稀碱—酶解—树脂吸附提取法提取猪鼻骨中的硫酸软骨素的制作方法

文档序号:12399649阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种新的提取猪鼻骨中的硫酸软骨素的方法,其特征在于:采用碱解、酶解、树脂吸附三者相结合的方法将猪鼻骨中的硫酸软骨素提取出来。

2.根据权利要求1所述的的方法,其特征在于:提取猪鼻骨中的硫酸软骨素采用如下步骤:(1)碱解:将猪鼻骨粉碎,放入1mol/L的氢氧化钠溶液中浸泡,42~53℃下保温碱解3小时;(2)酶解:加4mol/L盐酸调节pH到6.5~7.5,按猪鼻骨与胰蛋白酶1000∶(1~8)的质量比加入胰蛋白酶,于40~50℃酶解12小时后,再按猪鼻骨与胃蛋白酶1000∶(1~8)的质量比加入胃蛋白酶,40~50℃酶解12小时;(3)树脂吸附:将溶液通过离子交换树脂柱吸附完毕,用0.5 mol/L的NaCl 液洗涤,再用1.8mol/L 的氯化钠液洗脱,流速2L/h;(4)沉淀:调节洗脱液pH至6.8~7.2,再加入2.5倍体积的95%以上乙醇,充分搅拌后,静置12小时以上,虹吸上层乙醇,即得硫酸软骨素;(5)纯化:将硫酸软骨素溶于浓度为2%~5%(m/v)的氯化钠溶液中,加入少量乙醇,于低温下静置后离心,将其上清液中再加入少量乙醇,重复以上步骤,可依次得到较高纯度的硫酸软骨素;(6)脱水:最后,用95%以上的丙酮对产品进行脱水,再真空干燥,即可。

3.根据权利要求1所述的的方法;其特征在于:在乙醇沉淀之前,先用胰蛋白酶和胃蛋白酶酶解,再用树脂吸附。

4.根据权利要求2所述的的方法;其特征在于:碱解时的保温温度为49℃。

5.根据权利要求2所述的的方法;其特征在于:酶解时加4mol/L盐酸调节pH到6.9。

6.根据权利要求2所述的的方法;其特征在于:在酶解过程中,先按猪鼻骨与胰蛋白酶1000∶3的质量比加入胰蛋白酶,再按猪鼻骨与胃蛋白酶1000∶3的质量比加入胃蛋白酶。

7.根据权利要求2所述的的方法;其特征在于:在纯化过程中,用于溶解硫酸软骨素的氯化钠溶液浓度为2%(m/v)。

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