本发明涉及药物化学领域，具体地，涉及一种取代吡咯色原酮类化合物及其应用，具体为在制备治疗5型磷酸二酯酶相关疾病的药物中的应用。
背景技术：
环核苷酸磷酸二酯酶(cyclicnucleotidephosphodiesterases,pdes)是一类重要的超级酶家族，通过对camp和cgmp的水解，有效控制细胞内的camp和cgmp浓度，从而调节体内第二信使所传导的生化作用。pdes在哺乳动物组织中分布广泛，其多样性致使不同的pde酶在细胞和亚细胞水平有着特定的分布，可选择性调节多种细胞功能，是良好的药物设计与治疗靶点。
5型磷酸二酯酶(pde5)作为对cgmp特异的pde家族，最先在老鼠的血小板中被分离并确认，之后在老鼠的肺中也被发现并纯化得到。人类pde5a主要分布在主动脉血管平滑肌细胞、心脏、胎盘、骨骼肌细胞、胰腺、血小板，大脑、肝脏、肺部也有极少量分布。男性阴茎海绵体中的pde5含量远高过其他pde家族。
pdes抑制剂中开发最成功的是pde5a抑制剂。西地那非(sildenafil,viagra)、伐地那非(vardenafil,levitra)、他达那非(tadalafil,cialis)为治疗勃起功能障碍药物，西地那非之后更被证明具有临床治疗肺动脉高血压的功效。此外，人们还发现pde5抑制剂可用于提高记忆能力、抗肿瘤、治疗心脏疾病。尽管如此，现有的pde5a抑制剂具有不可忽视的副作用:如头痛、视力模糊、脸红、鼻粘膜充血、消化功能紊乱、肌肉疼痛等。另一方面，现有药物也可能对严重肝肾功能不全者造成较严重的不良反应。开发新一代疗效强、副作用弱的pde5选择性抑制剂具有重要意义。目前，取代吡咯色原酮类化合物多用于制备降血脂药物，对于作为pde5抑制剂尚无研究。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中取代吡咯色原酮类化合物的应用不足，提供一种能用于治疗5型磷酸二酯酶相关疾病的取代吡咯色原酮类化合物。
本发明的另一个目的是提供一种取代吡咯色原酮类化合物在制备治疗5型磷酸二酯酶相关疾病的药物中的应用。
一种取代吡咯色原酮类化合物，具有式1所示的结构，
其中，r1、r2、r3和r4选自氢、卤素、c1-3烷基、c1-3取代烷基、烷氧基、酰基、羧酸基、羧酸根、含氮基团、含磷基团或含硫基团；
r5选自卤素、c1-3烷基、c1-3取代烷基、烷氧基、酰基、羧酸基、羧酸根、含氮基团、含磷基团、含硫基团、含取代苄基基团、芳香基团、氨基酸侧链结构或含有保护基的氨基酸侧链结构；
r6选自氢或c1-3的烷基、酰基、含羧酸基团、含羧酸根基团、含氮基团、含磷基团或含硫基团；
x选自氢、卤素、取代或非取代环状基团、酰基、羧酸基、羧酸根、含羧酸根基团。
作为一种优选方案，式1所示结构的取代吡咯色原酮类化合物中，
r1、r2、r3和r4选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、乙酰基、异丙基、氰基、硝基、n,n-二甲基、氯甲基、苄氧基、羧酸基、羧酸根、取代氨基、非取代氨基，取代胍基、非取代胍基、取代磷酸基、非取代磷酸基、取代磷酰基、非取代磷酰基、取代磺酸基、非取代磺酸基、取代磺酰基或非取代磺酸基；
r5选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、乙酰基、取代胍基、非取代胍基、异丙基、氰基、硝基、n,n-二甲基、氯甲基、苄氧基、羧酸基、羧酸根、取代氨基、非取代氨基、取代磷酸基、非取代磷酸基、取代磷酰基、非取代磷酰基、取代磺酸基、非取代磺酸基、取代磺酰基、非取代磺酰基、取代芳香甲基、非取代芳香甲基、取代芳香基团、非取代芳香基团、氨基酸侧链结构或含有保护基的氨基酸侧链结构，所述的保护基为叔丁基或叔丁氧羰基；
r6选自氢或或含羧酸根基团；
x选自氢、氟、氯、溴、碘、取代或非取代环状基团、酰基、羧酸基、羧酸根、含羧酸根基团。
作为一种更优选方案，式1所示结构的取代吡咯色原酮类化合物中，
所述的x选自氢、取代稠环芳基、非取代稠环芳基、取代苯基、非取代苯基、取代含氧杂环基、非取代含氧杂环基、取代含硫杂环基、非取代含硫杂环基、取代含氮杂环基或非取代含氮杂环基、羧基、酯基、酰胺、取代酰胺、氰基。
作为一种最优选方案，所述的取代吡咯色原酮类化合物具有式2、3、4、5、6或7所示的化合物，
其中，n为0、1、2或3；m为0、1、2或3；
r7为氢或r7是以单取代或多取代形式选自下列任一一种或多种基团：氟、氯、溴、碘、甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、乙酰基、异丙基、氰基、硝基、n,n-二甲基、氯甲基、苄氧基、羧酸基、羧酸根、取代氨基、非取代氨基、取代胍基、非取代胍基、取代磷酸基、非取代磷酸基、取代磷酰基、非取代磷酰基、取代磺酸基、非取代磺酸基或磺酰基；
r8为羟基、甲氧基、乙氧基、烷氧基、氨基、单取代氨基、双取代氨基。
作为一种优选方案，式2、3、4、5、6或7所述的取代吡咯色原酮类化合物中的r1、r2、r3、r4为氢；r6为氢或含羧酸根基团；n为0、1或2，m为2或3。
作为一种优选方案，上述的取代是指，被取代结构相应位置的氢原子，被一种或多种其它基团置换，此处所述其它基团指氟、氯、溴、碘、甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、乙酰基、取代胍基、非取代胍基、异丙基、氰基、硝基、n,n-二甲基、氯甲基、苄氧基、羧酸基、羧酸根、取代氨基、非取代氨基、取代磷酸基、非取代磷酸基、取代磷酰基、非取代磷酰基、取代磺酸基、非取代磺酸基、取代磺酰基、非取代磺酰基、取代芳香甲基、非取代芳香甲基，取代芳香基团、非取代芳香基团以及含氨基酸侧链结构的化学结构。
作为一种优选方案，式2、3、4、5、6或7所示所述的取代吡咯色原酮类化合物中的r1、
r2、r3、r4为氢；r6为氢或含羧酸根基团；n为0、1或2，m为2或3；
r5选自如下基团：
作为一种优选方案，式2、3、4、5、6或7所示的取代吡咯色原酮类化合物中的r1、r2、r3、r4为氢；
r6为氢或碳酸叔丁酯；
n为0、1或2，m为2或3；
r5选自如下基团：
x选自：
作为一种优选方案，所述的取代吡咯色原酮类化合物选自下面任意一种化合物：
p1：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(吡啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p2：3-(4-羟基苄基)-1-(吡啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p3：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(嘧啶-4-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p4：3-(4-羟基苄基)-1-(嘧啶-4-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p5：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p6：3-(4-羟基苄基)-1-(吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p7：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(吡啶-4-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p8：3-(4-羟基苄基)-1-(吡啶-4-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p9：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(4-氯吡啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p10：3-(4-羟基苄基)-1-(4-氯吡啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p11：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(5-氯吡啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p12：3-(4-羟基苄基)-1-(5-氯吡啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p13：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(2-氯吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p14：3-(4-羟基苄基)-1-(2-氯吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p15：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(3-氯吡啶-4-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p16：3-(4-羟基苄基)-1-(3-氯吡啶-4-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p17：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(2-氟苯基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p18：3-(4-羟基苄基)-1-(2-氟苯基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