1.一种使用基因工程微生物宿主细胞生产所需低聚糖的方法,所述方法包括以下步骤:
(i)提供能够产生所需低聚糖的基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达至少一种异源糖苷酶,其能够在细胞内降解在所需低聚糖的细胞内生物合成过程中产生的代谢糖副产物,其中所述微生物宿主细胞能够回收由所述糖苷酶的酶活性产生的降解产物,用于产生所需低聚糖;
(ii)在允许产生所需低聚糖的条件下和培养基中培养所述基因工程微生物宿主细胞,从而产生所需低聚糖;和
(iii)任选地,回收所需低聚糖。
2.一种用于生产所需低聚糖的基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞
a)能够产生所需低聚糖;
b)已被基因工程改造以表达至少一种异源糖苷酶,其能够在细胞内降解在所需低聚糖的细胞内生物合成过程中产生的代谢糖副产物;和
c)能够回收由所述糖苷酶的酶活性产生的降解产物,以产生所需低聚糖。
3.根据权利要求1所述的方法或根据权利要求2所述的基因工程微生物宿主细胞,其中所述异源糖苷酶选自岩藻糖苷酶、唾液酸酶、己糖胺酶、半乳糖苷酶和葡糖苷酶。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述异源糖苷酶选自α-1,2-岩藻糖苷酶、α-1,3-岩藻糖苷酶、α-2,3-唾液酸酶、α-2,6-唾液酸酶、α-2,8-唾液酸酶、β-1,3-半乳糖苷酶、β-1,4-半乳糖苷酶、β-1,6-半乳糖苷酶、β-n-乙酰己糖胺酶和β-1,3-葡糖苷酶。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述基因工程微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源糖基转移酶,优选选自岩藻糖基转移酶、唾液酸转移酶、半乳糖基转移酶、n-乙酰葡糖胺基转移酶和葡糖基转移酶的糖基转移酶。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源α-1,3-岩藻糖基转移酶和异源α-1,2-岩藻糖苷酶。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源α-1,2-岩藻糖基转移酶和异源α-1,3-岩藻糖苷酶。
8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源β-1,3-n-乙酰葡糖胺基转移酶、异源α-1,2-岩藻糖基转移酶、异源β-1,3-半乳糖基转移酶和异源α-1,3-岩藻糖苷酶。
9.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源α-2,6-唾液酸转移酶和异源α-2,3-唾液酸酶。
10.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源β-1,3-n-乙酰葡糖胺基转移酶、异源β-1,4-半乳糖基转移酶和异源β-1,3-半乳糖苷酶和/或β-1,3-葡糖苷酶和/或半乳聚糖-β-1,3-半乳糖苷酶。
11.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述微生物宿主细胞已被基因工程改造以表达异源β-1,3-n-乙酰葡糖胺基转移酶、异源β-1,3-半乳糖基转移酶和异源β-1,3-葡糖苷酶和/或半乳聚糖-β-1,3-半乳糖苷酶。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法或基因工程微生物宿主细胞,其中所述所需低聚糖为人乳低聚糖,优选选自以下的人乳低聚糖:2’-岩藻糖基乳糖(2’-fl)、3-岩藻糖基乳糖(3-fl)、2’,3-二岩藻糖基乳糖、乳-n-三糖ii、乳-n-四糖、乳-n-新四糖、乳-n-岩藻戊糖i、乳-n-新岩藻戊糖i、乳-n-岩藻戊糖ii、乳-n-岩藻戊糖iii、乳-n-岩藻戊糖v、乳-n-新岩藻戊糖v、乳-n-二岩藻己糖i、乳-n-二岩藻糖基己糖ii、对-乳-n-岩藻糖基己糖、岩藻糖基-乳-n-唾液酸戊糖b、岩藻糖基-乳-n-唾液酸戊糖c、岩藻糖基-乳-n-唾液酸戊糖c、二唾液酸-乳-n-岩藻戊糖、3-岩藻糖基-3’-唾液酸乳糖、3-岩藻糖基-6’-唾液酸乳糖、乳-n-新二岩藻己糖i、3’-唾液酸乳糖、6’-唾液酸乳糖、唾液酸乳-n-四糖a(lst-a)、唾液酸乳-n-四糖b(lst-b)、唾液酸乳-n-四糖c(lst-c)和二唾液酸乳-n-四糖。
13.根据权利要求2至12中任一项所述的基因工程微生物宿主细胞用于生产所需低聚糖、优选选自hmo的低聚糖的用途。
14.一种低聚糖,优选选自hmo的低聚糖,其通过权利要求1至12中任一项所述的方法或通过使用权利要求1至12中任一项所述的基因工程微生物宿主细胞生产,其用于制备营养组合物。
15.一种营养组合物,其含有通过权利要求1至12中任一项所述的方法或通过使用权利要求1至12中任一项所述的基因工程微生物宿主细胞生产的至少一种低聚糖,其中所述至少一种低聚糖优选为hmo。