除草醚半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用与流程

文档序号:19489601发布日期:2019-12-21 04:14阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种除草醚半抗原,其特征在于,其具有如下结构式:

2.如权利要求1所述的除草醚半抗原的制备方法,其特征在于,其是由2,4-二氯苯酚与2-氯-5-硝基苯胺反应得到。

3.如权利要求2所述的除草醚半抗原的制备方法,其特征在于,该制备方法为:取2,4-二氯苯酚加乙腈溶解,加入强碱和无水碘化亚铜,充分搅拌后,加入2-氯-5-硝基苯胺,回流反应12h,反应完毕后,进行分离纯化后得到除草醚半抗原;其中,所述2,4-二氯苯酚、强碱和2-氯-5-硝基苯胺的物质的量之比为1:(1.0-1.5):(1.0-1.2);所述强碱为koh、naoh或nah中的任意一种。

4.如权利要求2所述的除草醚半抗原的制备方法,其特征在于,该制备方法的具体步骤如下:取2,4-二氯苯酚1.6g加乙腈100ml溶解,加入koh0.67g和无水碘化亚铜0.7g,充分搅拌后,加入2-氯-5-硝基苯胺1.85g,回流反应12h,反应完毕后降至室温,过滤,滤液蒸干,用60ml体积比为1:3的无水乙醚-正己烷重结晶,得到除草醚半抗原。

5.一种除草醚人工抗原,其特征在于,其是载体蛋白和权利要求1所述的除草醚半抗原偶联得到的偶联物。

6.如权利要求5所述的除草醚人工抗原,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白或血蓝蛋白。

7.如权利要求5所述的除草醚人工抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

将所述除草醚半抗原溶于有机溶剂中,即为a液;

将载体蛋白溶解在0.05mol/l的cb缓冲液中,得到b液;以及

将所述a液滴加到所述b液中,4℃反应24h,加硼氢化钠,继续搅拌3h,纯化后得到所述除草醚人工抗原。

8.一种除草醚抗体,其特征在于,它是由权利要求5所述的除草醚人工抗原经动物免疫得到,其能与除草醚发生特异性免疫反应。

9.一种权利要求8所述的除草醚抗体在检测除草醚残留中的应用。


技术总结
本发明公开了除草醚半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用,本发明提供的除草醚半抗原既最大程度保留了除草醚的特征结构,使得除草醚半抗原的免疫原性明显增强,又具有可以与载体蛋白发生偶联的醛基;用除草醚半抗原与载体蛋白偶联后得到的除草醚人工抗原去免疫动物,更有利于刺激动物免疫应答产生特异性更强、灵敏度更高的抗体,经检测除草醚抗体的灵敏度可达0.1μg/L,与其他农药的交叉反应率低,为后续建立除草醚的各种免疫分析方法提供了基础。

技术研发人员:吴小胜;崔海峰;万宇平;马玉华;朱亮亮;王喜平;王兆芹;杨春艳;丛倩千
受保护的技术使用者:北京勤邦生物技术有限公司
技术研发日:2019.08.26
技术公布日:2019.12.20
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