p19：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(4-甲基苯基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p20：3-(4-羟基苄基)-1-(4-甲基苯基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p21：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(嘧啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p22：3-(4-羟基苄基)-1-(嘧啶-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p23：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(噻唑-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p24：3-(4-羟基苄基)-1-(噻唑-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p25：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(2-甲氧基吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p26：3-(4-羟基苄基)-1-(2-甲氧基吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p27：3-(4-羟基苄基)-1-(2-羟基吡啶-3-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p28：3-(4-(叔丁氧基)苄基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p29：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-溴色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p30：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-9-氧代色原酮[2,3-c]并吡咯-2(9h)-甲酸叔丁酯；
p31：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-碘色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p32：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸乙酯；
p33：3-(4-羟基苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸乙酯；
p34：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸甲酯；
p35：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸；
p36：3-(4-羟基苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸甲酯；
p37：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(吗啉-4-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p38：3-(4-羟基苄基)-1-(吗啉-4-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p39：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(4-甲基哌嗪-1-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p40：3-(4-羟基苄基)-1-(4-甲基哌嗪-1-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p41：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(4-异丙基哌嗪-1-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p42：3-(4-羟基苄基)-1-(4-异丙基哌嗪-1-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p43：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(4-环丙基哌嗪-1-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p44：3-(4-羟基苄基)-1-(4-环丙基哌嗪-1-碳酰基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p45：3-(3,4-亚甲二氧基苄基)-1-(噻唑-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p46：3-(4-(叔丁氧基)苄基)-1-(5-甲基-1,3,4-恶二唑-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p47：3-(4-羟基苄基)-1-(5-甲基-1,3,4-恶二唑-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p48：3-(3,4-亚甲二氧基苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸乙酯；
p49：3-(3,4-亚甲二氧基苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酸；
p50：3-(3,4-亚甲二氧基苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-甲酰胺；
p51：3-(3,4-亚甲二氧基苄基)-9-氧代-2,9-二氢色原酮[2,3-c]并吡咯-1-腈；
p52：3-(3,4-亚甲二氧基苄基)-1-(1h-四唑-5-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮；
p53：3-(4-三氟甲基苄基)-1-(噻唑-2-基)色原酮[2,3-c]并吡咯-9(2h)-酮。
本发明所述的化合物通过如下方法制备得到：
s1.以β-二羰基类化合物a与fmoc保护的具有α-氨基结构的有机羧酸b为原料，此处除α-氨基与羧基外，当b具有其它活性基团如氨基、羟基、酚羟基、羧基等时，应事先采取适当的保护基进行保护。反应条件：a与b溶于有机溶剂中，加入缩合剂常温反应2-12h，加入碱催化升温50-100℃加热反应3-12h生成色原酮并吡咯环化合物c。如下列反应式所示：
s2.当所选用具有α-氨基结构的有机羧酸b具有事先用于保护活性基团的保护基时，可采用适当方法去除。以含有叔丁基、叔丁氧羰基作为合理保护基时为例，可以含三氟乙酸(tfa)的试剂将其去除。如下列反应式所示：
s3.当目标分子吡咯环上氮有取代基时，采用合适的方法进行取代。以碳酸叔丁酯(boc)取代为例，可采用试剂二碳酸二叔丁酯(boc2o)完成。反应条件：将c溶于有机溶剂中，往体系中加入碱及二碳酸二叔丁酯，室温反应4-12h。如下列反应式所示：
s4.当目标分子x位置为溴时，需采取新的合成方法合成，以c为原料。反应条件：将c溶于有机溶剂中，氩气保护下，往体系中加入n-溴代丁二酰亚胺(nbs)，室温反应15-30分钟。如下列反应式所示：
s5.当目标分子x位置为碘时，需采取新的合成方法合成，以c为原料。反应条件：将碱的水溶液加入至c的有机溶剂中，然后往体系中缓慢加入碘、碘化钾的水溶液，滴加完毕，室温反应1-3小时。如下列反应式所示：
s6.当目标分子x位置为羧基时，需采取新的合成方法合成，以c为原料。将化合物c溶于溶剂中，然后加入碱，升温至50-100℃反应5-12h。如下列反应式所示：
s7.当目标分子x位置为酰胺时，需采取新的合成方法合成，以h为原料。将化合物h溶于溶剂中，然后加入碱及缩合剂，室温反应5-12h。如下列反应式所示：
s8.当目标分子x位置为酰胺、氰基、四氮唑等基团时，需采取新的合成方法合成，以c为原料。反应条件：将化合物c加入一封管中，然后加入氨甲醇溶液，升温至40-90℃反应3-12h，获得化合物j。将化合物j溶于有机溶剂中，然后加入三氯氧膦，升温至50-90℃反应5-16h，获得化合物k。将化合物k溶于有机溶剂中，然后加入三乙胺盐酸盐及叠氮化钠，升温至80-120℃反应8-24h，获得化合物l。如下列反应式所示：
上述步骤中，所述取代基x，r1,r2,r3,r4,r5如上所述；r9,r10为h，六元环，五元环，四元环，胺类化合物侧链。
作为一种优选方案，所述缩合剂为n,n-二异丙基碳二亚胺，n,n-二环己基二亚胺，氰基膦酸二乙酯，n-羟基琥珀酰亚胺。
作为一种优选方案，步骤s1与步骤s3中所述碱为有机碱；步骤s6中所述的碱为无机碱。
作为一种最优选方案，步骤s1、步骤s3与步骤s7中所述有机碱为三乙胺，n,n-二甲基吡啶，吡啶，或二异丙基乙二胺；步骤s6中所述的无机碱为氢氧化钾，氢氧化钠，氢氧化锂，碳酸钾，碳酸钠。
