ATF6抑制剂和其用途的制作方法

atf6抑制剂和其用途
[0001]
相关申请的交叉参考
[0002]
本申请要求2018年4月6日提出的美国临时专利申请第62/654,263号的优先权益，所述临时专利申请的公开内容由此以全文引用的方式并入本文中。
技术领域
[0003]
本公开大体上涉及可用作转录激活因子6(atf6)的抑制剂的治疗剂。


背景技术：

[0004]
尽管有高剂量的化学疗法、自体干细胞移植和新颖药剂，多发性骨髓瘤(mm)仍然是基本上不可治愈的恶性病。例如硼替佐米(bortezomib)的蛋白酶体抑制剂(pi)已经提高mm患者的反应率和存活率。最新诊断的mm对硼替佐米和地塞米松(dexamethasone)的总体患者反应率是约67％。在复发的难治性mm中，反应率减少到约40-60％。因此，存在相当大数目的对硼替佐米具抗性的mm患者。mm细胞本身对pi敏感，因为其免疫球蛋白产生的体积大，需要生理未折叠蛋白反应(upr)基因的组成性表达。这似乎降低了其响应于pi诱发的内质网(er)应力而诱导促凋亡/终末upr的阈值。upr诱导的标志之一是er分子伴侣蛋白的转录与翻译提高。这些基因由upr转录因子xbp1和atf6诱导。虽然xbp1剪接和其所引起的激活已经显示在经过pi处理的mm细胞中受到抑制，但研究结果显示2种xbp1目标基因产物grp78和grp94的高组成性表达未因pi处理而减少，并且xbp1依赖性upr目标基因erdj4通常被pi诱导的观测结果表明了upr在经过pi处理的mm细胞中仍然具有功能。因为xbp1和atf6都可以结合于upr目标基因的启动子中的er应力反应元件，所以提出atf6可弥补经过pi处理的mm细胞中xbp1活性的降低。与此相一致的是，已经证明在xbp1-/-b细胞中grp78和grp94的诱导只是略微受损，并且grp94的表达需要atf6或xbp1中的任一个，而不是两个。有趣地，先前的研究已经显示xbp1预测对硼替佐米的敏感性并且其含量与对硼替佐米的敏感性呈比例相关。近来，harnoss jm等人证明在体外和体内使用基因和药理学破坏ire1a-xbp1s通路在mm生长中发挥关键作用。实际上，使用小分子抑制ire1α激酶活性经证明是一种临床上治疗mm的潜在有效和安全的疗法。
[0005]
除量之外，pi敏感性似乎还与mm细胞内的免疫球蛋白折叠的效能有关。er驻存伴侣蛋白grp78和grp94在mm细胞系中的高度组成性表达与专业分泌细胞功能需要生理upr基因表达的报告相一致。升高水平的er伴侣蛋白是浆细胞的特征，并且其表达对适当抗体装配和分泌来说是至关重要的。grp78已显示稳定结合于尚未与免疫球蛋白轻链缔合的免疫球蛋白重链并且帮助免疫球蛋白装配。此外，grp78和grp94对免疫球蛋白轻链折叠和靶向未装配亚基进行降解来说都是重要的。grp78和grp94的表达在用pi和经典er应力剂治疗的mm细胞中只是略微提高的事实表明，其已经表达接近最大水平的细胞保护性upr蛋白质以充当分泌细胞。因此，这些细胞可具有较低的诱导在对er的任何额外应力之后的末端upr的阈值(与非分泌细胞相比)。因此，通过硼替佐米与干扰upr的药剂，例如atf6信号传递通路的调节剂组合，可以使更有抵抗性的骨髓瘤克隆以及其它非分泌性恶性病对硼替佐米敏
感。
[0006]
错误折叠的蛋白质累积在哺乳动物细胞的ep中会引起折叠机制变得不堪重负并引起应激反应。细胞试图通过将信号从er发送至细胞核，激活增加er中的蛋白质折叠能力的巨大基因表达程序来减少er蛋白质负荷。然而，如果这一系统发生故障并且无法再建立内稳态，那么细胞将通过参与细胞凋亡而死亡。upr是一种进化上保守的信号转导通路，其响应于er应力维持蛋白质内稳态。
[0007]
三个缠绕的信号传导通路包含upr：(1)perk(蛋白激酶rna样er激酶)；(2)ire1(需要肌醇的酶1α)；以及(3)atf6(转录激活因子6)(mckimpson，w.m.等人，circ res，2017，120(5)：759-761)。atf6通路的激活引起例如bip(grp78)、chop或xbp-1的基因上调，这些基因增强内质网折叠蛋白质或介导品质控制的能力。atf6联合ire1一起工作，因为atf6的目标基因之一是xbp1-ire1的关键底物(yoshida，h.等人，cell，2001，107(7)：881-891)。perk发挥若干其它作用，包括暂停新蛋白质的产生以暂时降低蛋白质折叠负担。
[0008]
atf6是位于er中的一种ii型跨膜蛋白，其充当er应力传感器和转录因子(adachi，y.等人，cell struct funct，2008，33(1)：75-89；wu，j.等人，dev cell，2007，13(3)：351-64)。当需求超出er的折叠能力时，atf6从er输送至高尔基体，在高尔基体中两个存在于两个高尔基体中的蛋白酶-位点-1和位点-2蛋白酶(s1p和s2p)依次裂解将其n端结构域(atf6n)从高尔基体膜释放出，被引入至细胞核中，在细胞核中其激活其目标基因的转录(ye，j.等人，mol cell，2000，6(6)：1355-64)。这个激活涉及atf6与称为er应力反应元件(erse)的共同序列的结合。erse的共同序列是ccaatcggcggcggccacg(seq id no.1)。
[0009]
atf6激活的转录目标在包括以下的多种疾病的发病机理和发展中起作用：病毒感染、癌症、神经退化、阿尔茨海默氏病(alzheimer
′
s disease)、大脑局部缺血、遗传性小脑萎缩和共济失调、2型糖尿病和糖尿病性肾病，以及心血管病，例如心肌萎缩、心力衰竭、缺血性心脏病和动脉粥样硬化(chu，w.s.等人，diabetes，2007，56(3)：856-62；vekich，j.a.等人，j mol cell cardiol，2012，53(2)：259-67；liu，c.l.等人，int j mol med，2016，37(2)：407-14)。因此，atf6介导的转录的抑制可以为这些和涉及atf6调节的其它疾病提供一种治疗策略。


技术实现要素：

[0010]
在一个方面，提供了一种式(a)化合物：
[0011][0012]
或其药学上可接受的盐，其中a、r1、n、l、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、g1和g2如本文中详述。
[0013]
在一些实施例中，提供一种式(i)化合物：
[0014][0015]
或其药学上可接受的盐，其中a、r1、n、l、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1和g2如本文中详述。
[0016]
在一些实施例中，式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐具有式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)，如本文中详述。
[0017]
在另一方面，提供了一种治疗有需要的个体的由转录激活因子6(atf6)介导的疾病或病症的方法，其中所述方法包含向所述个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐或包含所述化合物的药物组合物。在所述方法的另一方面，式(a)、(i)的化合物或其盐是式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物，或上述任一种化合物的药学上可接受的盐，或包含所述化合物的药物组合物。在一些实施例中，由转录激活因子6(atf6)介导的疾病或病症为病毒感染、癌症、神经退化性疾病或血管疾病。在某些实施例中，疾病或病症为病毒感染、遗传性小脑萎缩和共济失调、阿尔茨海默氏病、2型糖尿病、糖尿病性肾病、心肌萎缩、心力衰竭、动脉粥样硬化、局部缺血、缺血性心脏病或大脑局部缺血。在一些实施例中，特征是转录激活因子6(atf6)的疾病或病症为癌症。在一些实施例中，atf6为atf6α。
[0018]
在另一方面，提供了一种治疗有需要的个体的特征是转录激活因子6(atf6)的疾病或病症的方法，其中所述方法包含向所述个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐或包含所述化合物的药物组合物。在所述方法的另一方面，式(a)、(i)的化合物或其盐是式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物，或上述任一种化合物的药学上可接受的盐，或包含所述化合物的药物组合物。在一些实施例中，特征是atf6激活的疾病或病症为病毒感染、癌症、神经退化性疾病或血管疾病。在某些实施例中，疾病或病症为病毒感染、遗传性小脑萎缩和共济失调、阿尔茨海默氏病、2型糖尿病、糖尿病性肾病、心肌萎缩、心力衰竭、动脉粥样硬化、局部缺血、缺血性心脏病或大脑局部缺血。在一些实施例中，特征是转录激活因子6(atf6)的疾病或病症为癌症。在一些实施例中，atf6为atf6α。
[0019]
在另一方面，提供了一种治疗有需要的个体的癌症的方法，所述方法包含向所述个体施用治疗有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐或包含所述化合物的药物组合物。在所述方法的另一方面，式(a)、(i)的化合物或其盐是式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物，或上述任一种化合物的药学上可接受的盐，或包含所述化合物的药物组合物。
[0020]
在一些实施例中，癌症为乳癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、肾癌、肺癌、黑色素瘤、纤维肉瘤、骨肉瘤、结缔组织肉瘤、肾细胞癌、巨大细胞癌、鳞状细胞癌、白血病、皮肤癌、软组织癌症、肝癌、胃肠癌或腺癌。在一些实施例中，个体中的一个或多个癌细胞是休眠癌细胞。
[0021]
在一些实施例中，个体进行过先前治疗。在一些实施例中，癌症对先前治疗有抗性或是先前治疗难治愈的。在一些实施例中，癌症对用泛素-蛋白酶体通路抑制剂、紫杉烷、
cox-2抑制剂、铂类抗肿瘤药物、蒽环霉素(anthracycline)、嘧啶类似物、拓扑异构酶抑制剂、mtor抑制剂、免疫检查点抑制剂或在免疫肿瘤学中使用的药剂治疗有抗性。
[0022]
在一些实施例中，所述方法进一步包含施用放射线。在一些实施例中，所述方法进一步包含施用第二抗癌剂。在一些实施例中，所述第二抗癌剂靶向免疫检查点蛋白。
[0023]
在另一方面，提供了一种治疗有需要的个体的与血管生成相关的疾病或病症的方法，其中所述方法包含向所述个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐或包含所述化合物的药物组合物。在所述方法的另一方面，式(i)的化合物或其盐是式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物，或上述任一种化合物的药学上可接受的盐，或包含所述化合物的药物组合物。在一些实施例中，所述方法进一步包含施用第二抗血管生成剂。
[0024]
在本文所公开的方法的一些实施例中，所述方法进一步包含施用调节未折叠蛋白反应或整合应激反应的第二药剂。在一些实施例中，第二药剂抑制ire1/xbp1通路。
[0025]
在另一方面，提供了一种抑制个体中的atf6的方法，所述方法包含向所述个体施用式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐或包含所述化合物的药物组合物。在所述方法的另一方面，式(a)、(i)的化合物或其盐是式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物，或上述任一种化合物的药学上可接受的盐，或包含所述化合物的药物组合物。
[0026]
在另一方面，提供了一种抑制细胞中的atf6的方法，所述方法包含将式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐或包含所述化合物的药物组合物递送至所述细胞。在所述方法的另一方面，式(a)、(i)的化合物或其盐是式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物，或上述任一种化合物的药学上可接受的盐，或包含所述化合物的药物组合物。
[0027]
还提供了药物组合物，所述药物组合物包含：(a)本文中详述的化合物，例如式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐，或式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物或其药学上可接受的盐；以及(b)药学上可接受的载体或赋形剂。还提供了包含本文中详述的化合物或其盐以及任选地使用说明书的试剂盒。还提供了如本文中详述的化合物或其药学上可接受的盐，用于制造供治疗特征是atf6激活的疾病或病症的药剂。在一些实施例中，疾病或病症为癌症、神经退化性疾病或血管疾病。在某些实施例中，疾病或病症为病毒感染、遗传性小脑萎缩和共济失调、阿尔茨海默氏病、2型糖尿病、糖尿病性肾病、心肌萎缩、心力衰竭、动脉粥样硬化、局部缺血、缺血性心脏病或大脑局部缺血。
附图说明
[0028]
图1描绘了在多发性骨髓瘤(mm)细胞系中内质网(er)蛋白内稳态网络的atf6依赖性分子机制的调节。
[0029]
图2a、2b和2c示出了使用三种示例性化合物调节er蛋白内稳态网络如何影响mm细胞系的细胞活力。
具体实施方式
[0030]
定义
[0031]
如本文所使用，除非另外明确指示，否则使用术语“一个(种)”等是指一个(种)或多个(种)。
[0032]
本文中提及“约”一个值或参数包括(并且描述)针对所述值或参数本身的实施例。举例来说，提及“约x”的描述包含“x”的描述。
[0033]
如本文所使用，除非另有说明，否则“烷基”是指并且包括具有指定碳原子数(即，c
1-c
10
表示一个至十个碳原子)的饱和直链(即，无支链)或支链单价烃链或其组合。特定烷基是具有1至20个碳原子(“c
1-c
20
烷基”)、具有1至10个碳原子(“c
1-c
10
烷基”)、具有6至10个碳原子(“c
6-c
10
烷基”)、具有1至6个碳原子(“c
1-c6烷基”)、具有2至6个碳原子(“c
2-c6烷基”)或具有1至4个碳原子(“c
1-c4烷基”)的烷基。烷基的实例包括但不限于如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等基团。
[0034]“烷氧基”是指基团r-o-，其中r为烷基；并且包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等等。
[0035]
如本文所使用，“芳基”或“ar”是指具有单个环(例如苯基)或多个稠环(例如萘基或蒽基)的不饱和芳香族碳环基团，所述稠环可以是或可以不是芳香族环。特定芳基是具有6至14个环碳原子的芳基(“c
6-c
14
芳基”)。具有超过一个环并且至少一个环是非芳香环的芳基可在芳香环位置处或在非芳香环位置处连接至母结构。在一种变化形式中，具有超过一个环并且至少一个环是非芳香环的芳基在芳香环位置处连接至母结构。
[0036]
如本文所使用，除非另有说明，否则“环烷基”是指并且包括具有指定碳原子数(即，c
3-c
10
表示三个至十个碳原子)的饱和环状单价烃结构。环烷基可以由一个环组成，如环己基，或由多个环组成，如金刚烷基。包含超过一个环的环烷基可为稠合环烷基、螺环烷基或桥接环烷基，或其组合。特定环烷基是具有3至12个环碳原子的环烷基。优选的环烷基是具有3至8个环碳原子(“c
3-c8环烷基”)、具有3至6个碳原子(“c
3-c6环烷基”)或具有3至4个环碳原子(“c
3-c4环烷基”)的环烃。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降冰片烷基等。
[0037]“卤代基”或“卤素”是指原子数为9至85的第17族系列元素。优选的卤基包括氟、氯、溴和碘的基团。如果残基被多于一个卤素取代，那么可以通过使用与所附接的卤素部分的数目相对应的前缀来进行指代，例如，二卤代芳基、二卤代烷基、三卤代芳基等是指被两个(“二”)或三个(“三”)卤基取代的芳基和烷基，所述卤基可能是相同的卤素但不一定是相同的卤素；因此4-氯-3-氟苯基在二卤代芳基的范围内。每个氢被卤代基置换的烷基被称为“全卤代烷基”。优选的全卤代烷基是三氟甲基(-cf3)。类似地，“全卤代烷氧基”是指卤素替代烃中构成烷氧基的烷基部分的每个h的烷氧基。全卤代烷氧基的实例是三氟甲氧基(-ocf3)。
[0038]
术语“卤代烷基”是指具有一个或多个卤基取代基或一个、两个或三个卤基取代基的烷基。卤代烷基的实例包括-cf3、-(ch2)f、-chf2、ch2br、-ch2cf3和-ch2ch2f。
[0039]
如本文所使用，“杂芳基”是指具有1至14个环碳原子和至少一个环杂原子的不饱和芳香族环状基团，所述环杂原子包括但不限于如氮、氧和硫等杂原子。杂芳基可以具有单
个环(例如吡啶基、呋喃基)或多个稠环(例如吲哚嗪基、苯并噻吩基)，所述稠环可以是或可以不是芳香环。特定杂芳基是具有1至12个环碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5至14元环；具有1至8个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5至10元环；或具有1至5个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的5、6或7元环。在一种变化形式中，特定杂芳基是具有1至6个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的单环芳香族5、6或7元环。在另一变化形式中，特定杂芳基是具有1至12个环碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的多环芳香环。具有超过一个环并且至少一个环是非芳香环的杂芳基可在芳香环位置处或非芳香环位置处连接至母结构。在一种变化形式中，具有超过一个环并且至少一个环是非芳香环的杂芳基在芳香环位置处连接至母结构。杂芳基可以在环碳原子或环杂原子处连接至母结构。
[0040]
如本文所使用，“杂环”、“杂环的”或“杂环基”是指具有单个环或多个稠环并且具有1至14个环碳原子和1至6个如氮、硫或氧等环杂原子的饱和或不饱和非芳香族环状基团。包含超过一个环的杂环可以是稠合的、桥连的或螺环的，或其任何组合，但是不包括杂芳基。杂环基可任选独立地被一个或多个本文所描述的取代基取代。特定杂环基是具有1至13个环碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3至14元环；具有1至11个环碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3至12元环；具有1至9个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3至10元环；具有1至7个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3至8元环；或具有1至5个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的3至6元环。在一种变化形式中，杂环基包括具有1至2个、1至3个、1至4个、1至5个或1至6个环碳原子和1至2个、1至3个或1至4个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的单环3元、4元、5元、6元或7元环。在另一变化形式中，杂环基包括具有1至12个环碳原子和1至6个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的多环非芳香环。
[0041]“药学上可接受的载体”是指药物调配物中除了活性成分以外的对受试者无毒的成分。药学上可接受的载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。
[0042]
如本文所使用，“治疗(treatment或treating)”是一种用于获得包括临床结果在内的有益或所需结果的途径。举例来说，有益或所需结果包括(但不限于)以下中的一个或多个：减少由疾病引起的症状，提高患有疾病的人的生活质量，降低治疗疾病所需的其它药品的剂量，延迟疾病的进展，和/或延长个体的存活期。在提及癌症或其它不合需要的细胞增殖时，有益或所需结果包括：缩小肿瘤(减小肿瘤大小)；降低肿瘤的生长速率(以便抑制肿瘤生长)；减少癌细胞数量；抑制、延缓或在某一程度上减缓并优选地停止癌细胞对周围器官的浸润；抑制(在某一程度上减缓并优选地停止)肿瘤转移；抑制肿瘤生长；预防或延迟肿瘤的发生和/或复发；和/或在某一程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。在一些实施例中，有益或所需结果包括预防或延迟例如不合需要的细胞增殖的复发。
[0043]
如本文所使用，化合物或其盐或者药物组合物的“有效剂量”或“有效量”是足以实现有益或所需结果的量。对于预防性用途，有益或所需结果包括以下结果：例如消除或降低疾病风险；减轻疾病严重度；或延迟疾病发作，包括所述疾病的生物化学、组织学和/或行为症状、其并发症以及疾病发展期间呈现的中间病理表现型。对于治疗用途，有益或所需结果包括：改善、缓和、减轻、延迟或减少由疾病引起的一种或多种症状；提高患有疾病的人的生活质量；降低治疗疾病所需的其它药品的剂量；例如经由靶向增强另一药品的效果；延迟疾
病的进展；和/或延长存活期。在提及癌症或其它不合需要的细胞增殖时，有效量包含足以使肿瘤缩小和/或降低肿瘤生长速率(以便抑制肿瘤生长)，或预防或延迟其它不合需要的细胞增殖的量。在一些实施例中，有效量是足以延迟发展的量。在一些实施例中，有效量是足以预防或延缓复发的量。有效量可以在一次或多次施用中施用，在癌症情况下，药物或组合物的有效量可以：(i)减少癌细胞数目；(ii)减小肿瘤大小；(iii)抑制、延缓、在某一程度上减缓并优选地停止癌细胞对周围器官的浸润；(iv)抑制(即在某一程度上减缓并优选地停止)肿瘤转移；(v)抑制肿瘤生长；(vi)预防或延迟肿瘤复发；和/或(vii)在某一程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。有效剂量可以在一次或多次施用中施用。出于本公开的目的，化合物或其盐或者药物组合物的有效剂量为足以直接或间接实现预防性或治疗性治疗的量。预期并且应了解，化合物或其盐或者药物组合物的有效剂量可以或可以不结合另一药物、化合物或药物组合物来实现。因此，在施用一或多种治疗剂的情形下可以考虑“有效剂量”，并且如果与一种或多种其它药剂结合，可达成或已达成所需结果，那么单一药剂可视为以有效量给出。
[0044]
如本文所使用，术语“个体”为哺乳动物，包括人类。个体包括(但不限于)人、牛科动物、马、猫科动物、犬科动物、啮齿动物或灵长类动物。在一些实施例中，个体是人。个体(例如人)可患有晚期疾病或更低程度的疾病，例如低肿瘤负荷。在一些实施例中，个体处于增生性疾病(例如癌症)早期。在一些实施例中，个体处于增生性疾病晚期(例如癌症晚期)。
[0045]
应了解，本文所描述的方面和变化形式还包括“由方面和变化形式组成”和/或“基本上由其组成”。
[0046]
通篇的所有参考文献，如出版物、专利、专利申请和公布的专利申请，都以全文引用的方式并入本文中。
[0047]
化合物
[0048]
在一个方面，提供了式(a)化合物：
[0049][0050]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0051]
g1和g2中的一个为n并且g1和g2中的一个为cr
d
，
[0052]
其中r
d
为h或c
1-c6烷基；
[0053]
r1为h、c
1-c6烷基、c
3-c8环烷基或c
1-c6卤代烷基；
[0054]
r8为h或c
1-c6烷基，
[0055]
n为0或1；
[0056]
l为-ch
2-或不存在；
[0057]
r2、r3、r4、r5和r6各自独立地为h、卤代基、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基；
[0058]
或者r2、r4、r5和r6各自独立地为h、卤代基、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环，其中所述5或6元环未经取代或经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代；
硫代呋喃基；
[0078]
条件是当a为并且n为1时，r1不为h；
[0079]
条件是当a为n为0并且l不存在时，r
a
不为h；
[0080]
条件是当a为并且r
e
为甲基时，r
a
不为未取代的苯基；
[0081]
条件是当a为n为1并且l不存在时，r1不为h；
[0082]
并且
[0083]
r7为h或c
1-c6烷基，
[0084]
条件是当r
d
为c
1-c6烷基，r7为h时，并且当r7为c
1-c6烷基，r
d
为h。
[0085]
在一种变化形式中，提供式(a)化合物或其盐，其中当r1不为h(即，c
1-c6烷基、c
3-c8环烷基或c
1-c6卤代烷基)时负载r1的碳呈“s”构型。在另一变化形式中，提供式(a)化合物或其盐，其中当r1不为h(即，c
1-c6烷基、c
3-c8环烷基或c
1-c6卤代烷基)时负载r1的碳呈“r”构型。还涵盖了式(a)化合物的混合物，包括给定化合物的外消旋或非外消旋混合物，以及具有不同化学式的两种或更多种化合物的混合物。
[0086]
在本文的描述中，应了解，针对一个部分的每一描述、变化、实施例或方面可与针对其它部分的每一描述、变化、实施例或方面组合，就如同具体地且个别地列出每一描述组合一般。例如，本文中关于式(a)的r1提供的每一描述、变化、实施例或方面可以与a的每一描述、变化、实施例或方面组合，就如同具体地且个别地列出每一描述组合一般。同样，针对r1的每一描述可以与针对a和g1和g2的每一描述组合，就如同具体地且个别地列出每一描述一般。
[0087]
在一些实施例中，提供了式(a)化合物，其中a为在一些实施例中，提供了式(a)化合物，其中a为在一些实施例中，提供了式(a)化合物，其中a为在一些实施例中，提供了式(a)化合物，其中a为
[0088]
在一些实施例中，提供了式(i)化合物：
[0089][0090]
或其药学上可接受的盐，其中：
[0091]
g1和g2中的一个为n并且g1和g2中的一个为cr
d
，
[0092]
其中r
d
为h或c
1-c6烷基；
[0093]
r1为h、c
1-c6烷基或c
3-c8环烷基；
[0094]
n为0或1；
[0095]
l为-ch
2-或不存在；
[0096]
r2、r3、r4、r5和r6各自独立地为h、卤代基、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基；
[0097]
或r2、r4、r5和r6各自独立地为h、卤代基、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环，其中所述5或6元环未经取代或经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代；
[0098]
条件是：
[0099]
r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环；或
[0100]
r2、r3、r4、r5和r6中的至少两个不为h；或
[0101]
r2、r3、r4、r5和r6中的一个为氰基；
[0102]
a为
[0103]
其中
---
指示以e或z构型连接；
[0104]
r
a
和r
b
各自独立地为h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
和r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代；
[0105]
r
c
为c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
c
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代；
[0106]
条件是当a为并且r
a
为h、甲基、乙基、n-pr、i-pr、i-bu、2-硫代呋喃基、2-呋喃基、未取代的苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、4-氟苯基或2，4-二氯苯基时，(i.)-(ix.)中的至少一个适用：
[0107]
(i.)g2为n；
[0108]
(ii.)n为1，l不存在，并且r1为c
1-c6烷基；
[0109]
(iii.)n为0，l不存在，并且r2、r3、r4、r5和r6中的至少一个为卤代基、cn或c
1-c6卤代烷基；
[0110]
(iv.)n为1，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环；
[0111]
(v.)r2、r3、r4、r5和r6中的一个为cn；并且
[0112]
(vi.)r4和r5各自独立地为cl、br、i、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基；
[0113]
(vii.)r
d
或r7中的一个为c
1-c6烷基；
[0114]
(viii.)r2和r3各自为cl；
[0115]
(ix.)r2、r3、r4、r5和r6中的至少一个为f、br、i、cn或c
1-c6卤代烷基并且r
a
为h或2-硫代呋喃基；并且
[0116]
r7为h或c
1-c6烷基，
[0117]
条件是当r
d
为c
1-c6烷基，r7为h时，并且当r7为c
1-c6烷基时，r
d
为h。
[0118]
在式(i)的一些实施例中，当a为并且r
a
为2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基或3，4-二甲氧基苯基时，(i.)-(ix.)中的至少一个适用。
[0119]
在一些实施例中，提供了式(ia)化合物：
[0120][0121]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0122]
在一些实施例中，提供了式(ib)化合物：
[0123][0124]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0125]
在一些实施例中，提供了式(ic)化合物：
[0126][0127]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0128]
在一些实施例中，提供了式(id)化合物：
[0129][0130]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r
d
、n、l、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r7如针对式(i)所定义。
[0131]
在式(id)的一个实施例中，l不存在。在式(id)的一个实施例中，l不存在并且n为0。在式(id)的一个实施例中，l不存在，n为1并且r1为h、c
1-c6烷基或c
3-c8环烷基。在式(id)的一个实施例中，l不存在，n为1并且r1为c
1-c6烷基或c
3-c8环烷基。在一个此类实施例中，载有r1的碳呈s-构型。在另一个此类实施例中，载有r1的碳呈r-构型。
[0132]
在一些实施例中，提供了式(ie)化合物：
[0133][0134]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r
d
、n、l、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r7如针对式(i)所定义。在式(ie)的一个实施例中，l不存在。
[0135]
在式(ie)的一个实施例中，l不存在并且n为0。在式(ie)的一个实施例中，l不存在，n为1并且r1为h、c
1-c6烷基或c
3-c8环烷基。在式(ie)的一个实施例中，l不存在，n为1并且r1为c
1-c6烷基或c
3-c8环烷基。在一个此类实施例中，载有r1的碳呈s-构型。在另一个此类实施例中，载有r1的碳呈r-构型。
[0136]
在一些实施例中，提供了式(if)化合物：
[0137][0138]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r2、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0139]
在一些实施例中，提供了式(ig)化合物：
[0140][0141]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r2、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0142]
在一些实施例中，提供了式(ih)化合物：
[0143][0144]
或其药学上可接受的盐，其中：a、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0145]
在一些实施例中，提供了式(ii)化合物：
[0146][0147]
或其药学上可接受的盐，其中：a、n、r1、r2、r6、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0148]
在一些实施例中，提供了式(ij)化合物：
[0149][0150]
或其药学上可接受的盐，其中：a、n、r1、r2、r3、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0151]
在一些实施例中，提供了式(ik)化合物：
[0152][0153]
或其药学上可接受的盐，其中：a、n、r1、r4、r5、r7、g1和g2如针对式(i)所定义。
[0154]
本文中关于式(a)或(i)详述的任一实施例在适用时同等地适用于式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)和(ik)。还了解，针对式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的任何变量的描述在适用时可以与针对任何其它变数的一种或多种描述组合，就如同具体地且个别地列出每一变量组合一般。例如，针对r1的每一描述可以与针对a的每一描述组合，就如同具体地且个别地列出每一组合一般。同样，针对r1的每一描述可以与针对a和g1和g2的每一描述组合，就如同具体地且个
别地列出每一描述一般。
[0155]
在式(a)化合物的一些实施例中，r8为c
1-c6烷基。在式(a)化合物的一些实施例中，r8为甲基。在式(a)化合物的一些实施例中，r8为h。
[0156]
在式(a)、(i)、(id)、(ie)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，n为1并且r1为h。在一些实施例中，n为1并且r1为c
1-c6烷基。在其它实施例中，n为1并且r1为c
3-c8环烷基。在一些实施例中，n为1并且r1为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，n为1并且r1为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在一些实施例中，n为1并且r1为甲基。在一些实施例中，n为1并且r1为乙基。在一些实施例中，n为1并且r1为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施例中，n为1并且r1为环丙基。在式(a)、(i)、(id)、(ie)或(ij)的化合物的一些实施例中，n为1并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环。在一些实施例中，n为1并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的5元碳环。在一些实施例中，n为1并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的6元碳环。在一些实施例中，n为1并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代的5元碳环。在一些实施例中，n为1并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代的6元碳环。在一些实施例中，n为1并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元杂环，其中所述5或6元杂环未经取代或经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代。在式(a)、(i)、(id)、(ie)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，n为0。
[0157]
在式(a)、(i)、(id)或(ie)的化合物的一些实施例中，l不存在。在其它实施例中，l为-ch
2-。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为h。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为c
1-c6烷基。在其它实施例中，n为1，l不存在，并且r1为c
3-c8环烷基。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为甲基。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为乙基。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r1为环丙基。
[0158]
在式(a)、(i)、(id)或(ie)的化合物的一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的5元碳环。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的6元碳环。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代的5元碳环。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代的6元碳环。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元杂环，其中所述5或6元杂环未经取代或经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环，其中所述5元碳环未经取代或经卤基、cn、-oh、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基取代并且r2、r4、r5和r6中的一
个或两个独立地选自卤基、cn、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的5元碳环，并且r2、r4、r5和r6各自为h。在一个变化形式中，当载有r1的碳呈“s”构型时，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环。在另一个变化形式中，当载有r1的碳呈“r”构型时，n为1，l不存在，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环。
[0159]
在式(a)、(i)、(id)或(ie)的化合物的一些实施例中，n为0并且l不存在。
[0160]
在式(a)、(i)、(id)或(ie)的化合物的一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为h。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为c
1-c6烷基。在其它实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为c
3-c8环烷基。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为甲基。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为乙基。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r1为环丙基。在式(a)、(i)、(id)或(ie)的化合物的一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的5元碳环。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的6元碳环。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代的5元碳环。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代的6元碳环。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元杂环，其中所述5或6元杂环未经取代或经一个至三个选自由卤代基、cn、-oh、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环，其中所述5元碳环未经取代或经卤基、cn、-oh、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基取代并且r2、r4、r5和r6中的一个或两个独立地选自卤基、cn、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成未取代的5元碳环，并且r2、r4、r5和r6各自为h。在一个变化形式中，当载有r1的碳呈“s”构型时，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环。在另一个变化形式中，当载有r1的碳呈“r”构型时，n为1，l为-ch
2-，并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环。
[0161]
在式(a)、(i)、(id)或(ie)的化合物的一些实施例中，n为0和l为-ch
2-。
[0162]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，g1为n并且g2为cr
d
。在一些实施例中，g1为n并且g2为ch。在一些实施例中，g1为n并且g2为cc
1-c6烷基。在一些实施例中，g1为n并且g2为cch3。在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，g1为cr
d
并且g2为n。在一些实施例中，g1为ch并且g2为n。在一些实施例中，g1为cc
1-c6烷基并且g2为n。在一些实施例中，g1为cch3并且g2为n。
[0163]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r1为h。在一些实施例中，r1为c
1-c6烷基。在其它实施例中，r1为c
3-c8环烷基。在一些
实施例中，r1为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，r1为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在一些实施例中，r1为甲基。在一些实施例中，r1为乙基。在一些实施例中，r1为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施例中，r1为环丙基。在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)或(ih)或(ij)的化合物的一些实施例中，r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元环。在一些实施例中，r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环。在某些实施例中，r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5元碳环，并且r2、r4、r5和r6各自为h。
[0164]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)或(ih)的化合物的一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6各自独立地为h、卤代基、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6各自独立地为h、cl、cn或cf3。在一些实施例中，r4和r5各自独立地为cl、br、i、cn、c
1-c6烷基或c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的一个不为h。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的两个不为h。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的至少两个不为h。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的一个为cn。在一些实施例中，r6为cn。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的一个为cf3。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的两个为cf3。在一些实施例中，r2和r6各自为cf3，或r4和r5各自为cf3，或r3和r6各自为cf3。在一些实施例中，r2、r3、r4、r5和r6中的一个或两个为cl。在一些实施例中，r4和r5各自为cl。在一些实施例中，r2、r4、r5和r6各自为h。
[0165]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)或(ih)的一些实施例中，为其中r2和r6各自为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，为其中r2和r6各自独立地选自由卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组。在一些实施例中，为其中r2和r6各自独立地选自由cl、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组。在一些实施例中，为
其中r2和r3各自为卤基。在一些实施例中，为其中r5和r6各自独立地选自由cl、br、i、cn、c
1-c6烷基和c
1-c6卤代烷基组成的群组。在一些实施例中，为为
[0166]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r
a
、r
b
和r
c
各自独立地为6元芳基或5或6元杂芳基，其中所述6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基的基团取代。在一些实施例中，r
a
、r
b
和r
c
各自独立地为6元芳基或5或6元杂芳基，其中所述6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自oh、卤代基和c
1-c6烷基的基团取代。在一些实施例中，r
a
、r
b
和r
c
各自独立地为5或6元杂芳基，其中所述5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基的基团取代。在一些实施例中，r
a
、r
b
和r
c
各自独立地为5或6元杂芳基，其中所述5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自oh、卤代基和c
1-c6烷基的基团取代。
[0167]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r
a
和r
b
各自独立地选自由h、c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，r
a
和r
b
各自独立地选自由h、c
1-c6烷基、
组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，r
a
和r
b
各自独立地选自由h、各自独立地选自由h、组成的群组。
[0168]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r
c
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，r
c
选自由选自由选自由组成的群组。
[0169]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0170]
在一些实施例中，a为并且r
a
为未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代的5或6元杂芳基。在一些实施例中，a为并且r
a
为未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代的5或6元杂芳基。在一些实施例中，a为并且r
a
为吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基或四嗪基，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为吡啶基，其中所述吡啶基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为呋喃基，其中所述呋喃基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为噻吩基，其中所述噻吩基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。
[0171]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、选自由h、组成的群组。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、
组成的群组。
[0172]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
b
的每个6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
b
的每个6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。
[0173]
在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并
且r
b
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。在一些实施例中，a为并且r
b
为
[0174]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
c
选自由c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
c
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
c
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
c
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
c
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。
[0175]
在一些实施例中，a为并且r
c
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
c
选自由选自由组成的
群组。在一些实施例中，a为并且r
c
选自由选自由组成的群组。
[0176]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0177]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0178]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、
组成的群组。
[0179]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0180]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0181]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、
组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0182]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0183]
在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
b
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
b
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0184]
在一些实施例中，a为并且r
b
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、选自由h、和组成的群组。
[0185]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0186]
在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
b
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
b
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，
每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0187]
在一些实施例中，a为并且r
b
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0188]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0189]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和
