本发明涉及食品加工技术领域，具体是一种利用鱼溶浆生产蛋白小肽的方法。
背景技术：
鱼溶浆是鱼粉生产过程中产生的压榨废水。早期鱼粉生产工艺过程中，鱼溶浆通常不经回收直接向环境中排放，造成了严重的环境污染。鱼溶浆中含有丰富的优质蛋白，据p.j.bechtel，univ.ofalaska报道，鱼溶浆含蛋白6%，胃蛋白酶消化率大于95%，可溶性蛋白占70%，采用适当方法回收后的鱼溶浆蛋白可以用于饲料工业，用作动物饲料的原料。近年来，有关鱼溶浆回收利用的方法已有较多研究，如把鱼溶浆加入鱼粉中烘干(中国专利cn200710030735.9)，或经脱油、脱粘多糖处理后干燥成鱼溶浆蛋白粉(中国专利cn200710120346.5)等。由于鱼溶浆含鱼体组织中的可溶性蛋白和游离氨基酸，可将鱼溶浆加工成蛋白粉。但鱼溶浆中蛋白质分子量较大，并有较强的鱼腥气味，需要分解成小分子蛋白并去腥。
现有技术如授权公告号为cn102994601b的中国发明专利一种利用海洋胶原蛋白酶mcp-01制备胶原蛋白小肽的方法，包括如下步骤：（1）将海洋胶原蛋白酶mcp-01溶于tris-hcl缓冲液中，配成酶浓度为0.3～0.5mg/ml的酶液；（2）将牛肌腱i型不可溶胶原蛋白加入酶液中，在水浴锅中反应，在4℃条件下，离心后超滤，制得胶原蛋白小肽。该方法生产的胶原蛋白小肽分子量小但小肽的生物活性不强，功能性较弱。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种能得到分子量小、无腥味、活性高的蛋白小肽，原料利用率高的利用鱼溶浆生产蛋白小肽的方法。
本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种利用鱼溶浆生产蛋白小肽的方法，包括以下步骤：
脱脂：在鱼溶浆中加入有机溶剂，采用索氏提取法脱脂，有机溶剂为丙酮和乙醇混合物，体积比为1:1~3，鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2~3。反应温度为70~85℃，反应时间为2~3h，重复2~4次。利用相似相容原理，鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中，同时蛋白质不溶于有机溶剂，脂肪随有机溶剂蒸馏，与蛋白质分离开来，得到脱脂后的鱼溶浆；
分步酶解：在鱼溶浆中加入复合蛋白酶，复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶，体积比为1:0.4~0.8：0.6~1.0。采用红外线控温，酶解，复合酶添加量0.6~1.4%，ph为6.8~7.8，酶解温度为50~55℃，酶解时间为10~15min。酶解结束后灭酶，复合蛋白酶中不同蛋白酶对鱼匀浆中蛋白质的酶切位点不同，几种蛋白酶相互协作，酶解效率高且得到的蛋白质分子量小，容易被人体消化吸收。调节ph后再加入胃蛋白酶酶解，采用红外线控温，胃蛋白酶加入量为0.2~0.4%，ph为2.0~3.5，温度为37~39℃，酶解时间为4~7min。复合蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多胃蛋白酶的酶切位点，胃蛋白酶对上述蛋白质继续酶解，进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3~7min，过滤取滤液；
脱腥：在滤液中加入脱腥液，脱腥液成份及其重量份为：氯化钠10~15份、碳酸氢钠8~12份、紫苏水10~18份、柠檬酸6~10份、乳酸6~10份、活性蛋白肽0.1~0.3份和水80~100份，其中活性蛋白肽的氨基酸序列为hshacasysryyvsvcgyyvshrgrcyrclrcrvlhpgklcvcvncsr。搅拌均匀，静置。鱼糜中腥味成分主要由氧化三甲胺降解、脂肪氧化、含硫氮前体物质转化等途径产生。上述脱腥液既可与蛋白质中已产生的腥味物质反应，达到去腥的效果，还能抑制蛋白氧化，使蛋白粉产品在保质期内始终保持无腥味状态。活性蛋白肽可促进脱腥液中其他成分与腥味物质的反应，且可有效掩盖腥味；
超滤：将去腥后的滤液超滤，超滤膜规格为1~2kda，取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质，对鱼蛋白进行纯化，提高产品质量；
脱盐：将滤过液通过离子交换树脂脱盐，得到脱盐液体；
