一种微生物污泥除臭剂及其制备方法与流程

文档序号:12096952阅读:282来源:国知局

本发明涉及一种制备方法,具体涉及一种微生物污泥除臭剂及其制备方法,属于环境保护技术领域。



背景技术:

近几年,随着人们对环保认识的提高,污水处理在我国得到了迅猛发展,但随之带来另一严重的环保问题,这就是如何妥善处置污水处理后产生的污泥,它已成为整个污水处理行业亟待解决的问题。处理好的污泥将是一种很好的资源,但随意摊置必会造成对环境的二次污染。目前处理处理污泥的最好的方法就是综合利用,即将污泥添加无机肥料、生石灰或粉煤灰,经简单加工用于农业生产。这种方法比较经济,且符合我国当今所提倡的可持续发展的战略,但随着一些城市污泥处理厂的建立和实际运行后,发现该方法也存在一些问题,其中一个主要问题生成过程中污泥散发臭味。产生臭味的原因是因为城市污泥处理厂的污泥含有部分带有臭味的物质,如:硫化物、氨、腐胺类等,所以当将它加工过程中时,会向四周散发臭气,严重污染大气环境。

目前,常见的除臭方法有化学法和物理法,但其使用设备繁多、工艺复杂、能耗大、运行费用高,且除臭效果不太好,不是增加了污泥的碱度就是增加了污泥的体积。微生物除臭技术是通过微生物的生理代谢将具有臭味的物质加以转化,达到对污泥除臭的目的。与其他除臭方法相比,微生物除臭法具有投资少、效果好、维护管理简单、操作方便等优点。考虑到国内许多中小型污水处理厂没有污泥消化工序,产生的是生污泥,利用生物除臭的方法可起到污泥消化工序的作用,所以采用微生物除臭法较好。现今,国内外市场存在不少生物除臭产品,但针对城市污泥的生物除臭剂的产品较少。有的甚至以单一的枯草芽孢杆菌剂充当生物除臭剂,还有的虽组分复杂,但存在有效菌群比例不稳定,导致产品质量和使用效果上问题不断。



技术实现要素:

本发明正是针对现有技术中存在的技术问题,提供了一种高效、无污染去除污泥中异味的微生物除臭剂及其制备方法,该方法采用高密度培养方式,降低了发酵成本,减少杂菌的产生,稳定了产品质量,能减少污泥综合利用过程中有害气体的排放,净化生产场地的环境,减轻大气污染。

为了实现上述目的,本发明的技术方案如下,一种微生物污泥除臭剂,微生物污泥除臭剂,由嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),米曲霉(Aspergillus oryzae),光合细菌(photosynthetic bacteria),酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)和恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)组成,其中:嗜热链球菌10~20份,枯草芽孢杆菌10~15份,米曲霉20~30份,光合细菌10~15份,酿酒酵母10~20份,干酪乳杆菌10~15份和恶臭假单胞菌10~20份;

上述微生物污泥除臭剂中各组分优选嗜热链球菌CGMCC1.3996、枯草芽孢杆菌CGMCC1.1160,米曲霉CGMCC3.4437,光合细菌CGMCC1.7520,酿酒酵母CGMCC2.1793,干酪乳杆菌CGMCC1.3113和恶臭假单胞菌CGMCC1.2309;以上菌种均购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏时间为2015年10月。该技术方案通过分离筛选高效除臭功能菌株并优化组合配伍成微生物除臭菌剂,应用该菌剂可对其恶臭气体进行分解利用,从而减少污泥资源化利用过程中有害气体的排放,达到净化周围环境,减少大气污染的目的。

一种微生物污泥除臭剂的制备方法,其特征在于,所述方法如下,1)将嗜热链球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、光合细菌、酿酒酵母、干酪乳杆菌和恶臭假单胞菌的菌种进行高密度培养;2)将上述菌种分别接种至装有体积比为15~30%的培养基的摇瓶中活化培养,将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养,将扩大培养得到各种单菌脱水干燥,制备成休眠体微生物干粉;3)将步骤2)中的菌粉按照嗜热链球菌10~20份、枯草芽孢杆菌10~15份、米曲霉20~30份、光合细菌10~15份、酿酒酵母10~20份、干酪乳杆菌10~15份和恶臭假单胞菌10~20份的重量比,混合得到微生物污泥除臭剂。