c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0190]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0191]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0192]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0193]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0194]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在
一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0195]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0196]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0197]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的
化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0198]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0199]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、
组成的群组。
[0200]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
a
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0201]
在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0202]
在一些实施例中，a为并且r
a
选自由c
1-c6烷基、
组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
a
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0203]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
b
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0204]
在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中所述6元芳基和5或6元杂芳基r
b
的未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
a
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。
[0205]
在一些实施例中，a为并且r
b
选自由c
1-c6烷基、烷基、组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基、c
1-c6烷基和c
1-c6烷氧基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
b
选自由h、选自由h、选自由h、组成的群组。
[0206]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为并且r
c
选自由c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基和5或6元杂芳基组成的群组，其中r
c
的每个c
1-c6烷基、-c(o)c
1-c6烷基、6元芳基或5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。
[0207]
在一些实施例中，a为并且r
c
为6元芳基或5或6元杂芳基，其中r
c
的所述6元芳基和5或6元杂芳基未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
c
选自由苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噻吩基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡嗪基和四嗪基组成的群组，每个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。
[0208]
在一些实施例中，a为并且r
c
选自由c
1-c6烷基、
组成的群组，每一个未经取代或经一个至四个选自由oh、卤代基和c
1-c6烷基组成的群组的基团取代。在一些实施例中，a为并且r
c
选自由选自由选自由组成的群组。
[0209]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为
[0210]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为在一些实施例中，a为其中呈e构型连接。在其它实施例中，a为其中呈z构型连接。举例来说，在一些实施例中，a为在其它实施例中，a为
[0211]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，a为在一些实施例中，a为其中呈e构型连接。在其它实施例中，a为其中呈z构型连接。举例来说，在一些实施例中，a为在其它实施例中，a为
[0212]
应了解，针对a的每一描述可以与针对r2、r3、r4、r5和/或r6的每一描述组合，就如同具体地且个别地列出每一组合一般。举例来说，在一个方面，应了解在一个方面，针对a的每一描述可以与r2和r6各自为cf3并且r3、r4和r5各自为氢的变化组合。针对a的每一描述还可以与针对r1和n的每一描述组合，就如同具体地且个别地列出每一组合一般。类似地，应了解，针对a的每一描述可以与针对g1、g2和r7的每一描述组合，就如同具体地且个别地列出每一组合一般。
[0213]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r7为h。在一些实施例中，r7为h。在一些实施例中，r7为c
1-c6烷基。在一些实施例中，r7为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在某些实施例中，r7为甲基。
[0214]
在式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r7和r
d
均为h。在一些实施例中，r
d
为c
1-c6烷基并且r7为h。在其它实施例中，r
d
为h并且r7为c
1-c6烷基。在某些实施例中，r
d
为甲基并且r7为h。在其它实施例中，r
d
为h并且r7为甲基。
[0215]
在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代。在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
a
为r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，并且r6为cf3。在一些实施例中，a为r
a
为r2卤基，并且r3为卤基。在某些实施例中，a为r
a
为r2为cl，并且r3为cl。在某些实施例中，a为r
a
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。在一些实施例中，a为r
a
为并且r6为cn。在一些实施例中，a为r
a
为r6为cn，并且r4为卤基。
环烷基。在一些实施例中，a为r
a
为为r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0218]
在一些实施例中，a为r
a
为苯基，其中r
a
的所述苯基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代。在一些实施例中，a为r
a
为苯基，其中r
a
的所述苯基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，r6为cf3，并且r1为c
1-c6烷基或c
1-c6环烷基。在一些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0219]
在一些实施例中，a为r
a
为r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
a
为为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，r6为cf3，并且r1为c
1-c6烷基或c
1-c6环烷基。在一些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0220]
在一些实施例中，a为r
b
为苯基，其中r
b
的所述苯基未经取代或经oh、
卤基或c
1-c6烷基取代。在一些实施例中，a为r
b
为苯基，其中r
b
的所述苯基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
b
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
b
为r2为cf3，r6为cf3，并且r1为c
1-c6烷基或c
1-c6环烷基。在一些实施例中，a为r
b
为r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0221]
在一些实施例中，a为r
c
为呋喃基，其中r
c
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代。在一些实施例中，a为r
c
为呋喃基，其中r
c
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
c
为2-呋喃基，r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
c
为2-呋喃基，r2为cf3，r6为cf3，并且r1为c
1-c6烷基或c
1-c6环烷基。在一些实施例中，a为r
c
为2-呋喃基，r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0222]
在一些实施例中，a为r
c
为吡啶基或苯基，其中r
c
的所述吡啶基或苯基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代。在一些实施例中，a为r
c
为吡啶基或苯基，其中r
c
的所述吡啶基或苯基未经取代或经oh、卤基或c
1-c6烷基取代，r2c
1-c6卤代烷
基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r
c
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
c
为r2为cf3，r6为cf3，并且r1为c
1-c6烷基或c
1-c6环烷基。在一些实施例中，a为r
c
为r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0223]
在一些实施例中，a为r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，a为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r2为cf3，r6为cf3，并且r1为c
1-c6烷基或c
1-c6环烷基。在一些实施例中，a为r2为cf3，r6为cf3，并且r7或r
d
为c
1-c6烷基。
[0224]
在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为r2cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0225]
在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0226]
在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0227]
在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经
oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0228]
在一些实施例中，a为r
b
为呋喃基，其中r
b
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
b
为呋喃基，其中r
b
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
b
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
b
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0229]
在一些实施例中，a为r
b
为吡啶基，其中r
b
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
b
为吡啶基，其中r
b
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2c
1-c6卤代烷
基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
b
为为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
b
为为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0230]
在一些实施例中，a为r
b
为呋喃基，其中r
b
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
b
为呋喃基，其中r
b
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
b
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
b
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0231]
在一些实施例中，a为r
b
为吡啶基，其中r
b
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
b
为吡啶基，其中r
b
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为rb
a
为为r2为
cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
b
为为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0232]
在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0233]
在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为
并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0234]
在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为呋喃基，其中r
a
的所述呋喃基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2为c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0235]
在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代。在一些实施例中，a为r
a
为吡啶基，其中r
a
的所述吡啶基未经取代或经oh、卤代基、c
1-c6烷基或c
1-c6烷氧基取代，r2c
1-c6卤代烷基，并且r6为c
1-c6卤代烷基。在某些实施例中，a为r
a
为为r2为cf3，并且r6为cf3。在某些实施例中，a为r
a
为
并且r3连同r1和它们所连接的原子一起形成5或6元碳环。
[0236]
在式(a)、(i)、(id)、(ie)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物的一些实施例中，r
e
为c
1-c6烷基。在一些实施例中，r
e
为甲基。在一些实施例中，r
e
为c
1-c6卤代烷基。在一些实施例中，r
e
为h。
[0237]
在某些变体中，式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物具有以下结构特征中的一个或多个：(a)a为并且r
a
选自由h、h、组成的群组；或a为并且r
b
为或a为并且r
c
选自由组成的群组；或a为并且(b)为为
[0238]
在某些变体中，式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物具有以下结构特征中的一个或多个：(a)a为(ij)或(ik)的化合物具有以下结构特征中的一个或多个：(a)a为
r
a
、r
b
和r
c
在存在时各自独立地选自由由组成的群组，并且r
e
在存在时为h或甲基；(b)为为(c)n为1；并且(d)r1为h或甲基。
[0239]
在某些变体中，式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物具有以下结构特征中的一个或多个：(a)a为(ij)或(ik)的化合物具有以下结构特征中的一个或多个：(a)a为(ij)或(ik)的化合物具有以下结构特征中的一个或多个：(a)a为r
a
、r
b
和r
c
在存在时各自独立地选自由由组成的群
为h，r4为h，r5为h，r6为ch3，r7为h，并且r
a
不为h。在一些实施例中，a为r
a
为h，g1为n，g2为ch，n为0，l不存在，r2为ch3，r3为h，r4为h，r5为h，r7为h，并且r6不为ch3。
[0243]
在本文提供的任何式的一些实施例中，a为g1为n，g2为ch，n为1，r1为h，l不存在，r2为cl，r3为h，r4为h，r5为h，r6为cl，r7为h，并且r
a
不为正丙基、异丙基、异丁基、2-呋喃基、甲基、乙基、4-氟苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、苯基或2-硫代呋喃基。在一些实施例中，a为r
a
为正丙基、异丙基、异丁基、2-呋喃基、甲基、乙基、4-氟苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、苯基或2-硫代呋喃基，g1为n，g2为ch，n为1，r1为h，l不存在，r2为cl，r3为h，r4为h，r5为h，r7为h，并且r6不为cl。
[0244]
在本文提供的任何式的一些实施例中，a为g1为n，g2为ch，n为1，r1为h，l不存在，r2为f，r3为f，r4为f，r5为f，r6为cl，r7为h，并且r
a
不为2，4-二氯苯基。在一些实施例中，a为g1为n，g2为ch，n为1，r1为h，l不存在，r2为cl，r3为f，r4为h，r5为h，r6为h，r7为h，并且r
a
不为苯基。在一些实施例中，a为r
a
不为苯基，g1为n，g2为ch，n为1，r1为h，l不存在，r2为cl，r4为h，r5为h，r6为h，r7为h，并且r3不为f。
[0245]
在本文提供的任何式的一些实施例中，a为g1为n，g2为cr
d
，并且n为1，r1不为h。在一些实施例中，a为g1为n，g2为cr
d
，n为0，并且l不存在，那么r
a
不为h。在一些实施例中，a为g1为n，g2为cr
d
，并且r
e
为甲基，那么r
a
不为未取代的苯基。在一些实施例中，g1为n，g2为cr
d
，n为1并且l不存在，那么r1不为h。
[0246]
代表性化合物列于表1中。
[0247]
表1
[0248]
[0249]
[0250]
[0251]
[0252]
[0253]
[0254]
[0255]
[0256]
[0257]
[0258]
[0259]
[0260]
[0261]
[0262]
[0263]
[0264]
[0265]
[0266]
[0267]
[0268]
[0269]
[0270]
[0271]
[0272]
[0273]
[0274]
[0275][0276]
在一些实施例中，本文提供了表1中所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及其用途。
[0277]
适当时，本文所述的实施例和变体适合于本文详述的任何式的化合物。
[0278]
本文提供了选自由以下组成的群组的化合物：
[0279]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)丙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0280]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-羟基丙烷-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0281]
5-乙酰基-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺
[0282]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酰胺；
[0283]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0284]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0285]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0286]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-4-基)异噁唑-3-甲
酰胺；
[0287]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0288]
n-(1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0289]
n-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯甲基]-1h-吡唑-4-基}-5-叔丁基-1，2-噁唑-3-甲酰胺；
[0290]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0291]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-[3，3
′-
联吡啶]-5-甲酰胺；
[0292]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2，4-二氟苯基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0293]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-咪唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0294]
n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0295]
n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0296]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(4氟苯基)烟酰胺；
[0297]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-苯基烟酰胺；
[0298]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0299]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0300]
n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0301]
n-(1-(4-氰基苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0302]
n-(1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0303]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0304]
n-(1-(3，5-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0305]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0306]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0307]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0308]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0309]
n-(1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0310]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0311]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0312]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0313]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0314]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0315]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0316]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0317]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0318]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0319]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0320]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0321]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0322]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0323]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0324]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0325]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0326]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)烟酰胺；
[0327]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0328]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0329]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0330]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0331]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0332]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0333]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺
[0334]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0335]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0336]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0337]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0338]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0339]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0340]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0341]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0342]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0343]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0344]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0345]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0346]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0347]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-5
′-
甲酰胺；
[0348]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0349]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0350]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺；
[0351]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺；
[0352]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺；
[0353]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺；
[0354]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，4
′-
联吡啶]-2
′-
甲酰胺；
[0355]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-6
′-
甲酰胺；
[0356]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)丙烯酰胺；
[0357]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0358]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0359]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0360]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0361]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0362]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0363]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0364]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0365]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0366]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0367]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺；
[0368]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0369]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0370]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0371]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-n-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0372]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺；
[0373]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺；
[0374]
n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0375]
n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0376]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲酰胺；
[0377]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺；
[0378]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0379]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0380]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0381]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺；
[0382]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺；
[0383]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺；
[0384]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0385]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-4-甲酰胺；
[0386]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺；
[0387]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0388]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基氨基)噻唑-5-甲酰胺；
[0389]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0390]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，
4-噁二唑-2-甲酰胺；
[0391]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0392]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0393]
n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0394]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0395]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺；
[0396]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺；
[0397]
n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0398]
n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0399]
n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0400]
n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0401]
n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺；
[0402]
n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0403]
n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0404]
n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺；
[0405]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0406]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺；
[0407]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；
[0408]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺；并且
[0409]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺，
[0410]
或其药学上可接受的盐。适用时，本文还提供了本文中描绘的化合物的任何和所有立体异构体，包括几何异构体(例如顺式/反式异构体或e/z异构体)、对映异构体、非对映异构体、或其以任何比率的混合物，包括外消旋混合物。
[0411]
本文中描绘本文中详述的化合物的代表性实例，所述化合物包含根据本公开的中
间化合物和最终化合物。应了解，在一个方面，任一种化合物可用于本文中详述的方法中，包括在适用时可经过分离并向个体施用的中间化合物。
[0412]
即使未描绘盐，本文中描绘的化合物仍可以呈盐形式存在，并且应了解，本公开涵盖此处描绘的化合物的所有盐和溶剂化物，以及所述化合物的非盐和非溶剂化物形式，如熟练技术人员所充分了解。在一些实施例中，本文所提供的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一个或多个叔胺部分存在于所述化合物中时，还提供并描述n-氧化物。
[0413]
在任何本文所描述的化合物可以呈互变异构形式存在时，即使可明确地描绘仅一种或一些互变异构形式，也要考虑每种互变异构形式。具体地描绘的互变异构形式在溶液中或当根据本文所描述的方法使用时可以是或可以不是主要形式。
[0414]
本公开还包括所描述化合物的任一种或全部立体化学形式，包括任何对映异构或非对映异构形式。本文中给出的任何式的化合物可以具有不对称中心并且因此呈不同对映异构或非对映异构形式存在。通式化合物的所有光学异构体和立体异构体以及其以任何比率的混合物都被认为在所述式的范围内。因此，本文中给出的任何式意图表示外消旋体、一种或多种对映异构形式、一种或多种非对映异构形式、一种或多种阻转异构体形式以及其以任何比率的混合物。在描绘表1的化合物具有特定立体化学构型的情况下，本文还提供了化合物的任何替代立体化学构型，以及化合物的立体异构体以任何比率的混合物。举例来说，在表1的化合物具有呈“s”立体化学构型的立构中心的情况下，本文还提供了立构中心呈“r”立体化学构型的化合物的对映异构体。同样，在表1的化合物具有呈“r”构型的立构中心的情况下，本文还提供了呈“s”立体化学构型的化合物的对映异构体。还提供了具有“s”和“r”立体化学构型的化合物的混合物。此外，某些结构可以呈几何异构体(即，顺式和反式异构体)、呈互变异构体或呈阻转异构体形式存在。举例来说，本文中给出的任何式的化合物可以含有具有受限旋转的键并且因此呈不同几何构型存在。在表1的化合物被描绘为具体几何异构体(例如e或z异构体、或顺式或反式异构体)的情况下，本文还提供了化合物的任何替代几何构型，以及化合物的几何异构体以任何比率的混合物。举例来说，在表1的化合物被描绘为“z”异构体的情况下，本文还提供了化合物的“e”异构体。同样，在表1的化合物被描绘为“e”异构体的情况下，本文还提供了化合物的“z”异构体。还提供了具有“e”和“z”立体化学构型的化合物的混合物，其中混合物呈任何比率。类似地，在表1的化合物被描绘为“顺式”异构体的情况下，本文还提供了化合物的“反式”异构体；并且在化合物被描绘为“反式”异构体的情况下，本文还提供了化合物的“顺式”异构体。还提供了具有“顺式”和“反式”立体化学构型的化合物的混合物，其中混合物呈任何比率。本发明还涵盖所述化合物的所有形式，例如所述化合物的结晶或非结晶形式。还预期包含本发明化合物的组合物，例如具有基本上纯的化合物(包括其特定立体化学形式)的组合物，或包含呈任何比率的本发明化合物的混合物的组合物，所述混合物包括两种或更多种立体化学形式，例如外消旋或非外消旋混合物。
[0415]
本发明还预期本文所描述的化合物的同位素标记和/或同位素富集的形式。本文中的化合物可在构成这类化合物的一个或多个原子处含有非天然比例的原子同位素。在一些实施例中，所述化合物被同位素标记，如同位素标记的本文所描述的式(i)化合物或其变化形式，其中一个或多个原子中有一部分被相同元素的同位素置换。可并入本发明化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯的同位素，如2h、3h、
11
c、
13
c、
14
c
13
n、
15
o、
17
o、
32
p、
35
s、
18
f、
36
cl。某些同位素标记的化合物(例如3h和
14
c)可用于化合物或底物组织分布研究中。并入较重同位素，例如氘(2h)可由于较大代谢稳定性而提供某些治疗优势，例如体内半衰期增加或剂量要求降低，因此，在一些情况下可为优选的。
[0416]
同位素标记的本发明化合物一般可以通过本领域的普通技术人员已知的标准方法和技术或通过与所附实例中描述类似的程序，用适当同位素标记的试剂替代相应未标记的试剂来制备。
[0417]
本发明还包括任一种所描述化合物的任何或所有代谢物。代谢物可以包括由任一种所描述化合物的生物转化产生的任何化学物质，例如化合物的代谢中间体和产物，例如将在向人施用之后在体内产生的中间体和产物。
[0418]
提供了在适合容器中的包含本文所描述化合物或其盐或溶剂化物的制品。容器可以是小瓶、广口瓶、安瓿、预装载注射器、静脉内袋等。
[0419]
优选地，本文中详述的化合物是口服生物可用的。然而，所述化合物也可以被配制成供肠胃外(例如静脉内)施用。
[0420]
可以使用本文所描述的一种或数种化合物，通过将作为活性成分的一种或多种化合物与本领域中已知的药理学上可接受的载体组合来制备药剂。取决于药品的治疗形式，所述载体可以呈各种形式。在一种变化形式中，药剂的制造用于本文所公开的任何方法中，例如用于治疗癌症。
[0421]
通用合成方法
[0422]
本发明化合物可以通过下文且更确切地下文实例(例如以下实例中所提供的方案)中大体上描述的多种方法制备。在以下方法描述中，当在所描绘的各式中使用符号时，应了解这些符号表示上文关于本文中的这些式所描述的基团。
[0423]
当希望获得一种化合物的特定对映异构体时，这可由相应的对映异构体混合物，使用适于分离或拆分对映异构体的常规程序实现。因此，例如，非对映异构衍生物可通过使对映异构体混合物，例如外消旋体与适当手性化合物反应来制备。接着，可通过任何便利的手段，例如通过结晶分离非对映异构体，并回收所希望的对映异构体。在另一种拆分方法中，可使用手性高效液相色谱法分离外消旋体。或者，在需要时，可在一种所描述的方法中，通过使用适当的手性中间体来获得特定对映异构体。
[0424]
在希望获得化合物的特定异构体或以其它方式纯化反应产物的情况下，也可将色谱法、再结晶和其它常规分离程序用于中间体或终产物。
[0425]
还涵盖了本文提供的化合物或其药学上可接受的盐的溶剂化物和/或多晶型物。溶剂化物含有化学计算量或非化学计算量的量的溶剂，并且通常是在结晶过程期间形成。当溶剂是水时形成水合物，或当溶剂是醇时形成醇化物。多晶型物包括相同元素组成的化合物的不同晶体堆积排列。多晶型物通常具有不同的x射线衍射图、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶体形状、光学特性和电学特性、稳定性和/或溶解性。多种因素可能引起单一晶体形式占主导，例如再结晶溶剂、结晶速率和存储温度。
[0426]
在一些实施例中，可根据方案1合成式(i)化合物。
[0427]
方案1
[0428][0429]
其中r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1、g2和a如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义。
[0430]
方案1中制备方法的示例性实施例显示于方案1a中。
[0431]
方案1a
[0432][0433]
其中r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1、g2和r
a
如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义。
[0434]
在一些实施例中，可根据方案2合成式(i)化合物。
[0435]
方案2
[0436][0437]
其中a、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1、g2和n如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义，并且x为卤素。
[0438]
方案2中制备方法的示例性实施例显示于方案2a中。
[0439]
方案2a
[0440][0441]
其中a、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1、g2和n如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义，并且x为卤素。
[0442]
在一些实施例中，可根据方案3合成式(i)化合物。
[0443]
方案3
[0444][0445]
其中a、r2、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义。
[0446]
方案3中制备方法的示例性实施例显示于方案3a中。
[0447]
方案3a
[0448][0449]
其中a、r2、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义。
[0450]
在一些实施例中，可根据方案4合成式(i)化合物。
[0451]
方案4
[0452][0453]
其中a、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、g1和g2如针对式(a)、(i)或本文中详述的其任何变化形式所定义，并且x为卤素。
[0454]
在下文的实例部分中提供特定实例。应了解，以上方案可被修改，通过选择适当的试剂和起始物质获得各种本发明的化合物。关于保护基和其使用的一般描述，参见p.g.m.wuts和t.w.greene，《greene的有机合成中的保护基(greene
′
s protective groups in organic synthesis)》，第4版，wiley-interscience，纽约，2006。
[0455]
药物组合物和制剂
[0456]
本公开涵盖本文中详述的任何化合物的药物组合物。因此，本公开包括含如本文中详述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。在一个方面，药学上可接受的盐为酸加成盐，例如与无机酸或有机酸形成的盐。药物组合物可以呈适合口服、颊、肠胃外、鼻、体表或直肠施用的形式或适合通过吸入施用的形式。
[0457]
如本文中详述的化合物一方面可呈纯化形式并且包含呈纯化形式的化合物的组合物在本文中有详述。提供了包含如本文中详述的化合物或其盐的组合物，如含基本上纯的化合物的组合物。在一些实施例中，含有如本文中详述的化合物或其盐的组合物呈基本上纯的形式。
[0458]
在一种变化形式中，本文中的化合物为被制备用于向个体施用的合成化合物。在另一变化形式中，提供了含有呈基本上纯形式的化合物的组合物。在另一变化形式中，本公开涵盖包含本文中详述的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。在另一变化形式中，提供一种施用化合物的方法。所述纯化形式、药物组合物以及施用化合物的方法适合于本文详述的任何化合物或其形式。
[0459]
本文中详述的化合物或其盐可被配制用于任何可用的递送途径，包括口服、粘膜(例如鼻、舌下、阴道、经颊或直肠)、肠胃外(例如肌肉内、皮下或静脉内)、表面或透皮递送形式。化合物或其盐可以与适合载体一起配制以提供递送形式，所述递送形式包括但不限于片剂、囊片、胶囊(如硬明胶胶囊或软质弹性明胶胶囊)、扁囊剂、糖衣片、口含片、胶状物、分散液、栓剂、软膏、泥罨剂(泥敷剂)、糊剂、散剂、敷料、乳膏、溶液、贴片、气雾剂(例如鼻喷雾剂或吸入剂)、凝胶剂、悬浮液(例如水性或非水性液体悬浮液、水包油乳液或油包水乳液)、溶液和酏剂。
[0460]
一种或数种本文所描述的化合物或其盐可用于通过将一或多种化合物或其盐作
为活性成分与例如上文所提及的药学上可接受的载体组合来制备制剂，例如药物制剂。取决于系统的治疗形式(例如透皮贴片对比口服片剂)，载体可以呈各种形式。另外，药物制剂可含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、再湿润剂、乳化剂、甜味剂、染料、调节剂以及用于调整渗透压的盐、缓冲剂、包衣剂或抗氧化剂。包含化合物的制剂还可含有其它物质，这些物质具有有用的治疗特性。药物制剂可通过已知药学方法制备。适合制剂可见于例如以引用的方式并入本文中的雷氏药学大全(remington
′
s pharmaceutical sciences)，mack publishing公司，宾夕法尼亚州费城(philadelphia，pa)，第20版(2000)。
[0461]
施用给个体的如本文所述的化合物可呈公认的口服组合物形式，如片剂、包衣片剂、以及在硬壳或软壳中的凝胶胶囊、乳液或悬浮液。可用于制备这些组合物的载体的实例为乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸酯或其盐等。用于软壳凝胶胶囊的可接受载体为例如植物油、蜡、油脂、半固体和液体多元醇等。另外，药物制剂可含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、再湿润剂、乳化剂、甜味剂、染料、调节剂以及用于调整渗透压的盐、缓冲剂、包衣剂或抗氧化剂。
[0462]
可以以所述的任何剂型将本文所述的任何化合物配制成片剂，例如，可以将如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐配制为10mg片剂。
[0463]
还描述了包含本文提供的化合物的组合物。在一种变化形式中，所述组合物包含化合物或其盐以及药学上可接受的载体或赋形剂。在另一变化形式中，提供了含基本上纯化合物的组合物。
[0464]
使用方法和用途
[0465]
本文中详述的化合物和组合物，例如含有本文所提供的任何式的化合物或其盐以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物，可用于如本文所提供的施用和治疗方法中。所述化合物和组合物还可以用于体外方法中，如将化合物或组合物施用至细胞以达成筛选目的和/或用于进行质量控制测定的体外方法。
[0466]
在一些实施例中，本文提供了一种抑制atf6通路的方法。在一些实施例中，本文提供了一种抑制atf6的方法。在一些实施例中，atf6为atf6α。相信本文所描述的化合物或其盐和本文所描述的组合物可有效抑制atf6通路、atf6和/或atf6α。
[0467]
在一些实施例中，抑制atf6通路、atf6或atf6α的方法包含将本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或本文所述的药物组合物施用或递送至包含atf6或atf6α的细胞。在一些实施例中，细胞是发生病变的细胞，例如癌细胞。在一些实施例中，细胞具有激活的atf6通路。在一些实施例中，细胞已经暴露于er应力诱发的情形。本领域中己知数个er应力诱发的情形，例如葡萄糖剥夺、异常ca
2+
调控、病毒感染、低氧和暴露于er应力诱发分子，例如毒胡萝卜素(thapsigargin)、离子霉素(ionomycin)或衣霉素(tunicamycin)。
[0468]
在一些实施例中，抑制atf6通路、atf6或atf6α的方法包含将本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或本文所述的药物组合物施用或递送至肿瘤。
[0469]
在一些实施例中，atf6通路、atf6或atf6α的抑制包含抑制atf6和/或atf6α目标基因的表达。在一些实施例中，atf6通路、atf6或atf6α的抑制包含抑制atf6α目标基因的表达。在一些实施例中，atf6和/或atf6α目标基因的表达抑制达至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或98％。
[0470]
在一些实施例中，atf6和/或atf6α目标基因包含含有er应力反应元件(erse)的启
