由于疾病的指数增长，抗癌药物的研究和开发是全世界的优先事项，然而，正在进行对药物的开发的研究，该药物不仅使用了清洁技术，而且还使用了低成本的原料，这有助于减少由于常规化疗的开支。例如，我们可以提及源自柑橘产业的化合物，其中巴西占据世界领先地位。这些化合物之一是柠檬烯，其从工业废物(即柑橘皮)中获得。紫苏酸(AP)(式I)以其抗癌活性而闻名并且可以通过生物合成(生物转化)从微生物(特别是属于Arxula属、假丝酵母属(Candida)和耶氏酵母属(Yarrowia)的酵母)对柠檬烯的作用而产生。本发明包括源自紫苏酸的盐形式的化合物，该化合物具有式II，其可以从紫苏酸获得，紫苏酸又通过柠檬烯的生物转化而获得，该化合物具有抗癌活性并可溶于水。源自紫苏酸的盐的化合物，其中反离子(抗衡离子/平衡离子，counterion)M+包含碱金属或碱土金属，诸如例如，Na+(钠)、K+(钾)、Ca+2(钙)，由式II表示，其中反离子M+可以是Na、K、Ca/2等。本发明特别包括获得源自紫苏酸的盐形式的化合物，诸如紫苏酸钠(sodiumperylate)，本文被描述为NAP(式III)，该化合物具有抗癌活性并可溶于水。本发明特别涉及化合物、药物组合物、用于获得化合物的方法、化合物用于治疗癌症的用途以及用于治疗癌症的方法。
背景技术：
：柠檬烯由低成本的单萜组成，广泛分布在自然界中，是柑橘产业的丰富的副产物，并且能够提供具有巨大药物重要性的高附加值的氧化的衍生物。在这些衍生物中，紫苏酸占据显著的位置，这是因为它具有抗癌和抗微生物活性，根据下述结构式还有紫苏醇和紫苏醛。与化学合成相比，生物转化方法提供了技术、经济和环境优势，其中我们强调具有化学选择性、区域选择性和对映选择性的产物的形成，具有较少的副产物形成、温和反应条件的使用和低能耗。由于生产光学纯(enantiomericallypure)产物的能力，生物转化的工业应用变得越来越重要，特别是生产药物和药物中间体。由于来自工业柑橘残渣的R-(+)-柠檬烯右旋异构体的丰富可用性，该化合物的微生物的生物转化已被集中利用以建立低成本方法来产生芳香族化合物(例如，α-萜品二醇(α-terpinol))和药理学活性衍生物(诸如紫苏醇和紫苏酸)，其描述于：·CadwalladerK.R.；BraddockRJ.；ParishM.E.；HigginsD.P.Bioconversionofd-limonenebyPseudomonasgladioli.J.FoodSei.54,1241-1245(1989)；·Mirata；MA.；BeerdD.；SchraderJ.IntegratedbioprocessfortbeoxidationoflimonenetoperillicactdwithPseudomonasputidaDSM12264,ProcessBiochem.44,764-771(2009)；·SpeetmansG.；BijlsmaA.；EgginkG.Limonenebioconversiontohighconcentrationsofasingleandstableproduct,perillicacid,byasolvent-resistantPseudomonasputdastrain.Appl.Microbiol.Biotechnol.50,538-544(1998)。从柠檬烯获得的衍生物已作为抗微生物剂和抗癌剂由下列作者研究：·DaFonseca,C.O.；M.；Lins,I.R.；Caetano,R.O.；Futuro,D.；Quirico-Santos,T.EfftcacyofmonoterpeneperillylalcoholuponsurvivalrateofpatientswrthrecurrentglioblastomaJ.CancerRes.Clin.Oncot.137.287-293(2011)；·Yeruva,L；Pierre,KJ.；Elegbede,A.；Wang,R.C.