一种大容量核酸纯化装置的制作方法

本实用新型涉及一种大容量核酸纯化装置。

背景技术：

众所周知，核酸包括dna和rna。dna是遗传信息的携带者，而rna是将dna携带的遗传信息转变为有功能的蛋白质的中间桥梁；另外，rna在生物体内还有多种复杂的调节功能。临床上进行基因测序、突变检测、病原体核酸检测或基因表达水平检测等工作之前，都要将核酸从生物样品中提取出来。这里提到的生物样品，包括动植物或人的组织、体液（如血清、尿液、组织液等）等。某些种类的体液样品中的核酸浓度往往极低，如果使用常规的核酸提取试剂盒，只能用少量样品（如0.5毫升）进行核酸提取，最后得到的核酸溶液浓度经常低于检测阈值，造成结果的假阴性或检测失败。实际上，临床采集到的体液样品体积可以多达5毫升~50毫升，使用常规的核酸提取试剂盒进行核酸提取只是使用了其中很少的一部分，样品并没有得到充分利用。所以说，在实际操作中可以增大样品的体积，也就是增加了起始的核酸总量；最后将提取出的核酸溶解在较小体积的溶液或水中，使核酸溶液的浓度提高到可以满足后续检测要求的程度。但是，使用常规的核酸提取试剂盒很难处理较大量的样品（例如5毫升~50毫升样品）。这与核酸提取试剂盒所使用的方法有关。

目前商业化的核酸提取试剂盒多数采用柱法。柱法提取核酸的步骤一般是：①先用合适的裂解液处理样品，②然后将样品加到核酸纯化柱上，③离心使液体通过核酸纯化柱中的核酸吸附材料（一般是硅胶膜），样品中的核酸被吸附在核酸吸附材料上，④用清洗液洗去吸附在核酸吸附材料上的杂质，⑤用洗脱液或水洗脱核酸，得到高质量的核酸溶液。这里，核酸纯化柱是一个关键的限制因素。常见的商业化的核酸纯化柱容量仅有0.7毫升~0.8毫升，用20微升~100微升（1毫升=1000微升）洗脱液或水洗脱，一般仅用于1毫升以内的样品的核酸纯化。如果样品的体积有几毫升甚至几十毫升，使用这种核酸纯化柱就要做十几次甚至几十次上柱、离心的操作，这显然不太现实。目前已有的适用于大量样本的核酸纯化柱直径较大，要求的洗脱体积在0.2毫升以上。因为洗脱的体积偏大，并不适用于样品中核酸浓度低的情况。因为样品中核酸浓度低，总量比较少，如果用大的体积洗脱，最后得到的核酸浓度还是偏低，不能满足后续检测的要求。所以，对于含有低浓度核酸的样品中的核酸提取，不但要求样品的体积要尽量大，最后洗脱时的体积也要尽量小（例如控制在5微升~50微升），这样才能提高提取出来的核酸浓度，满足后续检测的要求。

技术实现要素：

本实用新型所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种大容量核酸纯化装置。

为解决上述技术问题，本实用新型采取的技术方案如下：

一种大容量核酸纯化装置，纯化装置包括第一柱管、顶部入口能够与第一柱管的底部出口对接连通的第二柱管、设于第二柱管底部的核酸吸附体，第一柱管与第二柱管可拆卸连接，第一柱管的容积为5毫升~20毫升，第二柱管底部出口处的内径为3mm~6mm。

优选地，第二柱管的容积为0.3毫升~0.8毫升。

优选地，第二柱管由其顶部至底部呈锥状逐渐延伸缩小。

优选地，核酸吸附体位于第二柱管底部出口处。

优选地，第一柱管的底部形成有环状抵触板，第二柱管的顶部外边缘形成有与环状抵触板配合抵触的第一卡台，当第一柱管与第二柱管安装对接后，环状抵触板上表面与第一卡台的下表面在上下方向对接贴合。

优选地，第一柱管具有直筒段和位于直筒段下方与其连通的锥筒段，环状抵触板形成于锥筒段的底部。

优选地，环状抵触板的上表面固定有密封圈，当第一柱管与第二柱管对接安装后，第一卡台的外周位于密封圈的内周侧且与密封圈的内周相抵触靠紧。

优选地，第二柱管的底部固定连接有环形连接套，环形连接套内周设置核酸吸附体，且核酸吸附体堵塞在第二柱管底部的开口处。

优选地，第一柱管的顶部外边缘形成有第二卡台。

优选地，设第一柱管的长度为a，则第二柱管的长度为1/3a~1/5a。

由于以上技术方案的实施，本实用新型与现有技术相比具有如下优点：

本实用新型提供的大容量核酸纯化装置有效地克服了现有核酸纯化柱的缺点，适用于从含有低浓度核酸的大体积样品中提取核酸，有助于提高检测的灵敏度和准确性。

附图说明

图1为本实用新型的第一柱管的主视结构示意图；

图2为本实用新型的第二柱管及吸附体的主视结构示意图；

图3为本实用新型大容量核酸纯化装置的主视结构示意图；

图4为吸附核酸时大容量核酸纯化装置与50毫升离心管配合使用时的结构示意图；

图5为提取核酸时第二柱管及吸附体与1.5毫升离心管配合使用时的结构示意图；

其中：10、第一柱管；101、直筒段；102、锥筒段；103、环状抵触板；104、密封圈；20、第二柱管；201、环形连接套；202、核酸吸附体；30、离心管。

具体实施方式

下面结合附图和具体的实施例对本实用新型做进一步详细的说明。

如图1和图2所示，以下关于“底、顶”方向的描述，均按照装置实际使用时的状态作为参照；

一种大容量核酸纯化装置，纯化装置包括第一柱管10、顶部入口能够与第一柱管10的底部出口对接连通的第二柱管20、设于第二柱管20底部出口处的核酸吸附体202，第一柱管10与第二柱管20可拆卸连接；

