大豆转基因事件MON87751以及其检测和使用方法与流程

文档序号:18337536发布日期:2019-08-03 15:58阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种在含有大豆DNA的样品中可检测的重组DNA分子,其中所述分子的核苷酸序列为:

a)选自由以下组成的组:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、及SEQ ID NO:10;或

b)与(a)完全互补的核苷酸序列,

其中此类DNA分子的存在用于诊断所述样品中的大豆事件MON87751DNA。

2.如权利要求1所述的重组DNA分子,其中所述重组DNA分子来源于大豆事件MON87751,即包含大豆事件MON87751的种子的代表性样品,其已以ATCC登记号PTA-120166保藏。

3.一种DNA分子,其包含足够长度的多核苷酸区段以用作在严格的杂交条件下与样品中的大豆事件MON87751DNA特异性地杂交的DNA探针,其中检测在所述杂交条件下所述DNA分子的杂交用于诊断所述样品中的大豆事件MON87751DNA。

4.如权利要求1所述的重组DNA分子,其中所述样品包括大豆植物、大豆植物细胞、大豆种子、大豆植物部分、大豆后代植物、大豆油、大豆蛋白或大豆商品产品。

5.一对DNA分子,其包含第一DNA分子及不同于所述第一DNA分子的第二DNA分子,所述DNA分子当在扩增反应中与含有大豆事件MON87751模板DNA的样品一起使用时用作DNA引物以产生用于诊断所述样品中的所述大豆事件MON87751DNA的扩增子,其中所述扩增子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10。

6.一种检测DNA区段的存在的方法,所述DNA区段的存在用于诊断样品中大豆事件MON87751DNA,所述方法包括:

a)使所述样品与如权利要求3所述的DNA探针接触;

b)使所述样品及所述DNA探针经受严格的杂交条件;以及

c)检测所述DNA探针与所述样品的杂交,

其中所述检测步骤用于诊断所述样品中的所述大豆事件MON87751DNA的存在。

7.一种检测DNA区段的存在的方法,所述DNA区段的存在用于诊断样品中大豆事件MON87751DNA,所述方法包括:

a)使所述样品与如权利要求5所述的DNA分子对接触;

b)进行足以产生DNA扩增子的扩增反应;以及

c)检测在所述反应中所述DNA扩增子的存在,

其中所述DNA扩增子包含选自由以下组成的组的核苷酸序列:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10,并且其中所述检测所述扩增子的存在用于诊断所述样品中大豆事件MON87751DNA。

8.一种用于保护大豆植物免于遭受昆虫侵染的方法,其中所述方法包括在大豆的鳞翅目害虫的膳食中提供杀虫有效量的包含事件MON87751的大豆植物的细胞或组织。

9.如权利要求8所述的方法,其中所述鳞翅目昆虫害虫选自由以下组成的组:夜蛾属、灰翅夜蛾属、铃夜蛾属、Crocidosema spp.、Rachiplusia spp.、干煞夜蛾属、玉米苗斑螟属以及绿夜蛾属。

10.一种产生昆虫抗性大豆植物的方法,其包括:

a)将两种不同的大豆植物与包含转基因大豆事件MON87751DNA的两种不同的大豆植物中的至少一种有性杂交;

b)对来自所述杂交的后代的种子或组织进行采样;

c)检测用于诊断来自步骤b)的样品中的大豆事件MON87751的DNA区段的存在以鉴别包含大豆事件MON87751DNA的后代;以及

d)选择所述包含大豆事件MON87751DNA的后代,其中所述后代为包含转基因大豆事件MON87751DNA的昆虫抗性大豆植物。

11.一种无生命的大豆植物材料,其包含可检测量的如权利要求1所述的重组DNA分子。

12.一种微生物,其包含可检测量的如权利要求1所述的重组DNA分子,所述微生物是细菌。

13.一种大豆商品产品,其包含可检测量的对于事件MON87751是独特的DNA分子,其中所述分子包括如权利要求1所述的重组DNA分子,所述大豆商品产品选自以下:大豆油、大豆蛋白、大豆粕、大豆粉、大豆坯片、大豆豆皮、豆浆、大豆干酪、大豆酒、包含大豆的动物饲料、包含大豆的纸、包含大豆的乳酪、大豆生物质、以及使用大豆植物及大豆植物部分生产的燃料产品。

14.一种测定包含事件MON87751的大豆植物或大豆种子的合子型的方法,其包括:

a)使包含大豆DNA的样品与能够产生用于诊断事件MON87751的第一扩增子及用于诊断不包含事件MON87751的天然大豆基因组DNA的第二扩增子的引物组接触;

i)进行与所述样品及所述引物组的核酸扩增反应;及

ii)在所述核酸扩增反应中检测用于诊断事件MON87751的所述第一扩增子或用于诊断不包含事件MON87751的天然大豆基因组DNA的所述第二扩增子;

其中仅所述第一扩增子的存在用于诊断样品中的纯合事件MON87751DNA,并且所述第一扩增子和所述第二扩增子两者的存在用于诊断对于事件MON87751等位基因呈杂合的大豆植物;或

b)使包含大豆DNA的样品与探针组接触,所述探针组含有至少一个与事件MON87751DNA特异性地杂交的第一探针及至少一个与通过插入事件MON87751的异源DNA而被破坏的大豆基因组DNA特异性地杂交并且不与事件MON87751DNA杂交的第二探针,

i)使所述探针组与所述样品在严格的杂交条件下杂交,

其中检测仅所述第一探针在所述杂交条件下的杂交用于诊断所述样品中事件MON87751DNA的纯合等位基因,并且其中检测所述第一探针及所述第二探针两者在所述杂交条件下的杂交用于诊断所述样品中事件MON87751DNA的杂合等位基因。

15.如权利要求14所述的方法,其中所述引物组包含SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14及SEQ ID NO:15。

16.如权利要求14所述的方法,其中所述探针组包含SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:16。

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