；Carper,S.W,Perillylalcoholandperillicacidinducedcellcycleandapoptosisinnon-smallcelllungcancer.Cancerletters257,216-226(2007)。专利申请号WO95/24895描述了使用紫苏醇和紫苏酸甲酯来降低血清胆固醇水平以形成并引起癌的消退；而专利文献号BRPI0107262涉及哺乳动物神经系统中细胞肿瘤的治疗，其使用紫苏醇来抑制肿瘤的形成和引起肿瘤的消退。紫苏酸(PA)可以以左旋形式或(S)-PA(诸如紫苏醇)商购获得。因此，可推断(S)-AP通过化学合成获得，包括以前体而非(R)-柠檬烯引发的几个步骤，因为这将产生右旋分子。因此，从低成本原料获得的抗癌药物的生产被认为与群体的健康相关。这由柠檬烯代表，柠檬烯是柑橘产业的衍生物，其通过清洁技术加工，而不使用溶剂或有毒催化剂来产生活性成分。相比之下，该方法通过生物安全的酵母的作用使用含水生物学方法(aqueousbiologicalmethod)来转化柠檬烯。此外，所开发的方法仅利用电能来搅拌该系统，而不应用热，即，其在室温下进行，具有中性pH(水pH)。这样，发酵过程不仅利用了工业废物，而且还生成了能生物降解的残渣，从而满足绿色化学(GreenChemistry)的原则。重要的是强调本发明的主题涉及化合物和药物组合物，它们的生产方法具有高度的可持续性。技术实现要素：本发明包括根据式II的源自紫苏酸的盐形式的化合物，其中反离子M+包含碱金属或碱土金属，诸如例如Na+(钠)、K+(钾)、Ca+2(钙)等。特别地，本发明的化合物是由紫苏酸获得的由式III表示的紫苏酸钠(NAP)，紫苏酸由柠檬烯生物转化而产生。本发明的另一目的涉及药物组合物，其包含式II的源自紫苏酸的盐形式的化合物，特别是式III的化合物紫苏酸钠(NAP)。本发明的又一目的是获得式II的源自紫苏酸的盐形式的化合物，特别是式III的化合物紫苏酸钠(NAP)。此外，本发明涉及源自紫苏酸的盐形式的化合物(特别是，紫苏酸钠(NAP))在治疗癌症中的用途。本发明还提供了使用源自紫苏酸的盐形式的化合物(特别是紫苏酸钠(NAP))治疗癌症的方法。附图说明下面简要地描述每个附图的内容。图1表示用于获得源自紫苏酸的化合物的方法的流程图。图2示出了(S)-NAP在HCT-116(高度恶性人类结肠腺癌)活力中的作用。线性回归示出了0.9347的统计学显著相关系数(R2)，使用了95％置信区间。图3示出了(S)-NAP在HT-29(人类结肠腺癌)肿瘤细胞活力中的作用。线性回归示出了0.9569的统计学显著相关系数(R2)，使用了95％置信区间。图4示出了对K562(白血病)细胞的抗增殖测定的结果。图5示出了对MCF7(乳腺肿瘤)细胞的抗增殖测定的结果。图6示出了对Lucena(多重耐药性白血病)细胞的抗增殖测定的结果。图7示出了对SKMEL(黑素瘤)细胞的抗增殖测定的结果。具体实施方式紫苏酸(AP)(式I)以其抗癌活性而闻名，并且其可以通过由微生物(特别是属于Arxula属、假丝酵母属(Candida)和耶氏酵母属(Yarrowia)的酵母)对柠檬烯的作用所促进的生物合成(生物转化)而产生。反过来，柠檬烯是大规模地从柑橘产业的残渣(橘皮)获得的被归类为单萜的化合物。基于文献中描述的使用紫苏醇(POH)以及还使用紫苏酸(PA)的临床测定和临床前测定的结果，源自紫苏酸的盐形式的化合物，特别是紫苏酸钠(NAP)，已经成为防止肿瘤生长的可行药剂(试剂)。使用源自紫苏酸的盐形式的化合物来治疗肿瘤的主要原因如下：(i)在来自接受使用紫苏醇的临床治疗的患者的血浆中发现了高浓度的紫苏酸和二氢紫苏酸；(ii)NAP在水性培养基中的溶解度高于POH和PA的溶解度，并因此，其在生理培养基和血浆中具有更大的溶解度，这使得其在体内更易获得，从而导致较低的浓度要求以达到与更大亲脂性的衍生物(诸如紫苏酸和紫苏醇)相同的活性水平；(iii)源自紫苏酸盐的化合物的更高的生物利用度允许当与紫苏醇或紫苏酸的更大亲脂性的分子相比时在身体的不同器官中的性能更全面；(iv)紫苏酸盐的酸官能度和电离电位(ionizationpotential)促进分子杂化物(hybrid)或新型药物组合物的产生，从而使得可能的组合也巩固它们在常规癌症治疗中作为佐剂和/或协同剂的用途。