作为一种优选方案，步骤s1中所述有机溶剂为吡啶，dmf，或1,4-二氧六环；步骤s2与步骤s3所述有机溶剂为二氯甲烷，乙酸乙酯，所用脱保护溶剂可为含tfa的试剂；步骤s4中所述有机溶剂为氯仿，二氯甲烷，1,2-二氯乙烷，四氢呋喃；步骤s5中所述有机溶剂为1,2-二氯乙烷，二氯甲烷，氯仿；步骤s6中所述有机溶剂为甲醇，乙醇，四氢呋喃，1,4-二氧六环；步骤s7中所述有机溶剂为二氯甲烷，氯仿，四氢呋喃，n,n-二甲基甲酰胺；步骤s8中所述有机溶剂为k(二氯甲烷，氯仿，甲苯)，l(甲苯，二甲苯，n,n-二甲基甲酰胺，n,n-二甲基乙酰胺)。
作为一种优选方案，步骤s7中所述缩合剂为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(hatu)、苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(hbtu)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edci)、2-(1h-苯并三偶氮l-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(tbtu)、n,n’-二环己基碳二亚胺(dcc)、n,n'-羰基二咪唑(cdi)。
作为一种优选方案，本发明所述的5型磷酸二酯酶抑制剂在制备治疗5型磷酸二酯酶相关疾病的药物中的应用。
作为一种优选方案，本发明所述的5型磷酸二酯酶抑制剂在制备治疗男性性功能障碍或肺动脉高压疾病的药物中的应用。
作为一种优选方案，所述的药物按照常规工艺加入常规辅料制成临床接受的剂型。
作为一种优选方案，所述的剂型为口服型片剂、丸剂、胶囊以及注射用注射液、粉针以及经皮或皮下吸收的各种剂型。
有益效果：本发明提供了一种取代吡咯色原酮类化合物新的用途，即作为5型磷酸二酯酶抑制剂的应用。所述的多取代色原酮并吡咯环化合物可用于抑制pde5酶。进而用于治疗男性性功能障碍，肺动脉高压等与pde5相关的疾病。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
以下为本实施例所涉及的原料化合物：
实施例1
230mg(0.95mmol,1.0eq)1-(2-羟基苯基)-3-(吡啶-2-基)丙烷-1,3-二酮(a1)与785mg(1.71mmol,1.8eq)溶于15ml吡啶中，然后加入391mg(1.9mmol,2.0eq)n,n-二环己基二亚胺及46mg(0.38mmol,0.4eq)n,n-二甲基吡啶，室温搅拌反应约3h至tlc检测原料a1消失，升温至50℃反应6h至tlc检测生成一个主要的黄色的点。冷却，用旋转蒸发仪浓缩除去溶剂吡啶，然后加入30ml乙酸乙酯稀释，抽滤除去反应中生成的n,n-二环己基脲，滤液浓缩后经柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)得到121mg产物p1，黄色固体，产率30％。其结构和核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.42(d,j＝7.8hz,1h),8.48(d,j＝4.1hz,1h),8.41(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.81(td,j＝7.8,1.8hz,1h),7.69–7.63(m,1h),7.42(d,j＝8.4hz,1h),7.34(d,j＝8.0hz,1h),7.20(d,j＝8.4hz,2h),7.19–7.15(m,1h),6.98(d,j＝8.5hz,2h),4.24(s,2h),1.35(s,9h).
实施例2
121mg化合物p1溶解于10.0ml二氯甲烷，冰浴下滴入tfa3.0ml，常温反应2-4h。然后用二氯甲烷稀释，饱和nahco3溶液洗涤，二氯甲烷层干燥，浓缩，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝1:2)得到66mg产物p2，黄色固体，产率63％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,acetone–d6)δ11.66(br,1h),9.41(d,j＝8.1hz,1h),8.60–8.44(m,1h),8.32(dd,j＝7.9,1.5hz,1h),8.14(br,1h),7.86(td,j＝8.0,1.8hz,1h),7.72(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.49(d,j＝8.4hz,1h),7.41–7.30(m,1h),7.25–7.20(m,3h),6.77(d,j＝8.5hz,2h),4.26(s,2h)；13cnmr(101mhz,acetone–d6)δ174.73,156.58,155.94,148.81,148.71,142.88,137.06,133.87,130.12,129.41×3,126.87,122.75,122.65,122.30,122.14,117.47,115.58,115.28,109.10,99.99,28.62.
实施例3
0.48mmol1-(2-羟基苯基)-3-(嘧啶-4-基)丙烷-1,3-二酮(a2)，0.86mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，0.96mmoln,n-二环己基二亚胺，0.19mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到110mg产物p3，黄色固体，产率54％，其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.36(br,1h),9.35(dd,j＝5.4,1.3hz,1h),9.04(d,j＝1.2hz,1h),8.77(d,j＝5.4hz,1h),8.40(dd,j＝8.0,1.7hz,1h),7.70(t,j＝6.9hz,1h),7.46(d,j＝8.5hz,1h),7.37(t,j＝7.5hz,1h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),7.01(d,j＝8.4hz,2h),4.27(s,2h),1.37(s,9h).
实施例4
110mg化合物p3及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到80mg产物p4，黄色固体，产率84％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.26(br,1h),9.20(s,1h),9.18(d,j＝11.7hz,1h),8.83(d,j＝5.3hz,1h),8.23(d,j＝7.5hz,1h),7.77(t,j＝7.3hz,1h),7.55(d,j＝8.2hz,1h),7.39(t,j＝7.4hz,1h),7.16(d,j＝8.1hz,2h),6.69(d,j＝8.2hz,2h),4.14(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.33,157.98×2,155.77×2,154.44,143.04,134.49,129.20×2,129.12,126.52,123.34,121.90,119.25,117.70,117.61,115.20×2,110.93,99.49,28.39.
实施例5
2.0mmol1-(2-羟基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙烷-1,3-二酮(a3)与3.6mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，4.0mmoln,n-二环己基二亚胺，0.8mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到475mg产物p5，黄色固体，产率56％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.42(br,1h),8.90(d,j＝1.7hz,1h),8.65–8.55(m,1h),8.34(dd,j＝8.0,1.7hz,1h),8.28(dd,j＝4.8,1.6hz,1h),7.65(ddd,j＝8.6,7.1,1.7hz,1h),7.41(dd,j＝8.4,0.7hz,1h),7.33–7.29(m,1h),7.28–7.24(m,1h),7.16(d,j＝8.5hz,2h),6.94(d,j＝8.5hz,2h),4.21(s,2h),1.33(s,9h).
实施例6
475mg化合物p5及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到385mg产物p6，黄色固体，产率93％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.53(br,1h),9.22–9.21(m,2h),8.53(dd,j＝4.8,1.6hz,1h),8.46(ddd,j＝8.1,2.3,1.7hz,1h),8.18(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.72(ddd,j＝8.6,7.1,1.8hz,1h),7.57–7.44(m,2h),7.35(t,j＝8.0hz,1h),7.13(d,j＝8.5hz,2h),6.72(d,j＝8.5hz,2h),4.08(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.71,156.56,156.27,148.85,148.58,142.24,135.33,134.59,129.86,129.53×2,127.48,126.87,124.18,123.58,123.34,122.31,118.02,115.75×2,115.39,108.55,29.03.
