石蜡包埋组织样本中交联DNA的快速分离与检测的方法与流程

文档序号:13221297阅读:来源:国知局
技术特征:
1.一种石蜡包埋组织样本中交联DNA的快速分离与检测的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:置石蜡包埋组织样本于样品管中,加水,60-80℃孵育,移弃上清;加入蛋白质降解试剂,孵育;添加DNA解交联与分离提取试剂,震荡,所述DNA解交联与分离提取试剂为Chelex100;高温震动孵化;离心留取上清;上清中加入加样承载缓冲液;电泳检测。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括将上清转入新的样品管中。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括在所述上清中加入RNaseA。4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述60-80℃孵育时间为5-10min。5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白质降解试剂选自蛋白酶K、胰蛋白酶(Trypsin)和或组织蛋白酶(cathepsin)中的一种或多种,优选地为蛋白酶K。6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述Chelex100的浓度为2-50%(g/mL)。7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高温震动孵化条件为80-100℃,100-1500转/min,5-30min,优选地,所述高温震动孵化条件为95℃,1300转/min,10min。8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述加样承载缓冲液包括示踪核酸分子电泳迁移速度的染料。9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述染料分子量相当于50-400bp的DNA,优选地,所述染料分子量相当于50-150bp的DNA,更优选地,所述染料分子量相当于50的DNA。10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电泳检测是进行凝胶分析或快速凝胶分析,优选地,用1.2%凝胶进行电泳分析检测。
当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1