动子。在一些实施例中，启动子包含与ccaatcggcggcggccacg(seq id no.1)共享至少约70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。在一些实施例中，启动子包含seq id no.1。在一些实施例中，atf6和/或atf6α目标基因为grp78、herpud1或ero1b。在一些实施例中，atf6α目标基因为grp78。atf6和/或atf6α目标基因的表达的抑制可通过本领域中己知的方法，例如通过使用例如pcr、qpcr或rna印迹法等技术检测目标基因的mrna，或通过例如通过蛋白质印迹法或质谱分析法检测多肽基因产物来确定。
[0471]
在一些实施例中，化合物、其盐或组合物以少于约10μm，例如少于约5μm、2μm、1μm、900nm、800nm、700nm或600nm的ic
50
抑制atf6通路、atf6或atf6α。在一些实施例中，化合物、其盐或组合物以介于约10nm与5μm之间，如介于约50nm与2μm、100nm与1μm或20nm与1μm之间的ic
50
抑制atf6通路、atf6或atf6α。半数最大抑制浓度(ic
50
)是物质抑制特定生物或生物化学功能的有效性的量度。ic
50
是指示将给定生物过程或一个过程中的组分如酶、细胞、细胞受体或微生物抑制一半所需抑制剂的量的定量量度。在体外和体内确定ic
50
的方法是本领域中已知的。
[0472]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐和本文所述的组合物以不抑制atf6β活性或在较轻微程度上抑制atf6β活性的量施用。在一些实施例中，atf6α的抑制比atf6β活性的抑制大至少或至少约2倍，例如大至少或至少约3倍、4倍、5倍、8倍、10倍、15倍、30倍、50倍、60倍、75倍或100倍。
[0473]
本文提供了一种治疗个体的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(i)化合物或其任何实施例、变化或方面，包括但不限于式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的化合物或其任何实施例或变化或方面(总称为式(i)化合物或本发明化合物或本文所详述或描述的化合物)或其药学上可接受的盐。
[0474]
在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的由atf6通路介导的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的由atf6通路激活介导的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的由atf6激活介导的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的由atf6α激活介导的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。
[0475]
在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的特征是atf6通路激活的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的特征是atf6激活的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的特征是atf6α激活的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的特征是atf6目标基因的表达增加的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，本文提供了一种治疗个体的特征是atf6α目标基因的表达增加的疾病的方法，所述方法包含向个体施用有效量的式(a)、(i)的
化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，表达增加是与未发生病变的组织或细胞相比。
[0476]
相信本发明化合物或其盐有效治疗多种疾病和病症，例如atf6激活的转录目标在疾病的发病机理或发展中起作用的疾病。例如，在一些实施例中，本发明化合物和组合物可以用于治疗病毒感染、癌症、神经退化性疾病或血管疾病，例如心血管病。在一些实施例中，疾病为病毒感染、遗传性小脑萎缩和共济失调或阿尔茨海默氏病。在一些实施例中，疾病为2型糖尿病或糖尿病性肾病。在一些实施例中，疾病为心肌萎缩、心力衰竭、动脉粥样硬化或局部缺血，例如缺血性心脏病或大脑局部缺血。
[0477]
已经证明upr的atf6分枝对于病毒感染来说是重要的。举例来说，atf6对于在西尼罗病毒(west nile virus)感染期间维持细胞活力和调节免疫反应来说是重要的(ambrose r《病毒学杂志(j.virol.)》2013年2月第87卷第4期2206-2214)。另外，非洲猪瘟病毒激活atf6分枝以防早期细胞凋亡和确保病毒复制(galindo i，《细胞死亡与疾病(cell death dis)》2012年7月5日；3：e341.doi：10.1038/cddis.2012.81)。因此，在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗或预防病毒感染的方法中。在一些实施例中，病毒感染为非洲猪瘟病毒、登革病毒(dengue virus)、肠病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、流感病毒、蜱传脑炎病毒或西尼罗病毒感染。在一些实施例中，病毒感染是由在感染的细胞中激活atf6的病毒引起的。
[0478]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗癌症，如乳癌、结肠直肠癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、肾癌、肺癌、黑色素瘤、纤维肉瘤、骨肉瘤、结缔组织肉瘤、肾细胞癌、巨大细胞癌、鳞状细胞癌、白血病、皮肤癌、软组织癌症、肝癌、胃肠癌或腺癌的方法中。在一些实施例中，所述化合物、盐或组合物可用于治疗转移性肾癌、慢性淋巴细胞性白血病、胰腺腺癌或非小细胞肺癌的方法中。
[0479]
atf6α转录目标在癌细胞中以高水平表达。举例来说，细胞内grp78水平与肿瘤大小之间存在相关性(cai，j.w.等人，《细胞生理学杂志(j cell physiol)》，1993，154(2)：229-37)。此外，当在实验上grp78/bip表达在然后注射至小鼠中的癌细胞中得到遏制时，细胞由于对细胞毒性t细胞(ctl)反应和肿瘤坏死因子(tnf)的敏感性提高而不能够形成肿瘤(jamora，c.等人，《美国国家科学院院刊(proc natl acad sci usa)》，1996，93(15)：7690-7694；sugawara，s.等人，《癌症研究(cancer res)》，1993，53(24)：6001-6005)。
[0480]
细胞休眠的癌细胞缺乏增殖标志物并且以休眠状态存在。已知经历细胞休眠的细胞包括散播性肿瘤细胞(dtc)和位于循环内的肿瘤细胞(被称为循环肿瘤细胞(ctc))(hensel，j.a.等人，《自然评论：临床肿瘤学(nat rev clin oncol)》，2013，10(1)：41-51)。由单独dtc引起的微小残留病是公认的与不良患者预后相关的事件。针对增殖标志物(例如ki67)染色通常呈阴性的dtc可能是在治疗原发性肿瘤之后长达数十年才显现的肿瘤复发的根源(meng，s.等人，《临床癌症研究(clin cancer res)》，2004，10(24)：8152-8162)。据报告，atf6a是休眠癌瘤细胞通过atf6α-rheb-mtor通路进行的转导存活信号(schewe，d.m.等人，《美国国家科学院院刊(proc natl acad sci usa)》，2008，105(30)：10519-10524)。atf6α信号传导对于防止er和低葡萄糖应力来说是重要的，并且atf6α与mtor信号传导之间的相互作用似乎赋予休眠癌细胞对多柔比星(doxorubicin)和mtor抑制剂雷帕霉素(rapamycin)的抗性，这揭露了一种可能的抗药性机制(schewe，d.m.等人，《美国国家科学
院院刊(proc natl acad sci usa)》，2008，105(30)：10519-10524)。
[0481]
另外，多癌研究显示，癌转移相比于原发性病变，atf6表达更高，并且原发性肿瘤中atf6α表达增加的结肠癌患者具有更高的复发几率(ramaswamy，s.等人，《美国国家科学院院刊》，2001，98(26)：15149-15154)。
[0482]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗个体的癌症的方法中，其中个体中的一个或多个癌细胞是休眠癌细胞。在一些实施例中，休眠癌细胞中的一个或多个是散播性肿瘤细胞或循环肿瘤细胞。在一些实施例中，休眠癌细胞中的一个或多个是散播性肿瘤细胞。
[0483]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗个体的癌症的方法中，其中个体进行过先前治疗。在一些实施例中，癌症对先前治疗有抗性或是先前治疗难治愈的。在一些实施例中，癌症在先前治疗后已经有所进展。在实施例中，癌症为复发癌。在一些实施例中，先前治疗是用泛素-蛋白酶体通路抑制剂(例如硼替佐米)、紫杉烷(例如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇)、cox-2抑制剂(例如塞内昔布(celecoxib))、铂类抗肿瘤药物(例如顺铂(cisplatin)或奥沙利铂(oxaliplatin))、蒽环霉素(例如多柔比星)、嘧啶类似物(例如5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)或吉西他滨(gemcitabine))、拓扑异构酶抑制剂(例如依托泊苷(etoposide))、mtor抑制剂(例如雷帕霉素)、免疫检查点抑制剂或在免疫肿瘤学中使用的药剂治疗。在一些实施例中，癌症对用泛素-蛋白酶体通路抑制剂(例如硼替佐米)、紫杉烷(例如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇)、cox-2抑制剂(例如塞内昔布)、铂类抗肿瘤药物(例如顺铂或奥沙利铂)、蒽环霉素(例如多柔比星)、嘧啶类似物(例如5-氟尿嘧啶或吉西他滨)、拓扑异构酶抑制剂(例如依托泊苷)、mtor抑制剂(例如雷帕霉素)、免疫检查点抑制剂或在免疫肿瘤学中使用的药剂治疗有抗性。在一些实施例中，癌症对用多柔比星和/或雷帕霉素治疗有抗性。
[0484]
在一些实施例中，施用所述化合物、盐或组合物减少个体中的肿瘤生长、肿瘤增殖或肿瘤形成。在一些实施例中，所述化合物、盐或组合物可用于减少有需要的个体中的肿瘤生长、肿瘤增殖或肿瘤形成的方法中。在一些实施例中，肿瘤生长减慢或停滞。在一些实施例中，肿瘤生长减少至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。在一些实施例中，肿瘤大小减小。在一些实施例中，肿瘤大小减小至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。在一些实施例中，肿瘤转移得到预防或减慢。在一些实施例中，将所述肿瘤生长、肿瘤增殖或肿瘤形成与施用所述化合物、盐或组合物之前个体中的肿瘤生长、肿瘤增殖或肿瘤形成相比较。在一些实施例中，将所述肿瘤生长、肿瘤增殖或肿瘤形成与类似个体或一组个体中的肿瘤生长、肿瘤增殖或肿瘤形成相比较。测量肿瘤生长、肿瘤增殖和肿瘤形成的方法是本领域中已知的，例如通过对个体进行重复成像。
[0485]
还相信本发明化合物或其盐有效抑制血管生成。atf6和perk的激活通过正面调节ser473上mtorc2介导的akt磷酸化(这是akt的完全活性所需的)来影响血管内皮生长因子(vegf)对内皮细胞(ec)的存活作用。在小鼠基质胶塞(标准的血管生成分析)中plcγ、atf6或eif2a的耗尽显著抑制体内vegf诱导的血管形成(karali，e.等人，《分子细胞(molecular cell)》，2014，54：559-572)。因此，相信本发明化合物或其盐有效治疗与血管生成相关的多种疾病和病症。
[0486]
血管生成与多种疾病病症的发病机理相关，所述病症包括实体瘤和癌转移、动脉
粥样硬化、晶体后纤维膜增生症、血管瘤、慢性炎症、眼内新生血管疾病(例如增殖性视网膜病，例如糖尿病性视网膜病变、年龄相关的黄斑变性(amd)、新生血管性青光眼)、移植角膜组织和其它组织的免疫排斥、类风湿性关节炎和牛皮癣。因此，在一些实施例中，本发明化合物和组合物用于治疗以下的方法中：癌症如本文所述的任何癌症、不希望的或异常的肥大、关节炎、类风湿性关节炎(ra)、牛皮癣、牛皮癣性斑块、结节病、动脉粥样硬化、动脉粥样硬化斑块、糖尿病性和其它增生性视网膜病(包括早产儿视网膜病)、晶体后纤维膜增生症、新生血管性青光眼、年龄相关的黄斑变性、糖尿病黄斑水肿、角膜新血管生成、角膜移植新血管生成、角膜移植排斥反应、视网膜/脉络膜新血管生成、房角新血管生成(虹膜红变)、眼部新生血管疾病、血管再狭窄、动静脉畸形(avm)、脑膜瘤、血管瘤、血管纤维瘤、甲状腺增生(包括格雷弗病(grave
′
s disease)))、角膜和其它组织移植、慢性炎症、肺部炎症、急性肺损伤/ards、败血症、原发性肺高压、恶性肺部积液、脑水肿(例如与急性中风/闭合性脑损伤/外伤相关)、滑膜炎症、ra中关节翳形成、骨化性肌炎、肥厚性骨形成、骨关节炎(oa)、难治性腹水、多囊卵巢疾病、子宫内膜异位、第3流体间隔疾病(胰腺炎、间室综合征、臀病、肠病)、子宫肌瘤、早产、慢性炎症如ibd(克罗恩病(crohn
′
s disease)和溃疡性结肠炎)、肾同种异体移植排斥反应、炎性肠病、肾病综合征、不希望的或异常的组织块生长(非癌症)、出血性关节、增生性瘢痕、毛发生长抑制、奥-韦综合征(osler-weber syndrome)、化脓性肉芽肿晶状体后纤维组织增生、硬皮病、沙眼、血管粘附、滑膜炎、皮炎、先兆子痫、腹水、心包积液(例如与心包炎相关)和肋膜积液。
[0487]
结合微生物菌群失调的肠屏障防御的瓦解正在成为包括炎性肠病、1型糖尿病、阿尔茨海默氏病和癌症在内的数种病症的关键促成因素。具体地说，在结肠直肠癌(crc)患者中，肿瘤组织中高表达水平的atf6与肿瘤大小增加和无疾病存活期减少相关。另一方面，改变的微生物丛与crc相关。这些数据表明upr的激活、微生物丛和结肠肿瘤形成之间的联系。己经证明经由atf6的upr激活与微生物丛依赖性结肠肿瘤形成之间的新颖关系。杯状细胞丧失和细菌浸润至上皮隐窝中是在肿瘤形成之前发生，并且natf6iec小鼠的抗生素治疗显著减少肿瘤负荷。在atf6激活的诱导性小鼠模型中，在26周肿瘤发生率为100％。在激活的atf6诱导之后四天，细菌接近结肠上皮细胞显著增加，并且细胞增殖增加，这表明这些改变是atf6激活下游的早期事件。如在肿瘤开始形成之前通过5周龄时16s rrna基因扩增子测序所评估，一些研究人员发现，在natf6iec小鼠的盲肠内含物中存在微生物菌群失调以及减少的微生物多样性。这个菌群失调的微生物丛在转移至无菌natf6iec小鼠中时，相比于对照微生物丛转移至natf6iec小鼠中，增强肿瘤形成。这些数据表明在这个模型中微生物菌群失调和随后上皮细胞中的stat3信号传导显著影响肿瘤形成。
[0488]
因此，在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于预防或治疗crc的方法中，所述方法通过抑制atf6，防止杯状细胞丧失和菌群失调。在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于在crc患者子集中阻断atf6信号传导和逆转菌群失调以对抗肿瘤进展的方法中。
[0489]
upr信号传导臂显著影响er蛋白内稳态和功能的能力表明这些通路的选择性激活具有缓解与病因多样的人疾病相关的er蛋白内稳态的病理性不平衡的巨大潜能。具体地说，atf6信号传导臂的激活已经显示可用于改善与疾病相关的er蛋白内稳态和功能的不平衡。使用化学基因方法对atf6转录因子进行非应力依赖性激活诱发er蛋白内稳态通路的保
护性重塑，从而选择性地减少失稳的淀粉状蛋白疾病相关的蛋白质如甲状腺素运载蛋白和免疫球蛋白轻链的分泌和细胞外聚集，并且不显著影响内源蛋白质组的分泌(shoulders等人，2013；chen等人，2014；cooley等人，2014；plate等人，2016)。因此，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于校正蛋白质错误折叠和聚集疾病的细胞和动物模型中er蛋白内稳态的病理性不平衡的方法中。
[0490]
本发明的一个方面是基于以下意外发现：细胞中atf6的过表达阻止细胞死亡，否则当蛋白质在所述细胞中不当累积时将发生细胞死亡。因此，在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗如帕金森病(parkinson
′
s disease，pd)的病状的方法中，所述病状与同帕金蛋白(parkin)相互作用并且在细胞内未正确处置的分子的异常累积相关。
[0491]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于预防细胞死亡的方法中。举例来说，本发明内涵盖预防神经元细胞死亡，包括预防哺乳动物、包括人中的黑质神经元死亡。
[0492]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗与蛋白质异常沉淀和/或聚集相关的神经退化性疾病的方法中。举例来说，阿茲海默氏病患者的大脑展现神经原纤维缠结(nft)、老年斑和淀粉状蛋白-β的脑血管沉积物；朊病毒病患者的大脑展现包含朊病毒蛋白的斑块；亨廷顿氏病(huntington
′
s disease)患者的大脑展现亨廷顿蛋白沉淀；显性遗传性脊髓小脑共济失调患者展现相应共济失调核蛋白沉淀；多发性系统萎缩症患者展现α-突触核蛋白沉积物；进行性核上麻痹患者展现τ沉淀；以及家族性肌肉萎缩性侧索硬化患者展现sod1沉淀(johnson，w.g.，《解剖学杂志(j.anat.)》4：609-616(2000))。因为这么多种疾病享有共同的病理学机制，所以它们可能共享引起蛋白质异常聚集和/或沉淀的通路(hardy，j.和gwinn-hardy，k.，《科学(science)》282(5391)：1075-1079(1998))。
[0493]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可作为独立疗法或作为与缓解性的其它药剂(例如缓解有待治疗的病症症状的药剂)和/或靶向病症病因的药剂结合的疗法用于方法中。举例来说，向受试者施用增加atf6表达的组合物可结合l-dopa、多巴胺激动剂、单胺氧化酶b抑制剂或可用于治疗神经退化性疾病如帕金森病的任何其它组合物的施用进行。
[0494]
在缺血性心脏病的小鼠模型中，通过涉及抗氧化基因过氧化氢酶的atf6依赖性调控的机制，心脏中活性atf6转录因子的过表达也显示提高心脏性能(jin等人，2017)。类似地，在肥胖小鼠中肝脏中活性atf6转录因子的过表达提高胰岛素敏感性(ozcan等人，2016)。这些结果表明，atf6激活提供了一个独特的治疗机会来改善与多种疾病相关的er蛋白内稳态缺陷。
[0495]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于增强从i/r损伤的心肌恢复的方法中，所述方法特别是通过活化心脏中内源性适应性atf6基因程序。
[0496]
atf6α通路在应力诱导的脂质累积中也发挥作用。p50atf6与srebp-2的核形式相互作用，因而对抗srebp-2调控的脂肪生成基因的转录和培养的肝细胞和肾细胞中的脂质累积。此外，响应于er应力的药理学诱导，atf6α缺失的小鼠展示比野生型小鼠长得多的肝功能异常和脂肪变性。这可以通过chop的长期表达和c/ebpα的持续遏制和/或atf6α介导的
编码蛋白质伴侣蛋白的基因的诱导、运输和erad功能的失败来解释。当喂食hfd时，atf6α-/-小鼠显现肝性脂肪变性和葡萄糖耐受不良以及srebp-1c的表达增加。另一方面，斑马鱼中atf6的功能活性核片段的过表达引起脂肪肝，这表明atf6α的微调对于预防肝脏脂肪变性来说可能是重要的。
[0497]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗代谢病症的方法中，所述代谢病症如肥胖症、i型和ii型糖尿病、胰腺炎、血脂异常、高脂质血症、非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、葡萄糖耐受不良、高血糖症、代谢综合征、急性心肌梗塞、高血压、心血管病、动脉粥样硬化、外周动脉疾病、中风、心力衰竭、冠状动脉性心脏病、肾病、糖尿病并发症、神经病、胃轻瘫、与胰岛素受体中严重失活突变相关的病症和其它代谢病症。
[0498]
在一些实施例中，本文所述的化合物或其盐或本文所述的组合物可用于治疗缺血性心脏病或从局部缺血/再灌注(i/r)的心肌恢复的方法中。
[0499]
根据本公开，在一些实施例中，个体是哺乳动物。在一些实施例中，个体是灵长类动物、牛科动物、绵羊科动物、猪科动物、马科动物、犬科动物、猫科动物、兔或啮齿动物。在一些实施例中，个体是人。在一些实施例中，个体患有本文所公开的疾病或病症中的任一种。在一些实施例中，个体有发展本文所公开的疾病或病症中的任一种的风险。
[0500]
本文还提供了本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物在制造药剂中的用途。在一些实施例中，制造药剂是用于治疗本文所述的病症或疾病。在一些实施例中，制造药剂是用于预防和/或治疗由atf6通路、atf6或atf6α介导的病症或疾病。
[0501]
组合疗法
[0502]
如本文所提供，本文所述的化合物或其盐和本文所述的组合物可与药剂一起施用以治疗本文所公开的疾病和病症中的任一种。在一些实施例中，所述药剂调节未折叠蛋白反应或整合应激反应。在一些实施例中，所述药剂为抗血管生成剂。在一些实施例中，所述药剂为抗癌剂。在一些实施例中，所述药剂靶向免疫检查点蛋白。
[0503]
在一些实施例中，(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物与(b)药剂是依序施用、并行地施用或同时施用的。在某些实施例中，(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物与(b)药剂是间隔约15分钟或更短时间，如间隔约10分钟、5分钟或1分钟或更短时间中的任一个施用。在某些实施例中，(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物与(b)药剂是间隔约15分钟或更长时间，如间隔约20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟或更长时间中的任一个施用。(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物与(b)药剂可先施用。在某些实施例中，(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物与(b)药剂同时施用。
[0504]
在一些实施例中，所述药剂调节未折叠蛋白反应或整合应激反应。在一些实施例中，所述药剂抑制未折叠蛋白反应或整合应激反应。在一些实施例中，所述药剂调节perk通路。在一些实施例中，所述药剂抑制perk通路。在一些实施例中，药剂抑制perk。已知atf6与ire1合作工作，因为atf6的目标基因之一是xbp1-ire1的关键底物(yoshida，h.等人，《细胞(cell)》，2001，107(7)：881-891)，所以例如atf6和ire1信号传导对于经历er应力的黑色素
瘤细胞的存活来说是重要的，这表明了atf6抑制剂与ire1抑制剂组合使用的潜在益处(tay，k.h.等人，《细胞信号(cell signal)》，2014，26(2)：287-294)。因此，在一些实施例中，所述药剂调节ire1/xbp1通路。在一些实施例中，所述药剂抑制ire1/xbp1通路。在一些实施例中，所述药剂抑制ire1或xbp1。
[0505]
在一些实施例中，所述药剂为抗血管生成剂。相信本发明化合物或其盐有效抑制血管生成和治疗与血管生成相关的疾病和病症。因此，本文提供了一种抑制血管生成的方法，所述方法包含向个体施用(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物和(b)抗血管生成剂。本文还提供了一种治疗与血管生成相关的疾病或病症、例如本文中所公开的与血管生成相关的任何疾病或病症的方法，所述方法包含向个体施用(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物和(b)抗血管生成剂。在一些实施例中，抗血管生成剂为vegf拮抗剂。在一些实施例中，抗血管生成剂为贝伐单抗(bevacizumab)或兰比珠单抗(ranibizumab)。
[0506]
近来血管生成作为肿瘤微环境中免疫调控的介体的作用日渐清晰。此外，新出现的证据表明免疫疗法可在肿瘤中引起免疫介导的血管病变，这说明肿瘤血管可能是肿瘤指导的免疫反应与癌症本身之间的重要界面。免疫检查点抑制作为许多癌症的有效免疫治疗策略的引入已经引起了对这个界面更好的了解。血管生成、vegf信号传导和免疫系统之间的复杂关系的初始研究表明，免疫检查点阻断与血管生成抑制的组合具有增强免疫疗法的潜能和作用，将广泛地影响肿瘤学的未来。atf6超过vegf信号传导的作用加强了atf6抑制剂与免疫检查点抑制剂组合使用的想法(ott，p.a.，f.s.hodi，和e.i.buchbinder，《免疫检查点抑制和血管内皮生长因子作为转移性黑色素瘤的组合疗法：基本原理概述、临床前证据和初始临床数据(inhibition of immune checkpoints and vascular endothelial growth factor as combination therapy for metastatic melanoma：an overview of rationale，preclinical evidence，and initial clinical data)》.《肿瘤学最新进展(front oncol)》，2015.5：第202页)。
[0507]
因此，在一些实施例中，所述药剂靶向免疫检查点蛋白。在一些实施例中，所述药剂是靶向免疫检查点蛋白的抗体。在一些实施例中，所述药剂靶向pd-1、pd-l1、pd-l2、ctla4、tim3、lag3、ccr4、ox40、ox40l、ido和a2ar。在一些实施例中，所述药剂为抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体或抗ctla-4抗体。
[0508]
本文提供了一种增强个体中的免疫反应的方法，所述方法包含向所述个体施用(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物和(b)靶向免疫检查点蛋白的药剂。在一些实施例中，个体患有癌症。在一些实施例中，增强的免疫反应是针对肿瘤或癌细胞。
[0509]
本文还提供了治疗有需要的个体的癌症的方法，所述方法包含向所述个体施用(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物和(b)靶向免疫检查点蛋白的药剂，其中所述个体的免疫反应增加。
[0510]
在一些实施例中，所述药剂为抗癌剂。在一些实施例中，抗癌剂为泛素-蛋白酶体通路抑制剂(例如硼替佐米)、紫杉烷(例如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇)、cox-2抑制剂(例如塞内昔布)、铂类抗肿瘤药物(例如顺铂或奥沙利铂)、蒽环霉素(例如多柔比星)、嘧啶类似物(例如5-氟尿嘧啶或吉西他滨)、拓扑异构酶抑制剂(例如依托泊苷)或调节未折叠蛋白
反应或整合应激反应的药剂(例如ire1/xbp1抑制剂或perk抑制剂)。在一些实施例中，抗癌剂为奥沙利铂、5-氟尿嘧啶或吉西他滨。在一些实施例中，抗癌剂为免疫检查点抑制剂或在免疫肿瘤学中使用的药剂。
[0511]
在一些实施例中，向患有癌症的个体施用有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物，以增加对一种或多种抗癌治疗的敏感性。
[0512]
治疗剂抗性是癌症患者结果改善的主要屏障。放射线会诱发er应力和其下游信号传导并且似乎与继发于辐照的ros平衡的变化相关。先前，atf6的基因表达阻断足以增强放射性诱发的细胞死亡(dadey，d.y.等人，《肿瘤靶点(oncotarget)》，2016，7(2)：2080-2092)。这表明atf6成为潜在的治疗目标以增强放射线疗法的功效。
[0513]
在一些实施例中，向患有癌症的个体施用有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物，以增加对放射线的敏感性。在一些实施例中，本文提供了治疗有需要的个体的癌症的方法，所述方法包含向所述个体施用(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物和(b)放射线。
[0514]
在一些实施例中，向患有癌症的个体施用有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物，以增加对一种或多种抗癌剂的敏感性。在一些实施例中，抗癌剂为泛素-蛋白酶体通路抑制剂(例如硼替佐米)、紫杉烷(例如太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇)、cox-2抑制剂(例如塞内昔布)、铂类抗肿瘤药物(例如顺铂或奥沙利铂)、蒽环霉素(例如多柔比星)、嘧啶类似物(例如5-氟尿嘧啶或吉西他滨)、拓扑异构酶抑制剂(例如依托泊苷)或调节未折叠蛋白反应或整合应激反应的药剂(例如ire1/xbp1抑制剂或perk抑制剂)。在一些实施例中，抗癌剂为奥沙利铂、5-氟尿嘧啶或吉西他滨。在一些实施例中，抗癌剂为免疫检查点抑制剂或在免疫肿瘤学中使用的药剂。
[0515]
本文提供了一种治疗个体的代谢和/或纤维化疾病的方法，所述方法包含向所述个体施用(a)本文所述的化合物或其药学上可接受的盐、或本文所述的药物组合物和(b)药剂。在一些实施例中，药剂为蛋白酶体抑制剂，例如硼替佐米、卡非佐米(carfilzomib)和埃沙佐米(ixazomib)。在一些实施例中，药剂为单克隆抗体，例如达雷木单抗(daratumumab)和埃罗妥珠单抗(elotuzumab)。在一些实施例中，药剂为组蛋白脱乙酰酶(hdac)蛋白抑制剂，例如帕比司他(panobinostat)、罗米地辛(romidepsin)和伏立诺他(vorinostat)。在一些实施例中，药剂为免疫调节药物(imid)，例如沙力度胺(thalidomide)、来那度胺(lenalidomide)和泊马度胺(pomalidomide)。在一些实施例中，药剂为肾上腺皮质类固醇，例如地塞米松、泼尼松(prednisone)、泼尼松龙(prednisolone)和甲基泼尼松龙(methylprednisolone)。在一些实施例中，药剂为靶向ire1-xbp1的疗法。
[0516]
剂量和施用方法
[0517]
施用给个体(如人)的化合物的剂量可随具体化合物或其盐、施用方法以及所治疗的具体疾病，如癌症的类型和分期而变化。在一些实施例中，化合物或其盐的量为治疗有效量。
[0518]
一方面，化合物的有效量可以是介于约0.01与约100mg/kg之间的剂量。本发明化合物的有效量或剂量可通过常规方法，例如模拟、剂量递增或临床试验，考虑如下因素来确定：施用或药物递送的模式或途径、药剂的药物动力学、待治疗疾病的严重度和病程、受试者的健康状况、条件和重量。示例性剂量约在每日约0.1mg至10g范围内。
[0519]
在一个方面，本文所提供的方法中的任一种可包含向个体施用药物组合物，所述药物组合物含有有效量的本文提供的化合物或其盐以及药学上可接受的赋形剂。
[0520]
本发明的化合物或组合物可根据有效给药方案施用给个体，持续所希望的时间段或持续时间，如至少约一个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约6个月、或至少约12个月或更长时间，在一些变化形式中，施用可持续个体生命的持续时间。在一种变化形式中，根据每天或间歇性时程施用化合物。化合物可在一段时间内连续地(例如每天至少一次)施用给个体。给药频率也可小于每天一次，例如约每周给药一次。给药频率可每天超过一次，例如每天两次或三次。给药频率也可为间歇性的，包括
‘
休药期’(例如每天给药一次，持续7天，接着停药7天，重复任何14天时间段，例如约2个月、约4个月、约6个月或更长时间)。任一给药频率可采用任何本文所描述的化合物以及任何本文所描述的剂量。
[0521]
本文提供的化合物或其盐可经由各种途径，包括例如静脉内、肌肉内、皮下、口服和透皮向个体施用。在一些实施例中，所述化合物或组合物经口施用。本文提供的化合物可以低剂量频繁施用，称为
‘
节拍式疗法’，或使用单独或与一种或多种另外的药物组合的化合物作为维持疗法的一部分施用。节拍式疗法或维持疗法可包括循环施用本文提供的化合物。节拍式疗法或维持疗法可包括瘤内施用本文提供的化合物。
[0522]
本发明还提供了如本文所描述的用于治疗、预防和/或延迟本文所述的疾病的发作和/或发展的组合物(包括药物组合物)，以及本文所描述的其它方法。在某些实施例中，组合物包含以单位剂型存在的药物制剂。
[0523]
制品和试剂盒
[0524]
本公开另外提供制品，所述制品在适合的包装中包含本文所公开的化合物或其盐、本文所述的组合物、或本文所述的单位剂量。在某些实施例中，所述制品用于任何本文所描述的方法中。适合包装是本领域中己知的并且包括例如小瓶、容器、安瓿、瓶子、广口瓶、柔性包装等。制品可进一步进行灭菌和/或密封。
[0525]
本公开进一步提供了用于进行本公开方法的试剂盒，所述试剂盒包含一种或多种本文所述的化合物或包含本文所述的化合物的组合物。所述试剂盒可采用任一种本文所公开的化合物。在一种变化形式中，试剂盒采用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。试剂盒可以用于本文所述的用途中的任一个或多个用途，并且，因此，可以含有关于治疗本文所述的疾病如癌症的说明书。
[0526]
试剂盒一般包含适合的包装。试剂盒可包括含任何本文所述的化合物的一个或多个容器。每一组分(如果存在超过一种组分)可包装在分开的容器中，或在交叉反应性和保存期限容许的情况下，一些组分可组合在一个容器中。
[0527]
试剂盒可以呈单位剂型、散装(例如多剂量包装)或亚单位剂量。例如，提供的试剂盒可以含有足够剂量的如本文所公开的化合物和/或可用于本文中详述的疾病(例如高血压)的第二药物活性化合物，以向个体提供有效的治疗，持续较长时间段，如一周、2周、3周、4周、6周、8周、3个月、4个月、5个月、7个月、8个月、9个月中的任一个或更长时间。试剂盒还可以包括多个剂量的化合物和使用说明书，并且以足以储存并在药店(例如医院药店和调制药房)中使用的量包装。
[0528]
试剂盒可任选地包括一套说明书，一般是书面说明书，不过关于本发明方法的组件的使用的含有说明书的电子存储媒体(例如磁盘或光碟)也是可接受的。包括在试剂盒中
的说明书一般包括关于各组分和其施用给个体的信息。
[0529]
参照以下实例可进一步理解本发明，提供的实例是出于说明目的且不打算作为限制。
[0530]
实例
[0531]
合成实例
[0532]
提供以下实例以说明而非限制本公开。本领域的技术人员将认识到，可以通过选择适合的起始物质和试剂来修改以下合成反应和方案以便获取式(a)、(i)、(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)、(if)、(ig)、(ih)、(ii)、(ij)或(ik)的其它化合物或其盐。使用上述通用方法制备所述化合物。
[0533]
实例全篇使用以下缩写：dcm(二氯甲烷)、diad(偶氮二甲酸二异丙酯)、dipea或diea(n，n-二异丙基乙胺)、dmf(n，n-二甲基甲酰胺)、dmso(二甲亚砜)、hatu((1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡锭3-氧化物六氟磷酸盐)、hplc(高压液相色谱法)、ipa(异丙醇)、lcms(液相色谱质谱法)、nmr(核磁共振)、pph3(三苯膦)、rt(室温)、tea(三乙胺)、thf(四氢呋喃)和tlc(薄层色谱法)。
[0534]
实例s1.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)丙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物1)
[0535][0536]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇.在室温下向搅拌的2，4-双(三氟甲基)苯甲醛(500mg，2.06mmol，1当量)于thf(5ml)中的溶液中逐份加入乙基溴化镁(412mg(3ml)，3.09mmol，1.5当量)，并搅拌反应10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml
×
2)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇。(110gm，19％，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝8.13-8.06(m，1h)，8.05-7.99(m，1h)，7.94(s，1h)，4.80(br.s.，1h)，1.65-1.52(m，2h)，0.92(t，j＝7.2hz，3h)。
[0537]
步骤2：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)丙基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(196mg，0.73mmol，1.0当量)和diad(148mg，0.73mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(200mg，0.73mmol，1.0当量)。在逐滴加入4-硝基-1h-吡唑(66mg，0.58mmol，0.8当量)后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物
(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2gm，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10重量％)至其中并用氢气净化反应混合物2小时。用lcms监测反应。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并浓缩滤液，获得产物，其通过快速色谱法来纯化，得到棕色粘性液体。lcms：309[m+h]
+
。
[0544]
步骤3：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.使1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(1gm)溶解于乙醇中。在0℃下向其中加入含20ml hcl的乙醇(15ml)并保持在室温下搅拌半小时。过滤所得悬浮液。并将所获得的残余物用乙醚湿磨，获得产物1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐。lcms：309[m+h]
+
。
[0545]
步骤4：合成5-乙酰基-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺.使5-乙酰基异噁唑-3-甲酸(500.0mg，1当量，3.22mmol)溶于5ml dmf中。向其中加入hatu(1.22gm，1当量，3.22mmol)。向其中加入dipea(832.25mg，2当量，6.45mmol)。将反应混合物保持搅拌20分钟。向其中加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(1.112gm，1当量，3.22mmol)。将所得反应混合物保持搅拌24小时。通过加入水进行处理并用乙酸乙酯回收。并且所得粗物质通过用ipa湿磨来纯化。lcms：446[m+h]
+
。
[0546]
步骤5：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-羟基丙烷-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.在0℃下使1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(200.0mg，1当量，0.447mmol)溶于thf中。在0℃下向其中加入3m甲基溴化镁(70.99mg，4当量，1.789mmol)的乙醚溶液。反应混合物保持在0℃下搅拌半小时。将反应用氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯回收。所获得的残余物被送去准备纯化。1h nmr (400mhz，dmso-d6)δ10.99(br.s.，1h)，8.27(s，1h)，7.99-8.13(m，2h)，7.74(s，1h)，7.04(d，j＝8.33hz，1h)，6.67(s，1h)，5.75(br.s.，1h)，5.64(br.s.，2h)，1.50(s，6h)。lcms：462[m+h]
+
。
[0547]
实例s3.合成5-乙酰基-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物3)
[0548][0549]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.使4-硝基-1h-吡唑(0.73g，0.006mol，1当量)溶于dmf(20ml)中。用冰水冷却此反应混合物达0℃，逐份加入k2co3(1.34g，0.009mol，1.5当量)至其中，搅拌反应混合物10分钟并接着逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(2.0g，0.006mol，1当量)至其中。搅拌以上反应混合物1小时(用tlc和lcms监测反应)。在反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释并用水(50ml)萃取。收集有机层并浓缩其，获得产物，其通过快速色谱法进一步纯化，获得白色产物。lcms：339[m+h]
+
。
[0550]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2gm，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10重量％)至其中并用氢气净化反应混合物2小时。用lcms监测反应。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并浓缩滤液，获得产物，其通过快速色谱法来纯化，得到棕色粘性液体。lcms：309[m+h]
+
。
[0551]
步骤3：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.使1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(1gm)溶解于乙醇中。在0℃下向其中加入含20ml hcl的乙醇(15ml)并保持在室温下搅拌半小时，过滤所得悬浮液。并将所获得的残余物用乙醚湿磨，获得产物1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐。lcms：309[m+h]
+
。
[0552]
步骤4：合成5-乙酰基-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺.使5-乙酰基异噁唑-3-甲酸(200.0mg，1当量，1.29mmol)溶于3ml dmf中。向其中加入hatu(491.4mg，1当量，1.29mmol)。向其中加入dipea(332.8mg，2当量，和2.58mmol)。将反应混合物保持搅拌20分钟。向其中加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(445.1mg，1当量，1.29mmol)。所得反应混合物保持搅拌24小时。通过加入水进行处理并用乙酸乙酯回收，并且所得粗物质通过用ipa湿磨来纯化。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.23(br.s.，1h)，8.32(s，1h)，7.96-8.16(m，2h)，7.78(s，1h)，7.72(s，1h)，7.06(d，j＝7.89hz，1h)，5.67(br.s.，2h)，2.57-2.67(m，3h)。lcms：446[m+h]
+
。
[0553]
实例s4.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酰胺甲酸盐(化合物4甲酸盐)
[0554][0555]
步骤1：合成(z)-3-氟-n
′-
羟基苯甲脒.使3-氟苯甲腈(3.0gm，1当量，0.024mol)溶解于n thf∶me oh(1∶1)中。向其中加入nh2oh.hcl(1.5当量，2.60gm，和0.037mol)。向其中加入tea(3.5当量，12.08ml，和0.086mol)。并且反应混合物保持在室温下24小时。通过蒸发反应混合物至干进行处理。并接着加入20％me oh/dcm并过滤所获得的悬浮液。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，得到呈白色固体状的产物，(z)-3-氟-n
′-
羟基苯甲脒(2.5g)。lcms：154[m+h]
+
。
[0556]
步骤2：合成3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酸乙酯.使(z)-3-氟-n
′-
羟基苯甲脒(2.0gm，1当量，0.0129mol)溶于15ml thf中。在0℃下向其中加入2-氯-2-氧代基乙酸乙酯(3.5gm，2当量，0.0259mol)，反应混合物保持在室温下搅拌15分钟。此后反应在70℃下保持搅拌30小时。通过用水淬灭进行处理并用乙酸乙酯回收。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，得到呈黄色液体状的产物，3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酸乙酯(2.1g)。lcms：236[m+h]
+
。
[0557]
步骤3：合成3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酸钠(5).使3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酸乙酯(1当量，1gm，0.004mol)溶于5ml甲醇中。向其中加入naoh(1当量，169mg，和0.004mol)并保持在室温下2小时。通过蒸发meoh进行反应处理。并且所获得的粗
物质用乙醚湿磨，得到呈白色结晶固体状的产物，3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酸钠(600mg)
[0558]
步骤4：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酰胺甲酸盐.使3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酸钠(100mg，1当量，0.434mmol)溶于dcm(2ml)中。在0℃下向其中加入草酰氯(164.3mg，3当量，1.30mmol)。向其中加入一滴dmf。在15分钟后，反应混合物保持搅拌1小时。在室温下。反应混合物真空干燥，获得3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-羰基氯。另一边1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(147.7mg，1.1当量，0.478mmol)溶于dcm(2ml)中。向其中加入tea(6当量，0.36ml，和2.604mmol)，保持在室温下搅拌半小时。将此反应混合物加入至3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-羰基氯中。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。通过加入水进行反应处理并用乙酸乙酯回收。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，得到粗物质。所获得的粗物质送去纯化。获得产物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(3-氟苯基)-1，2，4-噁二唑-5-甲酰胺甲酸盐(12mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.45(s，1h)，8.40(s，1h)，8.08(d，j＝7.6hz，2h)，7.96(d，j＝7.7hz，1h)，7.86(d，j＝9.1hz，2h)，7.75-7.65(m，1h)，7.53(td，j＝8.7，2.9hz，1h)，7.06(d，j＝8.2hz，1h)，6.90(s，1h)，5.69(s，2h)，2.39(s，0h)，1.52(d，j＝19.7hz，1h)，1.23(s，6h)，1.04(d，j＝5.0hz，0h)，0.84(q，j＝10.8，8.5hz，1h)，0.07(s，0h)，-0.07(s，1h)。lcms：499[m+h]
+
。
[0559]
实例s5.合成(s)-和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物5和6)
[0560][0561]
步骤1：合成1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇.在0℃下向搅拌的1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙酮(1gm，0.003mol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.216gm，0.005mol，1.2当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml
×
2)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(1gm，100％(粗物质)，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.04-8.15(m，2h)，7.93(s，1h)，5.70(d，j＝3.95hz，1h)，5.09(br.s.，1h)，1.34(d，j＝6.14hz，3h)。
[0562]
步骤2：合成1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-4硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(517mg，1.93mmol，1.0当量)和diad(319mg，1.93mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加
入4-硝基-1h-吡唑(175mg，1.55mmol，0.8当量)，并接着加入1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(500mg，1.93mmol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-4硝基-1h-吡唑(550mg，84％，呈棕色液体状)。lcms：354[m+h]
+
。
[0563]
步骤3：合成1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1.41mmol，1.0当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](75mg，10％w/w)，用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(450mg，100％(粗物质)，呈棕色液体状)。lcms：324[m+h]
+
。
[0564]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，1.11mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(467mg，1.22mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(461mg，3.57mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(360mg，1.11mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(70mg，26％，呈灰白色固体状)。lcms：496[m+h]
+
。
[0565]
步骤5：(s)和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的外消旋混合物(70mg)通过手性hplc来纯化，获得作为对映异构体a(18mg)和对映异构体b(20mg)的单一对映异构体。(对映异构体a)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.09(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.20(s，1h)，8.12-7.99(m，4h)，7.74(d，j＝8.6hz，1h)，7.56(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，7.47(s，1h)，5.94(q，j＝6.8hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。(对映异构体b)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.09(s，1h)，8.76(d，j＝4.6hz，1h)，8.20(s，1h)，8.12-7.96(m，4h)，7.74(d，j＝8.9hz，1h)，7.60-7.52(m，1h)，7.47(s，1h)，5.94(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.8hz，3h)。
[0566]
实例s6.合成(s)-和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物7和8)