作为本发明的一种改进,步骤2)中嗜热链球菌休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:将纯化培养的斜面培养基上的嗜热链球菌种接种至装有体积比为15~30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基配方为酵母膏6.5~8.0g/l、蛋白胨6.5~8.0g/l、葡萄糖8~12g/l、磷酸氢二钾1~3g/l、西红柿汁50~200ml,pH值6.3~7.2,温度为46~50℃、摇瓶转速120~160rpm,活化培养30~42h;

将活化培养好的嗜热链球菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发酵罐内,接种量为体积比1~3%,所述发酵培养基的配方为玉米芯5~6g/l、葡萄糖8~12g/l、酵母膏8~12g/l、磷酸二氢钾18~22g/l、硫酸镁0.1~0.5g/l、氯化钙0.2~0.6g/l,在培养温度为48~50℃,pH值6.3~7.2,发酵罐搅拌转速120~160rpm,扩大培养60~72h,至发酵罐中嗜热链球菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的嗜热链球菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

作为本发明的一种改进,步骤2)中枯草芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15~30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏0.2~0.8g/l、蛋白胨12~18g/l、葡萄糖18~22g/l和氯化钠3~7g/l,在培养温度为36~40℃,pH值6.5~7.5,摇瓶转速150~190rpm培养16~24h;将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1~3%,所述发酵培养基的配方为豆饼粉18~22g/l、葡萄糖3~8g/l、鱼粉3~8g/l、玉米粉10~15g/l、磷酸氢二钾0.1~0.5g/l、硫酸铵0.8~1.2g/l、硫酸锰0.1~0.3g/l、碳酸钙5~9g/l和硫酸镁0.1~0.3g/l,在培养温度为36~40℃,pH值6.5~7.5,发酵罐搅拌转速150~190rpm培养22~34h,发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的枯草芽孢杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

作为本发明的一种改进,步骤2)中米曲霉的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:

将纯化培养的斜面培养基上的米曲霉菌种接种至装有体积比为15~30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为葡萄糖1~5g/l、马铃薯汁18~22g/l、硫酸镁1~2g/l、磷酸氢二钾1~5g/l、硫胺素0.01~0.05g/l,在培养温度为28~30℃,pH值5.5~6.5,摇瓶转速120~160rpm培养28~36h;将活化培养好的米曲霉菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1~3%,所述发酵培养基的配方为蔗糖20~40g/l、玉米浆25~35g/l、尿素4~8g/l、硫酸镁0.3~0.8g/l、氯化钾0.3~0.8g/l、磷酸氢二钾0.8~1.2g/l和橄榄油8~12g/l,在培养温度为28~30℃,pH值5.5~6.5,发酵罐搅拌转速120~160rpm,培养36~50h,发酵罐中米曲霉含量≥108个/ml,然后将发酵得到的米曲霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

作为本发明的一种改进,步骤2)中光合细菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:将纯化培养的斜面培养基上的光合细菌菌种接种至装有体积比为15~30%的培养基的摇瓶中,在培养温度为28~30℃,pH值7.0~7.5,摇瓶每隔24小时搅拌一次,培养64~84h;将活化培养好的光合细菌菌种接种到装有体积比为50~70%培养基的发酵罐内,体积接种量为6~10%,在培养温度为28~30℃,pH值7.0~7.5,每隔24小时搅拌半小时,搅拌转速140~180rpm,培养100~150h,至发酵罐中光合细菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的光合细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉,所述活化培养和发酵时的培养基的配方为磷酸氢二钾0.1~0.3g/l、氯化铵1~3g/l、氯化钠0.5~1.5g/l、乙酸钠2~6g/l、碳酸氢钠1~3g/l、硫酸镁0.1~0.3g/l和酵母膏0.1~0.2g/l。

作为本发明的一种改进,步骤2)中酿酒酵母休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:

将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为15~30%的培养基的摇瓶中,在培养温度为28~30℃、pH值6.2~6.8,摇瓶转速140~180rpm,活化培养32~48h;将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为50~70%培养基的发酵罐内,接种量为体积比1~3%,所述活化培养和发酵时的培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基,在培养温度为28~30℃,pH值6.2~6.8,发酵罐搅拌转速140~180rpm,扩大培养68~84h,至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml,然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

