本发明涉及双降醇制备技术领域，具体为一种制备双降醇的工艺。
背景技术：
甾体药物是品种多和应用广泛的一大类药物，临床上需求量仅次于抗生素，主要用于治疗风湿病、心血管、胶原性病症、淋巴白血病、肿瘤、细菌性脑炎、皮肤病、内分泌失调、老年性疾病等疾病。
双降醇(21-hydroxy-20-methylpregn-4-en-3-one)分子式为c22h34o2，分子量为330.5，是甾体激素类药物的一种重要中间体，具有重要的商业价值，目前，我国在制备双降醇时，一般采用甾体药物进行制备，而甾体药物合成步骤多，反应复杂，且基团的远程效应十分明显，分离纯化困难，不便于人们使用，因此提出一种制备双降醇的工艺。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明提供了一种制备双降醇的工艺，具备快速制备双降醇，且双降醇纯化和精制度高等优点，解决了现在市面上的双降醇制备繁琐，且制备纯度低的问题。
为实现上述可以快速制备双降醇，且双降醇纯化和精制度高的目的，本发明提供如下技术方案：一种制备双降醇的工艺，包括如下步骤：
步骤一、选取适量的放线菌中的分枝杆菌活体菌种进行多重诱变制备c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株，将c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株放入发酵培养基中，制成发酵液；
步骤二、将适量的发酵液注入玻璃瓶中，并对发酵液进行搅拌和水浴加热；
步骤三、提取适量的稀硫酸，将稀硫酸中和至ph3～3.5，加入3-6ml珍珠岩助滤剂，加热搅拌1～2h，加入聚合氯化铝和聚丙烯酰胺，持续搅拌2～3h，停止加热，排出热水，用冷水浴降至45～50℃，再过滤得到黄色粉状固体；
步骤四、将黄色粉状固体注入至步骤二中的玻璃瓶中，进行搅拌，再向玻璃瓶中注入甲醇溶液，在室温下持续搅拌；
步骤五、将混合溶液进行过滤抽干，将滤液通过常压进行蒸馏，去除甲醇，再降温、过滤并烘干得到粗品；
步骤六、向三角瓶中注入适量的甲醇溶液并将粗品将入至三角瓶中，再进行水浴加热和搅拌，直至粗品完全溶解，再加入适量的活性炭放置2～3h，再进行压滤，将滤液通过常压蒸馏减少至一半，在常温下放置分出结晶，最后进行过滤、抽干和烘干得到双降醇精制成品。
优选的，所述发酵培养基的温度为30～35℃，所述发酵培养基为硝酸钠，磷酸二氢钾，硫酸镁，玉米浆，豆饼油制成。
优选的，所述发酵液的水浴加热温度为70～80℃。
优选的，所述聚合氯化铝的加入量为25-35ml，所述聚丙烯酰胺的加入量为1-2g。
优选的，所述甲醇溶液的体积为3l，所述甲醇溶液中的甲醇与水的浓度体积比为80％。
优选的，所述粗品和甲醇溶液的水浴加热温度为55-65℃。
优选的，所述c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株由分枝杆菌通过紫外线-licl以及亚硝基胍复合诱变制备。
与现有技术相比，本发明提供了一种制备双降醇的工艺，具备以下一个有益效果：
该制备双降醇的工艺，通过使用放线菌中的分枝杆菌活体菌种进行多重诱变制备c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株并通过发酵培养液制成发酵液，通过将稀硫酸、珍珠岩助滤剂、聚合氯化铝及聚丙烯酰胺进行混合加热搅拌制成混合溶液，将混合溶液与发酵液混合并加入甲醇溶液再进过搅拌、过滤、蒸馏及烘干能够制成双降醇粗品，再通过向粗品中加入甲醇溶液进行加热、搅拌、压滤机烘干能够得到双降醇精制成品，从而能够能够快速有效的制备双降醇，且制备的双降醇纯化和精制度高，便于人们使用。
具体实施方式
下面是对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种制备双降醇的工艺，包括如下步骤：
步骤一、选取适量的放线菌中的分枝杆菌活体菌种进行多重诱变制备c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株，将c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株放入发酵培养基中，制成发酵液；
步骤二、将适量的发酵液注入玻璃瓶中，并对发酵液进行搅拌和水浴加热；
步骤三、提取5ml的稀硫酸，将稀硫酸中和至ph3，加入3ml的珍珠岩助滤剂，加热搅拌1h，加入聚合氯化铝和聚丙烯酰胺，持续搅拌2h，停止加热，排出热水，用冷水浴降至45℃，再过滤得到黄色粉状固体；
步骤四、将黄色粉状固体注入至步骤二中的玻璃瓶中，进行搅拌，再向玻璃瓶中注入甲醇溶液，在室温下持续搅拌；
步骤五、将混合溶液进行过滤抽干，将滤液通过常压进行蒸馏，去除甲醇，再降温、过滤并烘干得到粗品；
步骤六、向三角瓶中注入适量的甲醇溶液并将粗品加入至三角瓶中，再进行水浴加热和搅拌，直至粗品完全溶解，再加入适量的活性炭放置2h，再进行压滤，将滤液通过常压蒸馏减少至一半，在常温下放置分出结晶，最后进行过滤、抽干和烘干得到双降醇精制成品。