实施例7
1.17mmol1-(2-羟基苯基)-3-(吡啶-4-基)丙烷-1,3-二酮(a4)与2.11mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，2.34mmoln,n-二环己基二亚胺，0.47mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到275mg产物p7，黄色固体，产率55％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.65(d,j＝4.9hz,2h),8.38(d,j＝8.0hz,1h),7.93(d,j＝4.7hz,2h),7.67(d,j＝7.8hz,1h),7.44(d,j＝8.5hz,1h),7.34(d,j＝7.8hz,1h),7.20(d,j＝7.7hz,2h),7.01(d,j＝8.0hz,2h),4.27(s,2h),1.37(s,9h).
实施例8
275mg化合物p7及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到220mg产物p8，黄色固体，产率92％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.73(s,1h),9.23(s,1h),8.63(d,j＝4.7hz,2h),8.31–8.11(m,3h),7.75(t,j＝7.6hz,1h),7.52(d,j＝8.3hz,1h),7.37(t,j＝7.5hz,1h),7.11(d,j＝7.7hz,2h),6.70(d,j＝7.6hz,2h),4.11(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.73,156.27,149.91×2,142.92,138.32,134.80,129.59,129.54×3,126.99,123.87,123.58,122.36,121.36,118.06,117.05,115.75×3,109.76,28.99.
实施例9
1.12mmol1-(2-羟基苯基)-3-(4-氯吡啶-2-基)丙烷-1,3-二酮(a5)与2.02mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，2.24mmoln,n-二环己基二亚胺，0.45mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到255mg产物p9，黄色固体，产率50％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.37(br,1h),9.57(d,j＝1.8hz,1h),8.42(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),8.32(d,j＝5.3hz,1h),7.66(ddd,j＝8.6,7.1,1.7hz,1h),7.42(d,j＝7.7hz,1h),7.34(ddd,j＝8.1,7.2,1.0hz,1h),7.23–7.10(m,3h),6.96(d,j＝8.5hz,2h),4.21(s,2h),1.34(s,9h).
实施例10
255mg化合物p9及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到170mg产物p10，黄色固体，产率75％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.95(br,1h),9.45(d,j＝1.6hz,1h),9.18(s,1h),8.58(d,j＝5.0,1h),8.24(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.75(ddd,j＝8.6,7.1,1.7hz,1h),7.52(d,j＝7.8hz,1h),7.42(dd,j＝5.3,2.0hz,1h),7.38(t,j＝7.0hz,1h),7.15(d,j＝8.5hz,2h),6.69(d,j＝8.6hz,2h),4.12(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.52,155.84,155.70,150.15,150.10,143.75,142.29,134.35,129.45,129.18×2,126.58,123.74,123.13,121.84,121.41,117.58,117.17,115.16×3,109.07,28.30.
实施例11
1.12mmol1-(2-羟基苯基)-3-(5-氯吡啶-2-基)丙烷-1,3-二酮(a6)与2.0mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，2.24mmoln,n-二环己基二亚胺，0.44mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到230mg产物p11，黄色固体，产率45％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.15(br,1h),9.43(d,j＝8.7hz,1h),8.41(s,1h),8.38(d,j＝7.8hz,1h),7.76(d,j＝8.6hz,1h),7.66(t,j＝7.7hz,1h),7.42(d,j＝8.5hz,1h),7.33(t,j＝7.7hz,1h),7.20(d,j＝7.7hz,2h),6.98(d,j＝7.9hz,2h),4.24(s,2h),1.36(s,9h).
实施例12
230mg化合物p11及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到150mg产物p12，黄色固体，产率74％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.88(s,1h),9.26(d,j＝8.6hz,1h),9.19(s,1h),8.63(s,1h),8.21(d,j＝7.7hz,1h),8.03(d,j＝8.7hz,1h),7.74(t,j＝7.6hz,1h),7.52(d,j＝8.4hz,1h),7.37(t,j＝7.4hz,1h),7.14(d,j＝8.0hz,2h),6.68(d,j＝8.0hz,2h),4.11(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.40,155.87,155.68,147.23,147.21,142.17,136.88,134.29,129.52,129.16×2,128.90,126.50,124.01,123.14,123.06,121.88,117.57,116.74,115.15×2,108.81,28.31.
实施例13
3.26mmol1-(2-羟基苯基)-3-(2-氯吡啶-3-基)丙烷-1,3-二酮(a7)与5.87mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，6.52mmoln,n-二环己基二亚胺，1.30mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到718mg产物p13，黄色固体，产率48％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.43(s,1h),8.37(dd,j＝7.8,1.9hz,1h),8.31–8.24(m,2h),
7.65(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.43(d,j＝8.4hz,1h),7.35–7.29(m,2h),7.21(d,j＝8.5hz,2h),6.99(d,j＝8.5hz,2h),4.24(s,2h),1.35(s,9h).
实施例14
718mg化合物p13及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到480mg产物p14，黄色固体，产率76％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.48(br,1h),9.24(s,1h),8.48(dd,j＝4.8,1.9hz,1h),8.08(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),8.04(dd,j＝7.6,1.9hz,1h),7.73(ddd,j＝8.7,7.1,1.8hz,1h),7.61–7.47(m,2h),7.39–7.27(m,1h),7.12(d,j＝8.5hz,2h),6.71(d,j＝8.5hz,2h),4.06(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.31,156.94,156.27,150.14,149.64,142.52,141.18,134.58,129.82,129.55×2,127.83,126.50,123.35,122.95,122.30,121.38,118.24,115.75×2,114.61,109.56,29.13.
实施例15
1.1mmol1-(2-羟基苯基)-3-(3-氯吡啶-4-基)丙烷-1,3-二酮(a8)与2.0mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，2.2mmoln,n-二环己基二亚胺，0.44mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到430mg产物p15，黄色固体，产率85％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.29(s,1h),8.60(s,1h),8.56(d,j＝4.2hz,1h),8.34(d,j＝8.1hz,1h),8.20(d,j＝4.8hz,1h),7.69(t,j＝7.7hz,1h),7.46(d,j＝8.3hz,1h),7.34(t,j＝7.4hz,1h),7.23(d,j＝7.8hz,2h),7.03(d,j＝7.5hz,2h),4.27(s,2h),1.37(s,9h).
实施例16
430mg化合物p15及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到210mg产物p16，黄色固体，产率55％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.58(br,1h),9.23(s,1h),8.75(s,1h),8.59(d,j＝5.0hz,1h),8.09(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.79–7.70(m,1h),7.63(d,j＝5.0hz,1h),7.53(d,j＝8.4hz,1h),7.35(t,j＝7.5hz,1h),7.12(d,j＝8.5hz,2h),6.71(d,j＝8.5hz,2h),4.08(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.25,156.85,156.29,149.67,147.87,141.53,138.20,134.70,130.81,129.66,129.57×2,127.39,126.56,123.48,122.31,120.05,118.28,115.86,115.77×2,109.92,29.16.