本发明包括获得源自紫苏酸的盐形式的化合物(式II)，特别是紫苏酸钠(本文描述为NAP(式III))，其具有抗癌活性并且可溶于水。该分子从紫苏酸获得，而紫苏酸又源自柠檬烯生物转化。用于获得紫苏酸和紫苏酸钠的方法在获得本发明的化合物紫苏酸钠(NAP)之前，必须借助于柠檬烯生物转化来获得紫苏酸。通过生物过程，单萜柠檬烯通过微生物(特别是属于Arxula属、假丝酵母属(Candida)和耶氏酵母属(Yarrowia)的酵母)的作用而转化为紫苏酸。这种生物转化的产物紫苏酸(AP)从生物水性培养基中提取，然后单独转化为通过钠盐NAP举例说明的相应的盐，钠盐NAP由合适的碱在相容的溶剂中的作用产生。获得方法发生在四个主要步骤中，如图1的流程图中所表示的。用于获得钠盐(NAP)的方法例如包括以下步骤：1)细胞生长2)柠檬烯生物转化3)从培养基分离紫苏酸4)获得钠盐(NAP)步骤1-细胞生长在该阶段，从原种培养和生物量生产进行细胞增殖。细胞生长阶段使用所选择的酵母，其根据如由美国食品和药物管理局(FDA)(在美国负责药物注册的机构)建立的GRAS(通常被认为安全)标准已被分类为安全。在该阶段，产生足够的生物量来开始生物转化的理想的细胞生长条件是通过研究影响细胞培养的所考虑的参数(诸如碳源和氮源)来优化。步骤2-柠檬烯生物转化根据现有技术，我们发现解脂耶罗威亚酵母(Yarrowialipolytica)是产生特异性酶的微生物，其能够将柠檬烯氧化成紫苏酸。获得紫苏酸(PA)的柠檬烯生物转化发生在单个步骤中，其被测试用以下参数产生最大产量：a)5-20g/L之间的酵母细胞团(cellmass)的浓度；b)在反应中使用的柠檬烯的量在0.1％和0.5％v/v之间；c)以单一份或以间歇份加入柠檬烯；d)培养基的pH介于5.7-7.4之间；和e)温度范围为20℃至30℃；以及，f)反应时间为24至48小时。所获得的PA的量与类似于使用细菌的柠檬烯的生物转化器所报道的量相当，即当以相同规模进行时约1g/L的柠檬烯，对应于30％的转化率。获得紫苏酸的方法相对于现有技术的优点之一包括通过生物转化选择性生产PA，即所得的副产物不污染产物，诸如紫苏醛、紫苏醇和源自多羟基化柠檬烯的物质。此外，生物转化涉及水性培养基，因此消除了所有的有毒组分，从而符合当前的环境要求。步骤3-从培养基提取紫苏酸在该步骤中，AP在酸培养基中沉淀，或者可替换地利用合适的溶剂提取。因此，在完成柠檬烯的生物转化步骤之后，开始该方法的第三步骤，其包括分离紫苏酸(PA)的步骤，该步骤在正常的环境条件下是足够稳定的。考虑到其单萜性质(具有10个碳)和羧基官能的存在，可以以若干方式分离PA，其中选择以下两种：(1)用合适的溶剂分配：PA分离可以使用水不混溶的亲脂性溶剂(特别是乙酸乙酯)通过液-液分配进行；或者，(2)过滤与酸-碱分配的组合：提取可以通过理想化的一组操作来实现，所述操作包括在其某个阶段中用无机酸和碱金属氢氧化物增加/降低培养基的pH，在合适的膜上预先过滤或后过滤(post-filtration)；随后回收最终的酸培养基，从而引起AP的沉淀，然后通过过滤最终分离AP。在该阶段，分离PA用于两个目的：它们中的前者用于随后获得源自紫苏酸的NAP或其他盐；以及后者用于获得将被定量分析的样品，以便评估酵母对柠檬烯的生物氧化的有效与否和所获得的PA的质量/纯度。步骤4-获得钠盐(NAP)在分离紫苏酸(PA)后，该方法的第四且最后步骤涉及通过用来自碱金属或碱土金属的阳离子(诸如Na+(钠)、K+(钾)、Ca+2(钙)等)取代羧酸的氢来获得紫苏酸盐。该步骤旨在增加化合物在亲水性溶剂中的溶解度以有利于溶剂化，从而促进阴离子和相应阳离子之间的分离的稳定性。