作为本发明的一种改进,步骤2)中干酪乳杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:将纯化培养的斜面培养基上的干酪乳杆菌菌种接种至装有体积比为15~30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏1~5g/l、蛋白胨8~12g/l和氯化钠3~7g/l,在培养温度为36~40℃,pH值6.8~7.2,摇瓶转速180~220rpm,培养20~32h;

将活化培养好的干酪乳杆菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1~3%,所述发酵培养基的配方为玉米粉13~17g/l、豆饼粉13~17g/l、磷酸二氢钾0.05~0.15g/l、硫酸锰0.05~0.1g/l、碳酸钙15~20g/l和硫酸镁0.1~0.2g/l,在培养温度为36~40℃,pH值6.8~7.2,发酵罐搅拌转速180~220rpm培养20~32h,发酵罐中干酪乳杆菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的干酪乳杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

作为本发明的一种改进,步骤2)中恶臭假单胞菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤:将纯化培养的斜面培养基上的恶臭假单胞菌菌种接种至装有体积比为15~30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏1~5g/l、蛋白胨8~12g/l和氯化钠3~7g/l,在培养温度为26~30℃,pH值7.0~7.5,摇瓶转速120~160rpm,培养18~26h;

将活化培养好的恶臭假单胞菌菌种接种到装有体积比为50~70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1~3%,所述发酵培养基的配方为葡萄糖3~8g/l、玉米粉10~15g/l、鱼粉3~8g/l、豆饼粉18~22g/l、硫酸铵0.8~1.2g/l、碳酸钙5~9g/l、硫酸镁0.1~0.3g/l、硫酸锰0.1~0.3g/l和磷酸氢二钾0.1~0.5g/l,在培养温度为26~30℃,pH值7.0~7.5,发酵罐搅拌转速180~200rpm培养24~32h,发酵罐中恶臭假单胞菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的恶臭假单胞菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

微生物污泥除臭剂用于城市污泥除臭。

相对于现有技术,本发明具有如下优点,1)该技术方案中的嗜热链球菌对污泥进行发酵处理,可提高反应速度,消灭污泥中的病原微生物,在发酵工业中,可以利用其耐高温的特性,提高反应温度,增大反应速度,减少中温型杂菌污染的机会。嗜热链球菌可产生多种酶,例如纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、菊糖酶等,由这些微生物中产生的酶制剂热稳定性好、催化反应速率高,易于在室温下保存;该技术方案中的枯草芽孢杆菌是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌,枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用;枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类;枯草芽孢杆菌对弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害细菌有很强的抑制作用,分泌大量几丁质酶的功能,几丁质酶可分解病原真菌的细胞壁而抑制真菌病害,分解污泥中有毒有害物质,具有很强的清理污泥中小颗粒的作用;该方案中的米曲霉是一类产复合酶的菌株,除产蛋白酶外,还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,广泛应用于污泥发酵、生产曲酸、酿酒等发酵工业;该方案中的光合细菌是以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。在自然界淡、海水中通常每毫升含有近百个PSB菌,光合细菌的菌体以有机酸、氨基酸、氨和醣类等有机物和硫化氢作为供氧体,通过光合磷酸化获得能量,在光照条件下可直接利用降解有机质和硫化氢并使自身得以增殖,同进净化了空气;该方案中的酿酒酵母能分解利用环境中的糖类、硫化氢、氨气等,代谢工程中产生酸性物质,可有效抑制致病菌生长,并且酵母菌体可作为其他配合菌的营养物质,有利于复合菌群的快速增殖;该方案中的干酪乳杆菌能够抑制和杀死污泥中的许多腐败菌及致病菌,并且不影响污泥性状,甚至能够改善食品特性,因此将其添加到除臭剂中能使产品除臭效果更加明显,对减少臭味气体的排放起到积极作用;该方案中的恶臭假单胞菌以苯酚为碳源和能源,能够有效降解污泥中苯酚类物质,减少有毒有害气体的排放。同时能够抑制污泥中的许多腐败菌及致病菌生长,减少臭味气体的产生;2)本发明将嗜热链球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、光合细菌、酿酒酵母、干酪乳杆菌和恶臭假单胞菌的菌种进行高密度培养后制备成的休眠体微生物干粉,根据其用途采用合理配比,混合得到微生物污泥除臭剂,比单一的细菌的除臭效果有很大的提升;3)该方案利用复合微生物群的协同作用,除臭剂中菌数高达1亿个每克,可迅速污泥中的有机成分,对污泥中的氨和硫化氢等主要的臭气源进行有效分解和吸收,从根本上减少了臭气产生源头,达到除臭的效果;4)该方案用于污泥除臭,相比现有技术,生产投资小,生产成本低,使用方便,而且除臭效果好,3-4天臭味可基本消除,该污泥除臭剂具有环保型,所用菌种常温下降解能力强,在污染物被分解掉后会自行消亡,分解为二氧化碳、水和无毒的细胞残体,分散程度高,对人和动物无毒无害,不会引起二次污染。

