本发明涉及植物化学成份的提取方法，具体是一种具有镇痛作用的茉莉素的提取方法。
背景技术：
茉莉是木犀科植物茉莉的根、茎、叶、花，主要分布于广西、广东、云南、四川等地，野生较少，多为家种，是一种经济作物。用其花作茶饮，称为茉莉花茶，或者拌和其他茶叶饮用。将其花经水蒸气蒸馏后所得蒸馏液，称茉莉花露，具有解胸中一切陈腐之气，健脾理气之功效。广西横县多个乡镇都有广泛种植，形成一定规模的产业，称为茉莉之乡。茉莉的应用目前只用其花，每年都举办茉莉花节，以促进茉莉花产业的发展。茉莉花只占茉莉植株的一小部分，而花的产量又与植株的新老有关，新株花多，老株花少。为保持花的正常产量，种植农户每年都要挖除老株，插植新株，或者砍去老株的地上部分，让根部长出新苗，而砍去的根茎通常弃之。
茉莉根茎不是中药，用作草药也很少见到。民间用法都是取其新鲜根茎磨汁内服，或者将新鲜根茎捣绒酒炒外敷，才有镇痛、镇静催眠、麻醉等效果。茉莉的镇痛麻醉作用在上个世纪七十年代开展的中药麻醉研究中，也没有分离得到这类单体成分。近年来，不少学者也对茉莉根茎的化学成分进行了研究，但目前没有发现有茉莉提取物进行治疗镇痛、镇静催眠的相关报道。
茉莉根茎镇痛等成分的化学性质相当活跃，光线、空气、温度(尤其是加热)、酸碱等都能促进其自动氧化。通常茉莉根茎阴干或晒干后用溶剂提取不出活性成分，说明它们已经氧化变成其他物质，做不成药材。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有镇痛作用的茉莉素的提取方法，可以增加镇痛药物的种类，又可以充分利用废弃农作物，变废为宝。
本发明以如下技术方案解决上述技术问题：
本发明具有镇痛作用的茉莉素的提取方法，包括以下操作步骤：
1)取新鲜茉莉根茎切段，加入0.8～2.0倍重量的体积浓度为18-20％的乙醇水溶液中浸泡3-24小时，过滤，取滤液；
2)将滤液置于盛皿中，放入-10～-15℃的冰库中使其结冰化；
3)将冰冻干燥器开启，待冷阱温度降至-50℃～-60℃后，放入已冰化的样品盛皿，并控制冰冻干燥器的真空度为160—170Pa，待冰冻干燥完全；
4)取出样品盛皿，刮取上层的膜层或絮状物层，即得茉莉素成品。
步骤1)中，将新鲜茉莉根茎切段后压碎，然后放入乙醇水溶液中浸泡的同时进行搅拌捣绒，再放出浸渍液，再将药渣移置离心机中，甩干溶液，将浸渍液和甩出的溶液合并，得滤液。
步骤1)中，所述切段是指切成1-2cm。
步骤4)中，冰冻干燥器在放入已冰化的样品盛皿后运行48—55小时，至冰冻干燥完全。
本发明方法能使茉莉的活性成分在低温低压条件下提取分离，并使活性成分不被氧化变质，保持原有的生物活性，而且工艺过程不需热能，对环境不造成污染。
本发明方法可以增加镇痛药物的种类，又可以充分利用废弃农作物，变废为宝。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明具有镇痛作用的茉莉素的提取方法作进一步的描述；
实施例1，提取方法如下：
1)取鲜茉莉根茎切段(每段长1-2cm)，样重400克，加入体积浓度为18％的乙醇水溶液375ml浸泡24小时，采用两层纱布滤过，得滤液；
2)将滤液分装于塑料皿中，置于-10～-15℃的冰库中使其结冰化；
3)开启冰冻干燥器，待冷阱温度降至-55℃后，放入已冰化的样品塑料皿，并控制冰冻干燥器的真空度为160Pa，运行52小时后，冰冻干燥完全；
4)取出样品塑料皿，刮取上层的膜层，得茉莉素成品。
步骤1)的滤液中茉莉素含量约达30％。茉莉素收率达0.1％。
实施例2，提取方法如下：
1)取鲜茉莉根茎切段(每段长1-2cm)，样重500克，加入体积浓度为20％的乙醇水溶液750ml，浸泡24小时，采用两层纱布滤过，得滤液500ml；
2)将滤液分装于玻璃烧杯中，置于-10～-15℃的冰库中使其结冰化；
3)开启冰冻干燥器，待冷阱温度降至-50℃后，放入已冰化的样品玻璃烧杯，并控制冰冻干燥器的真空度为165Pa，运行48小时，冰冻干燥完全；
4)取出样品玻璃烧杯，刮取上层絮状物，得茉莉素成品。
步骤1)的滤液中茉莉素含量约达50％。茉莉素收率达0.35％。
实施例3，提取方法如下：
1)取新鲜茉莉根茎切段(每段长1-2cm)、压碎，取1500克，加入体积浓度为18％的乙醇水溶液2800ml浸泡，并搅拌捣绒提取3小时，放出浸渍液，药渣移置离心机中，甩干溶液，然后将浸渍液和甩出的溶液合并得滤液；
2)将滤液分装于塑料皿中，置于-10～-15℃的冰库中使其结冰化；
3)开启冰冻干燥器，待冷阱温度降至-60℃后，放入已冰化的样品塑料皿，并控制冰冻干燥器的真空度为170Pa，运行50小时后，冰冻干燥完全；
4)取出样品塑料皿，刮取上层絮状物，得茉莉素成品。
步骤1)的滤液中茉莉素含量约达80％。茉莉素收率达1％。
以下是采用本发明方法提取得到的茉莉素对动物进行的镇痛试验：
1实验材料
1.1动物：昆明种小鼠，雌性，体重18～22g广西医科大学实验动物中心提供，合格证号：2014-0002。
1.2受试物
茉莉素
2实验方法
2.1对醋酸致小鼠扭体反应的影响
取40只小鼠，雌雄兼用，随机分为4组，即正常对照组、阳性对照组(阿司匹林0.2g/kg)、高低剂量给药组，每组10只小鼠。于次给药后30min，进行实验，每组小鼠均腹腔注射0.6％的醋酸0.2mL，记录各组小鼠的扭体潜伏期(即从注射醋酸至扭体的时间)及在15min内扭体的次数，若15min内未扭体，潜伏期按15min记录。抑制率＝(生理盐水组扭体均数－给药组扭体均数)/生理盐水组扭体均数×100％。
2.2统计学方法学：SPSS16.0软件对数据进行统计学处理。检测结果以均数±标准差表示，多个样本均数比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。
3结果
3.1对醋酸致小鼠扭体反应的影响
与正常对照组比较，茉莉素高低剂量组均有显著性差异(P＜0.01)。结果表明，茉莉素可抑制醋酸所致小鼠扭体反应，具有明显的镇痛作用，见表1。
表1 茉莉素对醋酸致小鼠扭体反应的影响
与正常对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01
4结论
两组剂量的茉莉素均可显著抑制醋酸所致小鼠扭体反应，具有明显的镇痛作用。