因此，将共价分子变成盐的目的在于促进制药技术(药学技术/药物技术，pharmacotechnical)程序以及药物的生物利用度。对于紫苏酸(PA)，发现存在两种对映体形式，其可以以下列方式获得：●(S)-PA(左旋形式)-在试剂市场购买；或者●(R)-PA(右旋形式)-通过(R)-柠檬烯的转化在实验室中产生。两种形式(左旋和右旋)可以产生相应的盐，而不损害每种形式固有的光学活性(对映异构)，只要紫苏酸(PA)变成其相应的盐不影响其性质。因此，与使用紫苏酸(PA)的一种或另一种对映体(R或S)无关，其对紫苏酸盐(诸如例如，NAP)的变化的描述不需要详述该条件，这是因为负责该活性的分子的手性中心将不会通过此种转化而改变。因此，原始的PA对映体将被整体维持，即(R)-PA将仅产生(R)-NAP，并且(S)-PA将仅产生(S)-NAP。对商业的(S)-PA试剂和对于在实验室中通过用解脂耶罗威亚酵母对(R)-柠檬烯生物转化所产生的(R)-PA试剂二者进行PA转化为NAP盐。在这种情况下，盐(R)-NAP和(S)-NAP二者通过溶解在相应的醇特别是甲醇中的碱金属甲醇盐特别是商购的甲醇钠的作用而获得。PA是相对可溶的，并且NAP(由于其离子特性)在醇中是相对不溶的。因此，在搅拌和冰浴冷却下，将甲醇中的甲醇钠溶液(10％-30％)以合适的浓度控制地加到另一种PA的甲醇溶液中，促进了沉淀物的形成，如实施例5中所示的。使用稍微化学计量过量的甲醇钠来确保在甲醇中形成NAP沉淀物和最大PA消耗。该沉淀物包含白色至微黄色固体，并且可以过滤、用丙酮洗涤、纯化、干燥和储存用于抗肿瘤活性测试。为了获得NAP，可以使用两种不同的途径，其基于：(1)商业的(S)-PA与甲醇钠的反应，以及(2)通过用解脂耶罗威亚酵母的(R)-柠檬烯生物转化生物合成(R)-PA，随后使(R)-PA与甲醇钠反应以产生(R)-NAP，如下列方案中所描述的：通过常规光谱法特别是通过质子磁共振(1H-NMR)来鉴定NAP。该鉴定由可用于紫苏酸以及用于柠檬烯的比较数据支持。如通过气相色谱(GC)所测量的，(S)-NAP和(R)-NAP的产率从44％变化至76％；也用于确定各自的纯度。不存在描述该化合物或与其相关的数据的引用；这使它新颖。例如，根据式IV，对于R-NAP所获得的1H-NMR的数据列于下面。对于化合物R-NAP所指示的值与S-NAP的值相同，这是因为所应用的NMR技术不能区分对映体。下面描述实施例以提供本发明的细节。实施例1获得解脂耶罗威亚酵母的细胞生物量在柠檬烯生物转化中所使用的所用的酵母谱系解脂耶罗威亚酵母ATCC18942是基于收集外来培养物(美国典型培养物保藏中心)，对巴西领土的基因遗传资源不存在有权鉴定(characterization)。所使用的菌株解脂耶罗威亚酵母的来源是OswaldoCruz的微生物的机构收集，其保藏物存储在InstitutoNacionaldeControledaQualidadeemSaúde-巴西国家卫生质量研究所(INCQS/FIOCRUZ)，记录号为40149。最佳酵母培养条件涉及其生长于旋转搅拌器(250rpm)上在YMB(酵母麦芽肉汤)(10g/L葡萄糖、3.0g/L酵母提取物、3.0g/L麦芽提取物和5.0g/L蛋白胨)中在25℃进行48小时。培养在含有50ml的培养基的250ml锥形瓶中进行，并在旋转搅拌器中在以250rpm搅拌下在28℃下孵育细胞48小时。参照校准曲线，在OD600测定细胞质量浓度。OD600中的单位对应于0.444g/L的解脂耶罗威亚酵母的干细胞浓度。实施例2使用解脂耶罗威亚酵母的柠檬烯生物转化将如实施例1中所述的所获得的酵母解脂耶罗威亚酵母的细胞团以3000g离心并用于R-(+)-柠檬烯转化(96％-Fluka，Buchs，瑞士)。柠檬烯生物转化的反应条件如下：(i)温度在20℃到30℃之间；(ii)在磷酸盐缓冲液(50mM)中pH在5.7至7.4之间；(iii)细胞团浓缩物在5g/L到20g/L之间；以及(iv)0.1％至0.5％(v/v)的柠檬烯浓缩物。