本发明属于生物工程技术领域，涉及一种TSA培养基的改良配方，具体涉及一种能满足普通细菌与大部分厌氧菌全面需要的TSA培养基的改良配方。
背景技术：
现有的TSA培养基基本上是由胰酪蛋白胨、大豆胨、氯化钠、琼脂组成，虽然营养较为丰富，但由于氧化还原电位较高，所以只能进行需氧微生物的培养，厌氧微生物不能很好的生长。
技术实现要素：
为了拓宽TSA的培养范围，满足大部分需氧微生物和厌氧微生物的生长条件，本发明修改了部分TSA配方，提供了一种TSA培养基的改良配方。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种TSA培养基的改良配方，由胰酪蛋白胨、大豆胨、肝脏消化物、酵母提取物、氯化钠、硫乙醇酸钠、葡萄糖、磷酸氢二钾、琼脂组成，其中：每1000ml培养基中，含有胰酪蛋白胨15～20g、大豆胨1～5g、肝脏消化物1～5g、酵母提取物1～5g、氯化钠2～6g、硫乙醇酸钠0.5～2g、葡萄糖1～4g、磷酸氢二钾1～3g、琼脂10～20g，pH＝7.3±0.2。
本发明中，所述胰酪蛋白胨为进口，采用酪蛋白为原料，经过消化、脱色、过滤、浓缩、喷雾干燥而得到的一种浅黄色至类白色的干燥粉末。胰酪蛋白胨是一种营养价值很高的磷蛋白，氨基酸比较齐全，特别是色氨酸的含量比较高，适宜于厌氧菌、真菌、肺炎球菌、乳酸杆菌、棒状杆菌、梭状杆菌的生长。
本发明中，所述大豆胨为进口，以大豆粉为原材料，经过酶解得到，含有的肽类物质十分广泛，包括低分子量的二肽、三肽及氨基酸。微生物生长效果极佳，有利于苛养菌的充分生长。
本发明中，所述肝脏消化物为进口，肝脏酶解产物，能够提供丰富的肝糖原、维生素和氨基酸，对各种细菌有明显的促生长作用，特别是对布鲁氏菌与阿米巴原虫效果极好，另外能够更好地对厌氧菌进行培养。
本发明中，所述酵母浸粉为进口，以新鲜酵母为原料，能够提供B族维生素和各种氨基酸以及糖类(主要为糖原和海藻糖)。
本发明中，所述硫乙醇酸钠为国产。硫乙醇酸钠(HSCH2COONa)是一种还原剂，加入培养基中，能除去其中的氧或还原性物质，促使厌氧菌生长，同时提供部分钠离子维持渗透压。
本发明中，所述氯化钠为国产，能够维持渗透压。
本发明中，所述葡萄糖为国产。葡萄糖能提供部分能量与维持渗透压，同时也是一种还原剂，加入培养基中，能除去其中的氧或还原性物质，促使厌氧菌生长。
本发明中，所述磷酸氢二钾为国产，能够解离出钾离子，提供适合的代谢中酶反应的离子环境。
本发明的TSA培养基改良配方能够提供全面营养，维持细菌渗透压，修复受损细菌，在不影响现有性能即能够培养需氧微生物的基础上同时适用于大部分厌氧微生物的培养。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
实施例1：
本实施例提供的TSA培养基的改良配方由胰酪蛋白胨、大豆胨、肝脏消化物、酵母提取物、氯化钠、硫乙醇酸钠、葡萄糖、磷酸氢二钾、琼脂组成，其中：每1000ml培养基中，含有胰酪蛋白胨17g、大豆胨3g、肝脏消化物2g、酵母提取物2g、氯化钠4g、硫乙醇酸钠1g、葡萄糖2.5g、磷酸氢二钾2g、琼脂15g，pH＝7.3±0.2。
上述培养基的制备步骤如下：将胰酪蛋白胨、大豆胨、肝脏消化物、酵母提取物、氯化钠、硫乙醇酸钠、葡萄糖、磷酸氢二钾、琼脂按照比例混合，加入纯化水定容加热溶解并调节pH值至7.2±0.2，经121℃灭菌15分钟，降温至50℃，灌注平板，冷凝后得到培养基成品，备用。
利用上述成分制成的新型TSA培养基与经典TSA培养基进行细菌培养实验对比，结果如表1所示。
所用菌株：枯草芽孢杆菌(CMCC 63501)、白色念珠菌(CMCC98001)、肺炎链球菌(ATCC 6305)、生孢梭菌(CMCC 64941)。
每种菌都用同一浓度菌液进行涂布培养，并做3组平行实验。
由表1可知，本实施例的培养基配方从实验结果上看，菌检出数与状态均好于经典配方，而且厌氧菌可以生长。
表1
实施例2：
本实施例与实施例1不同的是：每1000ml培养基中，胰酪蛋白胨16g、大豆胨4g、肝脏消化物3g、酵母提取物4g、氯化钠3g、硫乙醇酸钠0.5g、葡萄糖1.5g、磷酸氢二钾2.5g、琼脂18g，pH＝7.3±0.2。
实施例3：
本实施例与实施例1不同的是：每1000ml培养基中，含有胰酪蛋白胨18g、大豆胨2g、肝脏消化物4g、酵母提取物3g、氯化钠5g、硫乙醇酸钠1.5g、葡萄糖3.5g、磷酸氢二钾1.5g、琼脂12g，pH＝7.3±0.2。