一种31/2水三磷酸腺苷二钠化合物的制作方法

本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及一种31/2水三磷酸腺苷二钠化合物及制法。
背景技术：
：三磷酸腺苷二钠，化学名：腺嘌呤核苷-5’-三磷酸酯二钠盐水合物，分子式：c10h14n5na2o13p3·31/2h2o，分子量为614.19，结构式如下所示，三磷酸腺苷二钠是核苷酸衍生物，参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。当体内吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应等需要能量时，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同时释放出能量。三磷酸腺苷二钠能够穿透血-脑脊液屏障，能提高神经细胞膜性结构的稳定性和重建能力、促进神经突起的再生长。三磷酸腺苷二钠是辅酶类药物，临床用于因组织损伤、细胞酶活力下降所致的各种疾病。如心力衰竭、心肌炎、心肌梗塞、脑动脉硬化、冠状动脉硬化、进行性肌萎缩、脑出血后遗症、急慢性肝炎、肝硬化和听力障碍等，还用于进行性肌萎缩、脑溢血后遗症、心功能不全、心肌疾病及肝炎等治疗。专利201510280340.9公开了一种三磷酸腺苷二钠的制备工艺，通过生化反应，树脂分离和进一步精制制得三磷酸腺苷二钠化合物，其从源头开始制备，用适量室温的反渗透水溶解腺苷制成腺苷溶液，节约能耗50％以上，有效的避免了对酶的损害。专利200710019776.8公开了一种三磷酸腺苷二钠的生产方法，包括反应、灭活、树脂分离、脱色、超滤、结晶等步骤，采用氧化磷酸化方法，工艺便于工业化大生产，收率高，减少了对环境的污染，操作简便、安全。专利201711377696.x公开了一种三磷酸腺苷二钠注射液及其制备方法，所述的制备方法为将适量的三磷酸腺苷二钠溶解于温度为20℃～30℃，占总体积为50％～65％的注射用水中，搅拌使之溶解，再加入精氨酸直至溶液ph值为8.90～9.40时，加入注射用水至全量，药液经除菌过滤后，灌装、压塞、轧盖、包装即得。本发明仅以精氨酸作稳定剂，它是一种人体必需氨基酸，减小了药物的副作用，还有效地防止三磷酸腺苷二钠的降解，提高了临床用药的安全性。目前市场上的三磷酸腺苷二钠原料主要为三水合物，原料药稳定性较差，纯度低，易吸湿，工艺复杂，不便于工业化生产和储存。本发明人以现有三磷酸腺苷二钠粗品为原料，经过大量的试验，制得了一种不同于现有技术的含31/2水的三磷酸腺苷二钠化合物，并通过试验发现31/2水的三磷酸腺苷二钠化合物具有热稳定性好、纯度高、吸湿性弱的优点，而且工艺简单，收率高，重复性强，适合于工业化生产。技术实现要素：本发明的目的在于开发和制备一种新的三磷酸腺苷二钠化合物产品，克服目前市场上三磷酸腺苷二钠原料药的稳定性差、纯度低、易吸湿等问题。为解决这些问题，本发明制备出了一种31/2水三磷酸腺苷二钠化合物。本发明还提供了一种31/2水三磷酸腺苷二钠化合物及制法。本发明还提供了一种含有31/2水三磷酸腺苷二钠化合物的药物组合物。本发明的技术方案如下：一种31/2水三磷酸腺苷二钠化合物，分子式为c10h14n5na2o13p3·31/2h2o，分子量为614.19，结构式如下所示，本发明所述的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物，其用粉末x射线衍射测定法测定，以2θ±0.2°衍射角表示的x射线粉末衍射图谱如图1所示，在5.9°，11.7°，14.1°，17.3°，18.9°，23.3°，27.4°处显示出特征衍射峰。