具体实施方式:

为了加深对本发明的理解,下面结合实施方式对本技术方案做详细的说明。

实施例1:

分别将嗜热链球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、光合细菌、酿酒酵母、干酪乳杆菌和恶臭假单胞菌的菌种进行高密度培养:

(1)嗜热链球菌:将纯化培养的斜面培养基上的嗜热链球菌种接种至装有体积比为15%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基配方为酵母膏6.5g/l、蛋白胨6.5g/l、葡萄糖8g/l、磷酸氢二钾1g/l、西红柿汁50ml,pH值6.5,温度为50℃、摇瓶转速160rpm,活化培养42h;将活化培养好的嗜热链球菌种接种到装有体积比为50%发酵培养基的发酵罐内,接种量为体积比1%,所述发酵培养基的配方为玉米芯5g/l、葡萄糖8g/l、酵母膏8g/l、磷酸二氢钾18g/l、硫酸镁0.1g/l、氯化钙0.2g/l,在培养温度为46℃,pH值6.5,发酵罐搅拌转速120rpm,扩大培养72h,至发酵罐中嗜热链球菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的嗜热链球菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(2)枯草芽孢杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏0.2g/l、蛋白胨12g/l、葡萄糖18g/l和氯化钠3g/l,在培养温度为36℃,pH值6.5,摇瓶转速150rpm培养24h;将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1%,所述发酵培养基的配方为豆饼粉18g/l、葡萄糖3g/l、鱼粉3g/l、玉米粉10g/l、磷酸氢二钾0.1g/l、硫酸铵0.8g/l、硫酸锰0.1g/l、碳酸钙5g/l和硫酸镁0.1g/l,在培养温度为36℃,pH值6.5,发酵罐搅拌转速190rpm培养34h,发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml,

(3)米曲霉:将纯化培养的斜面培养基上的米曲霉菌种接种至装有体积比为15%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为葡萄糖1g/l、马铃薯汁18g/l、硫酸镁1g/l、磷酸氢二钾1g/l、硫胺素0.01g/l,在培养温度为28℃,pH值5.5,摇瓶转速120rpm培养36h;将活化培养好的米曲霉菌种接种到装有体积比为50%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1%,所述发酵培养基的配方为蔗糖20g/l、玉米浆25g/l、尿素4g/l、硫酸镁0.3g/l、氯化钾0.3g/l、磷酸氢二钾0.8g/l和橄榄油8g/l,在培养温度为28℃,pH值5.5,发酵罐搅拌转速120rpm,培养50h,发酵罐中米曲霉含量≥108个/ml,然后将发酵得到的米曲霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(4)光合细菌:将纯化培养的斜面培养基上的光合细菌菌种接种至装有体积比为15%的培养基的摇瓶中,在培养温度为28℃,pH值7.0,摇瓶每隔24小时搅拌一次,培养84h;将活化培养好的光合细菌菌种接种到装有体积比为50%培养基的发酵罐内,体积接种量为6%,在培养温度为28℃,pH值7.0,每隔24小时搅拌半小时,搅拌转速140rpm,培养150h,至发酵罐中光合细菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的光合细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉,所述活化培养和发酵时的培养基的配方为磷酸氢二钾0.1g/l、氯化铵1g/l、氯化钠0.5g/l、乙酸钠2g/l、碳酸氢钠1g/l、硫酸镁0.1g/l和酵母膏0.1g/l。