[0567][0568]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇.在0℃下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(1gm，0.003mol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.216gm，0.005mol，1.2当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml
×
2)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(1gm，100％，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.04-8.15(m，2h)，7.93(s，1h)，5.70(d，j＝3.95hz，1h)，5.09(br.s.，1h)，1.34(d，j＝6.14hz，3h)。
[0569]
步骤2：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(517mg，1.93mmol，1.0当量)和diad(319mg，1.93mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(500mg，1.93mmol，1.0当量)。接着逐滴加入4-硝基-1h-吡唑(175mg，1.55mmol，0.8当量)，将反应混合物在室温下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑(550mg，84％，呈棕色液体状)。lcms：353[m+h]
+
。
[0570]
步骤3：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1.41mmol，1.0当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](75mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(450mg，100％，呈棕色液体状)。lcms：323[m+h]
+
。
[0571]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，1.11mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(467mg，1.22mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(461mg，3.57mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(360mg，1.11mmol，1当量)于dmf中的溶液(1ml)逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色
谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(150mg，27％，呈灰白色固体状)。lcms：484[m+h]
+
。
[0572]
步骤5：(s)和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的外消旋混合物(mg，)通过手性hplc来纯化，获得单一对映异构体，作为对映异构体a(45mg)和对映异构体b(40mg)。lcms：484[m+h]
+
。(对映异构体a)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.19(s，1h)，8.09(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，8.00(s，1h)，7.73(d，j＝6.9hz，1h)，7.28(d，j＝3.6hz，1h)，7.14(s，1h)，6.80-6.74(m，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。(对映异构体b)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.05(s，1h)，8.18(s，1h)，8.08(d，j＝8.3hz，1h)，8.04(s，1h)，8.00(d，j＝1.9hz，1h)，7.73(d，j＝7.5hz，1h)，7.28(d，j＝3.6hz，1h)，7.14(s，1h)，6.80-6.74(m，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。
[0573]
实例s7.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物9)
[0574][0575]
步骤1：合成1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇.在0℃下向搅拌的1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙酮(1gm，0.003mol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.216gm，0.005mol，1.2当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml
×
2)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(1gm，100％(粗物质)，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.04-8.15(m，2h)，7.93(s，1h)，5.70(d，j＝3.95hz，1h)，5.09(br.s.，1h)，1.34(d，j＝6.14hz，3h)。
[0576]
步骤2：合成1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-4硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(517mg，1.93mmol，1.0当量)和diad(319mg，1.93mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入4-硝基-1h-吡唑(175mg，1.55mmol，0.8当量)，并接着加入1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(500mg，1.93mmol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-4硝基-1h-吡唑(550mg，84％，呈棕色液体状)。lcms：354[m+h]
+
。
[0577]
步骤3：合成1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅
拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1.41mmol，1.0当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](75mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(450mg，100％(粗物质)，呈棕色液体状)。lcms：324[m+h]
+
。
[0578]
步骤4：n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(200mg，1.11mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(467mg，1.22mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(461mg，3.57mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(360mg，1.11mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(70mg，28％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.04(s，1h)，8.19(s，1h)，8.09(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.89(d，j＝5.0hz，1h)，7.84(d，j＝3.7hz，1h)，7.73(d，j＝7.6hz，1h)，7.32-7.21(m，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。lcms：501[m+h]
+
。
[0579]
实例s8.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-4-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物10)
[0580][0581]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(1.83g，16.28mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中逐份加入k2co3(3.36gm，24.42mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(5.0gm，16.28mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(4.5g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0582]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2.5g，1当量)于甲醇(40ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](250mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成
后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0583]
步骤3：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-4-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(吡啶-4-基)-1，2-噁唑-3-甲酸(50mg，0.263mmol，1当量)于dmf(5ml)中的溶液中加入hatu(109mg，0.289mmol，1.1当量)并搅拌所得反应混合物一小时。接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(81mg，0.263mmol，1当量)和dipea(108mg，0.841mmol，3.2当量)并在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释并用水(70ml)洗涤，收集有机层并经无水硫酸钠干燥并且在旋转蒸发仪上浓缩，得到粗产物，其通过逆相色谱法进一步纯化(10mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.66(br.s.，2h)7.04(d，j＝7.02hz，1h)7.77(d，j＝8.33hz，2h)7.93(d，j＝5.70hz，2h)8.02-8.12(m，1h)8.32(s，1h)8.51(br.s.，1h)8.78(d，j＝4.82hz，2h)11.19(br.s.，1h)。lcms：481(m+h)
+
。
[0584]
实例s9.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物11)
[0585][0586]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(1.83g，16.28mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中逐份加入k2co3(3.36gm，24.42mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(5.0gm，16.28mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(4.5g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0587]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2.5g，1当量)于甲醇(40ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](250mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0588]
步骤3：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(吡啶-2-基)-1，2-噁唑-3-甲酸(50mg，0.263mmol，1当量)于dmf(5ml)中的溶液中加入hatu(109mg，0.289mmol，1.1当量)并搅拌所得反应混合物一小
时。接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(81mg，0.263mmol，1当量)和dipea(108mg，0.841mmol，3.2当量)并在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释并用水(70ml)洗涤，收集有机层并经无水硫酸钠干燥并在旋转蒸发仪上浓缩，得到粗产物，其通过逆相色谱法进一步纯化(5mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.67(br.s.，2h)7.07(d，j＝8.77hz，1h)7.50(s，3h)7.57(d，j＝7.02hz，1h)7.79(s，1h)7.99-8.11(m，2h)8.33(s，1h)8.76(br.s.，1h)11.15(s，1h)。lcms：481[m+h]
+
。
[0589]
实例s10.合成n-(1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物12)
[0590][0591]
步骤1：合成1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇.在0℃下向搅拌的1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙酮(100mg，0.39mmol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(17mg，0.46mmol，1.2当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml
×
2)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(100mg，100％(粗物质)，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.04-8.15(m，2h)，7.93(s，1h)，5.70(d，j＝3.95hz，1h)，5.09(br.s.，1h)，1.34(d，j＝6.14hz，3h)。
[0592]
步骤2：合成1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-4硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(103mg，0.38mmol，1.0当量)和diad(78mg，0.38mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入4-硝基-1h-吡唑(35mg，0.31mmol，0.8当量)，并接着加入1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(100mg，1.93mmol，1.0当量)。将所得反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-4硝基-1h-吡唑(75mg，55％，呈棕色液体状)。lcms：354[m+h]
+
。
[0593]
步骤3：合成1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(200mg，1.0当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](20mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(200mg，呈棕色液体状)。lcms：324[m+h]
+
。
[0594]
步骤4：合成4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基呋喃(5.0g，45.40mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(3.63g，90.81mmol，2.0当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(12.28ml，90.81mmol，2.0当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
100ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法来纯化(己烷中15-20％乙酸乙酯)，获得4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(3.6g，45％，呈黄色固体状)。lcms：211[m+h]
+
。
[0595]
步骤5：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-呋喃-2-基-2，4-二氧代基-丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1.0当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1.0当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯。所获得的粗产物未经进一步纯化即用于下一步(700mg，52％，呈黄色固体状)。lcms：208[m+h]
+
。
[0596]
步骤6：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(225mg，52％，呈白色固体状)。lcms：180[m+h]
+
。
[0597]
步骤7：n-(1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(100mg，0.55mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(233mg，0.61mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(230mg，1.78mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(180mg，0.55mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。滤出所得沉淀并在冷冻干燥机上冷冻干燥。所获得的粗物质通过逆相hplc来纯化，得到n-(1-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(7mg，3％，呈白色固体状)。1h nmr：(400mhz，dmso-d6)δ11.07(s，1h)，8.18(d，j＝6.4hz，1h)，8.05(s，1h)，8.00(s，1h)，7.73(t，j＝4.2hz，2h)，7.28(d，j＝3.6hz，1h)，7.17-7.05(m，1h)，6.80-6.67(m，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。lcms：485[m+h]
+
。
[0598]
实例s11.合成n-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯甲基]-1h-吡唑-4-基}-5-叔丁基-1，2-噁唑-3-甲酰胺(化合物13)
[0599][0600]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(1.83g，16.28mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中逐份加入k2co3(3.36gm，24.42mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(5.0gm，16.28mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(4.5g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0601]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2.5g，1当量)于甲醇(40ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](250mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0602]
步骤3：合成n-{1-[2，4-双(三氟甲基)苯甲基]-1h-吡唑-4-基}-5-叔丁基-1，2-噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-叔丁基-1，2-噁唑-3-甲酸(100mg，0.588mmol，1当量)于dmf(8ml)中的溶液中加入hatu(246mg，0646mmol，1.1当量)并搅拌反应混合物半小时，接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(182mg，0.588mmol，1当量)和dipea(242mg，1.881mmol，3.2当量)，在室温下搅拌所得反应混合物过夜。用tlc和lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤，收集有机层，经硫酸钠干燥并在旋转蒸发仪上浓缩，得到粗产物，其通过逆相色谱法进一步纯化(15mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 1.35(s，9h)5.65(s，2h)6.64(s，1h)7.06(d，j＝7.89hz，1h)7.75(s，1h)7.99-8.17(m，2h)8.29(s，1h)10.97(s，1h)。lcms：461(m+h)
+
。
[0603]
实例s12.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物14)
[0604][0605]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(1.83gm，16.28mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中逐份加入k2co3(3.36gm，24.42mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(5.0gm，16.28mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(4.5g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0606]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2.5g，1当量)于甲醇(40ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](250mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0607]
步骤3：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(噻吩-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(噻吩-2-基)-1，2-噁唑-3-甲酸(100mg，0.512mmol，1当量)于dmf(5ml)中的溶液中加入hatu(213mg，0.0.513mmol，1.1当量)并搅拌所得反应混合物一小时。接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(158mg，0.0.512mmol，1当量)和dipea(210mg，1.63mmol，3.2当量)并在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释并用水(70ml)洗涤，收集有机层并经无水硫酸钠干燥并在旋转蒸发仪上浓缩，得到粗产物，其通过逆相色谱法进一步纯化(7mg白色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.67(br.s.，2h)7.05(d，j＝7.45hz，1h)7.29(br.s.，2h)7.78(s，1h)7.84(br.s.，1h)7.90(d，j＝4.38hz，2h)8.04-8.14(m，2h)8.32(s，1h)11.11(s，1h)。lcms：486(m+h)
+
。
[0608]
实例s13.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-[3，3
′-
联吡啶]-5-甲酰胺(化合物15)
[0609][0610]
向搅拌的n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴烟酰胺(100mg，0.20mmol，1当量)和吡啶-3-基硼酸(32mg，0.26mmol，1.3当量)于dmf(7ml)中的溶液中加入
na2co3(53mg，0.50mmol，2.5当量)、水(1.5ml)和tetrakis(23mg，0.020mmol，0.1当量)。将所得反应混合物在100℃下加热2小时。用tlc和lcms监测反应。在反应完成后，反应混合物冷却至室温并加入水(20ml)。将所得固体滤出并用水洗涤，真空干燥，获得粗物质。粗产物通过制备型纯化来纯化，获得固体n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-[3，3
′-
联吡啶]-5-甲酰胺(25mg，25％)，呈灰白色固体状。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.89(s，1h)，9.13(dd，j＝4.7，2.2hz，2h)，9.06(d，j＝2.5hz，1h)，8.68(d，j＝4.6hz，1h)，8.64(s，1h)，8.34(s，1h)，8.27(d，j＝8.0hz，1h)，8.08(d，j＝5.4hz，2h)，7.77(s，1h)，7.58(dd，j＝7.9，4.8hz，1h)，7.10(d，j＝8.2hz，1h)，5.68(s，2h)，1.62(s，2h)。
[0611]
实例s14.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2，4-二氟苯基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物16)
[0612][0613]
向5-(2，4-二氟苯基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.44mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(185mg，0.48mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(183mg，1.42mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(137mg，0.44mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2，4-二氟苯基)异噁唑-3-甲酰胺。(36mg，15.7％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.16(s，1h)，8.33(s，1h)，8.10(q，j＝8.3hz，3h)，7.78(s，1h)，7.61(t，j＝10.9hz，1h)，7.35(dd，j＝10.1，7.7hz，1h)，7.26(d，j＝2.9hz，1h)，7.06(d，j＝8.1hz，1h)，5.67(s，2h)。
[0614]
实例s15.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-咪唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物17)
[0615][0616]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-咪唑.向搅拌的4-硝基-1h-咪唑(0.368g，0.003mol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中。用冰水冷却此反应混合物达0℃，逐份加入k2co3(0.674g，0.004mol，1.5当量)至其中，搅拌反应混合物10分钟并接着逐滴
加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(1.0g，0.003mol，1当量)至其中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得呈灰白色固体状的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-咪唑(1.1g，100％粗)。lcms：339[m+h]
+
。
[0617]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-咪唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-咪唑(500mg，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](100mg，10％w/w)至其中并用氢气净化反应混合物2小时。用lcms监测反应。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并浓缩滤液，获得产物，其通过快速色谱法来纯化，得到1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-咪唑-4-胺(460mg，100％粗)，呈棕色粘性液体状。lcms：309[m+h]
+
。
[0618]
步骤3：合成4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基呋喃(5.0g，45.40mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(3.63g，90.81mmol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(12.28ml，90.81mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
100ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法来纯化(己烷中0-20％乙酸乙酯)，获得4-(呋喃-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(3.6g，45％呈黄色固体状)。lcms：210[m+h]
+
。
[0619]
步骤4：合成5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-(呋喃-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯。所获得的粗产物未经进一步纯化即用于下一步(700mg，52％，呈黄色固体状)。lcms：207[m+h]
+
。
[0620]
步骤5：合成5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(225mg，52％，呈白色固体状)。lcms：179[m+h]
+
。
[0621]
步骤6：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-咪唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，0.647mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中加入hatu(270mg，0.711mmol，1.1当量)，加入dipea(267mg，2.07mmol，3.2当量)。在室温下搅拌15分钟后，，接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-咪唑-4-胺(115mg，0.647mmol，1当量)。在室温下搅拌反应混合物过夜。用lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯(30ml)稀释并用水(50ml)洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物，其通过使用柱色谱法来纯化(100mg，32％，呈白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)＝11.21(br.s.，1h)，8.17-8.05(m，2h)，8.00(s，1h)，7.74(s，1h)，7.49(s，1h)，7.24(br.s.，3h)，6.76(br.s.，1h)，5.57(br.s.，2h)。lcms：471[m+h]
+
。
[0622]
实例s16.合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物18)
[0623][0624]
步骤1：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-4-硝基-1h-吡唑.使2，3-二氢-1h-茚-2-醇(1)(1gm，0.007mol，和1当量)和4-硝基-1h-吡唑(0.556gm，0.0049mol，和0.66当量)溶于6ml thf中。向其中加入三苯基膦(2.035gm，0.007mol，和1.041当量)。反应混合物保持在0℃下搅拌。向其中逐滴加入在3ml thf中稀释的diad(1.569gm，0.007mol，1.041当量)。混合物保持在0℃下搅拌10分钟。此后反应保持在微波中在140℃下15分钟。反应混合物浓缩至干并进行柱纯化，得到呈黄色油状的产物，1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-4-硝基-1h-吡唑(3)。lcms：229[m+h]
+
。
[0625]
步骤2：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-胺.向搅拌的1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-4-硝基-1h-吡唑(250mg)于meoh(10ml)中的溶液中并用氮气净化，接着加入pd/c 10重量％，1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑)至其中并再用氮气净化另外5分钟，接着将所得反应混合物用氢气净化一小时。用tlc和lcms监测反应。反应混合物经硅藻土床过滤并用甲醇洗涤并减压浓缩，得到粗产物1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-胺，其直接用于下一步。lcms：199[m+h]
+
。
[0626]
步骤3：合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.使5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，1当量，1.117mmol)溶于5ml dmf中。向其中加入hatu(424.5mg，1.117mmol，和1当量)。向其中加入dipea(0.288mg，2当量，和2.234mmol)。将反应混合物保持搅拌20分钟。向其中加入1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-胺(222.3，1当量，1.117mmol)。所得反应混合物保持搅拌24小时。通过加入水进行处理并用乙酸乙酯回收。将粗物质用ipa∶己烷(1∶9)湿磨，保持搅拌过夜并过滤。所获得的残余物为产物n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-2-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.98(s，1h)，8.01(d，j＝7.5hz，2h)，7.66(s，1h)，7.31-7.12(m，6h)，6.77(dd，j＝3.4，1.8hz，1h)，5.29-5.17(m，1h)，3.43(dd，j＝16.2，7.8hz，2h)，3.27(dd，j＝16.1，5.9hz，2h)。lcms：360[m+h]
+
。
[0627]
实例s17.合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物19)
[0628][0629]
步骤1：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑.使2，3-二氢-1h-茚-1-醇(1gm，0.007mol，和1当量)和4-硝基-1h-吡唑(0.556gm，0.0049mol，和0.6当量)溶于6ml thf中。向其中加入三苯基膦(2.035gm，0.007mol，和1.041当量)。反应混合物保持在0℃下搅拌。向其中逐滴加入在3ml thf中稀释的diad(1.56gm，0.007mol，1.041当量)。混合物保持在0℃下搅拌10分钟。此后反应保持在微波中在140℃下15分钟。反应混合物浓缩至干并进行柱纯化，得到呈黄色油状的产物，1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑。
[0630]
步骤2：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺.向搅拌的1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑(200mg)于meoh(10ml)中的溶液中并用氮气净化，接着加入pd/c(20mg 10重量％，1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑)至其中并再用氮气净化另外5分钟，接着将所得反应混合物用氢气净化一小时。用tlc和lcms监测反应。反应混合物经硅藻土床过滤并用甲醇洗涤并减压浓缩，得到粗产物1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺，其直接用于下一步。lcms：199[m+h]
+
。
[0631]
步骤3：合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.使5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，1当量，0.502mmol)溶于5ml dmf中。向其中加入hatu(190.9mg，0.502mmol，和1当量)。向其中加入dipea(0.17ml，2当量，和1.005mmol)。将反应混合物保持搅拌20分钟。向其中加入1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺(4)(89.9mg，1当量，0.502mmol)。所得反应混合物保持搅拌24小时。通过加入水进行处理并用乙酸乙酯回收。将粗物质用ipa∶己烷(1∶9)湿磨，保持搅拌过夜并过滤。所获得的残余物为产物n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.01(s，1h)，8.01(d，j＝4.3hz，2h)，7.67(s，1h)，7.35(d，j＝7.6hz，1h)，7.32-7.24(m，2h)，7.19(t，j＝7.4hz，1h)，7.14(s，1h)，7.07(d，j＝7.5hz，1h)，6.80-6.74(m，1h)，5.92(t，j＝7.1hz，1h)，3.12(ddd，j＝14.6，8.7，5.1hz，1h)，2.93(dt，j＝15.7，7.5hz，1h)，2.61(dtd，j＝13.1，8.2，5.1hz，1h)，2.35(dq，j＝13.4，6.6hz，1h)。lcms：360[m+h]
+
。
[0632]
实例s18.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(4氟苯基)烟酰胺(化合物20)
[0633][0634]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(1.83g，16.28mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中逐份加入k2co3(3.36gm，24.42mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(5.0gm，16.28mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(4.5g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0635]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(1.0g，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](100mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0636]
步骤3：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴烟酰胺.向搅拌的5-溴烟酸(200mg，1.01mmol，1当量)于dmf(15ml)中的溶液中加入hatu(422mg，1.11mmol，1.1当量)并搅拌半小时，接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(300mg，1.01mmol，1当量)和diea(0.550ml，3.23mmol，3.2当量)至其中。在室温下搅拌反应混合物过夜。用lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯(150ml)稀释并用水(100ml)洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到产物(450mg，棕色固体)。lcms：492[m+h]
+
。
[0637]
步骤4：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(4氟苯基)烟酰胺.向n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴烟酰胺(150mg，0.30mmol，1.当量)于二噁烷(05ml)中的溶液中加入(4氟苯基)硼酸(46mg，0.33mmol，1.1当量)、na2co3(60mg，0.60mmol，2.0当量)，接着加入pd(pph3)2cl2(10mg，0.015mmol，0.05当量)。将所得反应混合物在100℃下加热过夜。用lcms确认产物形成。在反应完成后，混合物经硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(100ml)洗涤。滤液在减压下浓缩。所获得的粗产物在(5ml)异丙醇中湿磨并在减压下浓缩，获得n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(4氟苯基)烟酰胺(20mg，棕色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.67(s，2h)7.10(d，j＝8.77hz，1h)7.40(t，j＝8.55hz，2h)7.76(s，1h)7.89(dd，j＝8.77，5.26hz，2h)8.09(br.s.，2h)8.34(s，1h)8.53(br.s.，1h)9.06(br.s.，2h)10.81(s，1h)。lcms：509[m+h]
+
。
[0638]
实例s19.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-苯基烟酰胺(化合物21)
[0639][0640]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(1.83g，16.28mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中逐份加入k2co3(3.36gm，24.42mmol，1.5当量)并搅拌1 0分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(5.0gm，16.28mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(4.5g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0641]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(1.0g，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](100mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0642]
步骤3：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴烟酰胺.向搅拌的5-溴烟酸(200mg，1.01mmol，1当量)于dmf(15ml)中的溶液中加入hatu(422mg，1.11mmol，1.1当量)并搅拌半小时，接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(300mg，1.01mmol，1当量)和diea(0.550ml，3.23mmol，3.2当量)至其中。在室温下搅拌反应混合物过夜。用lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯(150ml)稀释并用水(100ml)洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到产物(450mg，棕色固体)。lcms：492[m+h]
+
。
[0643]
步骤4：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-苯基烟酰胺.向n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴烟酰胺(150mg，0.30mmol，1.当量)于二噁烷(05ml)中的溶液中加入苯基硼酸(39mg，0.33mmol，1.1当量)、na2co3(60mg，0.60mmol，2.0当量)，接着加入pd(pph3)2cl2(10mg，0.015mmol，0.05当量)。将所得反应混合物在100℃下加热过夜。用lcms确认产物形成。在反应完成后，混合物经硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(100ml)洗涤。滤液在减压下浓缩。所获得的粗产物在(5ml)异丙醇中湿磨并在减压下浓缩，获得n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-苯基烟酰胺。(20mg，棕色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.67(br.s.，2h)7.10(d，j＝7.02hz，2h)7.48(br.s.，1h)7.56(t，j＝7.24hz，1h)7.76(s，1h)7.84(d，j＝7.45hz，3h)8.09(br.s.，1h)8.34(s，1h)8.55(br.s.，2h)9.08(br.s.，1h)10.81(s，1h)。lcms：491[m+h]
+
。
[0644]
实例s20.合成n-(1-(2，4-双(甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物22)
[0645][0646]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(2.0g，6.51mmol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中逐份加入k2co3并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(0.73gm，6.51mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2.1g，呈白色固体状)。lcms：339[m+h]
+
。
[0647]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(1.0g，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](100mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：309[m+h]
+
。
[0648]
步骤3：合成4-(5-甲基呋喃-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基-5-甲基呋喃(1.0g，8.05mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(0.386g，16.11mmol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(2.35ml，16.11mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
50ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得4-(5-甲基呋喃-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(1.0g，55％，呈黄色固体状)。lcms：224[m+h]
+
。
[0649]
步骤4：合成5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-(5-甲基呋喃-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(1.0g，4.46mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.218g，4.46mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯。所获得的粗产物未经进一步纯化即用于下一步(600mg，52％呈黄色固体状)。lcms：221[m+h]
+
。
[0650]
步骤5：合成5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁
唑-3-甲酸乙酯(0.5g，mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入1n氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-甲基呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(180mg，52％呈白色固体状)。lcms：193[m+h]
+
。
[0651]
步骤6：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-甲基呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(100mg，0.518mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(216mg，0.569mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(214mg，1.65mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1(2，4双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(176mg，0.569mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(25ml)稀释。所得沉淀滤出并在冷冻干燥机上冷冻干燥。所获得的粗物质通过逆相hplc来纯化，得到n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(5-甲基呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(55mg，呈白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 1.22-1.23(m，1h)2.40(s，3h)5.66(s，2h)6.40(d，j＝3.07hz，1h)7.01-7.10(m，2h)7.17(d，j＝3.51hz，1h)7.77(s，1h)8.05-8.11(m，1h)8.31(s，1h)11.10(s，1h)。lcms：484[m+h]
