一种检测ITPA94C>T基因多态性的引物及其PCR方法与流程

文档序号:12697624阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用PCR方法检测ITPA 94C>T基因多态性位点的引物对ITPAwtF/ITPAwtR和ITPAmtF/ITPAmtR,其特征在于,其序列分别如SEQ ID NO.1~4所示。

2. 权利要求1所述引物对ITPAwtF/ITPAwtR和ITPAmtF/ITPAmtR在检测生物样品ITPA 94C>T基因多态性位点方面的应用。

3. 一种通过PCR扩增生物样品检测ITPA 94C>T基因多态性位点的方法,其特征在于,以待测生物样品的DNA为模板,以权利要求1所述引物对ITPAwtF/ITPAwtR和ITPAmtF/ITPAmtR进行PCR扩增,根据扩增结果确定ITPA 94C>T基因多态性位点的基因型。

4. 根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系为25μl,包括:DNA模板3μl,10×Taq buffer 2.5μl,0.25mmol/L dNTPs 2μl,10μmol/L上下游引物各1μl,5U/μl ExTaq® 0.15μl,余量ddH2O。

5. 根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应条件为:95℃ 5min;94℃ 30s,66℃/80℃ 30s,75℃ 15s,35个循环;75℃ 5min;4℃保存。

6. 权利要求1所述引物对ITPAwtF/ITPAwtR和ITPAmtF/ITPAmtR在制备通过PCR扩增生物样品检测ITPA 94C>T基因多态性位点的试剂中的应用。

7. 一种ITPA 94C>T基因多态性位点检测试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述引物对ITPAwtF/ITPAwtR和ITPAmtF/ITPAmtR。

8.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,还包含有dNTPs、ExTaq聚合酶。

9.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,还包含有0.25mmol/L的dNTPs、5U/μl的ExTaq聚合酶。

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