其中，步骤一中c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株由分枝杆菌通过紫外线-licl以及亚硝基胍复合诱变制备，发酵培养基的温度为32℃，所述发酵培养基为硝酸钠，磷酸二氢钾，硫酸镁，玉米浆，豆饼油制成，步骤二中的发酵液的水浴加热温度为75℃，步骤三种聚合氯化铝的加入量为30ml，聚丙烯酰胺的加入量为1.3g，步骤四中甲醇溶液的体积为3l，甲醇溶液中的甲醇与水的浓度体积比为80％，步骤六中粗品和甲醇溶液的水浴加热温度为60℃。
实施例2
一种制备双降醇的工艺，包括如下步骤：
步骤一、选取适量的放线菌中的分枝杆菌活体菌种进行多重诱变制备c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株，c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株的诱变方式还可以采用亚硝酸进行诱变，其中亚硝酸的浓度为0.05mol/l，在25℃保温15分钟，将c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株放入发酵培养基中，制成发酵液；
步骤二、将适量的发酵液注入玻璃瓶中，并对发酵液进行搅拌和水浴加热，加热温度为78℃，加热5分钟，搅拌时采用顺时针搅拌；
步骤三、提取8ml的稀硫酸，将稀硫酸中和至ph3.3，加入6g的硅藻土助滤剂，加热搅拌1h，加入聚合氯化铝和聚丙烯酰胺，其中聚合氯化铝为40ml，聚丙烯酰胺为1.7g，持续搅拌2h，停止加热，排出热水，用冷水浴降至48℃，再过滤得到黄色粉状固体；
步骤四、将黄色粉状固体注入至步骤二中的玻璃瓶中，进行搅拌，再向玻璃瓶中注入甲醇溶液，甲醇溶液的体积为3l，甲醇溶液中的甲醇与水的浓度体积比为80％，在室温下持续搅拌；
步骤五、将混合溶液进行过滤抽干，将滤液通过常压进行蒸馏，去除甲醇，再降温、过滤并烘干得到粗品；
步骤六、向三角瓶中注入2.5l的甲醇溶液并将粗品加入至三角瓶中，再进行水浴加热和搅拌，加热温度为65℃，直至粗品完全溶解，再加入适量的活性炭放置2h，再进行压滤，将滤液通过常压蒸馏减少至一半，在常温下放置分出结晶，最后进行过滤、抽干和烘干得到双降醇精制成品。
实施例3
一种制备双降醇的工艺，包括如下步骤：
步骤一、选取适量的放线菌中的分枝杆菌活体菌种进行多重诱变制备c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株，c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株的诱变方式还可以采用ems母液进行诱变，ems母液诱变20分钟后，加入50倍生理盐水稀释，并进行多次离心、洗涤，以终止反应，然后将c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株放入发酵培养基中，发酵培养基的温度为32℃，所述发酵培养基为葡萄糖，硝酸钠，磷酸二氢钾，硫酸镁，麦芽汁，豆饼油制成，并在发酵培养基中制成发酵液；
步骤二、将20ml的发酵液注入玻璃瓶中，并对发酵液进行搅拌和水浴加热,加热温度为74℃；
步骤三、提取10ml的稀硫酸，将稀硫酸中和至ph3.5，加入6ml的珍珠岩助滤剂，加热搅拌2h，加入聚合氯化铝和聚丙烯酰胺，其中聚合氯化铝为35ml，聚丙烯酰胺为2.0g，持续搅拌3h，停止加热，排出热水，用冷水浴降至50℃，再过滤得到黄色粉状固体；
步骤四、将黄色粉状固体注入至步骤二中的玻璃瓶中，进行搅拌，再向玻璃瓶中注入甲醇溶液，甲醇溶液的体积为2l，甲醇溶液中的甲醇与水的浓度体积比为65％，在室温下持续搅拌；
步骤五、将混合溶液进行过滤抽干，将滤液通过常压进行蒸馏，去除甲醇，再降温、过滤并烘干得到粗品；
步骤六、向三角瓶中注入适量的甲醇溶液并将粗品加入至三角瓶中，再进行水浴加热和搅拌，加热温度为62℃，直至粗品完全溶解，再加入50g的活性炭放置3h，再进行压滤，将滤液通过常压蒸馏减少至一半，在常温下放置分出结晶，最后进行过滤、抽干和烘干得到双降醇精制成品。
综上所述，该制备双降醇的工艺，通过使用放线菌中的分枝杆菌活体菌种经过多重诱变制备c1，2脱氢酶以及c22脱氢酶双重缺陷菌株并通过发酵培养基制成培养液装入玻璃瓶中，再进行水浴加热和搅拌，将稀硫酸中和至ph3～3.5，加入珍珠岩助滤剂、聚合氯化铝和聚丙烯酰胺，加热搅拌，再用冷水浴降温，过滤得到黄色粉状固体，将黄色粉状固体注入至玻璃瓶中，向玻璃瓶中注入甲醇溶液，在室温下持续搅拌，将混合溶液进行过滤抽干和蒸馏，去除甲醇，再降温、过滤并烘干得到粗品，向三角瓶中注入适量的甲醇溶液并将粗品将入至三角瓶中，再进行水浴加热和搅拌，直至粗品完全溶解，再加入适量的活性炭，再进行压滤，将滤液通过常压蒸馏，在常温下放置分出结晶，最后进行过滤、抽干和烘干得到双降醇精制成品。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。