具体地，第一柱管10的底部形成有环状抵触板103(第一柱管10具直通段101和位于直通段101下方与其连通的锥筒段102，环状抵触板103形成于锥筒段102的底部），第二柱管20的顶部外边缘形成有与环状抵触板103配合抵触的第一卡台，第一柱管10的顶部外边缘形成有第二卡台，当第一柱管10与第二柱管20安装对接后，环状抵触板103上表面与第一卡台的下表面在上下方向对接贴合；此外，环状抵触板103的上表面固定有密封圈104，当第一柱管10与第二柱管20对接安装后，第一卡台的外周位于密封圈104的内周侧且与密封圈104的内周相抵触靠紧。

进一步地，第二柱管20的底部固定连接有环形连接套201（可以为塑料或橡胶套），环形连接套201内周设置核酸吸附体202，且核酸吸附体202堵塞在第二柱管20底部的开口处。

本例中，第一柱管10的容积为5毫升~20毫升左右，第二柱管20的容积为0.3毫升~0.8毫升左右，第二柱管20底部出口处的内径为3mm~6mm左右。设第一柱管10的长度为a，则第二柱管20的长度为1/4a，本例中，第二柱管20由其顶部至底部呈锥状逐渐延伸缩小。

第一柱管10和第二柱管20（底部固定连接有核酸吸附体202）组装时，将第二柱管20的底部朝下，并从第一柱管10的顶部入口进入第一柱管10内部，然后一直向下，至第二柱管20的底部从第一柱管10的底部出口脱出，且第二柱管20顶部的第一卡台与第一柱管10底部的环状抵触板103相抵时，则第一柱管10与第二柱管20组装完成，此时，密封圈104为第一柱管10和第二柱管20的连接处提供密封，而且，此时第二柱管20无法再向下运动，需要将二者分离时，则将第二柱管20向上托起，即可使二者分离。

此外，本实用新型的大容量核酸纯化装置使用时在吸附阶段时需要配合较大的离心管30使用，将大容量核酸纯化装置整体放入较大的离心管30中，至第二卡台抵触在离心管30的顶部边沿即可。在清除杂质和洗脱提取核酸时需要使用两只同样的且较小的离心管30，使用时将第二柱管20从第一柱管10中取出后放入较小的离心管30中，至第一卡台与该较小的离心管30的顶部边沿抵触即可。

以下以实例对本实用新型的大容量核酸纯化装置的使用情况进行描述：使用大容量核酸纯化装置配合trizol试剂提取10毫升血清中的游离rna，步骤如下：

1.取10毫升trizol试剂与10毫升血清混匀，室温静置5分钟。

加入5毫升氯仿，混匀，室温静置5分钟。

离心10分钟，小心地吸取上清至干净的离心管30中，加入1.6倍体积无水乙醇，混匀。

将大容量核酸纯化装置整体放入50毫升离心管30上，将上一步与无水乙醇混匀的样品加入大容量核酸纯化装置，12000g离心5分钟。

将第二柱管20从第一柱管10取出，放到1.5毫升离心管30中，加500微升浓度为1mol/l的盐酸胍溶液。

离心1分钟，倒掉流出液。

用1mol/l的盐酸胍溶液再洗一次。

用500微升80%乙醇洗一次。

将第二柱管20转移到另一个1.5毫升离心管30中，开盖晾2分钟。

向第二柱管20底部的核酸吸附体202处加入20微升60℃预热的水，60℃加热1分钟。

离心1分钟，取出第二柱管20，1.5毫升离心管30（步骤9中取用的离心管30）中的即为提取好的血清游离rna溶液。

综上所述，本实用新型的大容量核酸纯化装置，设计可拆卸对接连通的第一柱管（大容量）和第二柱管（小容量），第二柱管的底部出口处固定有核酸吸附体，在进行吸附核酸工作时，第一柱管可以盛装更多的液体样品，从而提高吸附体吸附的核酸，在提取核酸时，可将第二柱管单独放至离心管内进行洗脱提取，从而可以减小洗脱体积，增大提取液中核酸含量。本实用新型提供的大容量核酸纯化装置有效地克服了现有核酸纯化柱的缺点，适用于从含有低浓度核酸的大体积样品中提取核酸，有助于提高检测的灵敏度和准确性。

以上对本实用新型做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本实用新型的内容并加以实施，并不能以此限制本实用新型的保护范围，凡根据本实用新型的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本实用新型的保护范围内。