一种31/2水三磷酸腺苷二钠化合物的制备方法，具体包括如下步骤：(1)将乙醇、水和碳酸钠混合搅拌溶解，溶解完全后加入三磷酸腺苷，室温反应，减压浓缩，室温析晶，过滤，干燥，得白色固体三磷酸腺苷二钠粗品；(2)将三磷酸腺苷二钠粗品溶于水，控制水温为50℃以下，制成5～15％水溶液，加入活性炭，搅拌吸附，过滤脱炭，得粗品溶液；(3)搅拌下，加入结晶溶剂乙醇，逐渐析出晶体，静置3～6小时，过滤，用乙醇洗涤；(4)将过滤得到的晶体减压干燥，得到三磷酸腺苷二钠化合物。作为本发明一优选实施方案，其步骤(1)中室温反应4～6小时，室温析晶1小时，40～50℃干燥1～2小时。作为本发明一优选实施方案，其步骤(2)中控制水温为40℃以下，制成10％水溶液。作为本发明一优选实施方案，其步骤(2)中加入溶液总重量0.1％的活性炭，搅拌吸附15～30min。作为本发明一优选实施方案，其步骤(3)中搅拌速度为300～600r/m，乙醇与溶液总重的比为1.2～3.5。作为本发明一优选实施方案，其步骤(4)中减压干燥条件是35～50℃减压干燥30～50min。一种药物组合物，其包含本发明所述的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物和药学上可接受的赋形剂。本发明所述的药物组合物还含有磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、依地酸二钠、苯甲醇、氢氧化钠等。本发明所述的药物组合物为三磷酸腺苷二钠和磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、依地酸二钠、苯甲醇、氢氧化钠制成的无菌注射液。规格包含1ml：10mg和2ml：20mg。与现有技术相比，本发明具有如下优点：1、本发明提供的三磷酸腺苷二钠化合物纯度高，并具有较好的热稳定性，并且基本不吸湿。2、本发明提供的三磷酸腺苷二钠化合物制备方法工艺简单，收率高，重复性强，适合于工业化生产。3、本发明提供的含有三磷酸腺苷二钠化合物的药物组合物稳定性很好，从而提高了用药安全性和有效性，降低了不良反应的发生率。附图说明以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：图1为本发明的三磷酸腺苷二钠化合物的x射线粉末衍射图。具体实施方式以下实施例是对本发明的进一步说明，但绝不是对本发明范围的限制。下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。实施例131/2水三磷酸腺苷二钠化合物的制备(1)将369g乙醇、246g水和28.5g碳酸钠混合搅拌溶解，溶解完全后加入124.8g三磷酸腺苷，室温反应5小时，减压浓缩，室温析晶1小时，过滤，45℃干燥2小时，得白色固体三磷酸腺苷二钠粗品125.5g；(2)将三磷酸腺苷二钠粗品125.5g溶于1129.5g水中，水温为43℃，制成10％水溶液，加入1.255g活性炭，搅拌吸附20min，过滤脱炭，得粗品溶液；(3)搅拌速度为450r/m，加入结晶溶剂乙醇2761g，逐渐析出晶体，静置5小时，过滤，用乙醇洗涤；(4)将过滤得到的晶体42℃减压干燥44min，得到三磷酸腺苷二钠化合物109.94g，收率87.6％。实施例231/2水三磷酸腺苷二钠化合物的制备(1)将394g乙醇、262g水和30.4g碳酸钠混合搅拌溶解，溶解完全后加入133g三磷酸腺苷，室温反应6小时，减压浓缩，室温析晶1小时，过滤，50℃干燥1小时，得白色固体三磷酸腺苷二钠粗品133.8g；(2)将三磷酸腺苷二钠粗品133.8g溶于2637.2g水中，水温为40℃，制成5％水溶液，加入2.771g活性炭，搅拌吸附15min，过滤脱炭，得粗品溶液；(3)搅拌速度为600r/m，加入结晶溶剂乙醇9698.5g，逐渐析出晶体，静置6小时，过滤，用乙醇洗涤；(4)将过滤得到的晶体35℃减压干燥50min，得到三磷酸腺苷二钠化合物114.8g，收率85.8％。