+
。
[0652]
实例s21.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物23)
[0653][0654]
向异噁唑-3-甲酸(100mg，0.88mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液加入hatu(369mg，0.97mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(365mg，2.83mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(273mg，0.884mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)异噁唑-3-甲酰胺。(40mg，11％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，9.14(d，j＝1.5hz，1h)，8.29(s，1h)，8.06(d，j＝8.3hz，2h)，7.76(s，1h)，7.05(d，j＝8.1hz，1h)，6.99(d，j＝1.7hz，1h)，5.66(s，2h)。
[0655]
实例s22.合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物24)
[0656][0657]
步骤1：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.使4-硝基-1h-吡唑(1.177gm，1当量，0.0104mol)溶于5mldmf中。在0℃下向其中加入k2co3(2.15gm，0.015mol，1.5当量)，反应混合物保持搅拌30分钟。向其中加入2-(溴甲基)-1，3-二氯苯(2.5gm，0.0104mol，1当量)并将反应混合物保持搅拌1小时。通过加入水进行反应处理并回收在乙酸乙酯中。有机层减压浓缩，得到所需产物1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑。lcms：272[m+h]
+
。
[0658]
步骤2：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺.使1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(3)(1gm，0.003mol，1当量)溶于甲醇中。向其中加入锌(962mg，0.014mol，4当量)。向其中加入一水合肼(6ml)。使反应混合物在80℃下回流24小时。监测反应。通过使反应混合物通过硅藻土床进行处理。将所获得的有机层用水洗涤以萃取出剩余水合肼。并接着在减压下浓缩各层，获得所需产物1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺。lcms：241[m+h]
+
。
[0659]
步骤3：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.使1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.8gm)溶解于甲醇中。向其中加入5ml hcl的乙醚溶液并保持搅拌过夜。过滤所得悬浮液。并且所获得的残余物通过醚洗来干燥。获得产物1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐。lcms：241[m+h]
+
。
[0660]
步骤4：合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.使5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，1当量，0.558mmol)溶于3ml dmf中。向其中加入hatu(212.8mg，0.558mmol，和1当量)。向其中加入dipea(144.13mg，2当量，和1.117mmol)。将反应混合物保持搅拌20分钟。向其中加入1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺.hcl(186.3mg，1.2当量，0.670mmol)。所得反应混合物保持搅拌24小时。通过加入水进行处理并用乙酸乙酯回收。并且所得粗物质通过prep来纯化。所获得的产物是n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.00(s，1h)，8.06(s，1h)，8.00(s，1h)，7.63(s，1h)，7.56(d，j＝8.1hz，2h)，7.45(t，j＝8.1hz，1h)，7.28(d，j＝3.5hz，1h)，7.13(s，1h)，6.77(dd，j＝3.4，1.8hz，1h)，5.55(s，2h)，5.32(s，0h)，3.97(s，0h)，1.23(s，1h)，0.89-0.81(m，0h)。lcms：402[m+h]
+
。
[0661]
实例s23.合成n-(1-(4-氰基苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物25)
[0662][0663]
向5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.55mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(233mg，0.61mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(230mg，1.78mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用4-((4-氨基-1h-吡唑-1-基)甲基)苯甲腈(110mg，0.55mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。将反应混合物保持在室温下搅拌24。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质。粗产物通过制备型纯化来纯化，获得固体n-(1-(4-氰基苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(30mg，18％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.25(s，1h)，8.00(d，j＝1.8hz，1h)，7.82(d，j＝7.9hz，1h)，7.70(s，1h)，7.36(d，j＝8.0hz，1h)，7.29(d，j＝3.5hz，1h)，7.16(s，1h)，6.77(dd，j＝3.4，1.8hz，1h)，5.46(s，2h)，2.92(q，j＝7.2hz，1h)。
[0664]
实例s24.合成n-(1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物26)
[0665][0666]
步骤1：合成4-((4-硝基-1h-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯甲腈.向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(0.213g，1.893mmol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中。用冰水冷却此反应混合物达0℃，逐份加入k2co3(0.39g，2.839mmol，1.5当量)至其中，搅拌反应混合物10分钟并接着逐滴加入4-(溴甲基)-2-(三氟甲基)苯甲腈(0.500g，1.893mmol，1当量)至其中。搅拌以上反应混合物1小时(用tlc和lcms监测反应)。在反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释并用水(50ml)萃取。收集有机层并浓缩其，获得产物，其通过快速色谱法进一步纯化，获得白色产物。lcms：297[m+h]
+
。
[0667]
步骤2：合成4-((4-氨基-1h-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯甲腈.在氮气下向搅拌的4-((4-硝基-1h-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯甲腈(500mg，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10重量％)至其中并用氢气净化反应混合物2小时。用lcms监测反应。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并浓缩滤液，获得产物，其通过
快速色谱法来纯化，得到棕色粘性液体。lcms：267[m+h]
+
。
[0668]
步骤3：合成4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基呋喃(5.0g，45.40mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(3.63g，90.81mmol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(12.28ml，90.81mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
100ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(3.6g，45％，呈黄色固体状)。lcms：210[m+h]
+
。
[0669]
步骤4：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-呋喃-2-基-2，4-二氧代基-丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯。所获得的粗产物未经进一步纯化即用于下一步(700mg，52％呈黄色固体状)。lcms：207[m+h]
+
。
[0670]
步骤5：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(225mg，52％呈白色固体状)。lcms：179[m+h]
+
。
[0671]
步骤6：合成n-(1-(4-氰基-3-(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.563mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中加入hatu(235mg，0.619mmol，1.1当量)并搅拌半小时，接着加入4-((4-氨基-1h-吡唑-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯甲腈(150mg，0.563mmol，1当量)和diea至其中。在室温下搅拌反应混合物过夜。用lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯(30ml)稀释并用水(50ml)洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到产物，其通过逆相色谱法进一步纯化。(10mg白色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.57(s，2h)6.78(br.s.，1h)7.17(s，1h)7.29(d，j＝3.51hz，2h)7.73(s，1h)7.88(s，1h)8.01(s，1h)8.16(d，j＝7.45hz，1h)8.31(s，1h)11.09(s，1h)。lcms：428[m+h]
+
。
[0672]
实例s25.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物27)
[0673][0674]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.在0℃下向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(2.0g，6.51mmol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中逐份加入k2co3并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(0.73gm，6.51mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(2.1g，呈白色固体状)。lcms：326[m+h]
+
。
[0675]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(1.0g，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](100mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(0.800g，呈棕色液体状)。lcms：296[m+h]
+
。
[0676]
步骤3：合成4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基呋喃(5.0g，45.40mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(3.63g，90.81mmol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(12.28ml，90.81mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
100ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法来纯化(己烷中0-20％乙酸乙酯)，获得4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(3.6g，45％，呈黄色固体状)。lcms：210[m+h]
+
。
[0677]
步骤4：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-呋喃-2-基-2，4-二氧代基-丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯。所获得的粗产物未经进一步纯化即用于下一步(700mg，52％，呈黄色固体状)。lcms：207[m+h]
+
。
[0678]
步骤5：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(225mg，52％呈白色固体状)。lcms：179[m+h]
+
。
[0679]
步骤6：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(60mg，0.338mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中加入hatu(141mg，0.0.372mmol，1.1当量)并搅拌半小时，接着加入1-(2，4-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(100mg，0.338mmol，1当量)和diea(0.18ml，1.081mmol，3.2当量)至其中。在室温下搅拌反应混合物过夜。用lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯(30ml)稀释并用水(50ml)洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到产物(12mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 6.79(br.s.，2h)7.21(s，2h)7.31(br.s.，1h)8.06(s，1h)8.02(s，1h)8.27(br.s.，1h)8.49(br.s.，1h)11.30(br.s.，1h)。lcms：457[m+h]
+
。
[0680]
实例s26.合成n-(1-(3，5-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物28)
[0681][0682]
步骤1：合成1-(3，5-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的4-硝基-1h-吡唑(0.55g，4.88mmol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中。用冰水冷却此反应混合物达0℃，加入k2co3(1.01g，7.32mmol，1.5当量)逐份至其中，搅拌反应混合物10分钟并接着逐滴加入1-(溴甲基)-3，5-双(三氟甲基)苯(1.5g，4.88mmol，1当量)至其中。搅拌以上反应混合物1小时(用tlc和lcms监测反应)。在反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释并用水(50ml)萃取。收集有机层并浓缩其，获得产物，其通过快速色谱法进一步纯化，获得白色产物。lcms：339[m+h]
+
。
[0683]
步骤2：合成1-(3，5-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(3，5-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1当量)于甲醇(20ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10重量％)至其中并用氢气净化反应混合物2小时。用lcms监测反应。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并浓缩滤液，获得产物，其通过快速色谱法来纯化，得到棕色粘性液体。lcms：309[m+h]
+
。
[0684]
步骤3：合成4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基呋喃(5.0g，45.40mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(3.63g，90.81mmol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(12.28ml，90.81mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
100ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并
用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(3.6g，45％，呈黄色固体状)。lcms：210[m+h]
+
。
[0685]
步骤4：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-呋喃-2-基-2，4-二氧代基-丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯。所获得的粗产物未经进一步纯化即用于下一步(700mg，52％呈黄色固体状)。lcms：207[m+h]
+
。
[0686]
步骤5：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(225mg，52％呈白色固体状)。lcms：179[m+h]
+
。
[0687]
步骤6：合成n-(1-(3，5-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.558mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中加入hatu(233mg，0.613mmol，1.1当量)并搅拌半小时，接着加入1-(3，5-双(三氟甲基)-1h-吡唑-4-胺(172mg，0.558mmol，1当量)和diea至其中。在室温下搅拌反应混合物过夜。用lcms监测反应。将反应混合物用乙酸乙酯稀释(30ml)并用水(50ml)洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物，其通过使用异丙醇湿磨来纯化(12mg白色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 5.56(s，2h)7.16(s，1h)7.29(d，j＝3.51hz，1h)7.72(s，2h)7.95(s，2h)8.01(s，1h)8.08(br.s.，1h)8.33(s，1h)11.06(s，1h)。lcms：471[m+h]
+
。
[0688]
实例s27.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物29和30)
[0689][0690]
步骤1：合成2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯.在0℃下向1-(吡啶-2-基)
乙-1-酮(5.0g，0.04mol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(3.3g，0.08mol，2.0当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(11.2ml，0.08mol，2.0当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成.。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(3g，黄色固体)。lcms：221[m+h]
+
。
[0691]
步骤2：合成5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1.0当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1.0当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌48小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯。获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化。lcms：218[m+h]
+
。
[0692]
步骤3：合成5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(225mg，52％，呈白色固体状)。lcms：190[m+h]
+
。
[0693]
步骤4：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(峰1)和1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(峰2).在0℃下向搅拌的3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1.24g，0.009mol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中逐份加入k2co3(1.86g，0.013mol，1当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(3gm，0.009mol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(100ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml
×
4)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(峰1)和1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(峰2)的混合物。所获得的粗物质准备送去分离。lcms：353[m+h]
+
。
[0694]
步骤5：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(峰1).在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(峰1)(150mg，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w)。用h2气净化反应混合物6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(峰1)。lcms：323[m+h]
+
。
[0695]
步骤6：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(峰2).在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(峰2)(500mg，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w)。用h2气净化反应混合物6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(峰2)。lcms：323[m+h]
+
。
[0696]
步骤7：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物29).向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(50mg，0.263mmol，1
当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(100mg，0.263mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(0.13ml，0.775mmol，2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(峰1)(85mg，0.263mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。所获得的粗物质通过用己烷湿磨来纯化。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.40(s，1h)，8.77(d，j＝4.82hz，1h)，8.02-8.11(m，4h)，7.76(s，1h)，7.54-7.58(m，1h)，7.50(s，1h)，6.85(d，j＝7.89hz，2h)，5.59(s，2h)，2.19(s，3h)。lcms：495[m+h]
+
。
[0697]
步骤8：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物30).向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.52mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(200mg，0.52mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(135.7mg，1.05mmol，2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(峰2)(170mg，0.52mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)小时。将所得沉淀滤出。所获得的粗物质通过用ipa湿磨来纯化。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.39(s，1h)，8.76(br.s.，1h)，8.23(s，1h)，8.00-8.12(m，4h)，7.55-7.58(m，1h)，7.51(s，1h)，7.12(d，j＝8.33hz，1h)，5.58(s，2h)，2.21(s，3h)。lcms：495[m+h]
+
。
[0698]
实例s28.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物31)
[0699][0700]
步骤1：合成5-(三丁基锡烷基)异噁唑-3-甲酸乙酯.在室温下向(z)-2-氯-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(2.0gm，0.013mol，1当量)于dcm(20ml)中的溶液中加入k2co3(2.01gm，0.014mol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在室温下逐滴加入三丁基(乙炔基)锡烷(4.01gm，0.013mol，1当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用dcm(2
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中5-10％乙酸乙酯)进一步纯化，获得5-(三丁基锡烷基)异噁唑-3-甲酸乙酯(2.1gm，35％，呈棕色液体状)。lcms：432[m+h]
+
。
[0701]
步骤2：合成5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.使用氮气使5-(三丁基锡烷
基)异噁唑-3-甲酸乙酯(600mg，1.39mmol，1.0当量)和2-溴-3-氯吡啶(267mg，1.39mmol，1.0当量)于甲苯(2ml)中的悬浮液脱气5分钟。将tetrakis(161mg，0.13mmol，1.0当量)加入至反应混合物。将所得反应混合物在100℃下加热16小时。用tlc和lcms确认产物形成。将所得混合物用水稀释，用乙酸乙酯(2
×
100ml)萃取。分离有机相，经无水na2so4干燥，在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中10-15％乙酸乙酯)进一步纯化，获得5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(200mg，56％，呈灰白色固体状)。lcms：253[m+h]
+
。
[0702]
步骤3：合成5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(200mg，0.79mmol，1.0当量)于thf(5ml)、甲醇(3ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(66mg，1.58mmol，2.0当量)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，88％呈白色固体状)。lcms：225[m+h]
+
。
[0703]
步骤4：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(50mg，0.22mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(93mg，0.24mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(92mg，0.71mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(68mg，0.22mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(8mg，7％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.20(s，1h)，8.76(d，j＝4.5hz，1h)，8.33(s，1h)，8.21(d，j＝8.3hz，1h)，8.07(d，j＝7.2hz，2h)，7.79(s，1h)，7.64(dd，j＝8.2，4.6hz，1h)，7.57(s，1h)，7.07(d，j＝8.1hz，1h)，5.67(s，2h)。lcms：516[m+h]
+
。
[0704]
实例s29.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物32)
[0705][0706]
向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(50mg，0.22mmol，1当量)和hatu(72mg，0.22mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(92mg，0.71mmol，3.2当量)并加入1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(72mg，0.22mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯
产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(20mg，17％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.14(s，1h)，8.76(d，j＝4.6hz，1h)，8.21(d，j＝8.7hz，2h)，8.13-8.03(m，2h)，7.74(d，j＝7.5hz，2h)，7.64(dd，j＝8.3，4.6hz，1h)，7.54(s，1h)，5.94(q，j＝6.5hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。lcms：522[m+h]
+
。
[0707]
实例s30.合成n-(1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物33)
[0708][0709]
步骤1：合成(2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲醇.向搅拌的2，4-双(三氟甲基)苯甲醛(300mg，1.23mmol，1.0当量)于thf(5ml)中的溶液中逐份加入环丙基溴化镁(0.269gm，1.85mol，1.5当量)在室温下并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml
×
2)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得(2，4双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲醇(350gm，100％粗物质，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.15-8.02(m，2h)，7.94(s，1h)，5.67(d，j＝4.8hz，1h)，4.61(br.s.，1h)，1.14-1.06(m，1h)，0.58-0.49(m，1h)，0.46-0.28(m，3h)。
[0710]
步骤2：合成1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(329mg，1.23mmol，1.0当量)和diad(248mg，1.23mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入(2，4双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲醇(350mg，1.23mmol，1.0当量)。接着逐滴加入4-硝基-1h-吡唑(111mg，0.98mmol，0.8当量)，将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑(130mg，30％，呈棕色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.21(s，1h)，8.29-8.20(m，2h)，8.17(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，5.03(d，j＝10.1hz，1h)，1.22(br.s.，1h)，0.76(br.s.，2h)，0.69(br.s.，1h)，0.37(br.s.，1h)。
[0711]
步骤3：合成1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(220mg，0.58mmol，1.0当量)于
甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](49mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，得到1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-1h-吡唑-4-胺(120mg，58％粗物质，呈棕色液体状)。lcms：350[m+h]
+
。
[0712]
步骤4：合成n-(1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(60mg，0.31mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(132mg，0.34mmol，1.1当量)。将混合物用dipea(130mg，1.01mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-((2，4-双(三氟甲基)苯基)(环丙基)甲基)-1h-吡唑-4-胺(110mg，0.31mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(65mg，40％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.36(s，1h)，8.20(d，j＝8.5hz，1h)，8.14(d，j＝8.5hz，1h)，8.12-7.98(m，3h)，7.70(s，1h)，7.56(t，j＝6.1hz，1h)，7.47(s，1h)，4.96(d，j＝9.6hz，1h)，1.94(qd，j＝9.0，8.6，4.3hz，1h)，0.70(dddd，j＝28.2，18.9，9.1，4.8hz，3h)，0.35(dq，j＝10.4，5.4，4.9hz，1h)。lcms：530[m+h]
+
。
[0713]
实例s31.合成(r)-和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物34和35)
[0714][0715]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(95mg，0.42mmol，1当量)和hatu(177mg，0.46mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(175mg，1.35mmol，3.2当量)并加入1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(131mg，0.42mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(95mg，42％，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.14(s，1h)，8.76(d，j＝4.6hz，1h)，8.21(d，j＝8.7hz，2h)，8.13-8.03(m，2h)，7.74(d，j＝7.5hz，2h)，7.64(dd，j＝8.3，4.6hz，1h)，7.54(s，1h)，5.94(q，j＝6.5hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。
lcms：522[m+h]
+
。
[0716]
步骤2：(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的外消旋混合物(90mg)通过手性hplc来纯化，获得作为对映异构体a(12mg)和对映异构体b(11mg)的单一对映异构体。(对映异构体a)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.14(s，1h)，8.76(d，j＝4.6hz，1h)，8.21(d，j＝8.7hz，2h)，8.13-8.03(m，2h)，7.74(d，j＝7.5hz，2h)，7.64(dd，j＝8.3，4.6hz，1h)，7.54(s，1h)，5.94(q，j＝6.5hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。(对映异构体b)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.14(s，1h)，8.76(d，j＝4.6hz，1h)，8.21(d，j＝8.7hz，2h)，8.13-8.03(m，2h)，7.74(d，j＝7.5hz，2h)，7.64(dd，j＝8.3，4.6hz，1h)，7.54(s，1h)，5.94(q，j＝6.5hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。
[0717]
实例s32.合成(r)-和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物36和37)
[0718][0719]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酸(50mg，0.263mmol，1当量)和hatu(100.2mg，0.263mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(101.8mg，0.789mmol，3当量)并加入1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(94.73mg，0.263mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
2)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺。lcms：495[m+h]
+
。
[0720]
步骤2：(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺的外消旋混合物(60mg)通过手性hplc来纯化，获得作为对映异构体a(12mg)和对映异构体b(15mg)的单一对映异构体。(对映异构体a)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.09(s，1h)，9.20(s，1h)，8.74(d，j＝3.51hz，1h)，8.38(d，j＝7.89hz，1h)，8.20(s，1h)，8.02-8.14(m，2h)，7.70-7.80(m，2h)，7.57-7.65(m，2h)，5.94(d，j＝6.58hz，1h)，1.88(d，j＝6.58hz，3h)。(对映异构体b)：1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.09(s，1h)，9.20(s，1h)，8.74(d，j＝3.51hz，1h)，8.38(d，j＝8.33hz，1h)，8.20(s，1h)，8.04-8.11(m，2h)，7.70-7.77(m，2h)，7.59-7.63(m，2h)，5.94(d，j＝6.58hz，1h)，1.88(d，j＝
6.58hz，3h)。
[0721]
实例s34.合成(r)和(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺(化合物76和77)
[0722][0723]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺.向3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酸(100mg，0.44mmol，1当量)和hatu(168mg，0.44mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(185mg，1.41mmol，3.2当量)并加入1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(142mg，0.44mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺(150mg，呈灰白色固体状)。lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.18(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.21(s，1h)，8.10(dd，j＝8.5，4.2hz，2h)，8.05(s，1h)，8.01(td，j＝7.7，1.8hz，1h)，7.79-7.69(m，2h)，7.68(s，1h)，7.58(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.95(q，j＝7.0hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。
[0724]
步骤2：合成(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺的互变异构体(90mg，洗脱时间：3.69min和4.78min)通过手性sfc(daicelod-h，250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：51g/min，共溶剂百分比：20％，获得化合物40(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺(22mg)和化合物41(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-5-甲酰胺(23mg)。(化合物76)lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.18(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.21(s，1h)，8.10(dd，j＝8.5，4.2hz，2h)，8.05(s，1h)，8.01(td，j＝7.7，1.8hz，1h)，7.79-7.69(m，2h)，7.68(s，1h)，7.58(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.95(q，j＝7.0hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。(化合物77)lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.18(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.21(s，1h)，8.10(dd，j＝8.5，4.2hz，2h)，8.05(s，1h)，8.01(td，j＝7.7，1.8hz，1h)，7.79-7.69(m，2h)，7.68(s，1h)，7.58(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.95(q，j＝7.0hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。
[0725]
实例s35.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(化合物78)
4-甲酰胺.向2-溴噻唑-4-甲酸(200mg，0.96mmol，1当量)和hatu(401mg，1.05mmol，1.1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(396mg，3.07mmol，3.2当量)并加入1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(344mg，0.96mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得标题化合物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-4-甲酰胺，呈灰白色固体状(360mg)。lcms：515[m+h]
+
。
[0732]
步骤2：合成2-(三丁基锡烷基)吡啶.在-70℃下向-70℃下2-溴吡啶(1g，0.006mol，1当量)于thf(20ml)中的溶液中加入n-buli(2.5m己烷溶液，3.0ml，0.007mol)。将混合物搅拌至-50℃并搅拌1小时。使三丁基氯锡烷(bu3sncl)(2.2gm，0.0069mol 1.1当量)溶于thf(50ml)中并在0℃下逐滴加入至反应混合物。经2小时将所得橙色混合物搅拌至0℃。将混合物用饱和naoh淬灭并用etoac萃取并用nh4cl溶液洗涤。合并的有机物干燥并浓缩，获得呈黄色液体状之粗产物2-(三丁基锡烷基)吡啶(1.2g)。lcms：370[m+h]
+
。
[0733]
步骤3：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺.向n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-4-甲酰胺(100mg，0.27mmol，1当量)于无水甲苯(2ml)中的溶液中加入2-(三丁基锡烷基)吡啶(139mg，0.27mmol，1当量)并使混合物脱气10分钟。向此混合物加入pd(pph3)4(31mg，0.027mmol，0.1当量)并使混合物再脱气5分钟。在反应完成后，将反应混合物在100℃下搅拌12小时。将反应混合物用h2o淬灭，用etoac萃取，干燥(na2so4)，并在减压下浓缩，获得粗产物，其通过快速柱色谱法和逆相hplc进一步纯化，获得n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺(20mg，呈白色固体状)。lcms：512[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.58(s，1h)，8.68(d，j＝4.8hz，1h)，8.46(s，1h)，8.37(d，j＝7.9hz，1h)，8.22(s，1h)，8.13-8.01(m，3h)，7.84(s，1h)，7.75(d，j＝8.3hz，1h)，7.61-7.52(m，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.8hz，3h)。
[0734]
实例s37.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺(化合物80)
[0735][0736]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇.在0℃下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(1g，0.003mol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.216g，0.005mol，1.2当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取，将
合并的有机萃取物用水(2
×
50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(1g，呈无色液体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.04-8.15(m，2h)，7.93(s，1h)，5.70(d，j＝3.95hz，1h)，5.09(br.s.，1h)，1.34(d，j＝6.14hz，3h)。
[0737]
步骤2：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(517mg，1.93mmol，1.0当量)和diad(319mg，1.93mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(500mg，1.93mmol，1.0当量)。向反应混合物加入4-硝基-1h-吡唑(175mg，1.55mmol，0.8当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水洗涤(50ml
×
3)。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑(550mg，呈棕色液体状)。lcms：353[m+h]
+
。
[0738]
步骤3：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1.41mmol，1.0当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳(75mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并且将滤液在减压下浓缩，获得1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(450mg，呈棕色液体状)。lcms：323[m+h]
+
。
[0739]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺.向2-溴噻唑-5-甲酸(200mg，0.96mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(438.28mg，1.152mmol，1.2当量)。将混合物用dipea(396mg mg，3.072mmol，3.2当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-{1[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺(345mg，0.96mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺(150mg，呈白色固体状)。lcms：511[m+h]
+
。
[0740]
