用于产生补身醇及其混合物的倍半萜合酶的制作方法

文档序号:19429296发布日期:2019-12-17 16:12阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种产生补身醇或包含补身醇的混合物的方法,包括:

a.使无环法呢基二磷酸酯(fpp)前体与具有倍半萜合酶活性的多肽接触,以产生补身醇或包含补身醇与一种或多种萜烯的混合物,其中该多肽包含与seqidno:2有至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列同一性的氨基酸序列,或包含seqidno:2的氨基酸序列;和

b.任选地,分离补身醇。

2.根据权利要求1所述的方法,包括用编码具有补身醇合酶活性的多肽的核酸转化宿主细胞或非人宿主生物体,其中该多肽包含与seqidno:2有至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列同一性的氨基酸序列,或包含seqidno:2。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其进一步包括在允许产生多肽的条件下,培养能够产生fpp并经转化以表达多肽的非人宿主生物体或宿主细胞,其中该多肽包含与seqidno:2有至少55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或100%序列同一性的氨基酸序列。

4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其包括使用化学合成或生物化学合成将补身醇转化为补身醇衍生物。

5.一种分离的多肽,其具有倍半萜合酶活性,包含与seqidno:2有至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列同一性的氨基酸序列或包含seqidno:2的氨基酸序列。

6.一种分离的核酸分子,

a.包含编码权利要求5的多肽的核苷酸序列;

b.包含与seqidno:1或seqidno:3的核苷酸序列有至少75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列同一性的核苷酸序列;或者

c.包含seqidno:1或seqidno:3的核苷酸序列。

7.一种载体,包含:

c.权利要求6的核酸分子;或者

d.编码权利要求5的多肽的核酸。

8.根据权利要求7所述的载体,其中该载体是原核载体、病毒载体或真核载体。

9.一种宿主细胞或非人宿主生物体,包含:

a.权利要求6的分离的核酸;或者

b.权利要求7或8的载体。

10.根据权利要求2或3所述的方法,其中该细胞或非人宿主生物体是植物、原核生物、真菌或微生物。

11.权利要求10的方法,其中该微生物是细菌或酵母。

12.根据权利要求11所述的方法,其中该细菌是大肠杆菌,并且该酵母是啤酒酵母。

13.权利要求7的多肽在产生补身醇或包含补身醇与一种或多种萜烯的混合物中的用途。

14.根据权利要求13所述的用途,其中该混合物包含补身醇和橙花叔醇。

15.根据权利要求1所述的方法,其中该混合物包含补身醇和橙花叔醇。


技术总结
本申请涉及一种通过使至少一种多肽与法呢基二磷酸酯(FPP)接触而产生补身醇和/或补身醇衍生物的方法。该方法可以在体外或体内进行。还提供了在该方法中有用的多肽的氨基酸序列和编码该多肽的核酸。该方法还提供了经遗传修饰以表达该多肽,并可用于产生补身醇和/或补身醇衍生物的宿主细胞或生物体。

技术研发人员:李攀;王祺;何绣峰;O·海弗里格
受保护的技术使用者:弗门尼舍有限公司;芬美意香料(中国)有限公司
技术研发日:2018.04.27
技术公布日:2019.12.17
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