实施例17
1.0mmol1-(2-羟基苯基)-3-(2-氟苯基)丙烷-1,3-二酮(a9)与1.8mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，2.0mmoln,n-二环己基二亚胺，0.4mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到137mg产物p17，黄色固体，产率53％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.07(s,1h),8.77–8.65(m,1h),8.37(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.68–7.62(m,1h),7.47–7.39(m,2h),7.34–7.31(m,2h),7.21(d,j＝8.6hz,2h),7.15–7.09(m,1h),7.00(d,j＝8.5hz,2h),4.24(s,2h),1.37(s,9h).
实施例18
135mg化合物p17及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到107mg产物p18，黄色固体，产率91％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.35(br,1h),9.22(s,1h),8.10(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.73(ddd,j＝15.9,8.2,1.7hz,2h),7.58–7.39(m,2h),7.35–7.28(m,3h),7.12(d,j＝8.5hz,2h),6.70(d,j＝8.5hz,2h),4.06(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.27,156.78,156.22,141.42,134.42,132.80,130.51,130.03,129.54×2,126.61,124.41,124.38,123.24,122.45,120.41,118.13,116.13,115.91,115.71×2,114.55,108.94,29.10.
实施例19
2.2mmol1-(2-羟基苯基)-3-(4-甲基苯基)丙烷-1,3-二酮(a10)与3.9mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，4.4mmoln,n-二环己基二亚胺，0.88mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到150mg产物p19，黄色固体，产率16％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.49(s,1h),8.35(dd,j＝7.9,1.7hz,1h),7.81(d,j＝8.2hz,2h),7.63(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.39(d,j＝8.4hz,1h),7.33–7.29(m,1h),7.24(d,j＝8.0hz,2h),7.19(d,j＝8.5hz,2h),6.98(d,j＝8.5hz,2h),4.21(s,2h),2.39(s,3h),1.36(s,9h).
实施例20
150mg化合物p19及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到120mg产物p20，黄色固体，产率92％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.24(br,1h),9.20(s,1h),8.17(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),8.01(d,j＝8.2hz,2h),7.70(ddd,j＝8.6,7.2,1.7hz,1h),7.47(d,j＝7.9hz,1h),7.35–7.30(m,1h),7.27(d,j＝8.1hz,2h),7.11(d,j＝8.5hz,2h),6.70(d,j＝8.5hz,2h),4.06(s,2h),2.36(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.52,156.47,156.18,141.91,137.54,134.35,130.18,129.48×2,129.18×2,128.70,128.11×2,128.08,126.92,123.15,122.53,117.88,115.69×2,113.79,107.56,28.94,21.34.
实施例21
3.22mmol1-(2-羟基苯基)-3-(嘧啶-2-基)丙烷-1,3-二酮(a11)与5.80mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，6.44mmoln,n-二环己基二亚胺，1.29mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到850mg产物p21，黄色固体，产率62％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.25(br,1h),8.74(d,j＝4.9hz,2h),8.43(dd,j＝7.9,1.5hz,1h),7.67–7.58(m,1h),7.40(d,j＝8.3hz,1h),7.30(t,j＝7.5hz,1h),7.16(d,j＝8.4hz,2h),7.07(t,j＝4.8hz,1h),6.95(d,j＝8.4hz,2h),4.22(s,2h),1.32(s,9h).
实施例22
800mg化合物p21及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到617mg产物p22，黄色固体，产率89％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.95(br,1h),9.25(s,1h),8.88(d,j＝4.8hz,2h),8.17(dd,j＝7.9,1.4hz,1h),7.79–7.65(m,1h),7.53(d,j＝8.3hz,1h),7.39–7.34(m,2h),7.16(d,j＝8.4hz,2h),6.71(d,j＝8.4hz,2h),4.12(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ173.23,158.80,157.71×2,156.22,156.21,142.91,134.28,129.96,129.65×2,126.94,123.94,123.47,123.14,119.39,118.05,117.70,115.68×2,110.56,28.97.
实施例23
0.53mmol1-(2-羟基苯基)-3-(噻唑-2-基)丙烷-1,3-二酮(a12)与0.95mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，1.06mmoln,n-二环己基二亚胺，0.21mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到112mg产物p23，黄色固体，产率49％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.76(br,1h),8.40(dd,j＝8.0,1.7hz,1h),7.74(d,j＝3.2hz,1h),7.66(ddd,j＝8.6,7.2,1.7hz,1h),7.42(d,j＝8.3hz,1h),7.37(d,j＝3.2hz,1h),7.34(t,j＝7.5hz,1h),6.99(t,j＝12.4hz,2h),6.85(d,j＝7.9hz,2h),4.11(s,2h),1.25(s,9h).
实施例24
112mg化合物p23及3.0mltfa，按照实施例2的方法，得到89mg产物p24，黄色固体，产率91％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.05(br,1h),9.20(s,1h),8.20(dd,j＝7.9,1.5hz,1h),7.93(d,j＝3.2hz,1h),7.79–7.65(m,2h),7.53(d,j＝8.3hz,1h),7.38(t,j＝7.5hz,1h),7.14(d,j＝8.4hz,2h),6.69(d,j＝8.5hz,2h),4.09(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.19,156.89,156.29,155.72,142.30,141.11,134.42,129.36,129.15×2,126.15,123.19,121.71,120.40,119.71,117.80,116.51,115.17×2,108.64,28.38.
实施例25
0.8mmol1-(2-羟基苯基)-3-(2-甲氧基吡啶-3-基)丙烷-1,3-二酮(a13)与1.45mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，1.6mmoln,n-二环己基二亚胺，0.32mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到236mg产物p25，黄色固体，产率65％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.37(br,1h),9.59(dd,j＝7.7,1.8hz,1h),8.38(dd,j＝8.0,1.7hz,1h),8.08(dd,j＝4.8,1.8hz,1h),7.69–7.60(m,1h),7.41(d,j＝8.4hz,1h),7.32(d,j＝7.2hz,1h),7.24(d,j＝8.4hz,2h),7.11(dd,j＝7.7,4.8hz,1h),7.04(d,j＝8.4hz,2h),4.23(s,2h),3.97(s,3h),1.38(s,9h).
实施例26
80mg化合物p25及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到62mg产物p26，黄色固体，产率88％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.10(br,1h),9.23(s,1h),8.19(dd,j＝6.0,4.3hz,2h),8.11(d,j＝7.9hz,1h),7.71(t,j＝7.8hz,1h),7.50(d,j＝8.3hz,1h),7.32(t,j＝7.5hz,1h),7.13–7.08(m,3h),6.70(d,j＝8.4hz,2h),4.06(s,2h),3.90(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.34,160.52,156.64,156.20,146.53,141.37,140.94,134.43,130.06,129.56×2,126.70,123.24,122.38,121.98,118.07,117.12,115.68×2,114.72,113.86,108.70,53.95,28.98.
