1.快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、冬虫夏草菌菌体培养与收集
将冬虫夏草菌菌种接种于培养基中,培养10~20d后,过滤,收集菌丝沉淀;
b、冬虫夏草菌基因组DNA的提取
取步骤a所得菌丝沉淀,加入蒸馏水,打碎菌体,离心后弃上清;加入磷酸氢二钾溶液,离心弃上清;再加入磷酸氢二钾震荡成均匀悬浮的菌液,加入混合酶液,混合酶液为蜗牛酶和纤维素酶的混合液,震荡混匀0.5~3h,煮沸5~30min,再于冰上放置5~30min,离心,上清即为冬虫夏草菌基因组DNA。
2.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤a中所述的培养基组成为:每升培养基中含马铃薯80~300g,葡萄糖20~50g,蛋白胨5~20g,酵母提取物1~10g,磷酸氢二钾0.1~5g,硫酸镁0.1~5g,余量为水。
3.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤a中所述培养的培养温度为10~25℃,培养时置于转速为100~250r/min震荡摇床中进行。
4.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤b中所述的离心是指在6000~10000r/min离心5~10min。
5.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤b中所述蒸馏水加入量为每0.5~1g菌丝沉淀中加入蒸馏水2~10ml。
6.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤b中所述的磷酸氢二钾溶液浓度为0.01~0.1mol/L,加入量为每0.5~1g菌丝沉淀中加入2~10ml。
7.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤b中所述的混合酶液中每毫升含蜗牛酶1~10mg,含纤维素酶1~10mg。
8.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤b中所述的混合酶液的加入量为每0.5~1g菌丝沉淀中加入1~10ml。
9.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法,其特征在于:步骤b中所述震荡混匀时转速为100~250r/min,温度为25~37℃。