步骤5：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺.在干燥条件下向搅拌的n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺(100mg，0.19mmol 1当量)、2-(呋喃-2-基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊环(36mg，0.19mmol，1当量)、na2co3(40mg，0.38mmol，2当量)于二噁烷、h2o中的溶液中加入催化剂(22mg，0.019mmol，0.1当量)。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺(50mg)。lcms：500[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.77(s，1h)，8.51(s，1h)，8.14(s，1h)，8.09(d，j＝8.4hz，1h)，8.05(s，1h)，7.97(s，1h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.66(s，1h)，7.25(d，j＝3.5hz，1h)，6.79-6.72(m，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。
[0741]
实例s38.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，4
′-
联吡啶]-2
′-
甲酰胺(化合物81)
[0742][0743]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-溴吡啶甲酰胺.向2-溴噻唑-4-甲酸(200mg，0.96mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(401mg，1.05mmol，1.1当量)。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(396mg，3.07mmol，3.2当量)和1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(344mg，0.96mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-4-甲酰胺(360mg，粗，呈灰白色固体状)。lcms：507[m+h]
+
。
[0744]
步骤2：合成2-(三甲基锡烷基)吡啶.向2-溴吡啶(100mg，0.63mmol，1当量)于无水甲苯(30ml)中的溶液中加入1，1，1，2，2，2-六甲基二锡烷(227.0mg，0.6p mmol，1.1当量)，并使混合物脱气10分钟。向此混合物加入pd(pph3)4(73mg，0.063mmol，0.1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在微波下在150℃下搅拌20分钟，此后tlc指示起始物质完全消耗。将混合物真空浓缩，得到粗产物2-(三甲基锡烷基)吡啶(360mg，72％粗，其未经进一步纯化进行下一步。
[0745]
步骤3：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，4
′-
联吡啶]-2
′-
甲酰胺.向n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-溴吡啶甲酰胺(50mg，0.20mmol，1当量)于无水甲苯(30ml)中的溶液中加入2-(三甲基锡烷基)吡啶(105mg，0.206mmol，1当量)，并使混合物脱气10分钟。向此混合物加入pd(pph3)4(23mg，0.20mmol，1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在80℃下搅拌8小时，此后tlc指示起始物质完全消耗。将混合物用h2o淬灭，用etoac萃取，经无水na2so4干燥，并真空浓缩，得到产物，其通过快速柱色谱法和逆相hplc进一步纯化，获得标题化合物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(5mg，呈灰白色固体状)。lcms：506[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ8.64(d，j＝4.8hz，1h)，8.33(s，1h)，8.20(d，j＝8.0hz，1h)，8.15(s，1h)，7.92(s，1h)，7.89-7.81(m，1h)，7.79(s，1h)，7.75(d，j＝
8.3hz，1h)，7.65-7.56(m，3h)，7.39(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.92(q，j＝6.9hz，1h)，1.95(d，j＝6.9hz，3h)。
[0746]
实例s39.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-6
′-
甲酰胺(化合物82)
[0747][0748]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴吡啶甲酰胺.向5-溴吡啶甲酸(200mg，0.82mmol，1当量)和hatu(345mg，0.090mmol，1.1当量)于dmf(2ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(341mg，2.64mmol，3.2当量)和1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(266mg，0.82mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴吡啶甲酰胺。(250mg，呈灰白色固体状)。lcms：507[m+h]
+
。
[0749]
步骤2：合成2-(三甲基锡烷基)吡啶.向2-溴吡啶(150mg，0.94mmol，1当量)于无水甲苯(2ml)中的溶液中加入1，1，1，2，2，2-六甲基二锡烷(341mg，1.04mmol，1.1当量)，并使混合物脱气10分钟。向反应混合物加入pd(pph3)4(109mg，0.094mmol，0.1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在微波下在150℃下搅拌20分钟，此后tlc指示起始物质完全消耗。混合物在减压下浓缩，得到粗产物2-(三甲基锡烷基)吡啶(230mg，粗)，其未经进一步纯化进入下一步。lcms：244[m+h]
+
。
[0750]
步骤3：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-6
′-
甲酰胺.向n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-溴吡啶甲酰胺(200mg，0.39mmol，1当量)于无水甲苯(5ml)中的溶液中加入2-(三甲基锡烷基)吡啶(143mg，0.59mmol，1当量)，并使混合物脱气10分钟。向此混合物加入pd(pph3)4(45mg，0.039mmol，1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在80℃下搅拌过夜，此后tlc指示起始物质完全消耗。将混合物用h2o淬灭，用etoac萃取，经无水na2so4干燥，并真空浓缩，得到产物，其通过快速柱色谱法(atoac/己烷)和逆相hplc进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-[2，3
′-
联吡啶]-6
′-
甲酰胺(25mg，呈灰白色固体状)。lcms：506[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.84(s，1h)，9.41(d，j＝
2.1hz，1h)，9.13(d，j＝2.0hz，1h)，8.93(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.23(s，1h)，8.16(d，j＝8.0hz，1h)，8.10(d，j＝8.4hz，1h)，8.06(s，1h)，7.99(t，j＝7.5hz，1h)，7.79-7.69(m，2h)，7.48(dd，j＝7.7，4.8hz，1h)，5.94(q，j＝6.8hz，1h)，1.89(d，j＝6.9hz，3h)。
[0751]
实例s40.合成(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)丙烯酰胺(化合物83)
[0752][0753]
步骤1：合成(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)丙烯酰胺.向(e)-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(100mg，0.67mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(280mg，0.73mmol，1当量)。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(277mg，2.4mmol，3.2当量)和1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(240mg，0.67mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)和逆相hplc进一步纯化，获得呈游离碱形式的化合物(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(吡啶-2-基)丙烯酰胺(35mg，11％，呈灰白色固体状)。lcms：455[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.50(s，1h)，8.66-8.59(m，1h)，8.14(s，1h)，8.08(d，j＝8.4hz，1h)，8.05(s，1h)，7.85(td，j＝7.6，1.9hz，1h)，7.72(d，j＝8.4hz，1h)，7.65-7.57(m，2h)，7.53(d，j＝15.3hz，1h)，7.38(dd，j＝7.6，4.8hz，1h)，7.18(d，j＝15.3hz，1h)，5.91(q，j＝6.8hz，1h)，1.86(d，j＝6.9hz，3h)。
[0754]
实例s41.合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(化合物84)
[0755][0756]
步骤1：合成(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸乙酯.在0℃下向搅拌的三苯基膦乙酯维悌
希盐(wittig salt)(507mg，1.46mmol，1.4当量)于thf(10ml)中的溶液中加入糠醛(100mg，1.04mmol，1.0当量)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。反应过程通过tlc来监测。在反应完成后，将反应混合物蒸发，获得粗残余物，其通过快速柱色谱法来纯化，获得呈液体状的(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸乙酯(300mg)。lcms：167[m+h]
+
。
[0757]
步骤2：合成(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸.在0℃下向搅拌的(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸酯(380mg，2.29mmol，1.0当量)于thf∶水(1∶1)(10ml)中的溶液中加入lioh.h2o(288mg，6.87mmol，3.0当量)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。反应过程通过tlc来监测。在反应完成后，将反应混合物用10％hcl中和，用dcm(2
×
50ml)萃取。将有机层合并，经无水na2so4干燥并蒸发，获得粗残余物，其通过快速柱色谱法使用dcm/meoh作为洗脱剂来纯化，获得呈白色固体状的(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸(330mg)。lcms：139[m+h]
+
。
[0758]
步骤3：合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺.向(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸(60mg，0.435mmol，1当量)于dmf(3ml)中的溶液中加入hatu(182mg，0.478mmol，1.1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将反应混合物加入dipea(0.23ml，1.304mmol，3当量)和1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(150mg，0.435mmol，1当量)中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应过程通过tlc和lcms来监测。在反应完成后，将反应混合物用冰水(30ml)稀释并用etoac(2
×
30ml)萃取。将合并的有机层用冰冷水洗涤，经无水na2so4干燥并蒸发，获得粗残余物，其通过柱色谱法来纯化，获得呈白色固体状的(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(100mg)。lcms：446[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.38(s，1h)，8.23(s，1h)，8.06(d，j＝8.3hz，2h)，7.84-7.78(m，1h)，7.61(s，1h)，7.34(d，j＝15.5hz，1h)，7.03(d，j＝8.3hz，1h)，6.84(d，j＝3.4hz，1h)，6.65-6.58(m，1h)，6.53(d，j＝15.5hz，1h)，5.63(s，2h)。
[0759]
实例s42.合成(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(化合物85和86)
[0760][0761]
步骤1：合成(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺.向(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸(60mg，0.435mmol，1当量)于dmf(3ml)中的溶液中加入hatu(182mg，0.478mmol，1.1当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入dipea(0.25ml，1.304mmol，3当量)和1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(156mg，0.435mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应过程通过tlc和lcms来监测。在反应完成后，将反应混合物用冰水(30ml)稀释并用etoac(2
×
30ml)萃取。将合并的有机层用冰冷水洗涤，经无水na2so4干燥并蒸发，获得粗残余物，其通过柱色谱法来纯化，获得呈白色固体状的(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋
喃-2-基)丙烯酰胺(100mg)。对映异构体(洗脱时间：4.47min和4.68)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。利用分析级液体二氧化碳和hplc级乙醇(0.1％tfa)进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：12％，获得(r，e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(10mg)和(s，e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(20mg)。lcms：444[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 10.33(s，1h)8.12(s，1h)8.08(d，j＝8.33hz，1h)8.04(s，1h)7.80(s，1h)7.71(d，j＝8.33hz，1h)7.56(s，1h)7.31(d，j＝15.35hz，1h)6.83(d，j＝3.51hz，1h)6.61(d，j＝3.07hz，1h)6.50(d，j＝15.35hz，1h)5.90(d，j＝7.02hz，1h)1.85(d，j＝7.02hz，2h)。
[0762]
实例s43.合成(e)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(化合物87)
[0763][0764]
步骤3：合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺.向(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸(40mg，0.290mmol，1当量)于dmf(3ml)中的溶液中加入hatu(121mg，0.319mmol，1.1当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入dipea(0.16ml，0.870mmol，3当量)和1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(100mg，0.290mmol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应过程通过tlc和lcms来监测。在反应完成后，将反应混合物用冰水(30ml)稀释并用etoac(2
×
30ml)萃取。将合并的有机层用冰冷水洗涤，经无水na2so4干燥并蒸发，获得粗残余物，其通过柱色谱法来纯化，获得呈白色固体状的(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(40mg)。lcms：430[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.93(s，1h)，8.49(s，1h)，8.25-8.17(m，2h)，7.89(d，j＝8.4hz，1h)，7.83(s，1h)，7.37(d，j＝15.5hz，1h)，6.85(d，j＝3.4hz，1h)，6.79(d，j＝15.5hz，1h)，6.63(t，j＝2.6hz，1h)，2.31(s，3h)。
[0765]
实例s44.合成(r)-和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物s8和89)
[0766][0767]
步骤1：合成1-(2-甲氧基苯基)乙-1-酮.在0℃下向1-(2-羟基苯基)乙-1-酮(2g，0.014mol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中加入k2co3(4.05gm，0.029mol，2当量)。将反应混合物搅拌30分钟，接着加入碘甲烷(4.17g，2当量，0.029mol)。将反应混合物在室温下再搅拌24小时。将反应混合物用水淬灭并用etoac(3
×
100ml)萃取。收集有机层并用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法使用etoac/己烷作为洗脱剂来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物(1.2gm)。lcms：151[m+h]
+
。
[0768]
步骤2：合成4-(2-甲氧基苯基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向1-(2-甲氧基苯基)乙-1-酮(500mg，3.33mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入nah(60％，159.84mg，3.996mmol，1.2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(972.36mg，6.66mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得4-(2-甲氧基苯基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(0.6g)。lcms：251[m+h]
+
。
[0769]
步骤3：合成5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-(2-甲氧基苯基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(500mg，2mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(210mg，3mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物；使残余物溶解于dcm和水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到粗物质，其通过快速色谱法来纯化，获得标题化合物5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸乙酯(0.2g)。lcms：248[m+h]
+
。
[0770]
步骤4：合成5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸.向5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸乙酯(120mg，0.54mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并且将所获得的沉淀过滤并干燥，获得呈游离碱形式的标题化合物(0.1gm)。lcms：220[m+h]
+
。
[0771]
步骤5：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸(60mg，0.273mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(104mg，0.273mmol，1当量)。将混合物用dipea(106.6g，
0.821mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(98.3mg，0.273mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将沉淀的固体过滤，真空干燥并通过用己烷湿磨来纯化，获得n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺(50mg)。对映异构体(洗脱时间：2.3min和3.4min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。，利用分析级液体二氧化碳和hplc级乙醇(0.1％tfa)进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：25％，之后，获得(r)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺(14mg)和(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺(13mg)。(化合物88)1h nmr(400mhz，dmso-d6)d 11.03(s，1h)，8.18(s，1h)，8.09(d，j＝8.5hz，1h)，8.05(s，1h)，7.96-7.88(m，1h)，7.74(d，j＝8.4hz，2h)，7.60-7.51(m，1h)，7.27(d，j＝8.4hz，1h)，7.19(s，1h)，7.15(t，j＝7.6hz，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，3.98(s，3h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。(化合物89)1h nmr(400mhz，dmso-d6)d 11.03(s，1h)，8.18(s，1h)，8.09(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.92(d，j＝7.8hz，1h)，7.74(d，j＝8.5hz，2h)，7.55(t，j＝7.9hz，1h)，7.27(d，j＝8.4hz，1h)，7.19(s，1h)，7.15(t，j＝7.6hz，1h)，5.93(q，j＝7.0hz，1h)，3.98(s，3h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。
[0772]
实例s45.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物90)
[0773][0774]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑.同搅拌的3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(869mg，0.068mmol，1当量)\1-溴-2，4-双(三氟甲基)苯(2g，0.068mmol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中加入k2co3(1.89g，0.0136mmol，2当量)并将反应混合物搅拌15分钟。将cui(0.026g，0.2当量，0.001mol)和l-脯氨酸(0.317g，0.02mmol，0.4当量)加入至反应混合物中。将反应混合物在100℃下搅拌24小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(4
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得物质，其通过快速色谱法来纯化(etoac/己烷)，获得标题化合物1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1.0g)。lcms 339[m+h]
+
。
[0775]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1当量)于甲醇(10ml)中的
溶液中加入钯/碳(10％w/w，50mg)。用h2气净化反应混合物6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(5.0g)。lcms：310[m+h]
+
。
[0776]
步骤3：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.在0℃下向含1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(500mg)的乙醇中加入1.25m hcl的乙醇溶液(15ml)并保持在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤并将所获得的残余物用乙醚湿磨，获得产物1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(0.5g)。lcms：310[m+h]
+
。
[0777]
步骤4：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(55mg，0.289mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(110mg，0.289mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(112.1mg，0.869mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(110.4mg，0.289mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀真空过滤，干燥并通过用己烷湿磨来湿磨，得到呈游离碱形式的标题化合物(45mg)。lcms：482[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.59(br.s.，1h)，8.77(br.s.，1h)，8.42(br.s.，1h)，8.23(br.s.，2h)，8.03(br.s.，2h)，7.93(br.s.，1h)，7.54(s，2h)，2.33(s，3h)。
[0778]
实例s46.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物91)
[0779][0780]
步骤1：合成1-(2-甲氧基苯基)乙-1-酮.在0℃下向1-(2-羟基苯基)乙-1-酮(2g，0.014mol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中加入k2co3(4.05gm，0.029mol，2当量)。将反应混合物搅拌30分钟，接着加入碘甲烷(4.17g，2当量，0.029mol)。将反应混合物在室温下再搅拌24小时。将反应混合物用水淬灭并用etoac(3
×
100ml)萃取。收集有机层并用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法使用etoac/己烷作为洗脱剂来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物(1.2g)。lcms：150[m+h]
+
。
[0781]
步骤2：合成4-(2-甲氧基苯基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向1-(2-甲氧基苯基)乙-1-酮(500mg，3.33mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入60％氢化钠(159.84mg，3.996mmol，1.2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(972.36mg，6.66mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和
lcms确认产物形成。将反应混合物用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得4-(2-甲氧基苯基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(0.6g)。lcms：251[m+h]
+
。
[0782]
步骤3：合成5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-(2-甲氧基苯基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(500mg，2mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(210mg，3mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物；使残余物溶解于dcm和水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸乙酯，作为呈游离碱形式的粗化合物(0.5g粗)。lcms：248[m+h]
+
。
[0783]
步骤4：合成5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸.向5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸乙酯(500mg，0.54mmol，1当量)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并将所获得的悬浮液过滤并真空干燥，获得呈游离碱形式的标题化合物(0.5g)。lcms：220[m+h]
+
。
[0784]
步骤5：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸(66mg，0.289mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(110mg，0.289mmol，1当量)。将混合物用dipea(112.7mg，0.869mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，向处理的混合物加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺5-(2-甲氧基苯基)异噁唑-3-甲酸酯盐酸盐(100mg，0.289mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。所得沉淀过滤并真空干燥。固体通过用己烷湿磨来纯化，得到呈游离碱形式的标题化合物(65mg)。lcms：511[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.10(s，1h)，8.32(s，1h)，8.07(d，j＝7.8hz，2h)，7.97-7.89(m，1h)，7.79(s，1h)，7.56(t，j＝7.7hz，1h)，7.28(d，j＝8.5hz，1h)，7.21(s，1h)，7.15(t，j＝7.6hz，1h)，7.06(d，j＝8.3hz，1h)，5.67(s，2h)，3.99(s，3h)。
[0785]
实例s47.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物92和93)
[0786][0787]
步骤1：合成4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向2-乙酰基呋喃
(5.0g，45.40mmol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入nah(60％，3.63g，90.81mmol，2当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(12.28ml，90.81mmol，2当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用乙醚(2
×
100ml)洗涤。分离水层并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得呈黄色固体状的4-(2-呋喃基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(3.6g)。lcms：211[m+h]
+
。
[0788]
步骤2：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-呋喃-2-基-2，4-二氧代基-丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯。粗产物未经任何纯化即用于下一步(700mg)，呈黄色固体。lcms：208[m+h]
+
。
[0789]
步骤3：合成5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸.向5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得呈白色固体状的5-呋喃-2-基-异噁唑-3-甲酸(225mg)。lcms：180[m+h]
+
。
[0790]
步骤4：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(化合物58)和1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(化合物59).在0℃下向搅拌的3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1.48g，0.01mol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中逐份加入k2co3(2.71g，0.019mol，1.5当量)并搅拌10分钟。在0℃下逐滴加入1-(溴甲基)-2，4-双(三氟甲基)苯(4gm，0.01mol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(4
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得残余物，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)来纯化，获得标题化合物，为1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(0.6g)和1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1.4g)。lcms：354[m+h]
+
。
[0791]
步骤5：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(化合物58).在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w，50mg)。用h2气净化反应混合物6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并且将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(0.5g粗)。lcms：324[m+h]
+
。
[0792]
步骤6：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(化合物58).在0℃下向含1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(500mg)的乙醇加入1.25m hcl的乙醇溶液(15ml)并保持在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤，真空干燥，将残余物用乙醚湿磨，获得标题化合物1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(0.5g)。lcms：324[m+h]
+
。
[0793]
步骤7：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(化合物59).在
氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1g，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w，100mg)。将反应混合物用h2气净化6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(1g粗)。lcms：324[m+h]
+
。
[0794]
步骤8：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(化合物59).在0℃下将含1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(500mg)的乙醇加入1.25m hcl的乙醇溶液(15ml)中并保持在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤，真空干燥，将残余物用乙醚湿磨，获得标题化合物1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(0.5g)。lcms：324[m+h]
+
。
[0795]
步骤9：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物96).向5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(49.8mg，0.278mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(106mg，0.278mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(107.7mg，0.835mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(100mg，0.278mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并且固体通过用己烷湿磨来纯化，得到呈游离碱形式的标题化合物(30mg)。lcms：485[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.36(s，1h)，8.12-8.04(m，2h)，8.01(d，j＝1.6hz，1h)，7.74(s，1h)，7.28(d，j＝3.6hz，1h)，7.17(s，1h)，6.84(d，j＝8.2hz，1h)，6.78(dd，j＝3.5，1.8hz，1h)，5.58(s，2h)，2.18(s，3h)。
[0796]
步骤10：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物97).向5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(49.8mg，0.278mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(106mg，0.278mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(107.7mg，0.835mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(100mg，0.278mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并且固体通过用异丙醇湿磨来纯化，得到呈游离碱形式的标题化合物(20mg)。lcms：485[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.37(s，1h)，8.21(s，1h)，8.09(d，j＝9.5hz，2h)，8.01(s，1h)，7.28(d，j＝3.6hz，1h)，7.18(s，1h)，7.11(d，j＝8.2hz，1h)，6.83-6.74(m，1h)，5.57(s，2h)，2.19(s，3h)。
[0797]
实例s48.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物94)
[0798][0799]
步骤1：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(869mg，0.068mmol，1当量)和1-溴-2，4-双(三氟甲基)苯(2g，0.068mmol，1当量)于dmf(20ml)中的溶液中加入k2co3(1.89g，0.0136mmol，2当量)。将反应混合物搅拌15分钟，接着加入cui(0.026g，0.2当量，0.001mol)并加入l-脯氨酸(0.317g，0.4当量，0.02mmol)，将反应混合物在100℃下搅拌24小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(4
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法来纯化，得到标题化合物，为1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1g)。lcms：341[m+h]
+
。
[0800]
步骤2：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(500mg，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w，50mg)。将反应混合物用氢气净化6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(0.5g粗)。lcms：310[m+h]
+
。
[0801]
步骤3：合成1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.在0℃下向含1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(500mg)的乙醇加入1.25m hcl的乙醇溶液(15ml)并保持在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤，真空干燥，将残余物用乙醚湿磨，获得标题化合物1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(0.5g)。lcms：310[m+h]
+
。
[0802]
步骤4：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.558mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(212.8mg，0.558mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(216.2mg，1.67mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(192.7mg，0.558mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。粗物质通过用己烷(15mg)湿磨来纯化。lcms：471[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.56(s，1h)，8.42(s，1h)，8.28-8.20(m，2h)，8.01(d，j＝1.8hz，1h)，7.91(d，j＝8.3hz，1h)，7.29(d，j＝3.6hz，1h)，7.21(s，1h)，6.78(dd，j＝3.5，1.8hz，1h)，2.31(s，3h)。
[0803]
实例s49.合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(化合物95)
[0804][0805]
步骤1：合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺.向(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸(100mg，0.724mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(276.08mg，0.724mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(280.4mg，21.73mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，向混合物逐滴加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(250mg，0.724mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并且所获得的粗物质通过快速色谱法使用etoac己烷作为洗脱剂来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物(37mg)。lcms：444[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.70(s，1h)，8.08(s，1h)，8.06-8.01(m，1h)，7.90(s，1h)，7.81(d，j＝1.8hz，1h)，7.34(d，j＝15.5hz，1h)，6.83(d，j＝3.4hz，1h)，6.78(d，j＝8.2hz，1h)，6.69(d，j＝15.5hz，1h)，6.61(dd，j＝3.4，1.8hz，1h)，5.55(s，2h)，2.18(s，3h)。
[0806]
实例s50.合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺(化合物96)
[0807][0808]
步骤1：合成(e)-n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(呋喃-2-基)丙烯酰胺.向(e)-3-(呋喃-2-基)丙烯酸(100mg，0.724mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(276.08mg，0.724mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(280.4mg，21.73mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(250mg，0.724mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并且所获得的粗物质通过快速色谱法使用etoac己烷作为洗脱剂来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物(21mg)。lcms：444[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.75(s，1h)，8.28(s，1h)，8.06(d，j＝4.2hz，2h)，7.81(d，j＝1.9hz，1h)，7.33(d，j＝15.5hz，1h)，7.05(d，j＝8.5hz，1h)，6.82(d，j＝3.4hz，1h)，6.76(d，j＝15.5hz，1h)，6.61(dd，j＝3.4，1.8hz，1h)，5.54(s，2h)，2.19(s，3h)。
[0809]
实例s51.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物97)、(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)
乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物98)、(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物99)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物100)
[0810][0811]
步骤1：合成2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯.在0℃下向1-(吡啶-2-基)乙-1-酮(5.0g，0.04mol，1当量)于thf中的溶液中逐份加入nah(60％，3.3g，0.08mol，2.0当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(11.2ml，0.08mol，2.0当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(3g，黄色固体)。lcms：221[m+h]
+
。
[0812]
步骤2：合成5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(1.6g，7.61mmol，1.0当量)和羟胺盐酸盐(0.528g，7.61mmol，1.0当量)于etoh中的悬浮液在85℃下搅拌48小时。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于dcm和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥，经硅胶垫过滤，并接着在减压下浓缩，得到残余物，其通过快速色谱法(己烷中0-20％乙酸乙酯)来纯化，获得5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯。lcms：218[m+h]
+
。
[0813]
步骤3：合成5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(0.5g，2.41mmol)于thf(30ml)和甲醇(6ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂水溶液(10ml)。将所得混合物搅拌16小时。在减压下浓缩thf。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(225mg，呈白色固体状)。lcms：190[m+h]
+
。
[0814]
步骤4：合成1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇.在0℃下向搅拌的1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙酮(4g，0.008mol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.572g，0.008mol，1当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得呈无色液体状的1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(4g)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)：δ8.04-8.15(m，2h)，7.93(s，1h)，5.70(d，j＝3.95hz，1h)，5.09(br.s.，1h)，1.34(d，j＝6.14hz，3h)。
[0815]