实施例27
-20℃下，将三溴化硼(72μl,0.75mmol)的二氯甲烷(2.0ml)溶液缓慢滴加入化合物p26(100mg,0.25mmol)的无水二氯甲烷(8.0ml)溶液中，滴加完毕后，继续反应1-3h至tlc监测原料反应完全。将反应液缓慢导入冰水浴中，二氯甲烷萃取，有几层干燥，浓缩，柱层析获得44mg产物p27，黄色固体，产率46％，其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.27(s,1h),12.32(br,1h),9.73(dd,j＝7.4,1.9hz,1h),9.24(s,1h),8.22(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.74(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.59–7.46(m,2h),7.43–7.30(m,1h),7.11(d,j＝8.5hz,2h),6.71(d,j＝8.5hz,2h),6.55(dd,j＝7.3,6.3hz,1h),4.12(s,2h).
实施例28
8.54mmol3-(2-羟基苯基)-3-氧代丙醛(a14)与15.4mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，17.1mmoln,n-二环己基二亚胺，3.42mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到1.25g产物p28，白色固体，产率42％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.18(br,1h),8.32(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.66–7.59(m,1h),7.39(d,j＝8.3hz,1h),7.31(d,j＝3.6hz,1h),7.28(t,j＝7.3hz,1h),7.12(d,j＝8.4hz,2h),6.92(d,j＝8.4hz,2h),4.15(s,2h),1.32(s,9h).
实施例29
氩气保护下，将n-溴代丁二酰亚胺(40mg,0.22mmol)加入p28(100mg,0.22mmol)的5.0ml氯仿溶液中，室温搅拌反应15分钟，反应完全后，低温浓缩除去溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得到20mg产物p29,微黄色固体，产率21％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.36(br,1h),8.33(dd,j＝7.9,1.7hz,1h),7.63(dd,j＝12.1,5.2hz,1h),7.37(d,j＝8.4hz,1h),7.31(t,j＝7.1hz,1h),7.15(d,j＝8.5hz,2h),6.99(d,j＝8.5hz,2h),4.13(s,2h),1.37(s,9h).
实施例30
将化合物p28(100mg,0.3mmol)溶于5.0ml二氯甲烷溶液中，然后加入三乙胺(83μl,0.6mmol)及二碳酸二叔丁酯(78mg,0.36mmol)，室温搅拌反应12h。反应完全后，浓缩除去溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)分离获得121mg产物p30，白色固体，产率94％，其结构如下：
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.31(dd,j＝7.9,1.7hz,1h),8.01(s,1h),7.65(ddd,j＝8.6,7.2,1.6hz,1h),7.37(d,j＝8.4hz,1h),7.31(t,j＝8.0hz,1h),7.05(d,j＝8.4hz,2h),6.91(d,j＝8.4hz,2h),4.46(s,2h),1.48(s,9h),1.33(s,9h).
实施例31
将碳酸氢钠(420mg,5.0mmol)的10.0ml水溶液加入至化合物p28(347mg,1.0mmol)的5.0ml二氯甲烷溶液中，然后将碘(254mg,1.0mmol)、碘化钾(249mg,1.5mmol)的10.0ml水溶液缓慢加入上述体系中，室温搅拌反应1h。反应完全后，体系用乙酸乙酯稀释，饱和硫代硫酸钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩除去溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)分离获得240mg产物p31，微黄色固体，产率51％，其结构如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.63(br,1h),8.11(dd,j＝7.9,1.7hz,1h),7.71(ddd,j＝8.7,7.2,1.8hz,1h),7.45(d,j＝7.9hz,1h),7.37–7.27(m,1h),7.15(d,j＝8.5hz,2h),6.91(d,j＝8.5hz,2h),4.04(s,2h),1.26(s,9h).
实施例32
19.45mmol4-(2-羟基苯基)-2,4-二氧代丁酸乙酯(a15)与35.0mmolfmoc-o-叔丁基-l-酪氨酸(b1)，38.9mmoln,n-二环己基二亚胺，11.67mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到5.8g产物p32，微黄色固体，产率71％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.97(br,1h),8.38(dd,j＝8.0,1.4hz,1h),7.69–7.59(m,1h),7.41(d,j＝8.3hz,1h),7.31(t,j＝7.5hz,1h),7.14(d,j＝8.4hz,2h),6.95(d,j＝8.4hz,2h),4.45(q,j＝7.1hz,2h),4.21(s,2h),1.47(t,j＝7.1hz,3h),1.33(s,9h).
实施例33
210mg化合物p32及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到160mg产物p33，微黄色固体，产率88％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.20(br,1h),9.26(s,1h),8.16(d,j＝7.9hz,1h),7.74(t,j＝7.7hz,1h),7.53(d,j＝8.4hz,1h),7.38(t,j＝7.5hz,1h),7.10(d,j＝8.0hz,2h),6.68(d,j＝8.0hz,2h),4.33(q,j＝7.0hz,2h),4.07(s,2h),1.36(t,j＝7.0hz,3h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ172.88,160.04,156.31,156.05,142.88,134.66,129.63×2,129.28,126.98,123.85,122.95,120.32,118.24,115.72×2,114.17,112.44,60.80,28.97,14.82.
实施例34
将化合物p32(210mg,0.5mmol)溶于10ml甲醇中，然后加入一水合氢氧化锂(63mg,1.5mmol)，室温搅拌反应12h。体系加入10ml水稀释，浓缩除去溶剂甲醇，然后用乙酸乙酯萃取，有机层干燥，浓缩获得184mg产物p34，产率91％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.29(br,1h),8.16(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.75(ddd,j＝8.6,7.1,1.7hz,1h),7.53(d,j＝7.9hz,1h),7.44–7.34(m,1h),7.20(d,j＝8.5hz,2h),6.91(d,j＝8.5hz,2h),4.15(s,2h),3.86(s,3h),1.25(s,9h).
实施例35
将化合物p32(1.5g,3.58mmol)溶于30ml四氢呋喃中，然后加入120ml水，再加入氢氧化钾(3.0g,53.7mmol)，升温至60℃反应12h。冷却，用4mhcl调节ph至4.0。然后用乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩后获得1.37g产物p35，灰色固体，产率98％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.05(br,1h),8.32(d,j＝7.7hz,1h),7.62(t,j＝7.6hz,1h),7.39(d,j＝8.3hz,1h),7.40–7.25(m,1h),7.12(d,j＝8.0hz,2h),6.92(d,j＝7.9hz,2h),4.14(s,2h),1.32(s,9h).