将反应混合物在250rpm的搅拌下孵育，并通过以3000g离心从上清液(含有PA)中分离细胞。根据GC-FID分析(参见下文)，柠檬烯生物转化导致1g/L的紫苏酸的形成。通过具有火焰离子化检测器(GC-FID)的气相色谱法测量生物转化中的紫苏酸的产生。为此，在两种不同的制剂中分析样品，如实施例3A和3B中所述的。GC分析在具有毛细管柱HP-Innowax(30m×0.25mm×0.25mm的膜厚度)的气相色谱仪(型号NetworkHP6890N)中进行，流速为2.0mL/min以及流动分级速率模式1/15(进样口“分流/不分流”)。温度程序如下：初始温度为50℃，保持2分钟，最终温度为250℃，保持8分钟，并且加热速率为10℃/min。使用氦气作为输送气体。将进样口温度调节至270℃。在270℃下利用火焰离子化检测器(FID)进行检测。为了检测所形成的PA，使用商业的(S)-紫苏酸来建立校准曲线。通过生物转化所获得的紫苏酸的结构通过与用电子轰击(GC-EI)的质谱偶联的气相色谱来证实。除了使用HP-5MS柱之外，以在GC-FID中使用的相同条件进行分析。在该柱中，紫苏酸在13.03分钟中洗脱，从而导致与商业的化合物相同的质谱裂解[m/z166(M+)、121(M+-CO2H)、105、93、79、68]。实施例3从反应培养基中分离紫苏酸实施例3A：通过溶剂提取将来自柠檬烯生物转化的水相转移到1L的提取器中，并且加入NaCl(75g/L)，搅拌直至完全溶解该盐。水相用乙酸乙酯(三份的325mL/L)提取，并且在分液漏斗中与有机相分离。在合并有机相之后，加入干燥剂Na2SO4(10至15g/L)。溶剂过滤和在旋转蒸发器中的浓缩导致获得微黄色固体，然后在高真空下将其干燥。该方法的平均产率在80％到90％之间，并且样品的平均纯度在80％到85％之间，如通过GC所测定的。一旦以较小规模进行，则该程序也用于制备用于通过所获得的PA的GC分析的样品。实施例3B：通过添加酸进行的PA沉淀将来自柠檬烯的水相的等分试样(1ml)转移到离心管中，向其中加入50μL的0.6M的HCl以诱导沉淀。在以10,000rpm离心10分钟并弃去上清液后，将沉淀物溶解到2ml的乙酸乙酯中，用于GC分析。使用商业的紫苏酸的人工制剂来评价该样品的制备方法，从而获得98.1％的回收率。一旦以更大的规模进行，则该程序也用于从生物转化培养基中提取PA。实施例4紫苏酸钠(NAP)制备在MeOH(5.3-7.3mL)中的紫苏酸(580-702mg；3.5-4.2mmol)的溶液中，在冷却(10-0℃)下加入MeONa的商业溶液(30％，Vetec)直到完成沉淀。过滤滤液并通过用冰冷的丙酮(8.5至10.5mL)洗涤来纯化，在真空干燥后，提供对应于NAP的微黄色固体(480至722mg，产率从73％至91％)。对商业试剂(S)-PA和对在实验室中通过(R)-柠檬烯生物转化所产生的(R)-PA二者进行该方法；从而分别获得(S)-NAP和(R)-NAP。通过常规光谱法特别是1H-NMR来鉴定所获得的产物。实施例5(S)-NAP分子对高度恶性人类结肠腺癌细胞-HCT-116的杀肿瘤作用进行该实施例以证明紫苏酸钠的杀肿瘤能力。首先评价(S)-NAP对具有恶性程度增加的人类结肠腺癌细胞(Caco2、HT-29、HCT-116和正常对照细胞MDCK、达尔马提亚人肾细胞)的活力的影响。增殖测定(i)细胞培养：使用具有降低的恶性水平的人类结肠腺癌细胞系HCT116、HT-29和Caco-2。作为上皮细胞模型的对照，使用引流(drainage)上皮的正常细胞系(IEC-6)。根据ATCC规范培养这些细胞，并在具有5％的CO2的烘箱中在37℃下在DMEM培养基中保持直至达到半汇合(semiconfluence)。(ii)处理：首先，测试紫苏酸钠的浓度(1.0、1.8、2.6、3.4、4.2和5.0mM)以测定药物的IC50。