本发明涉及磷脂酰丝氨酸的生产制备技术领域，具体的涉及一种快速稳定制备磷脂酰丝氨酸的方法。
背景技术：
磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine，ps）又称复合神经酸，其功能主要是改善神经细胞功能，调节神经脉冲的传导，增进大脑记忆功能，由于其具有很强的亲脂性，吸收后能够迅速通过血脑屏障进入大脑，起到舒缓血管平滑肌细胞，增加脑部供血的作用。其无论是作为药品还是保健食品，毫无疑问，补充磷脂酰丝氨酸可以提高长期记忆、长期认知以及自由谈吐和逻辑性发言能力。
磷脂酰丝氨酸（ps）已经成为许多欧美国家研究记忆丧失、情绪、认知行为和学习能力有关的临床试验的课题。临床试验结果显示，补充磷脂酰丝氨酸后，关于认知和记忆的参数得到显著改善。毫无疑问，补充磷脂酰丝氨酸可以提高长期记忆、长期认知以及自由谈吐和逻辑性发言能力。磷脂酰丝氨酸（ps）可以按比例加入到膳食中，能够经过肠道有效地和迅速地吸收进入血液，并最终顺利穿过血脑屏障到达脑内的神经细胞。
磷脂酰丝氨酸（ps）可以由人类或者动物自身条件合成，也可以从植物提取，或可使用生物催化技术从大豆卵磷脂生产。通过使用磷脂酶d（plds）的磷脂酰基移转（transphosphatidylation）反应，可容易地对磷脂的头基进行修饰。因此，磷脂酰丝氨酸可从磷脂酰胆碱或任何其它磷脂混合物与丝氨酸通过pld催化生产。
现有的磷脂酰丝氨酸主要采用从动物的脑组织、肝组织中提取法，或者采用生物酶为催化剂合成。其中提取法需要大量的动物组织，而且提取过程使用较多溶剂，效率低，分离提纯工艺复杂，分离难度大；生物酶催化合成法可以批量合成磷脂酰丝氨酸。已公开的酶法合成方法都是以较高纯度的磷脂酰胆碱为原料合成磷脂酰丝氨酸，而且存在反应温度高，反应周期长、收率较低、高沸点溶剂残留、酶易失活等缺点。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，该方法具有反应时间短、产率高、无溶剂污染的特点。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于离子液体中，得到混合体系，所述超声的功率为300~800w，超声时间为15~60min，温度为25~80℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，静置30~120min，然后离心洗涤，得到食品用磷脂酰丝氨酸。
上述技术方案中通过磷脂酶d分散在离子液体中，而后加入丝氨酸和大豆卵磷脂反应，提高了磷脂酶d的催化活性和对温度的稳定性，通过超声波处理，磷脂酶d在离子液中快速催化合成，形成磷脂酰丝氨酸，反应时间短，得率高，使得制备效率大幅提升。
本发明中，离子液体应该与磷脂酶d具有良好的相容性，不会导致磷脂酶d产生失活现象，所述离子液体由阳离子和阴离子组成。
优选的，所述离子液体中的阳离子为有机阳离子，所述有机阳离子为季铵盐离子、季鏻盐离子、咪唑盐离子中的至少一种。
优选的，所述离子液体中的阴离子为bf4—、pf6—、cf3so3—、(cf3so2)2n—、c3f7coo—、c4f9so3—、cf3coo—、(cf3so2)3c—、(c2f5so2)3c—、(c2f5so2)2n—、sbf6—、asf6—中的至少一种。
更有选的，所述离子液体为十二烷基溴化吡啶、4-(4,6-二甲氧基三嗪)-4-甲基吗啉盐酸盐、1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、乙基三苯基碘化膦、2-氟-1,3-二甲基氯化咪唑翁六氟磷酸酯、1-己基-3-甲基咪唑氯盐和1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐中的至少一种。
根据本发明，本发明中所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为5~35%，进一步优选为10~35%。
当然，各物质的用量可以根据实际需要进行选择，例如，在本发明的一种优选的实施方式中，所述大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：（0.9~1.5）。
同样地，在本发明的另一优选的实施方式中，所述大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：（0.01~0.05）。
混合过程可以根据实际需要选择混合条件，例如，在本发明的一种优选的实施方式中，在步骤b中，所述混合体系的温度为20~60℃。
静置可以根据实际需要选择条件，例如，在本发明的一种优选的实施方式中，在步骤b中，所述静置的时间为30~60min。
根据本发明，乳化剂能够促进磷脂酰丝氨酸的生成，在本发明的另一优选的实施方式中，所述混合体系中还含有乳化剂。
本发明中，所述乳化剂为单硬脂酸甘油酯。
本发明了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，通过离子液使得酶具有良好的催化活性和对温度的稳定性，加入乳化剂，通过超声波处理，磷脂酶d在离子液中快速催化合成，形成磷脂酰丝氨酸，进一步通过离心分离提取，得到磷脂酰丝氨酸。其反应时间短，得率高，对大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱含量要求低。产品适合用于牛奶、饮料等健康食品中添加，对预防认知力低下、缓和疲劳等有显著效果。
本发明提出了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，与现有技术相比，其突出的特点和优异的效果在于：
1、将磷脂酶d预先分散于离子液中，通过离子液使得酶具有良好的催化活性和对温度的稳定性，从而快速稳定催化合成磷脂酰丝氨酸。反应时间短。
2、本发明制备方法磷脂酰丝氨酸得率高。
3、本发明方法工艺简单、制备过程清洁无污染、制备效率高，适合于规模化生产。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于十二烷基溴化吡啶中，得到混合体系，所述超声的功率为350w，超声时间为25min，温度为50℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在30℃下静置30min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为25%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.03；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
实施例得到的磷脂酰丝氨酸含量为69.8%，得率高，对大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱含量要求低。
实施例2
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于4-(4,6-二甲氧基三嗪)-4-甲基吗啉盐酸盐中，得到混合体系，所述超声的功率为400w，超声时间为30min，温度为50℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在50℃下静置20min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为25%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.03；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
实施例得到的磷脂酰丝氨酸含量为72.3%，得率高，对大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱含量要求低。
实施例3
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐中，得到混合体系，所述超声的功率为300w，超声时间为30min，温度为60℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在35℃下静置60min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为25%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.03；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
实施例得到的磷脂酰丝氨酸含量为65.8%，得率高，对大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱含量要求低。
实施例4
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于乙基三苯基碘化膦中，得到混合体系，所述超声的功率为500w，超声时间为40min，温度为55℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在30℃下静置45min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为25%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.03；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
实施例5
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于十二烷基溴化吡啶中，得到混合体系，所述超声的功率为400w，超声时间为50min，温度为45℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在60℃下静置30min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为20%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.05；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
实施例6
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于4-(4,6-二甲氧基三嗪)-4-甲基吗啉盐酸盐中，得到混合体系，所述超声的功率为450w，超声时间为15min，温度为60℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在35℃下静置80min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为20%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.05；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
实施例7
本实施例提供了一种快速稳定制备食品用磷脂酰丝氨酸的方法，包括以下步骤：
a、将磷脂酶d超声分散于1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐中，得到混合体系，所述超声的功率为600w，超声时间为40min，温度为25℃；
b、将大豆卵磷脂、丝氨酸加入混合体系中，在45℃下静置90min，得到磷脂酰丝氨酸。
所述的大豆卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量为20%；
大豆卵磷脂与丝氨酸的质量比为1：0.05；
所述的混合体系中还含有单硬脂酸甘油酯。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。