实施例36
150mg化合物p34及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到115mg产物p36，微黄色固体，产率89％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.27(br,1h),9.25(s,1h),8.16(d,j＝7.9hz,1h),7.75(t,j＝7.7hz,1h),7.54(d,j＝8.3hz,1h),7.38(t,j＝7.5hz,1h),7.10(d,j＝8.3hz,2h),6.68(d,j＝8.4hz,2h),4.06(s,2h),3.86(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ172.89,160.44,156.31,156.05,142.90,134.71,129.64×2,129.24,126.94,123.88,122.91,120.54,118.26,115.72×2,113.75,112.50,52.12,28.99.
实施例37
将化合物p35(250mg,0.6mmol)溶于8.0ml二氯甲烷中，然后加入吗啉(80μl,0.9mmol)、三乙胺(125μl,0.9mmol)及hatu(456mg,1.2mmol)，室温搅拌反应12h。反应完全后，体系用二氯甲烷稀释，水及饱和食盐水分别洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)获得113mg产品p37，白色固体，产率41％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,acetone–d6)δ11.93(br,1h),8.24(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.74(ddd,j＝8.7,7.1,1.8hz,1h),7.50(dd,j＝8.4,0.7hz,1h),7.36(ddd,j＝8.0,7.2,1.0hz,1h),7.19(d,j＝8.5hz,2h),6.86(d,j＝8.5hz,2h),4.19(s,2h),3.70(s,8h),1.25(s,9h).
实施例38
110mg化合物p37及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到84mg产物p38，白色固体，产率87％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.83(br,1h),9.26(s,1h),8.15(d,j＝7.6hz,1h),7.74(t,j＝7.4hz,1h),7.53(d,j＝8.3hz,1h),7.36(t,j＝7.4hz,1h),7.10(d,j＝8.3hz,2h),6.70(d,j＝8.4hz,2h),4.01(s,2h),3.67(s,4h),3.58(s,2h),3.48(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.16,161.52,156.68,156.29,140.55,134.78,129.68×2,129.65,126.69,123.52,122.28,118.51,118.30,116.13,115.72×2,109.38,66.70,66.54,47.69,42.85,29.06.
实施例39
p35(250mg,0.6mmol)与n-甲基哌嗪(90mg,0.9mmol)、三乙胺(125μl,0.9mmol)、hatu(456mg,1.2mmol)，按照实施例37的方法，得到122mg产物p39，白色固体，产率43％。其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ11.49(br,1h),8.31(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.64(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.45–7.38(m,1h),7.33–7.29(m,1h),6.90(d,j＝8.4hz,2h),6.81(d,j＝8.5hz,2h),4.08(s,2h),3.82(s,4h),3.62–3.33(m,4h),2.35(s,3h),1.33(s,9h).
实施例40
115mg化合物p39及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到95mg产物p40，白色固体，产率87％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.75(br,1h),9.22(s,1h),8.14(d,j＝6.5hz,1h),7.74(t,j＝6.9hz,1h),7.52(d,j＝8.4hz,1h),7.35(t,j＝7.6hz,1h),7.09(d,j＝8.4hz,2h),6.93(d,j＝8.3hz,2h),4.00(s,2h),3.67(s,2h),3.44(s,2h),2.39(s,2h),2.27(s,2h),2.20(s,3h).
实施例41
p35(250mg,0.6mmol)与n-异丙基哌嗪(115mg,0.9mmol)、三乙胺(125μl,0.9mmol)、hatu(456mg,1.2mmol)，按照实施例37的方法，得到117mg产物p41，白色固体，产率39％。其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.88(br,1h),8.25(dd,j＝8.0,1.4hz,1h),7.65(ddd,j＝8.6,7.2,1.7hz,1h),7.42(d,j＝8.0hz,1h),7.33–7.28(m,1h),7.09(d,j＝8.4hz,2h),6.81(d,j＝8.4hz,2h),4.10(d,j＝9.8hz,2h),3.84(s,4h),3.13–3.05(m,1h),2.96(s,4h),1.24(s,9h),1.21(d,j＝6.5hz,6h).
实施例42
110mg化合物p41及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到89mg产物p42，白色固体，产率91％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.74(br,1h),9.22(s,1h),8.14(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.74(ddd,j＝8.7,7.1,1.8hz,1h),7.52(d,j＝7.8hz,1h),7.40–7.30(m,1h),7.10(d,j＝8.5hz,2h),6.69(d,j＝8.5hz,2h),4.00(s,2h),3.65(s,2h),3.43(s,2h),3.18(d,j＝5.2hz,1h),2.68(s,1h),2.38(s,3h),0.97(d,j＝6.3hz,6h).
实施例43
p35(250mg,0.6mmol)与n-环丙基哌嗪(113mg,0.9mmol)、三乙胺(125μl,0.9mmol)、hatu(456mg,1.2mmol)，按照实施例37的方法，得到128mg产物p43，白色固体，产率44％。其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ12.00(br,1h),8.29(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.62(ddd,j＝8.6,7.2,1.7hz,1h),7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.33–7.27(m,1h),6.97(d,j＝8.4hz,2h),6.69(d,j＝8.4hz,2h),3.99(s,2h),3.76(d,j＝26.1hz,4h),2.71(d,j＝15.9hz,4h),1.78(s,1h),1.21(d,j＝28.6hz,9h),0.55–0.35(m,4h).
实施例44
120mg化合物p43及2.0mltfa，按照实施例2的方法，得到96mg产物p44，白色固体，产率91％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ12.76(br,1h),9.22(s,1h),8.13(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.74(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.53(d,j＝8.4hz,1h),7.41–7.29(m,1h),7.10(d,j＝8.5hz,2h),6.69(d,j＝8.5hz,2h),4.00(s,2h),3.63(s,2h),3.41(s,2h),2.60(s,2h),2.48(s,2h),1.71–1.59(m,1h),0.51–0.27(m,4h).
实施例45
2.2g1-(2-羟基苯基)-3-(噻唑-2-基)丙烷-1,3-二酮(a12)与1.8当量2-(9-芴甲氧羰酰氨基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙酸(b2)，2.0当量n,n-二环己基二亚胺，0.6当量n,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到p45，黄色固体，产率53％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ11.15(br,1h),8.38(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.75(d,j＝3.2hz,1h),7.65(ddd,j＝8.7,7.2,1.7hz,1h),7.40(d,j＝8.2hz,1h),7.38(d,j＝3.2hz,1h),7.33(t,j＝7.5hz,1h),6.58(d,j＝7.9hz,1h),6.50(s,1h),6.45(d,j＝7.9hz,1h),5.74(s,2h),4.01(s,2h)；13cnmr(101mhz,cdcl3)δ175.57,158.02,157.03,147.79,146.28,142.40,141.60,134.05,131.54,126.84,123.08,122.46,121.00×2,119.87,117.65,114.84,109.63,108.55,108.30,100.96,29.60.