在用(S)-NAP处理之前和处理24小时期间，单层半汇合细胞被血清去除24小时。(iii)活力测试：将该谱系接种在具有含有上述的不同的(S)-NAP浓度的DMEM培养基的96孔平底板中。细胞与(S)-NAP的孵育在37℃下进行24小时，此后，用MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物](2.5mg/ml)以250μg/ml的最终浓度孵育该板2小时。将板在4℃下以1200RPM离心5分钟，倾倒以除去上清液，这是因为晶体已沉积在细胞内。将甲臜晶体溶解到100μl的DMSO中，并手动均质化且通过装置。在平板读数器(SpectraMax190)中在538nm处测定吸光度。与实验同时进行无药物添加100％活力和使用甲醛的0％活力的对照。结果被证明对治疗是难治的CaCO2细胞，以及最具侵袭性的细胞HCT-116是最受影响的细胞。因此，使用HCT-116进行试验，并且CaCO2作为阴性对照。在图2和图3中以及表1中示出了(S)-PA的杀肿瘤作用。表1-用(S)-NPA进行的体外测定*受NAP溶解度限制的浓度高于该值。实施例6-使用(R)-AP、(S)-AP、(R)-NAP和(S)-NAP的抗增殖作用进行实施例6以确定以下样品对人类肿瘤谱系的生物活性：(S)-紫苏醇、(S)-AP、(R)-AP、(S)-NAP和(R)-NAP。将(S)-紫苏醇与钠酸和盐的样品结合进行测试，这是因为它是被认为具有一些确立的临床功效的物质。增殖测定接收样品(R)-AP、(S)-AP、(R)-NAP、(S)-NAP和紫苏醇(POH)并溶解于DMSO或盐水溶液(0.9％的NaCl)中并在-20℃下保存直至实验当天，在使用前立即将它们稀释在富含10％胎牛血清、100U/l青霉素和0.1mg/ml链霉素以及0.05mg/ml庆大霉素的细胞培养基DMEM(DMEM完全培养基)中。根据分子药理学实验室的标准操作程序FARMO1003版本00进行实验，其总结如下。在DMEM完全培养基上培养K562(白血病)、LUCENA(多药耐药性白血病)、SKMEL28(黑素瘤)和MCF7(乳腺肿瘤)细胞，并保持在对数生长期。在用样品处理之前24小时，将100μl的细胞悬浮液(5×104个细胞/ml)加入96孔板的孔中，并保持在5％CO2气氛、37℃下的烘箱中。以响应剂量(0.01至100μM；5个点)进行五种样品中的每一个的处理，每个浓度一式三份。在48小时后，加入噻唑蓝(MTT；SIGMA代码M5655)，并将板在具有CO2的烘箱中保持4小时。在孵育时间后，吸出上清液，并用异丙醇溶解由细胞活性所形成的甲臜晶体，并在完全溶解后，在微板读数器中在570nm处(VictorX5；PerkinUSA)进行光密度测定。结果：图4示出了用样品R-NAP(R-型紫苏酸钠)的处理显示出最佳性能，具有1.24μM的IC50。其他测试样品不显示需要计算IC50的抑制。图5示出了用五种样品(R)-PA、(S)-PA、(R)-NAP、(S)-NAP和(POH)的处理显示出没有使IC50计算必需的抑制。图6示出了用样品(R)-NAP(R-型紫苏酸钠)的处理显示出最佳性能，具有0.013μM的IC50。其他测试样品不显示需要在所用的剂量间隔内IC50计算的抑制。图7示出了用样品(S)-PA(S-型紫苏酸钠)和(R)-NAP(R-型紫苏酸钠)的处理在所用剂量间隔内显示出没有使IC50计算必需的抑制。在所测试的样品中，样品(R)-NAP(R-型紫苏酸钠)显示出最佳性能，示出对K562和LUCENA谱系的活性，分别具有1.240和0.013μM的IC50，而其他测试样品在所用的剂量间隔内对任何所测试的谱系均没有显示相关活性。基于前述结果，已经证明了紫苏酸的钠盐(即，紫苏酸钠)是适用于治疗癌症的产品，并且它也可以用作常规治疗的协同佐剂。