步骤5：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑和1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(4.28g，0.016mol，1.1当量)和diad(3.33gm，0.016mol，1.1当量)于thf(2ml)中的溶液中加入4-硝基-1h-吡唑(1.96g，0.004mmol，1.0当量)。向反应混合物加入1-[2，4-双(三氟甲基)苯基]乙醇(4g，0.004mmol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水洗涤(3
×
50ml)。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(0.5gm)和1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1.5gm)。lcms：368[m+h]
+
。
[0816]
步骤6：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-4-硝基-1h-吡唑(1g，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w)。用h2气净化反应混合物6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并且将滤液在减压下浓缩，获得1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(0.9gm)。lcms：338[m+h]
+
。
[0817]
步骤7：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-4-硝基-1h-吡唑(400mg，1当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w，40mg)。将反应混合物用氢气净化6小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并将滤液在减压下浓缩，获得1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(0.3gm)。lcms：338[m+h]
+
。
[0818]
步骤8：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.在0℃下向含1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(800mg)的乙醇加入1.25m hcl的乙醇溶液(15ml)并保持在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤，真空干燥，将残余物用乙醚湿磨，获得标题化合物1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(0.8g)。lcms：338[m+h]
+
。
[0819]
步骤9：合成1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.在0℃下向含1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(350mg)的乙醇加入1.25m hcl的乙醇溶液(15ml)并保持在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤，真空干燥，将残余物用乙醚湿磨，获得标题化合物1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(0.3gm)。lcms：338[m+h]
+
。
[0820]
步骤10：合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物99)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯
基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物100).向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.526mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(200mg，0.526mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(207.6mg，1.57mmol，1当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(196.3mg，0.526mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并将固体湿磨，获得标题化合物。对映异构体(洗脱时间：4.07min和4.7min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：25％，获得(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(9mg)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(10mg)。lcms：511[m+h]
+
。
[0821]
步骤11：合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物97)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物98).向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.526mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(200mg，0.526mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用dipea(207.6mg，1.57mmol，1当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-胺(196.3mg，0.526mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并且将固体用己烷湿磨，获得标题化合物。对映异构体(洗脱时间：4.57min和5.27min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：17％，获得(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(10mg)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-5-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(9mg)。lcms：511[m+h]
+
。1h nmr(化合物99)(400mhz，dmso-d6)δ10.29(s，1h)，8.75(d，j＝4.8hz，1h)，8.06(dq，j＝15.0，8.3hz，4h)，7.79(s，1h)，7.56(d，j＝7.7hz，2h)，7.47(s，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，2.06(s，3h)，1.85(d，j＝6.8hz，3h)。1h nmr(化合物100)(400mhz，dmso-d6)δ10.29(s，1h)，8.75(d，j＝4.8hz，1h)，8.13-7.98(m，4h)，7.79(s，1h)，7.56(t，j＝5.9hz，2h)，7.47(s，1h)，5.93(q，j＝7.0hz，1h)，2.06(s，3h)，1.85(d，j＝6.8hz，3h)。1h nmr(化合物97)(400mhz，dmso-d6)δ10.34(s，1h)，8.76(d，j＝5.0hz，1h)，8.16(s，1h)，8.14-7.99(m，4h)，7.74(d，j＝8.2hz，1h)，7.56(t，j＝6.2hz，1h)，7.48(s，1h)，5.84(q，j＝7.1hz，1h)，2.18(s，3h)，1.84(d，j＝6.9hz，3h)。1h nmr(化合物98)(400mhz，dmso-d6)δ10.34(s，1h)，8.76(d，j＝4.9hz，1h)，8.15(s，1h)，8.14-7.99(m，4h)，7.74(d，j＝8.3hz，1h)，7.56(t，j＝6.4hz，1h)，7.48(s，1h)，5.84(q，j＝6.9hz，1h)，2.18(s，3h)，1.84(d，j＝6.9hz，3h)，1.24(d，j＝6.7hz，1h)。
[0822]
实例s52.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和((s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物101和102)
[0823][0824]
步骤1：合成5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.在室温下经60分钟向(z)-2-氯-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(200mg，1.21mmol，1当量)和2-乙炔基嘧啶(252.1mg，1.21mmol，1当量)于乙醚(80ml)中的混合物中逐滴加入tea(0.337ml，2.42mmol，2.0当量)于乙醚(20ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并将滤液浓缩成黄色油状物，其通过快速硅胶色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的混合物来纯化，得到呈白色固体状的5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(0.07g)。lcms：220[m+h]
+
。
[0825]
步骤2：合成5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(60mg，0.273mmol，1当量)于thf(2ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(10.95mg，0.0.328mmol，1.2当量)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并且冻干所获得的悬浮液。将所获得的粗物质用乙醚湿磨，获得标题产物，为5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(52.2mg)。lcms：191[m+h]
+
。
[0826]
步骤3：合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(40mg，0.209mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入hatu(79.7mg，0.209mmol，1当量)。将混合物用dipea(81.04mg，0.628mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(75.18mg，0.0.209mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出并且将固体用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。对映异构体(洗脱时间：8.8min和15.15min)通过手性hplc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用hplc级正己烷和hplc级乙醇进行等度程序，总流速：18ml/min，乙醇百分比：40％，获得(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(9mg)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(8mg)。lcms：482[m+h]
+
。(化合物101)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.15(s，1h)，9.03(d，j＝5.26hz，2h)，8.21(s，1h)，7.99-8.13(m，3h)，7.69-7.79(m，3h)，7.66(t，j＝4.82hz，1h)，7.54(s，1h)，5.94(d，j＝7.89hz，1h)，1.87(d，j＝6.58hz，3h)。(化合物102)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.15(s，1h)，9.03(d，j＝5.26hz，2h)，8.21(s，1h)，7.99-8.13(m，3h)，7.69-7.79(m，3h)，7.66(t，j＝4.82hz，1h)，7.54(s，1h)，5.94(d，j＝7.89hz，1h)，1.87(d，j＝6.58hz，3h)。
[0827]
实例s53.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-n-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物103)
[0828][0829]
步骤1：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-n-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.在0℃下向1n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(50mg，0.103mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入nah(4.15mg，0.103mmol，1当量)。在相同温度下搅拌反应30分钟后，加入碘甲烷(14.75mg，0.103mmol，1当量)。将所得反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭并用etoac(3
×
20ml)萃取。收集有机层并用水(2
×
10ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过逆相纯化来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物。lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.69(d，j＝4.8hz，1h)，8.11-7.92(m，6h)，7.66(s，1h)，7.56(dt，j＝11.9，5.5hz，1h)，7.50-7.39(m，1h)，7.11(d，j＝16.1hz，1h)，6.52(d，j＝8.2hz，1h)，5.69(s，1h)，5.53(s，2h)，3.47(s，1h)，3.36(s，2h)。
[0830]
实例s54.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(化合物104和105)
[0831][0832]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺.向2-溴噻唑-5-甲酸(800mg，3.84mmol，1当量)于dmf(5ml)中的溶液中加入hatu(1376mg，4.23mmol，1.1当量)。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(1587mg，12.3mmol，3.2当量)和1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(1376mg，3.84mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。收集有机层并经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺，呈灰白色固体状(800mg)。lcms：514[m+h]
+
。
[0833]
步骤2：n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺.向n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺(400mg，0.77mmol，1当量)于无水甲苯(5ml)中的溶液中加入2-(三甲基锡烷基)吡啶(287mg，0.77mmol，1当量)，并使混合物脱气10分钟。向此混合物中加入pd(pph3)4(90mg，0.077mmol，1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在80℃下搅拌过夜，此后tlc指示起始物质完全消耗。将混合物用h2o淬灭，用etoac萃取(2
×
100ml)，经无水na2so4干燥，并真空浓缩，得到粗产物，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得标题化合物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺，呈灰白色固体状(150mg)。lcms：512[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.80(s，1h)，8.68(d，j＝4.8hz，1h)，8.59(s，1h)，8.18(d，j＝9.0hz，2h)，8.13-7.97(m，3h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.68(s，1h)，7.56(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。
[0834]
步骤3：合成(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺的互变异构体(150mg，洗脱时间：5.5min和7.47min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：22％，获得(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(45mg)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(43mg)。(化合物104)lcms：512[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.80(s，1h)，8.68(d，j＝4.8hz，1h)，8.59(s，1h)，8.18(d，j＝9.0hz，2h)，8.13-7.97(m，3h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.68(s，1h)，7.56(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。(化合物105)lcms：512[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.80(s，1h)，8.68(d，j＝4.8hz，1h)，8.59(s，1h)，8.18(d，j＝9.0hz，2h)，8.13-7.97(m，3h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.68(s，1h)，7.56(dd，j＝7.5，4.8hz，1h)，5.93(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.9hz，3h)。
[0835]
实例s55.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(化合物106和107)
[0836][0837]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴-4-甲基噻唑-5-甲酰胺.向2-溴-4-甲基噻唑-5-甲酸(300mg，1.35mmol，1当量)于dmf(1ml)中的
溶液中加入hatu(564mg，1.48mmol，1.1当量)。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(557mg，4.32mmol，3.2当量)并加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(483mg，1.35mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴-4-甲基噻唑-5-甲酰胺，呈灰白色固体状(200mg)。lcms：526[m+h]
+
。
[0838]
步骤2：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺.向n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴-4-甲基噻唑-5-甲酰胺(100mg，0.18mmol，1当量)于无水甲苯(5ml)中的溶液中加入2-(三丁基锡烷基)吡啶(69mg，0.18mmol，1当量)，并使混合物脱气10分钟。向此混合物加入pd(pppf)cl2(15mg，0.018mmol，1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在80℃下搅拌过夜，此后tlc指示起始物质完全消耗。将混合物用h2o淬灭，用etoac萃取，干燥(na2so4)，并真空浓缩，得到产物，其通过快速柱色谱法和逆相hplc进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(80mg，，呈灰白色固体状)。lcms：526[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.47(s，1h)，8.66(d，j＝4.7hz，1h)，8.20-7.95(m，5h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.67(s，1h)，7.55(dd，j＝7.6，4.8hz，1h)，5.92(q，j＝6.8hz，1h)，2.67(s，3h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。
[0839]
步骤3：合成(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(3-氯吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的互变异构体(90mg，洗脱时间：6.28min和9.54)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：22％，获得(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(12mg)和(s)-(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(11mg)。(化合物106)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.47(s，1h)，8.66(d，j＝4.7hz，1h)，8.20-7.95(m，5h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.67(s，1h)，7.55(dd，j＝7.6，4.8hz，1h)，5.92(q，j＝6.8hz，1h)，2.67(s，3h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h).(化合物107)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.47(s，1h)，8.66(d，j＝4.7hz，1h)，8.20-7.95(m，5h)，7.73(d，j＝8.3hz，1h)，7.67(s，1h)，7.55(dd，j＝7.6，4.8hz，1h)，5.92(q，j＝6.8hz，1h)，2.67(s，3h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。
[0840]
实例s56.合成(r)-n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物108和109)
[0841][0842]
步骤1：合成1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇.在0℃下向搅拌的1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(0.5gm，2.40mmol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.133gm，3.60mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(0.5gm，100％，呈无色液体状)。
[0843]
步骤2：合成1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(640mg，2.40mmol，1.0当量)和diad(480mg，2.40mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(500mg，2.40mmol，1.0当量)，接着逐滴加入4-硝基-1h-吡唑(217.2mg，1.92mmol，0.8当量)，将反应混合物在室温下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(50ml
×
3)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑(450mg，呈棕色液体状)。lcms：304[m+h]
+
。
[0844]
步骤3：合成1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑(450mg，1.41mmol，1.0当量)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳(45.7mg，10％w/w)。用h2气净化反应混合物2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并且将滤液在减压下浓缩，获得1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(0.4gm，粗，呈棕色液体状)。lcms：274[m+h]
+
。
[0845]
步骤4：合成1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐.向搅拌的1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(0.4gm)于2.5m hcl的乙醇溶液(10ml)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用乙醚湿磨，获得白色产物(0.4gm mg)。lcms：274[m+h]
+
。
[0846]
步骤5：合成n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-吡啶-基-异噁唑-3-甲酸(100mg，0.52mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(197mg，0.52mmol，1当量)。将混合物用dipea(201mg，1.56mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(142mg，0.52mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保
持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(140mg，呈灰白色固体状)。lcms：446[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.08(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.65(s，0h)，8.23(s，1h)，8.09(d，j＝7.9hz，1h)，8.03(t，j＝7.8hz，1h)，7.76-7.68(m，2h)，7.63-7.53(m，2h)，7.48(s，1h)，7.37(t，j＝7.8hz，1h)，5.98(q，j＝7.0hz，1h)，1.84(d，j＝7.0hz，3h)。
[0847]
合成n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的互变异构体(100mg，洗脱时间：6.28min和9.28min)通过手性sfc(daicel 250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：20％，获得(r)-n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(45mg)和(s)-n-(1-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。(40mg)。lcms：446[m+h]
+
。(化合物108)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.08(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.65(s，0h)，8.23(s，1h)，8.09(d，j＝7.9hz，1h)，8.03(t，j＝7.8hz，1h)，7.76-7.68(m，2h)，7.63-7.53(m，2h)，7.48(s，1h)，7.37(t，j＝7.8hz，1h)，5.98(q，j＝7.0hz，1h)，1.84(d，j＝7.0hz，3h).(化合物109)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.08(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.23(s，1h)，8.06(dt，j＝15.6，7.9hz，2h)，7.76-7.68(m，2h)，7.63-7.53(m，2h)，7.48(s，1h)，7.37(t，j＝7.7hz，1h)，5.98(q，j＝6.9hz，1h)，1.84(d，j＝7.1hz，3h)。
[0848]
实例s57.合成(r)-n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物110和111)
[0849][0850]
步骤1：合成1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇.在0℃下向搅拌的1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮(0.5g 2.4mmol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(0.133g，3.60mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水(50ml)淬灭并用乙酸乙酯(3
×
50ml)萃取。将合并的有机层用水(2
×
50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得呈无色液体状的1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(0.5gm)。
[0851]
步骤2：合成1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑.向搅拌的pph3(640mg，2.40mmol，1.0当量)和diad(484.8mg，2.40mmol，1.0当量)于thf(2ml)中的溶液中加入1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙-1-醇(500mg，2.40mmol，1.0当量)。接着逐滴加入4-硝基-1h-吡唑(217.2mg，1.92mmol，0.8当量)，将反应混合物在室温下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(3
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得纯产物1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑，呈棕色液体状(340mg)。lcms：304[m+h]
+
。
[0852]
步骤3：合成1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺.在氮气下向搅拌的1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-4-硝基-1h-吡唑(0.3gm)于甲醇(10ml)中的溶液中加入钯/碳[pd/c](10％w/w，75mg)。将反应混合物用氢气净化2小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物经硅藻土床过滤并且将滤液在减压下浓缩，获得1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺，呈棕色液体状(0.3g)。lcms：274[m+h]
+
。
[0853]
步骤4：合成n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-吡啶-基-异噁唑-3-甲酸(100mg，0.52mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(197mg，0.52mmol，1当量)。将混合物用dipea(201mg，1.56mmol，3.0当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(142mg，0.52mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(120mg)。lcms：446[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.13(s，1h)，8.08(d，j＝7.9hz，1h)，8.04(dt，j＝9.6，4.8hz，1h)，7.73(s，1h)，7.69-7.60(m，2h)，7.57(dt，j＝7.3，3.7hz，2h)，7.46(s，1h)，5.83(q，j＝6.9hz，1h)，1.83(d，j＝6.9hz，3h)。
[0854]
步骤5：n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的对映异构体分离.n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的互变异构体(100mg，洗脱时间：5.85min和7.65min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：25％，获得(r)-n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(45mg)和(s)-n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(40mg)。lcms：446[m+h]
+
。(化合物110)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.07(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.13(s，1h)，8.08(d，j＝7.8hz，1h)，8.03(dd，j＝8.2，6.4hz，1h)，7.73(s，1h)，7.69-7.60(m，2h)，7.57(dt，j＝7.3，3.9hz，2h)，7.46(s，1h)，5.83(q，j＝7.0hz，1h)，1.83(d，j＝6.9hz，3h).(化合物111)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.13(s，1h)，8.08(d，j＝7.9hz，1h)，8.04(dt，j＝9.6，4.8hz，1h)，7.73(s，1h)，7.69-7.60(m，2h)，7.57(dt，j＝7.3，3.7hz，2h)，7.46(s，1h)，5.83(q，j＝6.9hz，1h)，1.83(d，j＝6.9hz，3h)。
[0855]
实例s58.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲酰胺(化合物112)
[0856][0857]
步骤1：合成4-乙基2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯.在0℃下向60％氢化钠(1.48g，0.061mol，1.5当量)于甲苯(20ml)中的溶液中加入1-(吡啶-2-基)乙-1-酮(5.0g，0.041mol，1当量)，在0℃下逐滴加入至反应混合物。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(9.04g，0.061mol，1当量)并将反应混合物在室温下再搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯，呈黄色固体(6g)。lcms：222[m+h]
+
。
[0858]
步骤2：合成1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲酸乙酯.将2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(1.0g，0.004mol，1当量)和甲基肼(0.208g，0.004mmol，1.0当量)于etoh(20ml)中的悬浮液在85℃下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于乙酸乙酯和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥并将其在减压下浓缩，得到粗物质。粗产物使用快速柱色谱法使用溶剂系统(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得呈浅黄色固体状的1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯(200mg)。lcms：231[m+h]
+
。
[0859]
步骤3：合成1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲酸锂.向1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯(200mg，0.86mmol，1.0当量)于thf(5ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(54mg，1.29mmol，1.5当量)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩。将所得残余物用乙酸乙酯(2
×
30ml)洗涤。冻干水层，获得1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲酸的锂盐，灰白色固体(180mg粗)。lcms：204[m+h]
+
。
[0860]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲酰胺.向1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸(200mg，0.95mmol，1当量)于dmf(3ml)中的溶液中加入hatu(400mg，1.05mmol，1.1当量)。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(395mg，3.06mmol，3.2当量)并加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(342mg，0.95mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法和逆相hplc进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯
基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺，呈灰白色固体状(150mg)。lcms：509[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.45(s，1h)，8.71(d，j＝4.7hz，1h)，8.16(s，1h)，8.08(d，j＝8.4hz，1h)，8.05(s，1h)，7.92(dt，j＝12.7，4.8hz，2h)，7.76(s，1h)，7.73(d，j＝8.4hz，1h)，7.43(td，j＝5.2，4.7，2.6hz，1h)，7.24(s，1h)，5.90(q，j＝6.9hz，1h)，4.24(s，3h)，1.86(d，j＝6.9hz，3h)。
[0861]
实例s59.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(化合物113)
[0862][0863]
步骤1：合成2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯.在0℃下向氢化钠(60％，1.48g，0.061mol，1.5当量)于甲苯(20ml)中的溶液中加入1-(吡啶-2-基)乙-1-酮(5.0g，0.041mol，1当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(9.04g，0.061mol，1当量)并将反应混合物在室温下再搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(10-20％etoac/己烷)来纯化，获得2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯，呈黄色固体(6g粗)。lcms：222[m+h]
+
。
[0864]
步骤2：合成1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯.将2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(1.0g，0.004mol，1当量)和甲基肼(0.208g，0.004mmol，1.0当量)于etoh(20ml)中的悬浮液在85℃下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于乙酸乙酯和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥并将其在减压下浓缩，得到粗物质。粗产物使用快速柱色谱法使用溶剂系统(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯(300mg，呈灰白色固体状)。lcms：232[m+h]
+
。
[0865]
步骤3：合成锂-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸.向1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸(500mg，2.28mmol，1.0当量)于thf(5ml)、甲醇(3ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(191mg，4.56mmol，2.0当量)。将所得混合物搅拌16小时。将反应物质在减压下浓缩。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得呈浅黄色固体状的1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸的锂盐(250mg)。lcms：204[m+h]
+
。
[0866]
合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺.向1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸(200mg，0.95mmol，1
当量)和hatu(400mg，1.05mmol，1.1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(395mg，3.06mmol，3.2当量)并加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(342mg，0.95mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法和逆相hplc进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(35mg，呈白色固体状)。lcms：509[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.66(s，1h)，8.60(d，j＝4.9hz，1h)，8.18(s，1h)，8.12-8.02(m，2h)，7.94(d，j＝7.9hz，1h)，7.90-7.81(m，1h)，7.77-7.64(m，2h)，7.63(s，1h)，7.38-7.30(m，1h)，5.92(q，j＝6.9hz，1h)，4.18(s，3h)，1.87(d，j＝6.9hz，3h)。
[0867]
实例s60.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物114)
[0868][0869]
步骤1：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.52mmol，1当量)和hatu(218mg，0.57mmol，1.1当量)于dmf(2ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(216mg，1.67mmol，3.2当量)并加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(180mg，0.52mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得标题化合物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺，呈灰白色固体状(150mg)。lcms：483[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.22(s，1h)，9.36(d，j＝1.8hz，1h)，8.88-8.83(m，1h)，8.82(d，j＝2.6hz，1h)，8.34(s，1h)，8.07(d，j＝7.9hz，2h)，7.75(d，j＝35.8hz，2h)，7.06(d，j＝8.0hz，1h)，5.67(s，2h)。
[0870]
实例s61.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物115)
[0871][0872]
步骤1：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(100mg，0.49mmol，1当量)和hatu(204mg，0.53mmol，1.1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(202mg，1.56mmol，3.2当量)并加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(168mg，0.49mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得标题化合物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺，呈灰白色固体状(45mg)。lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.14(s，1h)，8.34(s，1h)，8.07(d，j＝7.9hz，2h)，7.96-7.85(m，2h)，7.79(s，1h)，7.47(s，1h)，7.43(d，j＝7.2hz，1h)，7.06(d，j＝8.2hz，1h)，5.67(s，2h)，2.57(s，3h)。
[0873]
实例s62.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物116和117)
[0874][0875]
步骤1：合成4-(6-甲基吡啶-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯.在0℃下向氢化钠(60％，133mg，5.55mmol，1.5当量)于thf(10ml)中的溶液中逐滴加入1-(6-甲基吡啶-2-基)乙-1-酮(500mg，3.70mmol，1当量)。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(811mg，5.55mmol，1.5当量)并将反应混合物在室温下再搅拌5小
时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用1n hcl中和并且将黄色沉淀过滤并减压干燥，获得4-(6-甲基吡啶-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯，呈黄色固体状(350mg)。lcms：236[m+h]
+
。
[0876]
步骤2：合成5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将4-(6-甲基吡啶-2-基)-2，4-二氧代基丁酸乙酯(500mg，2.12mmol，1当量)和羟胺盐酸盐(146mg，2.12mmol，1当量)于etoh(10ml)中的悬浮液在85℃下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于乙酸乙酯和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥并将其在减压下浓缩，得到5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯。粗产物使用快速柱色谱法使用溶剂系统(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得呈灰白色固体状的标题化合物(300mg)。lcms：233[m+h]
+
。
[0877]
步骤3：合成5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(350mg，1.50mmol，1.0当量)于thf(5ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(95mg，2.26mmol，1.5当量)。将所得混合物搅拌过夜。反应物质在减压下浓缩。将所得残余物用1n hcl酸化并且将沉淀过滤并减压干燥，获得呈白色固体状的5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(250mg)。lcms：205[m+h]
+
。
[0878]
合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，0.98mmol，1当量)和hatu(350mg，0.96mmol，1.0当量)于dmf(3ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(404mg，1.07mmol，3.13当量)并加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(350mg，0.98mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(100ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(150mg，30％，呈灰白色固体状)。lcms：509[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.04(s，1h)，8.17(s，1h)，8.06(d，j＝8.3hz，1h)，8.02(s，1h)，7.92-7.81(m，2h)，7.70(d，j＝7.7hz，2h)，7.39(d，j＝7.0hz，2h)，5.90(q，j＝6.9hz，1h)，2.53(s，3h)，1.84(d，j＝6.9hz，3h)，1.20(s，1h)。
[0879]
合成(r)和(s)的n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(120mg)的互变异构体(洗脱时间：3.78min和4.86min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：20％，获得峰-1(r)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(40mg)和峰-2(s)-of n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(40mg)。(化合物116)lcms：509[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.04(s，1h)，8.17(s，1h)，8.06(d，j＝8.3hz，1h)，8.02(s，1h)，7.92-7.81(m，2h)，7.70(d，j＝7.7hz，2h)，7.39(d，j＝7.0hz，2h)，5.90(q，j＝6.9hz，1h)，2.53(s，3h)，1.84(d，j＝6.9hz，3h)，1.20(s，1h)。(化合物117)lcms：509[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.04(s，1h)，8.17(s，1h)，8.06(d，j＝8.3hz，1h)，8.02(s，1h)，7.92-7.81(m，
