面具有十分显著的疗效。
[0025]与现有技术相比，本发明药物组合物具有以下优势： 1.与当前治疗闭经的药物相比，本发明药物组合物完全符合《中华人民共和国药典》相 关规定，由纯天然中草药组成，配伍合理、成本低廉、诸药协同、补治兼备、侧重调理。制备本 发明药物组合物的药材有效成分都采用现代工艺被充分提纯，从而提高了生物利用度。 [0026] 2.动物急、慢性毒性实验证明，未见任何毒性反应，其主要脏器也无明显改变，药 物安全有效;临床实验证明，与阳性对照药相比，本发明药物组合物具有起效快、疗程短、疗 效确切、药效稳定、安全性高的优点，能及时缓解患者闭经病症。
[0027] 3.本发明药物组合物易被制成各种制剂，携带和使用方便，利于临床推广。
【具体实施方式】
[0028] 以下将通过具体实施例对本发明做进一步描述，但本发明不仅限于以下实施例。 本领域技术人员应理解为，本发明除以下实施例外，在不脱离本发明的内容、精神和范围的 条件下对本发明进行的变更、组合或替换，对于本领域的技术人员来说是显而易见的，均包 含在本发明的范围之内。
[0029] 实施例1 本发明实施例1药物组合物包括以下重量份数的制备原料： 艾叶25份、益母草24份、红花20份、当归19份、黄芪18份、桑葚16份、及己12份、常春藤15 份、土鳖虫12份、麦芽15份、生姜9份和甘草10份。
[0030] 制备方法如下： s 1、称取各味原料药材，分别去杂质，洗净，烘干，切片后粉碎成粗粉； 52、 将艾叶、红花、及己、土鳖虫、麦芽和甘草粗粉混匀，按照粗粉总重量的8倍量加入体 积浓度为75%的乙醇溶液，浸泡12h，再回流煎煮提取3次，每次4h，过滤(保留滤渣），合并滤 液，减压蒸馏除去乙醇，并浓缩至60 °C相对密度为1.20的浓缩液，备用； 53、 将益母草、当归、生姜、常春藤、黄芪和桑葚粗粉混匀，合并S2所得滤渣，按照粗粉总 重量的8倍量加入纯化水，回流煎煮4小时，过滤，合并滤液，并浓缩至60 °C相对密度为1.20 的浓缩液，备用； 54、 将S2和S3所得浓缩液合并，充分混合，以进风温度为120°C，出风温度为85°C进行喷 雾干燥，即得药物细粉； 55、 往所述药物细粉加入相应的辅料，利用现代中药制剂制备技术，制备成胶囊剂。 [0031] 实施例2 本发明实施例2药物组合物包括以下重量份数的制备原料： 艾叶9份、益母草9份、红花7份、当归7份、黄苗6份、桑葚6份、及己5份、常春藤5份、土鳖 虫3份、麦芽2份、生姜3份和甘草6份。
[0032]制备方法同实施例1。
[0033] 实施例3 本发明实施例3药物组合物包括以下重量份数的制备原料： 艾叶17份、益母草17份、红花14份、当归13份、黄芪12份、桑葚11份、及己9份、常春藤10 份、土鳖虫7份、麦芽8份、生姜6份和甘草8份。
[0034]制备方法同实施例1。
[0035]试验例1本发明药物组合物的动物毒性试验 1、试验药物 本发明实施例1、实施例3所制胶囊，破除胶囊壳，加纯化水调制成溶液。
[0036] 2、试验动物 普通级NIH小鼠，体重22 ± 6g，雌雄各半，雌性小鼠均无孕;SD大鼠，初始体重220 ± 10g， 雌雄各半，雌性大鼠均无孕。
[0037] 3、急性毒性试验 取20只小鼠分别灌胃给本发明实施例1、实施例3药物胶囊配制的中药溶液，在831.2g 生药/kg剂量下，给药后小鼠出现轻微活动减少，5小时左右恢复正常，给药后连续观察7天， 无一小鼠死亡，且全身状况、饮食、摄水、小便和体重增长均正常。结果表明，小鼠灌胃本发 明的中药口服液的最大给药量为831.2g生药/kg/d(LD50>831.2g生药/kg)。按体重计，小 鼠灌胃本发明药物组合物的耐受量为临床病人的4178.9倍，表明其急性毒性极低，临床用 药安全。