本发明的药物组合物包含作为单一成分或与抗癌剂组合的从紫苏酸(其在使用酵母解脂耶罗威亚酵母的柠檬烯的生物转化过程中产生)获得的紫苏酸钠，所述组合物根据用于制备药物组合物的常规技术被配制到适用于人类的药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂中。可用于本发明组合物中的药学上可接受的载体包括常规的药学载体，诸如磷酸缓冲盐溶液、水和乳剂(诸如油包水乳剂或水包油乳剂)。该组合物可另外含有固体药物赋形剂，诸如淀粉、纤维素、滑石、葡萄糖、乳糖、蔗糖、凝胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、氯化钠、脱脂乳粉和类似物质。液体和半固体赋形剂可以选自甘油、丙二醇、水、乙醇和各种油，包括石油、动物油、植物油或合成来源的油，比如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。(特别是用于可注射溶液的)液体载体包括水、盐水、葡萄糖水溶液和二醇。作为合适的药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂的实例，参见由E.W.Martin编辑的RemingtonPharmaceuticalSciences(MackPublishingCompany，18th版，1,90)。该组合物还可以包括稳定剂和防腐剂。对于权利要求中的术语“治疗有效量”，应当理解，治疗有效量是足以治疗特定病症或疾病的量，或者可替换地，足以获得对病症或疾病治疗的药理反应(pharmacologicalresponse)的量。确定最有效的给药方式和给药剂量的方法可随用于治疗的组合物、治疗的目的、待治疗的靶细胞和待治疗的患者而变化。通常可以滴定治疗剂量以优化安全性和功效。单次或多次给药可以在由医生选择的剂量水平和标准下进行。合适的剂量配制和给药方法可以由本领域技术人员容易地确定。比如，以约0.01mg/kg至约200mg/kg、以约0.1mg/kg至约100mg/kg或以约0.5mg/kg至约50mg/kg给予该组合物。当本文所描述的化合物与另一种药剂或疗法共同给药时，有效量可以小于当单独使用药剂时的有效量。也就是说，所述组合物可以与也用作抗癌剂的另一种化合物组合使用。本发明的药物组合物包含治疗有效量的源自紫苏酸的盐形式的化合物(根据式II)以及适用于人类的药学上可接受的载体、佐剂和/或赋形剂。根据本发明，将源自紫苏酸的盐形式的化合物(根据式II)(其中反离子M+包括碱金属或碱土金属，诸如Na+(钠)、K+(钾)、Ca2+(钙)等)，特别是由式III表示的紫苏酸钠(NAP)用于制备用于治疗、预防或抑制癌形成的药物。式II的化合物还可以用于治疗与非实体瘤(诸如白血病、多发性骨髓瘤、血液恶性肿瘤或淋巴瘤)以及与实体瘤及其转移(诸如黑色素瘤、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、肝细胞癌、成胶质细胞瘤、甲状腺癌、胆管肿瘤、骨肿瘤、胃肿瘤、脑/CNS肿瘤、头颈肿瘤、肝肿瘤、腹部肿瘤、前列腺肿瘤、乳腺肿瘤、肾肿瘤、睾丸肿瘤、卵巢肿瘤、皮肤肿瘤、子宫颈肿瘤、肺肿瘤、子宫肿瘤、外阴肿瘤、子宫内膜肿瘤、结肠直肠肿瘤、胰腺肿瘤、胸膜/腹膜肿瘤、膜肿瘤、涎腺肿瘤和表皮样肿瘤)相关的疾病。根据本发明，源自紫苏酸的盐形式的式(II)化合物可以用于制备用于在温血动物(诸如人类生物)中产生抗癌作用的药物。根据本发明，包含源自紫苏酸的盐形式的根据式II的化合物(其中反离子M+包括碱金属或碱土金属，诸如Na+(钠)、K+(钾)、Ca2+(钙)等)特别是由式III表示的紫苏酸钠(NAP)的药物组合物被用于制备用于癌症治疗、预防和形成抑制的药物。本发明还包括包含作为单一成分或与抗癌剂组合的式(II)的化合物，特别是式(III)的化合物(紫苏酸钠)用于治疗癌症的方法。当前第1页1 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