一种活细胞清洗装置的制作方法

本实用新型涉及细胞清洗装置技术领域，尤其涉及一种活细胞清洗装置。

背景技术：

细胞生物学是现代生物学的重要组成部分，在基础研究与应用研究中均发挥着重要的作用。采用细胞生物学的方法，研究者可以高效地研究目标分子、细胞的基本功能，以及生物学机理，也可以在细胞中进行药物的有效性与毒性的测试。因此，细胞是生命科学研究以及产品开发过程中的重要材料。

细胞的体外培养是细胞生物学研究的基础，细胞培养的本质就是细胞的大规模克隆。通过细胞培养能够得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。由于体外培养的细胞，没有免疫系统的保护，在与外界发生物质交换的时候，易受各种微生物的污染，如细菌、霉菌、真菌、支原体、黑胶虫、原虫等。当出现污染时，细胞与微生物之间就会存在竞争，这些微生物的代谢远远快于培养的细胞，细胞会处于弱势，其生长和代谢都会受到很大的影响，最终会导致细胞的死亡。所以，细胞一旦出现污染而得不到控制，细胞实验就会前功尽弃，造成巨大的时间和资金损失。

为了防止污染，细胞培养用的所有试剂和材料，都需要经过严格的灭菌消毒。并且，在培养细胞的过程中，往往会在细胞培养基中添加一定的抗生素，如最常见的青霉素和链霉素，以防止可能出现的污染。但是，如果实验环境达不到要求，飘散在空气中的微生物很有可能会污染细胞。培养基中的预先添加的抗生素，也只能对很少种类的微生物有抑制效果，如革兰氏阳性细菌和链霉菌，对大多数的无明显作用。因此，传统的方法对细胞培养过程中出现的生物污染并无有效的解决办法。

技术实现要素：

本实用新型提供一种活细胞清洗装置，能够对培养的细胞进行持续性的长时间清洗，从而达到去除细胞中的污染物的目的，并且不会对细胞的活性造成影响。

本实用新型通过以下技术方案实现：

一种活细胞清洗装置，包括用于储存细胞清洗液的储存瓶，前后开口的细胞培养瓶，收集瓶，和真空泵，上述储存瓶出口处设有用于调节流速的调节阀、瓶口处设有通气管，上述储存瓶和上述细胞培养瓶之间通过第一导管连接，上述细胞培养瓶和上述收集瓶之间通过第二导管连接，上述收集瓶和上述真空泵之间通过第三导管连接。

进一步地，还包括用于给细胞加热的温控装置。

进一步地，上述温控装置是温控热台。

进一步地，上述温控热台调节台面温度范围为30℃～42℃。

进一步地，在上述通气管上设有过滤器，上述过滤器上设有多个过滤孔。

进一步地，上述过滤孔的孔径为0.22μm。

进一步地，在上述第三导管上设有过滤器，上述过滤器上设有多个过滤孔。

进一步地，上述过滤孔的孔径为0.22μm。

进一步地，上述真空泵为微型台式真空泵。

进一步地，上述微型台式真空泵能够产生的最大负压大于0.05兆帕。

本实用新型通过采用清洗液对细胞进行长时间的持续清洗，去除细胞培养中常见的污染，使得珍贵的细胞资源得以挽救。此外，由于该装置采用自动化过程，无需人为操作，可大大节省人力。而且，在清洗的过程中，细胞置于热台之上，能够提供细胞生长所需的热量，所以对细胞的活性无影响。并且，清洗液置于过滤器之间，清洗液通过过滤或高温灭菌可重复利用，可以大大节省试剂消耗。

