髓损伤的修复，只将该组大鼠在护理条件下喂养3个 月，得到术后未修复对照组大鼠。
[0109] 1、功能材料在修复大鼠脊髓损伤中的降解情况
[0110] 分别将术后实验组大鼠体内的功能材料连同与之相连的功能材料两端的部分脊 髓组织W及术后对照组大鼠体内的胶原支架材料连同与之相连的胶原支架材料两端的部 分脊髓组织取出，并分别进行肥染色分析。
[0111] 结果显示，术后对照组大鼠体内的胶原支架材料降解明显（图4中A)，术后实验组 大鼠体内的功能材料降解变慢，与体内组织较好的融合，起到填充引导作用（图4中B)。
[0112] 2、功能材料可W引导神经细胞的生长
[0113] 分别将术后实验组大鼠体内的功能材料连同与之相连的功能材料两端的部分脊 髓组织W及术后对照组大鼠体内的胶原支架材料连同与之相连的胶原支架材料两端的部 分脊髓组织取出，并均进行化Stin的免疫染色和细胞核的DAPI染色。
[0114] 结果显示，术后实验组大鼠大鼠体内脊髓损伤两端的神经细胞可延功能材料的延 伸方向生长(图5)，而术后对照组大鼠体内脊髓损伤两端的神经细胞没有该生长特性，说明 功能材料具有引导神经细胞生长的特性。
[0115] 3、功能材料可W抑制癒痕形成
[0116] 分别将术后实验组大鼠体内的功能材料连同与之相连的功能材料两端的部分脊 髓组织W及术后未修复对照组大鼠体内脊髓损伤处两端的部分脊髓组织取出，均进行胶质 癒痕CSPG阳性染色和胶质细胞GFAP的染色。
[0117] 结果显示，术后实验组大鼠大鼠体内脊髓损伤两端几乎无胶质癒痕（图6中B)，术 后未修复对照组大鼠体内脊髓损伤处两端有大量的癒痕（图6中A)，表明，功能材料可W抑 制癒痕的形成。
[0118] 4、功能材料可W促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复
[0119] 从第1周至第12周每周分别对实验组大鼠和未修复对照组大鼠进行BBB行为学评 分，结果如表3和图7所示。
[0120] 表3、大鼠的BBB行为学评分结果
[0122]结果显示，与未移植功能材料的未修复组大鼠相比，移植功能材料的对照组大鼠 运动行为恢复较好(图7)。
【主权项】
1. 功能材料，为用胶原支架材料交联N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙 基碳二亚胺盐酸盐得到的材料。2. 根据权利要求1所述的材料，其特征在于:所述功能材料按照权利要求3-8中任一所 述方法制备。3. 功能材料的制备方法，包括用交联液浸泡胶原支架材料得到所述功能材料;所述交 联液由溶剂和溶质组成，所述溶剂为水，所述溶质及其浓度分别为N-羟基琥珀酰亚胺 0 · 025-lmg/ml，1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亚胺盐酸盐0 · l_4mg/ml。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于:所述交联液中所述N-羟基琥珀酰亚胺与所 述1_(3_二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺盐酸盐的质量比为1: 4。5. 根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于:所述浸泡的温度为37°C;所述浸泡的时 间为8-24小时。6. 根据权利要求3-5中任一所述的方法，其特征在于:所述方法还包括将所述功能材料 冻干。7. 根据权利要求3-6中任一所述的方法，其特征在于:所述胶原支架材料按照如下方法 制备： 1) 用磷酸三丁酯处理筋膜，得到ΤηΒΡ处理的材料； 2) 用NaCl处理所述ΤηΒΡ处理的材料，得到NaCl处理的材料； 3) 用胰蛋白酶处理所述NaCl处理的材料，得到胶原支架材料。8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于:所述筋膜为牛筋膜。9. 用于制备权利要求1或2所述功能材料的组合物，由权利要求3-7中任一所述胶原支 架材料、N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐组成;所述胶原 支架材料、所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和所述N-羟基琥珀酰亚胺的 质量比为20000: (1-200): (0 · 25-50)。10. 权利要求1或2所述功能材料、权利要求3-7中任一所述方法或权利要求8或9所述组 合物的下述任一应用： XI、 在修复脊髓损伤中的应用； X2、在制备修复脊髓损伤产品中的应用； X3、在修复脊髓损伤中的应用； X4、在制备修复脊髓损伤产品中的应用； X5、在修复神经损伤中的应用； X6、在制备修复神经损伤产品中的应用； X7、在抑制脊髓损伤部位瘢痕形成中的作用； X8、在制备抑制脊髓损伤部位瘢痕形成产品中的作用； X9、在抑制脊髓损伤部位瘢痕形成中的作用； X10、在制备抑制脊髓损伤部位瘢痕形成产品中的作用； XII、 在抑制神经损伤部位瘢痕形成中的作用； XI2、在制备抑制神经损伤部位瘢痕形成产品中的作用； X13、在导向神经生长中的应用； X14、在制备导向神经生长产品中的应用； X15、在促进和/或引导轴突生长中的作用； X16、在制备促进和/或引导轴突生长产品中的作用； X17、在促进神经元突触连接中的作用； XI8、在制备促进神经元突触连接产品中的作用； X19、在促进脊髓损伤部位两端细胞迀移中的作用； X20、在制备促进脊髓损伤部位两端细胞迀移产品中的作用； X21、在促进脊髓损伤部位两端细胞迀移中的作用； X22、在制备促进脊髓损伤部位两端细胞迀移产品中的作用； X23、在促进神经损伤部位两端细胞迀移中的作用； X24、在制备促进神经损伤部位两端细胞迀移产品中的作用； X25、在促进脊髓损伤动物运动功能恢复中的应用； X26、在制备促进脊髓损伤动物运动功能恢复产品中的应用； X27、在促进神经损伤动物运动功能恢复中的应用； X28、在制备促进神经损伤动物运动功能恢复产品中的应用。
【专利摘要】本发明公开了降解速率可控的引导神经再生的功能材料及其制备方法与应用。本发明所提供的功能材料，为用胶原支架材料交联N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐得到的材料，利用交联液浸泡胶原支架材料得到，交联液由溶剂和溶质组成，溶剂为水，溶质及其浓度分别为N-羟基琥珀酰亚胺0.025-1mg/ml，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐0.1-4mg/ml。本发明的功能材料达到了理想的神经再生生物材料的要求，可以用来修复损伤神经，也可用来制备修复损伤神经的产品。
【IPC分类】A61L27/24, A61L27/50
【公开号】CN105497979
【申请号】CN201510984759
【发明人】戴建武, 赵燕南, 陈冰, 肖志峰, 韩素芳, 李星
【申请人】中国科学院遗传与发育生物学研究所
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月24日