(5)酿酒酵母:将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为15%的培养基的摇瓶中,在培养温度为28℃、pH值6.2,摇瓶转速140rpm,活化培养48h;将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为50%培养基的发酵罐内,接种量为体积比1%,所述活化培养和发酵时的培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基,在培养温度为28℃,pH值6.2,发酵罐搅拌转速140rpm,扩大培养84h,至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml,然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(6)干酪乳杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的干酪乳杆菌菌种接种至装有体积比为15%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏1g/l、蛋白胨8g/l和氯化钠3g/l,在培养温度为36℃,pH值6.8,摇瓶转速180rpm,培养32h;将活化培养好的干酪乳杆菌菌种接种到装有体积比为50%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1%,所述发酵培养基的配方为玉米粉13g/l、豆饼粉13g/l、磷酸二氢钾0.05g/l、硫酸锰0.05g/l、碳酸钙15g/l和硫酸镁0.1g/l,在培养温度为36℃,pH值6.8,发酵罐搅拌转速180rpm培养32h,发酵罐中干酪乳杆菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的干酪乳杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

(7)恶臭假单胞菌:将纯化培养的斜面培养基上的恶臭假单胞菌菌种接种至装有体积比为15%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏1g/l、蛋白胨8g/l和氯化钠3g/l,在培养温度为26℃,pH值7.0,摇瓶转速120rpm,培养26h;将活化培养好的恶臭假单胞菌菌种接种到装有体积比为50%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为1%,所述发酵培养基的配方为葡萄糖3g/l、玉米粉10g/l、鱼粉3g/l、豆饼粉18g/l、硫酸铵0.8g/l、碳酸钙5g/l、硫酸镁0.1g/l、硫酸锰0.1g/l和磷酸氢二钾0.1g/l,在培养温度为26℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速180rpm培养32h,发酵罐中恶臭假单胞菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的恶臭假单胞菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉;

将高密度培养得到的各种休眠体微生物干粉,按照嗜热链球菌10份、枯草芽孢杆菌10份、米曲霉30份、光合细菌10份、酿酒酵母20份、干酪乳杆菌10份和恶臭假单胞菌20份的菌种的重量比,混合得到微生物污泥除臭剂。

实施例 2

分别将嗜热链球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、光合细菌、酿酒酵母、干酪乳杆菌和恶臭假单胞菌的菌种进行高密度培养:

(1)嗜热链球菌:将纯化培养的斜面培养基上的嗜热链球菌种接种至装有体积比为30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基配方为酵母膏8.0g/l、蛋白胨8.0g/l、葡萄糖12g/l、磷酸氢二钾3g/l、西红柿汁200ml,pH值7.2,温度为50℃、摇瓶转速160rpm,活化培养30h;将活化培养好的嗜热链球菌种接种到装有体积比为70%发酵培养基的发酵罐内,接种量为体积比3%,所述发酵培养基的配方为玉米芯6g/l、葡萄糖12g/l、酵母膏12g/l、磷酸二氢钾22g/l、硫酸镁0.5g/l、氯化钙0.6g/l,在培养温度为50℃,pH值7.2,发酵罐搅拌转速160rpm,扩大培养72h,至发酵罐中嗜热链球菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的嗜热链球菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(2)枯草芽孢杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏0.8g/l、蛋白胨18g/l、葡萄糖22g/l和氯化钠7g/l,在培养温度为40℃,pH值7.5,摇瓶转速190rpm培养16h;将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为3%,所述发酵培养基的配方为豆饼粉22g/l、葡萄糖8g/l、鱼粉8g/l、玉米粉15g/l、磷酸氢二钾0.5g/l、硫酸铵1.2g/l、硫酸锰0.3g/l、碳酸钙9g/l和硫酸镁0.3g/l,在培养温度为40℃,pH值7.5,发酵罐搅拌转速190rpm培养22h,发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml,

(3)米曲霉:将纯化培养的斜面培养基上的米曲霉菌种接种至装有体积比为30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为葡萄糖5g/l、马铃薯汁22g/l、硫酸镁2g/l、磷酸氢二钾5g/l、硫胺素0.05g/l,在培养温度为30℃,pH值6.5,摇瓶转速160rpm培养28h;将活化培养好的米曲霉菌种接种到装有体积比为70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为3%,所述发酵培养基的配方为蔗糖40g/l、玉米浆35g/l、尿素8g/l、硫酸镁0.8g/l、氯化钾0.8g/l、磷酸氢二钾1.2g/l和橄榄油12g/l,在培养温度为30℃,pH值6.5,发酵罐搅拌转速160rpm,培养36h,发酵罐中米曲霉含量≥108个/ml,然后将发酵得到的米曲霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(4)光合细菌:将纯化培养的斜面培养基上的光合细菌菌种接种至装有体积比为30%的培养基的摇瓶中,在培养温度为30℃,pH值7.5,摇瓶每隔24小时搅拌一次,培养64h;将活化培养好的光合细菌菌种接种到装有体积比为70%培养基的发酵罐内,体积接种量为10%,在培养温度为30℃,pH值7.5,每隔24小时搅拌半小时,搅拌转速180rpm,培养100,至发酵罐中光合细菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的光合细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉,所述活化培养和发酵时的培养基的配方为磷酸氢二钾0.3g/l、氯化铵3g/l、氯化钠1.5g/l、乙酸钠6g/l、碳酸氢钠3g/l、硫酸镁0.3g/l和酵母膏0.2g/l。

