本发明属于黄酮类化合物的提取领域，特别涉及一种从昆仑雪菊中提取紫铆因的方法。
背景技术：
：紫铆因，又名紫铆查尔酮，英文名称：butein、2',3,4,4'-tetrahydroxychalcone，cas登记号487-52-5，化学结构式如下：紫铆因是一种来源广泛的植物多酚类物质。已有报道证明，紫铆因可以抑制抗体相关的肾小球肾炎；在体外还可以抑制一些人类肿瘤细胞的增殖。文献1(“苦豆子酚性成分的研究”，王桂云，中国中药杂志，第34卷第10期，2009年5月)报道了一种从苦豆子中提取紫铆因的方法，5kg苦豆子种子粉末，提取得到50mg紫铆因。文献2(“昆仑雪菊中2个黄酮类化合物的分离鉴定及其抗氧化活性评价”，杨英士，南京农业大学学报，第37卷第4期，2014年)报道了一种从昆仑雪菊中提取得到紫铆因的方法，采用甲醇萃取昆仑雪菊，二次硅胶柱梯度洗脱，得到紫铆因，且测定了紫铆因的抗氧化活性。文献3(“紫铆因抑制膀胱癌细胞增殖的体内外研究”，张丽瑞，肿瘤防治研究，第41卷第7期，2014年)报道了紫铆因具有抗膀胱癌细胞增殖作用。文献4(cn200810038433.0)报道了紫铆因在制备抑制血管新生药物中的应用。可见，紫铆因有较好的用途，但是其提取方法往往是采用萃取和多次硅胶柱层析的方法，这种提取方法较为繁琐，且提取率低。为了克服该问题，本发明提出了一种全新的紫铆因提取方法。技术实现要素：本发明提供了一种紫铆因的提取方法，该方法以昆仑雪菊为原料，粉碎后用醇类溶剂提取，然后再用大孔树脂纯化，最后结晶和洗涤后，即可得到纯度较高的紫铆因。该方法具有操作简单，时间短且提取率和纯度高等优点。本发明的技术方案具体如下：一种紫铆因的提取方法，包括如下步骤：(1)以晾干的昆仑雪菊为原料，粉碎过筛得粉末；(2)将上述粉末加入到醇类溶剂中，采用索氏提取器提取3-10小时，过滤，取上清液；(3)将上清液加入到大孔吸附树脂h-60中，吸附2-10小时后，水洗树脂柱，再用乙醇-丙酮-正己烷的混合溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得初产物；(4)将初产物用乙醇回流溶解，放置结晶，过滤后再用低极性溶剂洗涤2次并干燥，得到紫铆因。优选的，第(1)步中用10-100g昆仑雪菊作为原料；第(1)步中粉碎过筛所采用的是选自100、200、300、400、500目的筛子。优选的，第(2)步中的醇类溶剂选自：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇，所加入溶剂的体积量是原料粉末重量的5-10倍。索氏提取时间选自3、4、5、6、7、8、9、10个小时。优选的，第(3)步中，大孔树脂的洗脱溶剂乙醇-丙酮-正己烷的体积比例范围为：8-10:3-5:1-2，吸附时间选自2、3、4、5、6、7、8、9、10个小时。优选的，第(4)步中所采用的低极性溶剂选自：石油醚、正己烷、氯仿、甲苯、乙醚等。采用本发明的方法提取紫铆因，具有操作简单，安全可靠，时间短，提取率和纯度高等优点，且适合大批量进行提取。具体实施方式下面结合具体实施例进一步阐释本发明。实施例1取50g晾干的昆仑雪菊，粉碎过200目筛得粉末；将该粉末加入到250ml甲醇中，采用索氏提取器提取8小时，过滤，取上清液；将上清液加入到500g大孔吸附树脂h-60中，吸附6小时，1.5l水分三次洗树脂柱，再用体积比例为10:5:1的乙醇-丙酮-正己烷混合溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得初产物；将初产物用20ml乙醇回流溶解，放置结晶，过滤后再用石油醚洗涤2次并干燥，得到黄色粉末紫铆因0.23g，对照标准品用高效液相检测，其特征锋位置相同，且计算得含量为98.1％。1h-nmr(dmso-d6,300mhz)δ:7.25(1h,d,j＝1.5hz,h-2),6.26(1h,d,j＝2.1hz,h-3′),6.37(1h,dd,j＝9.1,2.1hz,h-5′),6.75(1h,d,j＝8.1hz,h-5),7.21(1h,dd,j＝8.1,1.5hz,h-6),8.15(1h,d,j＝9.0hz,h-6′),7.62(1h,brs,h-α),7.62(1h,brs,h-β),9.82(1h,s,3-oh),9.25(1h,s,4-oh),10.76(1h,s,4′-oh),13.55(1h,s,2′oh)。ms：273.1[m+h]+。经核磁和质谱确认其为紫铆因。大孔树脂的筛选实验：采用与实施例1相同的方法，区别在于将大孔树脂替换，得到的结果如表1所示。表1：大孔树脂筛选实验结果序号大孔树脂类型产量(克)纯度(％)1h-600.2398.12d1010.0835.23hpd400a0.1152.14lsa-400.0540.35ab-80.1231.26xda-70.1027.1从表1中可以看出，h-60大孔树脂是提取紫铆因的最佳树脂。实施例2取100g晾干的昆仑雪菊，粉碎过100目筛得粉末；将该粉末加入到500ml甲醇中，采用索氏提取器提取10小时，过滤，取上清液；将上清液加入到1kg大孔吸附树脂h-60中，吸附10小时，3l水分三次洗树脂柱，再用体积比例为9:5:2的乙醇-丙酮-正己烷混合溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得初产物；将初产物用40ml乙醇回流溶解，放置结晶，过滤后再用石油醚洗涤2次并干燥，得到黄色粉末紫铆因0.48g，采用高效液相检测含量为97.5％。实施例3取10g晾干的昆仑雪菊，粉碎过500目筛得粉末；将该粉末加入到50ml乙醇中，采用索氏提取器提取5小时，过滤，取上清液；将上清液加入到100g大孔吸附树脂h-60中，吸附3小时，500ml水分三次洗树脂柱，再用体积比例为8:3:2的乙醇-丙酮-正己烷混合溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得初产物；将初产物用10ml乙醇回流溶解，放置结晶，过滤后再用氯仿洗涤2次并干燥，得到黄色粉末紫铆因0.04g，采用高效液相检测含量为98.8％。实施例4取20g晾干的昆仑雪菊，粉碎过200目筛得粉末；将该粉末加入到100ml乙醇中，采用索氏提取器提取5小时，过滤，取上清液；将上清液加入到200g大孔吸附树脂h-60中，吸附5小时，1l水分三次洗树脂柱，再用体积比例为10:5:1的乙醇-丙酮-正己烷混合溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得初产物；将初产物用15ml乙醇回流溶解，放置结晶，过滤后再用石油醚洗涤2次并干燥，得到黄色粉末紫铆因0.09g，采用高效液相检测含量为97.9％。当前第1页12