附图说明

图1为本实用新型一种实施方案的活细胞清洗装置的结构示意图。

附图标记说明：

1：储存瓶；

2：调节阀；

3：通气管；

4：第一导管；

5：细胞培养瓶；

6：温控热台；

7：第二导管；

8：收集瓶；

9：第三导管；

10：真空泵。

具体实施方式

为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。

参见图1，本实用新型的实施例提供了一种活细胞清洗装置，用于去除培养细胞中常见的生物污染，其包括：用于储存细胞清洗液的储存瓶1以及储存瓶1出口处用于调节流速的调节阀2和瓶口处的通气管3，前后开口的细胞培养瓶5，储存瓶1和细胞培养瓶5之间通过第一导管4连接；还包括用于给细胞加热的温控热台6(温控装置的一种具体形式)，收集瓶8，细胞培养瓶5和收集瓶8之间通过第二导管7连接，以及真空泵10，收集瓶8和真空泵10之间通过第三导管9连接。

开始细胞清洗之前，所有用到的器具，包括储存瓶1、细胞培养瓶5、收集瓶8、调节阀2、通气管3、第一导管4和第三导管9都需经灭菌处理，保证实验器具洁净无菌。细胞以20％～40％的汇合度接种于细胞培养瓶5，待细胞贴壁后，将细胞培养瓶5从培养箱中取出，置于超净工作台的温控热台6上，将细胞培养瓶5的两个开口分别通过第一导管4和第二导管7连接于储存瓶1和收集瓶8。储存瓶1中注入一定量的清洗液，清洗液可为PBS或细胞培养基及其它，调节阀2处于关闭状态。收集瓶8通过第三导管9与真空泵10相连，并将真空泵10与电源相连接。

装置连接完成之后，打开温控热台6，调节温度至36.5℃～37.5℃。缓缓打开调节阀2，并打开真空泵10的电源。调节调节阀2，使清洗液的流速控制在1～5mL/min。根据细胞中污染的程度，对细胞进行2h以上的持续清洗。清洗结束后，用封口膜将细胞培养瓶5的两个开口封严，并将细胞置于培养箱中继续培养。后续对细胞进行观察，若再次发现污染，则对细胞进行第二轮清洗，步骤如上所述。

为节省清洗过程中清洗液(如细胞培养基)的使用，取出收集瓶8，将其中的收集液进行过滤，即可将过滤液作为清洗液重新使用。

为避免空气中的污染物进一步地污染清洗液或收集液，在储存瓶1瓶口处的通气管3设有过滤器，同时真空泵10的第三导管9上设有过滤器。过滤器上设有多个过滤孔，过滤孔的孔径为0.22μm。0.22μm的孔径，即可允许空气进入储存瓶1，途经细胞培养瓶5和收集瓶8，最终经真空泵10抽出，也可以避免空气中的污染物进入装置中。当然，本实用新型还可以采用其他结构的过滤器实现上述功能，其不以本实施例为限。

作为本实用新型的一种实施方式，采用自动化设计，能够持续地长时间对细胞进行清洗。温控热台6能够精确地调节温度，提供细胞生长代谢所需要的热量。真空泵10可以采用微型台式真空泵，能够产生的最大负压大于0.05兆帕，功率连续可调，保证清洗液及时被抽出。因此，自动化的设计大大地节省了人力。

本实施例所提供的活细胞清洗装置使用时包括以下步骤：将细胞接种于细胞培养瓶5，待细胞贴壁后取出培养瓶置于温控热台6上，并打开温控热台6的开关，调节温度至36.5℃～37.5℃；在储存瓶1中加入适量清洗液，按照图1连接好各个部件；打开调节阀2，使清洗液缓缓流入细胞培养瓶5，流速控制在1～5mL/min；打开真空泵10，调节功率，保持清洗液稳定没过细胞1～3mm；细胞持续清洗2h以上；清洗结束后，关掉真空泵10和调节阀2，拆下各个部件，用封口膜封闭细胞培养瓶5的两个开口。以上步骤可完成对被细菌、霉菌、黑胶虫等微生物污染的贴壁细胞的清洗。

以上内容是结合具体的实施方式对本实用新型所作的进一步详细说明，不能认定本实用新型的具体实施只局限于这些说明。对于本实用新型所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本实用新型的保护范围。