[0038] 4、长期毒性试验 4.1实验方法 选用60只SD大鼠，分为6组，分别给予本发明实施例1、实施例3胶囊剂配制的高、中、低 剂量组中药溶液:高剂量组为33.6g生药/kg、中剂量组为16.8g生药/kg、低剂量组为8.4g生 药/kg(单位体重给药量按临床用药量的20倍计算，临床用药量依据《中华人民共和国药典》 2010年版一部）。每天灌胃一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀1/2动物（雌雄各 半），其余1/2动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、摄食量、体重 变化;给药后90天和停药2周进行血液学(RBC、HB、网织红细胞、PLT、CT、WBC及分类)和血液 生化(AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crea、TP、I\BIL、ALB、CHOL)、尿液生化、脏器系数、病理组织学 等指标检查。
[0039] 4.2试验结果 本发明的药物组合物在高、中、低剂量组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、进食 量和体重增长均无异常变化;实施例1三个剂量组、实施例3三个剂量组及对照组血液学检 查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异;各组主要脏器组织病理学 检查未见明显异常。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量 的180、60、20倍，根据试验结果:本发明药物组合物在高、中、低三个剂量(33.6g生药/kg、 16.8g生药/kg、8.4g生药/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，无明确的毒性革El器官和敏 感指标，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本发明的药物组合物临床应用的剂量安 全性很高。
[0040]试验例2本发明药物组合物对负荷递增的运动性闭经动物模型的影响 1、实验目的 根据《药物新药药理学研究指南》的要求，研究本发明药物组合物治疗闭经的主要药效 学。
[0041 ] 2、递增负荷的运动性闭经动物模型的建立 方法:本实验选用体重240 ± 20g的成熟、健康的雌性SD大鼠100只，购自中国科学院实 验动物研究所，符合国标GB14922-94 SPF级质量标准。所有动物实验均符合中国科学院实 验动物研究所管理委员会动物管理和使用有关标准。所有大鼠以国家标准啮齿类动物饲料 饲养，自由饮食，室温20_25°C，相对湿度45-55%，每天光照时间12小时。连续7周递增地高强 度负荷运动训练(如表1所示）。7周后，所有训练组停训36小时，安静状态下称重后，迅速断 头处死取血，并取出垂体和心脏称重；采用氰化高铁血红蛋白比色法测定血液血红蛋白 (Hb)浓度;常规HE染色，光学显微镜下观察阴道脱落细胞的变化。
[0042]表1大鼠递增运动负荷的变化
大鼠在训练至第4、5周后，明显烦躁不安，易怒、好斗。第6周起普遍出现反应迟钝，萎 靡不振，眼神暗淡无光，毛发脱落呈稀疏状，垂头，进食量明显减少。为了说明模型是否构建 成功，随机挑取10只模型大鼠做以下验证：1)模型组Hb浓度明显低于正常组大鼠；2)模型组 大鼠体重平均下降11.25g;3)模型组大鼠的垂体重/体重（质量)比显著低于正常组大鼠组； 4)阴道中层和底层脱落细胞增加。以上指标说明，递增负荷的运动性闭经动物模型构建成 功。
[0043] 3、分组给药 筛选80只建模成功的大鼠随机分为8组，10只/组，分别为:模型组，阳性药对照组，本发 明实施例1药物组合物高、中、低剂量组，本发明实施例3药物组合物高、中、低剂量组，另取 10只正常大鼠作为空白对照组。其中，阳性药对照组大鼠灌胃给药(桂枝茯苓胶囊，国药准 字Z10950005，江苏康缘药业股份有限公司），给药剂量为40mg/Kg;实施例1高、中和低剂量 组分别给大鼠灌胃本发明实施例1制备的胶囊剂，实施例3高、中和低剂量组分别给大鼠灌 胃本发明实施例3制备的胶囊剂，给药剂量分别为:40mg/Kg、20mg/Kg和10mg/Kg;正常组和 模型组灌胃等体积生理盐水;各组每日给药3次，喂食后15-30分钟给药，普通块料喂养，连 续给药45天。
[0044] 4、实验结果 4.1饮食、体重及生活质量变化 表2本发明药物组合物治疗大鼠饮食和体重变化
注:与正常