技术特征：
技术总结
本发明公开了一种表达猪溶菌酶基因的乳酸克鲁维酵母的表达方法：首先以乳酸克鲁维酵母密码子偏好性优化并合成猪溶菌酶基因，基因两端同时引入NcoI与EcoRI两个限制性内切酶位点，使用NcoI与EcoRI同时对该基因与乳酸克鲁维酵母质粒pKLAC2进行双酶切，回收酶切产物，4℃连接过夜，转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中，PCR扩增鉴定疑似阳性转化子并测序，同时提取疑似阳性转化子的质粒进行双酶切鉴定，从而获得阳性转化子lys‑pKLAC2‑JM109，提取重组质粒lys‑pKLAC2并使用SacII酶切线性化，线性化的重组质粒转化乳酸克鲁维酵母GG779,经PCR扩增鉴定获得重组乳酸克鲁维酵母lys‑pKLAC2‑GG779。
技术研发人员：曹远东;汪石粮;周志;曾二生;程晓文;向勇
受保护的技术使用者：江西嘉博生物工程有限公司
技术研发日：2017.06.20
技术公布日：2017.10.10