喷雾干燥：将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白小肽产品。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明以鱼溶浆为原料，既保护了环境，又对资源进行了合理运用，增加了鱼溶浆的附加值；2）本发明制备的蛋白小肽，分子量小，无腥味，蛋白纯度和活性高，产品质量优异；3）本发明脱腥液既可与蛋白质中已产生的腥味物质反应，达到去腥的效果，还能抑制蛋白氧化，使蛋白粉产品在保质期内始终保持无腥味状态；4）本发明酶解时采用红外线控温，大大缩短生产周期，减少时间成本和人力成本，加工方法简单，重现性高，适合大规模生产。
具体实施例
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种利用鱼溶浆生产蛋白小肽的方法，包括以下步骤：
1）脱脂：在鱼溶浆中加入有机溶剂，采用索氏提取法脱脂，有机溶剂为丙酮和乙醇混合物，体积比为1:1~3，鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2~3。反应温度为70~85℃，反应时间为2~3h，重复2~4次。利用相似相容原理，鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中，同时蛋白质不溶于有机溶剂，脂肪随有机溶剂蒸馏，与蛋白质分离开来，得到脱脂后的鱼溶浆；
2）分步酶解：在鱼溶浆中加入复合蛋白酶，复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶，体积比为1:0.4~0.8：0.6~1.0。采用红外线控温，酶解，复合酶添加量0.6~1.4%，ph为6.8~7.8，酶解温度为50~55℃，酶解时间为10~15min。酶解结束后灭酶，复合蛋白酶中不同蛋白酶对鱼匀浆中蛋白质的酶切位点不同，几种蛋白酶相互协作，酶解效率高且得到的蛋白质分子量小，容易被人体消化吸收。调节ph后再加入胃蛋白酶酶解，采用红外线控温，胃蛋白酶加入量为0.2~0.4%，ph为2.0~3.5，温度为37~39℃，酶解时间为4~7min。复合蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多胃蛋白酶的酶切位点，胃蛋白酶对上述蛋白质继续酶解，进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3~7min，过滤取滤液；
3）脱腥：在滤液中加入脱腥液，脱腥液成份及其重量份为：氯化钠10~15份、碳酸氢钠8~12份、紫苏水10~18份、柠檬酸6~10份、乳酸6~10份、活性蛋白肽0.1~0.3份和水80~100份，其中活性蛋白肽的氨基酸序列为hshacasysryyvsvcgyyvshrgrcyrclrcrvlhpgklcvcvncsr。搅拌均匀，静置。鱼糜中腥味成分主要由氧化三甲胺降解、脂肪氧化、含硫氮前体物质转化等途径产生。上述脱腥液既可与蛋白质中已产生的腥味物质反应，达到去腥的效果，还能抑制蛋白氧化，使蛋白粉产品在保质期内始终保持无腥味状态。活性蛋白肽可促进脱腥液中其他成分与腥味物质的反应，且可有效掩盖腥味；
4）超滤：将去腥后的滤液超滤，超滤膜规格为1~2kda，取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质，对鱼蛋白进行纯化，提高产品质量；
5）脱盐：将滤过液通过离子交换树脂脱盐，得到脱盐液体；
6）喷雾干燥：将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白小肽产品。
实施例2：
一种利用鱼溶浆生产蛋白小肽的方法，包括以下步骤：
1）脱脂：在鱼溶浆中加入有机溶剂，采用索氏提取法脱脂，有机溶剂为丙酮和乙醇混合物，体积比为1:2，鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2.4。反应温度为76℃，反应时间为2.6h，重复2次。利用相似相容原理，鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中，同时蛋白质不溶于有机溶剂，脂肪随有机溶剂蒸馏，与蛋白质分离开来，得到脱脂后的鱼溶浆；