实施例46
p35(250mg,0.6mmol)与乙酰肼(67mg,0.9mmol)、三乙胺(125μl,0.9mmol)、hatu(456mg,1.2mmol)，按照实施例37的方法，得到169mg产物p46，白色固体，产率63％。其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.44(s,1h),12.25(s,1h),10.32(s,1h),8.25(dd,j＝8.0,1.4hz,1h),7.84(t,j＝7.0hz,1h),7.61(d,j＝8.4hz,1h),7.45(t,j＝7.6hz,1h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),6.90(d,j＝8.4hz,2h),4.17(s,2h),1.96(s,3h),1.25(s,9h).
实施例47
将化合物p46(140mg,0.31mmol)溶于3.0ml三氯氧膦中，升温至60℃反应30分钟。反应完全后，将反应液倒入盛有冰水混合物的烧杯中，搅拌10分钟，然后用乙酸乙酯萃取，水及食盐水分别洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)分离获得67mg产物p47，产率58％。其结构与核磁数据如下：
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.49(s,1h),9.25(s,1h),8.17(d,j＝7.9hz,1h),7.77(t,j＝7.0hz,1h),7.56(d,j＝8.3hz,1h),7.39(t,j＝7.5hz,1h),7.12(d,j＝8.3hz,2h),6.69(d,j＝8.4hz,2h),4.08(s,2h),2.61(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ173.40,163.90,158.98,156.53,156.34,142.25,134.97,129.67×2,129.37,126.74,123.88,122.46,119.66,118.38,115.75×2,111.16,108.08,31.17,11.17.
实施例48
9.3mmol4-(2-羟基苯基)-2,4-二氧代丁酸乙酯(a15)与14.0mmol2-(9-芴甲氧羰酰氨基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙酸(b2)，18.6mmoln,n-二环己基二亚胺，3.7mmoln,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到1.67g产物p48，微黄色固体，产率46％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.03(br,1h),8.39(dd,j＝8.0,1.5hz,1h),7.70–7.62(m,1h),7.42(d,j＝8.4hz,1h),7.33(t,j＝7.5hz,1h),6.77(d,j＝8.5hz,1h),6.73–6.71(m,2h),5.94(s,2h),4.47(q,j＝7.1hz,2h),4.17(s,2h),1.49(t,j＝7.1hz,3h).
实施例49
p48(470mg,1.2mmol)与氢氧化钾(1.01g,18mmol)，按照实施例35的方法，得到353mg产物p49，白色固体，产率81％。其结构如下:
实施例50
将化合物p49(3.0g,7.67mmol)加入一反应管中，然后加入氨甲醇溶液(7.0m，30ml，210mmol)，升温至60℃反应12h。反应完全后，体系冷却至室温，浓缩除去溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)分离获得1.25g产物p50，灰色固体，产率45％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ9.83(br,1h),8.22(d,j＝8.1hz,1h),7.80(d,j＝7.5hz,1h),7.70(s,1h),7.60(d,j＝8.4hz,1h),7.48–7.35(m,1h),6.92(s,1h),6.82(d,j＝7.6hz,1h),6.78(d,j＝7.3hz,1h),5.94(s,2h),4.08(s,2h).
实施例51
将化合物p50(1.2g,3.31mmol)溶于20ml二氯甲烷中，然后加入10.0ml三氯氧膦，升温回流反应12h。tlc监测反应完全后，体系冷却至室温，将反应液倒入盛有冰水混合物的烧杯中，搅拌30分钟，然后用二氯甲烷萃取(50ml×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩除去溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)分离获得433mg产物p51，黄色固体，产率38％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.24(br,1h),8.34(d,j＝8.2hz,1h),7.73–7.67(m,1h),7.45(d,j＝8.4hz,1h),7.40–7.34(m,1h),6.82(d,j＝7.7hz,1h),6.74–6.72(m,2h),5.99(s,2h),4.15(s,2h).
实施例52
将化合物p51(430mg,1.25mmol)溶于10ml甲苯中，然后加入三乙胺盐酸盐(518mg,3.75mmol)及叠氮化钠(244mg,3.75mmol)，氩气保护，升温至回流反应12h。tlc监测反应完全后，体系冷却至室温，加入10ml水，搅拌15分钟。然后用4m盐酸水溶液调节ph至4.0，用乙酸乙酯萃取(40ml×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩除去溶剂，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)分离获得203mg产物p52，黄色固体，产率42％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,dmso–d6)δ13.76(br,1h),8.24(d,j＝7.7hz,1h),7.83(t,j＝7.7hz,1h),7.62(d,j＝8.5hz,1h),7.44(t,j＝7.5hz,1h),6.94(s,1h),6.85(d,j＝7.9hz,1h),6.81(d,j＝8.1hz,1h),5.95(s,2h),4.13(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso–d6)δ174.96,156.56,147.8,147.44,145.76,141.49,135.14,132.47,126.13,123.61,121.15,120.99,118.13,118.06,110.26,109.02,108.72,108.24,100.79,29.08.
实施例53
108mg1-(2-羟基苯基)-3-(噻唑-2-基)丙烷-1,3-二酮(a12)与1.8当量2-(9-芴甲氧羰酰氨基)-3-(4-三氟甲基苯基)丙酸(b3)，2.0当量n,n-二环己基二亚胺，0.6当量n,n-二甲基吡啶，按照实施例1的方法，得到45mg产物p53，黄色固体，产率24％，其结构与核磁数据如下:
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.31(br,1h),8.40(dd,j＝8.0,1.7hz,1h),7.78(d,j＝3.2hz,1h),7.68(ddd,j＝8.6,7.1,1.7hz,1h),7.61–7.52(m,2h),7.41(t,j＝5.2hz,2h),7.39–7.31(m,3h),4.27(s,2h)；13cnmr(101mhz,cdcl3)δ175.53,160.31,157.61,157.04,143.45,142.66,141.87,134.16,128.58×2,126.88,125.68,125.65,124.26,123.19,122.38,121.44,120.08,117.61,113.23,109.68,29.95.
实施例54
待测分子与含有重组pde5a1蛋白(该重组蛋白的制备方法参见文献：bioorganic&medicinalchemistryletters，2012年，22卷，页码：3261–3264)，20mmtris-hcl,ph7.5,2mm二硫苏糖醇(dithiothreitol),10mmmgcl2以及20,000-30,000cpm的3h-cgmp在室温下孵育15分钟，然后分别用0.2mznso4andba(oh)2中止反应，然后利用perkinelmer2910计数仪测量上清液中未反应的3h-cgmp，每个分子至少测量三次。对pde5a1蛋白活性抑制的ic50值通过浓度测试及非线性回归，计算获得。本发明化合物对pde5酶的抑制活性测试数据如表1所示(同等条件下，阳性对照物西地那非sildenafil对pde5酶的抑制活性ic50为5nm)：
表1：部分发明化合物及对pde5酶的抑制活性测试数据表(ic50,单位:nm)
由上述结果可看出，本发明的取代吡咯色原酮类化合物对磷酸二酯酶5型具有良好的抑制活性，在作为磷酸二酯酶5型抑制剂方面具有广阔的应用空间。