(5)酿酒酵母:将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为30%的培养基的摇瓶中,在培养温度为30℃、pH值6.8,摇瓶转速180rpm,活化培养32h;将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为70%培养基的发酵罐内,接种量为体积比3%,所述活化培养和发酵时的培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基,在培养温度为30℃,pH值6.8,发酵罐搅拌转速180rpm,扩大培养68h,至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml,然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(6)干酪乳杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的干酪乳杆菌菌种接种至装有体积比为30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏5g/l、蛋白胨12g/l和氯化钠7g/l,在培养温度为40℃,pH值7.2,摇瓶转速220rpm,培养20h;将活化培养好的干酪乳杆菌菌种接种到装有体积比为70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为3%,所述发酵培养基的配方为玉米粉17g/l、豆饼粉17g/l、磷酸二氢钾0.15g/l、硫酸锰0.1g/l、碳酸钙20g/l和硫酸镁0.2g/l,在培养温度为40℃,pH值7.2,发酵罐搅拌转速220rpm培养20,发酵罐中干酪乳杆菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的干酪乳杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

(7)恶臭假单胞菌:将纯化培养的斜面培养基上的恶臭假单胞菌菌种接种至装有体积比为30%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏5g/l、蛋白胨12g/l和氯化钠7g/l,在培养温度为30℃,pH值7.5,摇瓶转速160rpm,培养18h;将活化培养好的恶臭假单胞菌菌种接种到装有体积比为70%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为3%,所述发酵培养基的配方为葡萄糖8g/l、玉米粉15g/l、鱼粉8g/l、豆饼粉22g/l、硫酸铵1.2g/l、碳酸钙9g/l、硫酸镁0.3g/l、硫酸锰0.3g/l和磷酸氢二钾0.5g/l,在培养温度为30℃,pH值7.5,发酵罐搅拌转速200rpm培养24h,发酵罐中恶臭假单胞菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的恶臭假单胞菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

将高密度培养得到的各种休眠体微生物干粉,按照嗜热链球菌20份、枯草芽孢杆菌15份、米曲霉20份、光合细菌15份、酿酒酵母10份、干酪乳杆菌10份和恶臭假单胞菌10份的菌种的重量比,混合得到微生物污泥除臭剂。

实施例 3

分别将嗜热链球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、光合细菌、酿酒酵母、干酪乳杆菌和恶臭假单胞菌的菌种进行高密度培养:

(1)嗜热链球菌:将纯化培养的斜面培养基上的嗜热链球菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基配方为酵母膏7.8g/l、蛋白胨7.8g/l、葡萄糖10g/l、磷酸氢二钾2g/l、西红柿汁150ml,pH值7.0,温度为48℃、摇瓶转速140rpm,活化培养36h;将活化培养好的嗜热链球菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,接种量为体积比2%,所述发酵培养基的配方为玉米芯5.5g/l、葡萄糖10g/l、酵母膏10g/l、磷酸二氢钾20g/l、硫酸镁0.3g/l、氯化钙0.4g/l,在培养温度为49℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速140rpm,扩大培养66h,至发酵罐中嗜热链球菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的嗜热链球菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(2)枯草芽孢杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏0.5g/l、蛋白胨15g/l、葡萄糖15g/l和氯化钠5g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,摇瓶转速170rpm培养20h;将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为豆饼粉20g/l、葡萄糖5g/l、鱼粉5g/l、玉米粉12g/l、磷酸氢二钾0.3g/l、硫酸铵1.0g/l、硫酸锰0.2g/l、碳酸钙7g/l和硫酸镁0.2g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速170rpm培养28h,发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml,