2）分步酶解：在鱼溶浆中加入复合蛋白酶，复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶，体积比为1:0.6：0.9。采用红外线控温，酶解，复合酶添加量1%，ph为7.0，酶解温度为53℃，酶解时间为14min。酶解结束后灭酶，复合蛋白酶中不同蛋白酶对鱼匀浆中蛋白质的酶切位点不同，几种蛋白酶相互协作，酶解效率高且得到的蛋白质分子量小，容易被人体消化吸收。调节ph后再加入胃蛋白酶酶解，采用红外线控温，胃蛋白酶加入量为0.3%，ph为2.7，温度为38℃，酶解时间为5min。复合蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多胃蛋白酶的酶切位点，胃蛋白酶对上述蛋白质继续酶解，进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3min，过滤取滤液；
3）脱腥：在滤液中加入脱腥液，脱腥液成份及其重量份为：氯化钠13份、碳酸氢钠10份、紫苏水13份、柠檬酸8份、乳酸8份、活性蛋白肽0.2份和水90份，其中活性蛋白肽的氨基酸序列为hshacasysryyvsvcgyyvshrgrcyrclrcrvlhpgklcvcvncsr。搅拌均匀，静置。鱼糜中腥味成分主要由氧化三甲胺降解、脂肪氧化、含硫氮前体物质转化等途径产生。上述脱腥液既可与蛋白质中已产生的腥味物质反应，达到去腥的效果，还能抑制蛋白氧化，使蛋白粉产品在保质期内始终保持无腥味状态。活性蛋白肽可促进脱腥液中其他成分与腥味物质的反应，且可有效掩盖腥味；
4）超滤：将去腥后的滤液超滤，超滤膜规格为1.5kda，取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质，对鱼蛋白进行纯化，提高产品质量；
5）脱盐：将滤过液通过离子交换树脂脱盐，得到脱盐液体；
6）喷雾干燥：将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白小肽产品。
实施例3：
一种利用鱼溶浆生产蛋白小肽的方法，包括以下步骤：
1）脱脂：在鱼溶浆中加入有机溶剂，采用索氏提取法脱脂，有机溶剂为丙酮和乙醇混合物，体积比为1:1.5，鱼溶浆与有机溶剂体积比为1:2.7。反应温度为75℃，反应时间为2.3h，重复3次。利用相似相容原理，鱼溶浆中脂肪溶解于有机溶剂中，同时蛋白质不溶于有机溶剂，脂肪随有机溶剂蒸馏，与蛋白质分离开来，得到脱脂后的鱼溶浆；
2）分步酶解：在鱼溶浆中加入复合蛋白酶，复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶，体积比为1:0.6：0.7。采用红外线控温，酶解，复合酶添加量1.2%，ph为7.0，酶解温度为53℃，酶解时间为14min。酶解结束后灭酶，复合蛋白酶中不同蛋白酶对鱼匀浆中蛋白质的酶切位点不同，几种蛋白酶相互协作，酶解效率高且得到的蛋白质分子量小，容易被人体消化吸收。调节ph后再加入胃蛋白酶酶解，采用红外线控温，胃蛋白酶加入量为0.3%，ph为2.7，温度为38℃，酶解时间为6min。复合蛋白酶酶切后的蛋白质暴露了很多胃蛋白酶的酶切位点，胃蛋白酶对上述蛋白质继续酶解，进一步减小蛋白质的分子量。沸水浴灭酶3min，过滤取滤液；
3）脱腥：在滤液中加入脱腥液，脱腥液成份及其重量份为：氯化钠14份、碳酸氢钠10份、紫苏水14份、柠檬酸8份、乳酸8份、活性蛋白肽0.3份和水100份，其中活性蛋白肽的氨基酸序列为hshacasysryyvsvcgyyvshrgrcyrclrcrvlhpgklcvcvncsr。搅拌均匀，静置。鱼糜中腥味成分主要由氧化三甲胺降解、脂肪氧化、含硫氮前体物质转化等途径产生。上述脱腥液既可与蛋白质中已产生的腥味物质反应，达到去腥的效果，还能抑制蛋白氧化，使蛋白粉产品在保质期内始终保持无腥味状态。活性蛋白肽可促进脱腥液中其他成分与腥味物质的反应，且可有效掩盖腥味；
4）超滤：将去腥后的滤液超滤，超滤膜规格为1.3kda，取滤过液。通过超滤可去除分子量大的杂质，对鱼蛋白进行纯化，提高产品质量；
5）脱盐：将滤过液通过离子交换树脂脱盐，得到脱盐液体；
6）喷雾干燥：将脱盐液体喷雾干燥得到蛋白小肽产品。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
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