实施例331/2水三磷酸腺苷二钠化合物的制备(1)将455g乙醇、303g水和35.2g碳酸钠混合搅拌溶解，溶解完全后加入153.7g三磷酸腺苷，室温反应4小时，减压浓缩，室温析晶1小时，过滤，40℃干燥2小时，得白色固体三磷酸腺苷二钠粗品154.6g；(2)将三磷酸腺苷二钠粗品154.6g溶于876.1g水中，水温为40℃，制成15％水溶液，加入1.031g活性炭，搅拌吸附30min，过滤脱炭，得粗品溶液；(3)搅拌速度为400r/m，加入结晶溶剂乙醇1236.84g，逐渐析出晶体，静置3小时，过滤，用乙醇洗涤；(4)将过滤得到的晶体50℃减压干燥30min，得到三磷酸腺苷二钠化合物139.6g，收率90.3％。实施例4三磷酸腺苷二钠药物组合物的制备处方：制备过程：(1)安瓿瓶处理：安瓿瓶经超声波清洗，注射用水精洗，高温干燥后使用。(2)在配料罐中加入2/3总配量的注射用水，冷却至40℃以下，加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、依地酸二钠搅拌溶解，加入甘油、苯甲醇搅拌溶解，最后加入三磷酸腺苷二钠搅拌至完全溶解，用10％氢氧化钠溶液调节ph在8.9-9.3之间。(3)补加注射用水至全量并搅匀，充分搅拌至药液均匀，按0.04％加入针剂用活性炭，回流30min。(4)粗滤除炭，取样，药液检验合格后，经0.22μm精滤器过滤，药液可见异物合格后灌封。(5)灌装、封口并按要求检查装量。(6)流通蒸汽100℃灭菌15min，检漏。(7)灯检、包装、检验、入库。实施例5三磷酸腺苷二钠药物组合物的制备处方：制备过程：(1)安瓿瓶处理：安瓿瓶经超声波清洗，注射用水精洗，高温干燥后使用。(2)在配料罐中加入2/3总配量的注射用水，冷却至40℃以下，加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、依地酸二钠搅拌溶解，加入甘油、苯甲醇搅拌溶解，最后加入三磷酸腺苷二钠搅拌至完全溶解，用10％氢氧化钠溶液调节ph在8.9-9.3之间。(3)补加注射用水至全量并搅匀，充分搅拌至药液均匀，按0.04％加入针剂用活性炭，回流30min。(4)粗滤除炭，取样，药液检验合格后，经0.22μm精滤器过滤，药液可见异物合格后灌封。(5)灌装、封口并按要求检查装量。(6)流通蒸汽100℃灭菌15min，检漏。(7)灯检、包装、检验、入库。对比例1三磷酸腺苷二钠化合物(3水)的制备根据专利201510280340.9公开的三磷酸腺苷二钠的制备工艺，通过生化反应，树脂分离和进一步精制制备三磷酸腺苷二钠化合物。对比例2三磷酸腺苷二钠药物组合物的制备根据专利201711377696.x公开的一种三磷酸腺苷二钠注射液及其制备方法将20g三磷酸腺苷二钠溶解于温度为26℃，1100ml的注射用水中，搅拌使之溶解，再加入21.7g精氨酸直至溶液ph值为9.25时，加入注射用水至2000ml，药液经除菌过滤后，灌装、封口、灭菌检漏、包装。试验例1纯度比较本发明人对本发明实施例1～3和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物进行了纯度检测，结果如下：实施例实施例1实施例2实施例3对比例1纯度(％)99.499.599.497.6结论：由上表数据可明显看出，本发明实施例1～3制备的三磷酸腺苷二钠化合物纯度明显好于对比例1制备的样品，说明了本发明技术方案对提高三磷酸腺苷二钠化合物纯度具有显著效果。试验例2热稳定性试验本发明人将本发明实施例1～3和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物置于温度60℃，相对湿度75％条件下30天，分别于0、10、20、30天进行检测，考察指标为性状、澄清度与颜色、含量和有关物质。结果如下：结论：由上表数据可明显看出，本发明实施例1～3制备的三磷酸腺苷二钠化合物热稳定性明显好于对比例1制备的样品，说明了本发明技术方案对提高三磷酸腺苷二钠化合物热稳定性具有显著效果。