(3)米曲霉:将纯化培养的斜面培养基上的米曲霉菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为葡萄糖3g/l、马铃薯汁20g/l、硫酸镁1.5g/l、磷酸氢二钾3g/l、硫胺素0.03g/l,在培养温度为29℃,pH值6.0,摇瓶转速140rpm培养32h;将活化培养好的米曲霉菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为蔗糖30g/l、玉米浆30g/l、尿素6g/l、硫酸镁0.5g/l、氯化钾0.5g/l、磷酸氢二钾1.0g/l和橄榄油10g/l,在培养温度为29℃,pH值6.0,发酵罐搅拌转速140rpm,培养43h,发酵罐中米曲霉含量≥108个/ml,然后将发酵得到的米曲霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(4)光合细菌:将纯化培养的斜面培养基上的光合细菌菌种接种至装有体积比为22%的培养基的摇瓶中,在培养温度为29℃,pH值7.2,摇瓶每隔24小时搅拌一次,培养74h;将活化培养好的光合细菌菌种接种到装有体积比为60%培养基的发酵罐内,体积接种量为8%,在培养温度为29℃,pH值7.3,每隔24小时搅拌半小时,搅拌转速160rpm,培养130h,至发酵罐中光合细菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的光合细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉,所述活化培养和发酵时的培养基的配方为磷酸氢二钾0.2g/l、氯化铵2g/l、氯化钠1.0g/l、乙酸钠4g/l、碳酸氢钠2g/l、硫酸镁0.2g/l和酵母膏0.15g/l。

(5)酿酒酵母:将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为22%的培养基的摇瓶中,在培养温度为29℃、pH值6.5,摇瓶转速160rpm,活化培养40h;将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为60%培养基的发酵罐内,接种量为体积比2%,所述活化培养和发酵时的培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基,在培养温度为29℃,pH值6.5,发酵罐搅拌转速160rpm,扩大培养76h,至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml,然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(6)干酪乳杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的干酪乳杆菌菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏3g/l、蛋白胨10g/l和氯化钠5g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,摇瓶转速200rpm,培养26h;将活化培养好的干酪乳杆菌菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为玉米粉15g/l、豆饼粉15g/l、磷酸二氢钾0.1g/l、硫酸锰0.08g/l、碳酸钙17g/l和硫酸镁0.15g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速200rpm培养26h,发酵罐中干酪乳杆菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的干酪乳杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

(7)恶臭假单胞菌:将纯化培养的斜面培养基上的恶臭假单胞菌菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏3g/l、蛋白胨10g/l和氯化钠5g/l,在培养温度为28℃,pH值7.3,摇瓶转速140rpm,培养22h;将活化培养好的恶臭假单胞菌菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为葡萄糖5g/l、玉米粉13g/l、鱼粉5g/l、豆饼粉20g/l、硫酸铵1.0g/l、碳酸钙7g/l、硫酸镁0.2g/l、硫酸锰0.2g/l和磷酸氢二钾0.3g/l,在培养温度为28℃,pH值7.3,发酵罐搅拌转速190rpm培养28h,发酵罐中恶臭假单胞菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的恶臭假单胞菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

将高密度培养得到的各种休眠体微生物干粉,按照嗜热链球菌15份、枯草芽孢杆菌12份、米曲霉25份、光合细菌13份、酿酒酵母15份、干酪乳杆菌10份和恶臭假单胞菌10份的菌种的重量比,混合得到微生物污泥除臭剂。

实施例 3

分别将嗜热链球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、光合细菌、酿酒酵母、干酪乳杆菌和恶臭假单胞菌的菌种进行高密度培养:

(1)嗜热链球菌:将纯化培养的斜面培养基上的嗜热链球菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基配方为酵母膏7.8g/l、蛋白胨7.8g/l、葡萄糖10g/l、磷酸氢二钾2g/l、西红柿汁150ml,pH值7.0,温度为48℃、摇瓶转速140rpm,活化培养36h;将活化培养好的嗜热链球菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,接种量为体积比2%,所述发酵培养基的配方为玉米芯5.5g/l、葡萄糖10g/l、酵母膏10g/l、磷酸二氢钾20g/l、硫酸镁0.3g/l、氯化钙0.4g/l,在培养温度为49℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速140rpm,扩大培养66h,至发酵罐中嗜热链球菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的嗜热链球菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(2)枯草芽孢杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏0.5g/l、蛋白胨15g/l、葡萄糖15g/l和氯化钠5g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,摇瓶转速170rpm培养20h;将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为豆饼粉20g/l、葡萄糖5g/l、鱼粉5g/l、玉米粉12g/l、磷酸氢二钾0.3g/l、硫酸铵1.0g/l、硫酸锰0.2g/l、碳酸钙7g/l和硫酸镁0.2g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速170rpm培养28h,发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml,

(3)米曲霉:将纯化培养的斜面培养基上的米曲霉菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为葡萄糖3g/l、马铃薯汁20g/l、硫酸镁1.5g/l、磷酸氢二钾3g/l、硫胺素0.03g/l,在培养温度为29℃,pH值6.0,摇瓶转速140rpm培养32h;将活化培养好的米曲霉菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为蔗糖30g/l、玉米浆30g/l、尿素6g/l、硫酸镁0.5g/l、氯化钾0.5g/l、磷酸氢二钾1.0g/l和橄榄油10g/l,在培养温度为29℃,pH值6.0,发酵罐搅拌转速140rpm,培养43h,发酵罐中米曲霉含量≥108个/ml,然后将发酵得到的米曲霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(4)光合细菌:将纯化培养的斜面培养基上的光合细菌菌种接种至装有体积比为22%的培养基的摇瓶中,在培养温度为29℃,pH值7.2,摇瓶每隔24小时搅拌一次,培养74h;将活化培养好的光合细菌菌种接种到装有体积比为60%培养基的发酵罐内,体积接种量为8%,在培养温度为29℃,pH值7.3,每隔24小时搅拌半小时,搅拌转速160rpm,培养130h,至发酵罐中光合细菌含量≥108个/ml,然后将发酵得到的光合细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉,所述活化培养和发酵时的培养基的配方为磷酸氢二钾0.2g/l、氯化铵2g/l、氯化钠1.0g/l、乙酸钠4g/l、碳酸氢钠2g/l、硫酸镁0.2g/l和酵母膏0.15g/l。

(5)酿酒酵母:将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为22%的培养基的摇瓶中,在培养温度为29℃、pH值6.5,摇瓶转速160rpm,活化培养40h;将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为60%培养基的发酵罐内,接种量为体积比2%,所述活化培养和发酵时的培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基,在培养温度为29℃,pH值6.5,发酵罐搅拌转速160rpm,扩大培养76h,至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml,然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

(6)干酪乳杆菌:将纯化培养的斜面培养基上的干酪乳杆菌菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏3g/l、蛋白胨10g/l和氯化钠5g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,摇瓶转速200rpm,培养26h;将活化培养好的干酪乳杆菌菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为玉米粉15g/l、豆饼粉15g/l、磷酸二氢钾0.1g/l、硫酸锰0.08g/l、碳酸钙17g/l和硫酸镁0.15g/l,在培养温度为38℃,pH值7.0,发酵罐搅拌转速200rpm培养26h,发酵罐中干酪乳杆菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的干酪乳杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

(7)恶臭假单胞菌:将纯化培养的斜面培养基上的恶臭假单胞菌菌种接种至装有体积比为22%的活化培养基的摇瓶中,所述活化培养基的配方为牛肉膏3g/l、蛋白胨10g/l和氯化钠5g/l,在培养温度为28℃,pH值7.3,摇瓶转速140rpm,培养22h;将活化培养好的恶臭假单胞菌菌种接种到装有体积比为60%发酵培养基的发酵罐内,体积接种量为2%,所述发酵培养基的配方为葡萄糖5g/l、玉米粉13g/l、鱼粉5g/l、豆饼粉20g/l、硫酸铵1.0g/l、碳酸钙7g/l、硫酸镁0.2g/l、硫酸锰0.2g/l和磷酸氢二钾0.3g/l,在培养温度为28℃,pH值7.3,发酵罐搅拌转速190rpm培养28h,发酵罐中恶臭假单胞菌含量≥109个/ml,然后将发酵得到的恶臭假单胞菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

将高密度培养得到的各种休眠体微生物干粉,按照嗜热链球菌15份、枯草芽孢杆菌12份、米曲霉25份、光合细菌13份、酿酒酵母15份、干酪乳杆菌10份和恶臭假单胞菌10份的菌种的重量比,混合得到微生物污泥除臭剂。

需要说明的是上述实施例,并非用来限定本发明的保护范围,在上述技术方案的基础上所作出的等同变换或替代均落入本发明权利要求所保护的范围。

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