试验例3吸湿性考察本发明人将本发明实施例1～3和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物置于开口洁净培养皿中，摊成≤5mm厚的薄层，各两份，分别放入横式密闭容器中，在25℃分别于相对湿度75％和92.5％条件下放置10天，于第5天和第10天取样，通过水分检测试验测量各样品的水分含量，试验结果与0天比较，结果如下：结论：由上表数据可明显看出，本发明实施例1～3制备的三磷酸腺苷二钠化合物吸湿性明显小于对比例1制备的样品，基本不吸湿，说明了本发明技术方案对改善三磷酸腺苷二钠化合物吸湿性具有显著效果。试验例4稳定性考察本发明人将本发明实施例4～5和对比例2制备的三磷酸腺苷二钠化合物进行加速和长期稳定性考察试验。加速试验考察条件为温度40±2℃，相对湿度75％±5％，放置6个月，分别于0、1、2、3、6月取样；长期试验考察条件为温度25±2℃，相对湿度60％±5％，放置24个月，分别于0、3、6、9、12月取样。考察指标为性状、ph、颜色和有关物质。结果如下：加速试验结果：长期试验结果：结论：由上表数据可明显看出，本发明实施例4～5制备的三磷酸腺苷二钠药物组合物稳定性明显好于对比例2制备的样品，说明了本发明技术方案对提高三磷酸腺苷二钠药物组合物稳定性具有显著效果。试验例531/2水三磷酸腺苷二钠化合物的确认为了充分验证本发明三磷酸腺苷二钠化合物中的31/2水为结晶水，本发明人通过热重分析法、60℃热稳定性10天、冷冻真空干燥失重法三种方法，考察各实施例和对比例的水分结果，具体如下：1、热重分析法热重分析是样品在高温状态下分解前的失重，是验证结晶水或吸附水的重要方法，本发明人分别对各实施例和对比例制备的三磷酸腺苷二钠化合物进行了热重分析，结果汇总如下：实施例热重法失重(％)实施例110.27实施例210.26实施例310.25对比例18.93结果，实施例1～3制备的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物失重与含有的31/2个水的结果(理论值10.26％)基本一致；对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物失重与含有3个水的结果(理论值8.92％)基本一致。推断本发明实施例1～3和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物所含水为结晶水。2、60℃热稳定性10天将本发明实施例制备的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物分别置于60℃烘箱中10天，分别于0、10天用卡尔费休法检测水分，结果如下：实施例0天(％)10天(％)实施例110.2910.28实施例210.3010.28实施例310.2610.25对比例18.988.95结果，高温60℃放置10天，实施例1～3制备的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物水分基本没有明显变化，推断本发明实施例1～3和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物所含水为结晶水。3、冷冻真空干燥16小时将本发明实施例1～3制备的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物分别置于-35℃冷冻干燥机中抽真空16小时，分别于0、16小时用卡尔费休法检测水分，结果如下：实施例0小时(％)16小时(％)实施例110.2910.27实施例210.3010.28实施例310.2610.26对比例18.988.96结果，低温-35℃冷冻真空干燥16小时，实施例1～3制备的31/2水三磷酸腺苷二钠化合物和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物水分基本没有明显变化，推断本发明实施例1～3和对比例1制备的三磷酸腺苷二钠化合物所含水为结晶水。当前第1页12