2h)，7.70(d，j＝7.7hz，2h)，7.39(d，j＝7.0hz，2h)，5.90(q，j＝6.9hz，1h)，2.53(s，3h)，1.84(d，j＝6.9hz，3h)，1.20(s，1h)。
[0880]
实例s63.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(化合物118)
[0881][0882]
步骤1：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺.向2-溴噻唑-5-甲酸(200mg，0.96mmol，1当量)和hatu(401mg，1.05mmol，1.1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(396mg，3.07mmol，3.2当量)并加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(330mg，0.96mmol，1当量)于dmf(5ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺，呈灰白色固体状)(250mg)。lcms：500[m+h]
+
。
[0883]
步骤2：n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺.向n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-溴噻唑-5-甲酰胺(200mg，0.40mmol，1当量)于无水甲苯(5ml)中的溶液中加入2-(三丁基锡烷基)吡啶(147mg，0.40mmol，1当量)，并使混合物脱气10分钟。向此混合物加入pd(pppf)cl2.dcm(32mg，0.040mmol，0.1当量)，并使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在100℃下搅拌过夜，此后tlc指示起始物质完全消耗。将混合物用h2o(ml)淬灭，用etoac(2
×
50ml)萃取，经无水na2so4干燥，并真空浓缩，得到产物，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)和逆相hplc进一步纯化，获得纯产物n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺，呈灰白色固体状(20mg)。lcms：497[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ＝10.85(s，1h)，8.69(d，j＝4.8hz，1h)，8.62(s，1h)，8.27(s，1h)，8.19(d，j＝7.9hz，1h)，8.11-8.05(m，2h)，8.02(t，j＝7.9hz，1h)，7.73(s，1h)，7.60-7.54(m，1h)，7.09(d，j＝8.3hz，1h)，5.66(s，2h)。
[0884]
实例s64.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物119和120)
[0885][0886]
步骤-1：合成2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯.在0℃下向氢化钠(60％，1.48g，0.061mol，1.5当量)于甲苯(20ml)中的溶液中加入1-(吡啶-2-基)乙-1-酮(5.0g，0.041mol，1当量)，在0℃下逐滴加入至反应混合物。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(9.04g，0.061mol，1当量)并将反应混合物在室温下再搅拌2小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用1n hcl中和并用etoac(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用水(2
×
100ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-flash色谱法(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯，呈黄色固体状(4.2g)。lcms：222[m+h]
+
。
[0887]
步骤2：合成5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯.将2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(1.5g，0.006mol，1当量)和水合肼(0.339g，0.006mmol，1.0当量)于etoh(20ml)中的悬浮液在85℃下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于乙酸乙酯和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥并将其在减压下浓缩，得到粗物质。粗产物使用快速柱色谱法使用溶剂系统(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯(650mg，44％，呈灰白色固体状)。lcms：218[m+h]
+
。
[0888]
步骤3：合成5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸锂.向5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯(500mg，2.30mmol，1.0当量)于thf(5ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(145mg，3.45mmol，1.5当量)。将所得混合物搅拌16小时。反应物质在减压下浓缩。将所得残余物用1n hcl酸化并用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取。将合并的有机层用蒸馏水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸锂，呈白色固体状(510mg)。lcms：190[m+h]
+
。
[0889]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酸锂(200mg，1.025mmol，1当量)和hatu(428mg，1.12mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(423mg，3.28mmol，3.2当量)并加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(367mg，1.025mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下
搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(50ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺，呈灰白色固体状(120mg)。lcms：495[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.46(s，1h)，8.63(dd，j＝21.4，4.9hz，1h)，8.16(d，j＝8.2hz，1h)，8.08(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.95(dq，j＝15.5，8.2hz，2h)，7.77(s，1h)，7.72(q，j＝5.4hz，1h)，7.40(t，j＝6.2hz，1h)，7.33(s，1h)，5.91(p，j＝7.5hz，1h)，1.86(d，j＝6.7hz，3h)。
[0890]
步骤5：合成(r)和(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺的互变异构体(110mg，洗脱时间：4.86min和3.3min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：20％，获得峰-1，为(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(35mg)和峰-2，为(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(36mg)。(化合物119)lcms：495[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.46(s，1h)，8.63(dd，j＝21.4，4.9hz，1h)，8.16(d，j＝8.2hz，1h)，8.08(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.95(dq，j＝15.5，8.2hz，2h)，7.77(s，1h)，7.72(q，j＝5.4hz，1h)，7.40(t，j＝6.2hz，1h)，7.33(s，1h)，5.91(p，j＝7.5hz，1h)，1.86(d，j＝6.7hz，3h)。(化合物120)lcms：495[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.46(s，1h)，8.63(dd，j＝21.4，4.9hz，1h)，8.16(d，j＝8.2hz，1h)，8.08(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.95(dq，j＝15.5，8.2hz，2h)，7.77(s，1h)，7.72(q，j＝5.4hz，1h)，7.40(t，j＝6.2hz，1h)，7.33(s，1h)，5.91(p，j＝7.5hz，1h)，1.86(d，j＝6.7hz，3h)。
[0891]
实例s65.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(化合物121和122)
[0892][0893]
步骤1：合成2-叠氮基吡啶.在n2下向搅拌的2-溴吡啶(500mg，3.184mmol，1.0当量)、叠氮化钠(227.7mg，3.5mmol，1.1当量)、抗坏血酸钠(315.2mg，1.5mmol，0.5当量)、tmeda(0.195ml，1.227mmol，0.4当量)于etoh∶h2o中的溶液中加入cui(121mg，0.636mmol，
0.2当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在120℃下搅拌3小时。用tlc和nmr确认产物形成。在反应完成后，反应混合物干燥以蒸发乙醇，用dcm(3
×
10ml)萃取，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法(etoac/己烷)来纯化，获得呈绿色固体状的2-叠氮基吡啶(200mg)。lcms：121[m+h]
+
。
[0894]
步骤2：合成1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酸乙酯.在n2下向搅拌的2-叠氮基吡啶(100mg，0.83mmol，1当量)、丙炔酸乙酯(2，6-二甲基吡啶(17.8mg，0.166mmol，0.2当量)于thf：dmso(2ml)中的溶液中加入cui(31.5mg，0.166mmol，当量)。将反应混合物在100℃下搅拌3小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将混合物用etoac(50ml)稀释并用水(3
×
10ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法(etoac/己烷)进一步纯化，获得呈绿色固体状的纯产物，1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酸乙酯(50mg)。lcms：219[m+h]
+
。
[0895]
步骤3：合成1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酸.向搅拌的1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酸乙酯(50mg，1.41mmol，1.0当量)于thf∶h2o(2ml)中的溶液中加入lioh(1.5当量)。接着将反应混合物在室温下搅拌1小时。用lcms确认产物形成。在反应完成后，反应混合物浓缩以蒸发h2o，并用hcl酸化，过滤并真空干燥，获得1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酸，呈灰白色固体状(40mg)。lcms：191[m+h]
+
。
[0896]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺.向1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酸(25mg，0.13mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(49.5mg，0.13mmol，1当量)。将混合物用dipea(50mg，0.39mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(42.63mg，1.13mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(10ml)稀释并用水(2
×
10ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得呈灰色固体状的标题化合物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(45mg)。lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.13(s，1h)，8.08(d，j＝7.9hz，1h)，8.04(dt，j＝9.6，4.8hz，1h)，7.73(s，1h)，7.69-7.60(m，2h)，7.57(dt，j＝7.3，3.7hz，2h)，7.46(s，1h)，5.83(q，j＝6.9hz，1h)，1.83(d，j＝6.9hz，3h)。
[0897]
步骤5：合成r和s-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺的对映异构体(40mg)(洗脱时间：12.6min和19.7min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：51g/min，共溶剂百分比：18％，获得峰-1，为(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(10mg)和峰-2，为(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-1-(吡啶-2-基)-1h-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(12mg)。lcms：496[m+h]
+
。(化合物125)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.07(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.13(s，1h)，8.08(d，j＝7.8hz，1h)，8.03(dd，j＝8.2，6.4hz，1h)，7.73(s，1h)，7.69-7.60(m，2h)，7.57(dt，j
＝7.3，3.9hz，2h)，7.46(s，1h)，5.83(q，j＝7.0hz，1h)，1.83(d，j＝6.9hz，3h)。(化合物126)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.06(s，1h)，8.76(d，j＝4.8hz，1h)，8.13(s，1h)，8.08(d，j＝7.9hz，1h)，8.04(dt，j＝9.6，4.8hz，1h)，7.73(s，1h)，7.69-7.60(m，2h)，7.57(dt，j＝7.3，3.7hz，2h)，7.46(s，1h)，5.83(q，j＝6.9hz，1h)，1.83(d，j＝6.9hz，3h)。
[0898]
实例s66.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物123和124)
[0899][0900]
合成吡啶甲酸乙酯.向搅拌的吡啶甲酸(2g)的乙醇溶液(30ml)中加入浓h2so4(1ml)并且在100℃下使反应混合物回流2天。用tlc和lcms监测反应。蒸发溶剂并将粗反应混合物用nahco3水溶液中和。用dcm(3
×
150ml)进行萃取。收集有机层，经无水na2so4干燥并蒸发，获得透明油状的标题化合物吡啶甲酸乙酯(1.8g)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 8.72(d，j＝4.38hz，1h)，8.01-8.09(m，1h)，7.96-8.01(m，1h)，7.60-7.68(m，1h)，4.35(q，j＝7.02hz，2h)，1.33(t，j＝7.24hz，3h)。
[0901]
合成吡啶甲酰肼.向搅拌的吡啶甲酸乙酯(1.8gm，0.0119mol，1当量)于乙醇(20ml)中的溶液中加入水合肼(0.715g，0.0143mol，1.2当量)。使反应混合物回流3小时。用tlc和lcms监测反应。蒸发溶剂，获得产物，将其用己烷湿磨，获得呈白色固体状的吡啶甲酰肼(1.5g)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.86(br.s.，1h)，8.61(d，j＝4.82hz，1h)，7.91-8.02(m，2h)，7.53-7.60(m，1h)，4.56(br.s.，2h)
[0902]
合成2-氧代基-2-(2-吡啶甲酰经基)乙酸乙酯.在0℃下向搅拌的吡啶甲酰肼(1.5g，0.0109mol，1当量)于dcm中的溶液加入tea(1.32gm，0.0131mol，1当量)。反应混合物保持在0℃下搅拌30分钟。在相同温度下向反应混合物加入2-氯-2-氧代基乙酸乙酯(1.5gm，0.0109mol，1当量)。将反应混合物在0℃下搅拌一小时。反应用lcms监测。反应用冰水(30ml)淬灭。产物用dcm(2
×
100ml)萃取。收集有机层，经无水na2so4干燥并减压蒸发，获得粗物质，将其用己烷湿磨，获得呈游离碱形式的标题化合物(2.2g)。1h nmr(400mhz，
dmso-d6)δ10.94(br.s.，1h)，10.75(s，1h)，8.69(d，j＝4.38hz，1h)，8.04(d，j＝3.95hz，2h)，7.62-7.72(m，1h)，4.30(q，j＝7.02hz，2h)，1.31(t，j＝7.24hz，3h)。
[0903]
合成5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯.向搅拌的2-氧代基-2-(2-吡啶甲酰经基)乙酸乙酯(100mg，1当量，和0.421mmol)于二噁烷(4ml)中的溶液中加入劳森试剂(lawessons’reagent)(426.16mg，2.5当量，和1.05mmol。反应混合物保持在110℃下搅拌24小时。用lcms监测反应。将反应混合物用nahcoo3水溶液(30ml)淬灭。产物用乙醚(3
×
75ml)萃取。收集有机层，经无水na2so4干燥并减压蒸发，获得粗物质，其通过快速色谱法来纯化，获得标题化合物5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯，浅黄色固体(60mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.76(d，j＝4.89hz，1h)，8.37(d，j＝8.31hz，1h)，8.10(dt，j＝1.71，7.70hz，1h)，7.63-7.69(m，1h)，4.46(q，j＝7.34hz，2h)，1.32-1.40(m，3h)。
[0904]
合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.212mmol，1当量)于甲苯(1ml)中的溶液中加入含1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(68.7mg，0.212mmol，1当量)的甲苯(1ml)。将混合物用2m三甲基铝的甲苯溶液(61.056mg，0.848mmol，4当量)逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得悬浮液滤出并用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取。所获得的有机层浓缩，浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法(etoac/己烷)来纯化，获得呈游离碱形式的标题产物。lcms：501[m+h]
+
。
[0905]
n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺的对映异构体分离.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺的互变异构体(洗脱时间：5.47min和6.75min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：18％，获得峰-1，为(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(8mg)，峰-2，为(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(6mg)。(化合物123)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.59(s，1h)，8.76(d，j＝4.40hz，1h)，8.35(d，j＝7.83hz，1h)，8.23(s，1h)，8.03-8.12(m，4h)，7.82(s，1h)，7.74(d，j＝8.31hz，1h)，7.66(d，j＝6.36hz，1h)，5.93(s，1h)，1.88(d，j＝6.85hz，3h)。(化合物124)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.59(s，1h)，8.76(d，j＝4.89hz，1h)，8.35(d，j＝8.31hz，1h)，8.23(s，1h)，8.03-8.12(m，3h)，7.82(s，1h)，7.74(d，j＝8.31hz，1h)，7.62-7.68(m，1h)，5.94(d，j＝7.34hz，1h)，1.88(d，j＝6.85hz，3h)。
[0906]
实例s67.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-4-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-4-甲酰胺(化合物125和126)
(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺(化合物127和128)
[0912][0913]
步骤1：合成2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酸乙酯.向搅拌的2-溴吡啶(450mg，0.005mol，1当量)、噁唑-5-甲酸乙酯(450mg，2.86mmol，1当量)、cs2co3(2.82gm，8.59mmol，3当量)、二噁烷(10ml)和水(2ml)的悬浮液中，用氮气净化5分钟。将p(t-bu)3(12.87mg，0.057.mmol，0.2当量)和pd(oac)2(12.873mg，0.057mmol，0.2当量)加入至反应混合物中，加热至80℃，保持2小时。将冷却的反应混合物用水稀释，用etoac萃取。将合并的etoac萃取物用水洗涤，经na2so4干燥，经硅胶垫过滤并浓缩。残余物在硅胶塞上用5-40％etoac/己烷洗脱进行色谱分析，得到3-(2-氯嘧啶-4-基)-2-甲基-1h-吲哚-1-甲酸叔丁酯(0.2gm)。lcms：220[m+h]
+
。
[0914]
步骤2：合成2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酸.向2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酸乙酯(200mg，0.913mmol，1当量)于thf(2ml)和水(2ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂(43.83mg，1.095mmol，1.2当量)，将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并将所获得的悬浮液冻干。将所获得的粗物质用乙醚湿磨，获得2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酸。(52mg)。lcms：191[m+h]
+
。
[0915]
步骤3：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺.向2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酸(100mg，0.526mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入hatu(200.5mg，0.526mmol，1当量)。将混合物用dipea(203.6mg，1.57mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(188.9mg，0.526mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出，获得粗物质，将所获得的粗物质用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，得到n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺。对映异构体(洗脱时间：7.0min和8.8min)通过手性hplc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用hplc级正己烷和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：18ml/min，异丙醇百分比：15％，获得(8mg)。(r)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺，6mg(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺)。lcms：497[m+h]
+
。(化合物127)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.84(s，1h)，8.77(d，j＝4.38hz，1h)，8.22(d，j＝7.89hz，1h)，8.17(s，1h)，7.97-8.11(m，4h)，7.70-7.78(m，2h)，7.60(dd，j＝5.26，7.02hz，1h)，5.86-5.97(m，1h)，1.87(d，j＝7.02hz，3h)。(化合物128)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.84(s，1h)，8.77(d，j＝4.38hz，1h)，8.23(d，j＝7.89hz，1h)，
8.18(s，1h)，7.97-8.13(m，4h)，7.70-7.79(m，2h)，7.61(dd，j＝5.26，7.02hz，1h)，5.88-5.98(m，1h)，1.88(d，j＝7.02hz，3h)。
[0916]
实例s69.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物129)
[0917][0918]
步骤1：合成5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.在室温下经60分钟向搅拌的(z)-2-氯-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(200mg，1.21mmol，1当量)和2-乙炔基嘧啶(252.1mg，1.21mmol，1当量)于乙醚(80ml)中的混合物中逐滴加入三乙胺(0.337ml，2.42mmol，2当量)于乙醚(20ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物过滤，并浓缩滤液成黄色油状物，其通过快速硅胶色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的混合物来纯化，得到呈白色固体状的5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(40mg)。lcms：220[m+h]
+
。
[0919]
步骤2：合成5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(35mg，0.159mmol，1当量)于thf(2ml)和水(2ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂(7.631mg，0.190mmol，1.2当量)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并冻干。在冻干后，将所获得的粗物质用乙醚湿磨，获得5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(0.03gm)。lcms：191[m+h]
+
。
[0920]
步骤3：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(30mg，0.157mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入hatu(59.84mg，0.157mmol，1当量)和dipea(60.78mg，0.471mmol，3当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物逐滴加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(54.18mg，0.157mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。所获得的粗物质通过用dcm∶己烷(2∶8)湿磨来纯化，获得n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(6mg)。lcms：483[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.21(s，1h)，9.04(d，j＝4.89hz，2h)，8.33(s，1h)，8.04-8.13(m，2h)，7.79(s，1h)，7.67(t，j＝4.89hz，1h)，7.57(s，1h)，7.07(d，j＝8.31hz，1h)，5.67(s，2h)。
[0921]
实例s70.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基氨基)噻唑-5-甲酰胺(化合物130)
[0922][0923]
向2-(吡啶-2-基氨基)噻唑-5-甲酸(25mg，0.113mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(42.96mg，0.113mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后逐滴加入dipea
(43.81mg，0.339mmol，3当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(38.98mg，0.113mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。所获得的粗物质通过combi快速色谱法来纯化，得到产物，其通过使用异丙醇和己烷进一步湿磨，得到n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基氨基)噻唑-5-甲酰胺(10mg白色固体)。lcms：513[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 11.65(s，1h)10.37(s，1h)8.38(br.s.，1h)8.20(s，1h)8.14(s，1h)8.08(br.s.，2h)7.76(br.s.，1h)7.68(s，1h)6.98-7.16(m，3h)5.64(s，2h)
[0924]
实例s71.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物131和132)
[0925][0926]
步骤1：合成2，4-二氧代基-4-(吡嗪-2-基)丁酸乙酯.在0℃下向60％氢化钠(0.590g，0.590mol，1.5当量)于thf(10ml)中的溶液中加入1-(吡嗪-2-基)乙-1-酮(2.0g，0.013mol，1当量)，在0℃下逐滴加入至反应混合物中。将所得反应混合物在室温下再搅拌30分钟，接着在0℃下逐滴加入草酸二乙酯(2.99g，0.024mol，1.5当量)并将反应混合物在室温下再搅拌18小时。用tlc和lcms确认产物形成。将反应混合物用冰水淬灭并用1n hcl中和并且将黄色沉淀过滤并减压干燥，获得2，4-二氧代基-4-(吡嗪-2-基)丁酸乙酯(3g，粗，呈黄色固体状)。lcms：222[m+h]
+
。
[0927]
步骤2：合成5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.将2，4-二氧代基-4-(吡啶-2-基)丁酸乙酯(2.0g，0.009mol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.621g，0.009mmol，1.0当量)于etoh(20ml)中的悬浮液在85℃下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于乙酸乙酯和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥并将其在减压下浓缩，得到5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯。粗产物使用快速柱色谱法使用溶剂系统(己烷中10-20％乙酸乙酯)来纯化，获得5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(300mg，呈灰白色固体状)。lcms：220[m+h]
+
。
[0928]
步骤3：合成5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸.向5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯
(400mg，1.82mmol，1.0当量)于thf(5ml)和水(2ml)中的溶液中加入氢氧化锂(115mg，2.73mmol，1.5当量)。将所得混合物搅拌过夜。反应物质在减压下浓缩。将所得残余物用1n hcl酸化并且沉淀过滤并减压干燥，获得5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸(250mg，呈白色固体状)。lcms：191[m+h]
+
。
[0929]
步骤4：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺.向5-(吡嗪-2-基)异噁唑-3-甲酸(150mg，0.78mmol，1当量)和hatu(328mg，0.86mmol，1.1当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌30分钟，接着加入dipea(324mg，2.51mmol，3.2当量)并加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(281mg，0.78mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用etoac(100ml)稀释并用水(2
×
50ml)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯产物n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(250mg，呈灰白色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.15(s，1h)，9.35(d，j＝1.6hz，1h)，8.87-8.82(m，1h)，8.81(d，j＝2.5hz，1h)，8.21(s，1h)，8.09(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.74(d，j＝10.0hz，2h)，7.67(s，1h)，5.94(q，j＝6.8hz，1h)，1.87(d，j＝6.8hz，3h)。lcms：497[m+h]
+
。
[0930]
步骤5：合成(r)和(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺的互变异构体(220mg，洗脱时间：5.6min和6.8min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇(0.2％dea)进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：20％，获得(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(40mg)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1h-吡唑-3-甲酰胺(40mg)。(化合物131)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.15(s，1h)，9.35(d，j＝1.6hz，1h)，8.87-8.82(m，1h)，8.81(d，j＝2.5hz，1h)，8.21(s，1h)，8.09(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.74(d，j＝10.0hz，2h)，7.67(s，1h)，5.94(q，j＝6.8hz，1h)，1.87(d，j＝6.8hz，3h)。lcms：497[m+h]
+
。(化合物132)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.15(s，1h)，9.35(d，j＝1.6hz，1h)，8.87-8.82(m，1h)，8.81(d，j＝2.5hz，1h)，8.21(s，1h)，8.09(d，j＝8.3hz，1h)，8.05(s，1h)，7.74(d，j＝10.0hz，2h)，7.67(s，1h)，5.94(q，j＝6.8hz，1h)，1.87(d，j＝6.8hz，3h)。lcms：497[m+h]
+
。
[0931]
实例s72.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺(化合物133和134)
[0932][0933]
步骤1：合成吡啶甲酸甲酯.在0℃下向吡啶甲酸(6.0gm，0.04mol)于meoh(60ml)中的溶液中逐滴加入socl2(8.8gm，0.073mol)(5.3ml)。使所得混合物回流12小时，此后其真空浓缩。将所得物质用h2o(150ml)稀释并用etoac萃取。将有机层用nahco3水溶液(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，并真空浓缩，得到6.1gm呈透明液体状的纯产物吡啶甲酸甲酯。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d＝8.72(d，j＝3.9hz，2h)，8.08-8.04(m，2h)，8.03-7.97(m，2h)，7.65(dd，j＝5.5，6.8hz，2h)。
[0934]
步骤2：合成吡啶甲酰肼.将吡啶甲酸甲酯(6g，0.043mol，1当量)和水合肼(4.3g，0.08mol，2.0当量)于etoh(50ml)中的悬浮液在90℃下搅拌过夜。用tlc和lcms确认产物形成。在减压下浓缩所得混合物，使残余物溶解于乙酸乙酯和蒸馏水中。分离有机相，经无水na2so4干燥并将其在减压下浓缩，得到粗物质。将粗产物用乙醚洗涤，获得吡啶甲酰肼(5.2gm，呈灰白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d＝9.87(br.s.，1h)，8.61(d，j＝4.8hz，1h)，8.03-7.90(m，2h)，7.57(dt，j＝3.3，5.2hz，1h)，4.62(br.s.，2h)。
[0935]
步骤3：合成2-氧代基-2-(2-吡啶甲酰经基)乙酸乙酯.在0℃下向搅拌的吡啶甲酰肼(2.0g，0.01mol，1当量)于dcm(20ml)中的溶液中加入三乙胺(2.2gm，0.02mol，1.5当量)，接着加入2-氯-2-氧代基乙酸乙酯(2.9g，0.02mmol，1.5当量)。在搅拌过夜后，将反应混合物用dcm(30ml)稀释。将dcm层用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到粗物质。将粗物质用乙醚洗涤，得到2.2gm2-氧代基-2-(2-吡啶甲酰经基)乙酸乙酯(2.2gm)。lcms：239[m+h]
+
。
[0936]
步骤4：合成5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酸乙酯.经10分钟的时间向2-氧代基-2-(2-吡啶甲酰经基)乙酸乙酯(2.0g，0.008mol，1当量)于dcm(10ml)中的混合物中加入三乙胺(1.28gm，0.012mol，1.5当量)，接着对甲苯磺酰氯(2.41gm，0.012mol，1.5当量)并在周围温度下搅拌过夜。将反应混合物用dcm(20ml)稀释，用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并通过柱色谱法来纯化，得到5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酸乙酯(1.4gm)。lcms：220[m+h]
+
。
[0937]
步骤5：合成5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酸锂.向搅拌的5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酸乙酯(140mg，0.63mmol，1当量)于thf∶水(1∶1，10ml)中的溶液中加入lioh(40mg，0.95mmol，0.95当量)并在室温下搅拌过夜。在反应完成后，反应在减压下浓缩，得到粗锂盐产物100mg 5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酸锂(0.2gm)。lcms：192[m+h]
+
。
[0938]
步骤6：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺.向喹啉-2-甲酸(200mg，1.01mmol，1当量)、edc.hcl(292mg，1.52mmol，1.5当量)、hobt(205mg，1.52mmol，1.5当量)和tea(328mg，3.24mmol，3.2当量)于dmf(1ml)中的溶液中。将混合物搅拌5分钟，接着加入含1-{1[2，4双(三氟甲基)苯基]乙基}-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(327mg，1.01mmol，1当量)的dmf(2ml)。反应混合物保持在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成并且将反应混合物用水(30ml)稀释并用etoac(100ml)萃取并再用水(30ml
×
4)洗涤。有机层经na2so4干燥并在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速柱色谱法进一步纯化，获得纯2n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺(60mg，呈白色固体状)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.60(s，1h)，8.87-8.80(m，1h)，8.28(d，j＝7.9hz，1h)，8.23(s，1h)，8.15-8.07(m，2h)，8.05(s，1h)，7.80(s，1h)，7.75(d，j＝8.3hz，1h)，7.70(ddd，j＝7.7，4.8，1.2hz，1h)，5.96(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.8hz，3h)。lcms：497[m+h]
+
。
[0939]
步骤7：合成(r)和(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺.(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺的互变异构体(80mg，洗脱时间：4.77min和5.77min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：20％，获得峰-1(r)-(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺(20mg)和峰-2(s)-(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺(20mg)。(化合物133)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.60(s，1h)，8.87-8.80(m，1h)，8.28(d，j＝7.9hz，1h)，8.23(s，1h)，8.15-8.07(m，2h)，8.05(s，1h)，7.80(s，1h)，7.75(d，j＝8.3hz，1h)，7.70(ddd，j＝7.7，4.8，1.2hz，1h)，5.96(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.8hz，3h)。lcms：497[m+h]
+
。(化合物134)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.60(s，1h)，8.87-8.80(m，1h)，8.28(d，j＝7.9hz，1h)，8.23(s，1h)，8.15-8.07(m，2h)，8.05(s，1h)，7.80(s，1h)，7.75(d，j＝8.3hz，1h)，7.70(ddd，j＝7.7，4.8，1.2hz，1h)，5.96(q，j＝6.9hz，1h)，1.88(d，j＝6.8hz，3h)。lcms：497[m+h]
+
。
[0940]
实例s73.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物135)
[0941][0942]
步骤1：合成4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯.将2-甲基丙二酸二乙酯(2g，0.011mol，1当量)和羟胺盐酸盐(0.965g，0.013mol，1.2当量)于etoh(20ml)中的
溶液加热至回流，保持12小时。反应混合物真空浓缩并将反应混合物水倾倒至反应混合物中并用etoac(600ml
×
5)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩，将所获得的残余物用石油醚(100ml)湿磨，得到化合物4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯(产量，1.2gm)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δppm4.42(q，j＝7.02hz，2h)，2.12(s，3h)，1.32-1.46(m，3h)。
[0943]
步骤2：合成4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯.向4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯(1g，0.058mol，1当量)和氧溴化磷(8.39g，0.0292mol，5当量)的混合物中逐滴加入tea(1.181gm，0.0116mol，2当量)。将所得反应加热至80℃并在此温度下搅拌12小时。接着反应混合物倾倒至冰水中并用etoac萃取(600ml
×
5)。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。所得残余物使用硅胶(810mg)上快速柱色谱法来纯化。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ4.37(q，j＝7.16hz，2h)，2.10(s，3h)，1.32(t，j＝7.02hz，3h)。
[0944]
步骤3：合成4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.在氮气氛围下在室温下向5-溴-4-甲基异噁唑-3-甲酸乙酯(500mg，2.127mmol，1当量)于无水甲苯(10ml)中的溶液中加入2-(三丁基锡烷基)吡啶(834mg，2.553mmol，1当量)，氮气净化15分钟并接着加入pd(dppf)cl2ch2cl2(173.8mg，0.212mmol，0.1当量)。将反应混合物在110℃下搅拌16小时。向反应溶液加入水，并接着将反应溶液用乙酸乙酯萃取。将萃取物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。在减压下去除溶剂。所获得的残余物通过柱色谱法来纯化，得到4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(150mg)。lcms：233[m+h]
+
。
[0945]
步骤4：合成4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(25mg，0.084mmol，1当量)于thf(2ml)和水(2ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂(4.08mg，0.102mmol，1.2当量)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并将所获得的悬浮液冻干。将所获得的粗物质用乙醚湿磨，获得4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(0.03gm)。lcms：205[m+h]
+
。
[0946]
步骤5：合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(20mg，0.0980mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入hatu(30.14mg，0.0980mmol，1当量)。将混合物用dipea(37.75mg，0.292mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(30.14mg，0.0975mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。所获得的粗物质通过用dcm∶己烷(2∶8)ml湿磨来纯化，n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(20mg)。lcms：496[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.13(s，1h)，8.78(d，j＝4.40hz，1h)，8.33(s，1h)，8.05-8.09(m，2h)，8.00-8.04(m，1h)，7.93-7.99(m，1h)，7.78(s，1h)，7.54(dd，j＝5.14，6.60hz，1h)，7.07(d，j＝8.31hz，1h)，5.66(s，2h)，2.56(s，3h)。
[0947]
实例s74.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物136)
[0948][0949]
步骤1：合成吡嗪-2-甲酸乙酯.向搅拌的吡嗪-2-甲酸(500mg)于乙醇(30ml)中的溶液中逐滴加入浓h2so4(1ml)并在100℃下回流2天。反应用nmr监测。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用饱和碳酸氢钠溶液处理，用dcm(3
×
150ml)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩，获得产物吡嗪-2-甲酸乙酯(496mg，棕色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.16-9.26(m，1h)，8.90(d，j＝2.19hz，1h)，8.82(s，1h)，4.39(q，j＝7.16hz，2h)，1.35(t，j＝7.24hz，3h)。
[0950]
步骤2：合成吡嗪-2-甲酰肼.向搅拌的吡嗪-2-甲酸乙酯(450mg，1当量，0.986mmol)于乙醇(20ml)中的溶液中加入水合肼(65.13mg，1.2当量，和1.184mmol)。使反应混合物回流3小时。反应用nmr监测。反应混合物在减压下浓缩，获得沉淀。用己烷湿磨，获得吡嗪-2-甲酰肼(340mg，棕色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.13(br.s.，1h)，9.13(d，j＝1.32hz，1h)，8.83(d，j＝2.19hz，1h)，8.59-8.78(m，1h)，4.65(br.s.，2h)。
[0951]
步骤3：合成2-氧代基-2-(2-(吡嗪-2-羰基)肼基)乙酸乙酯.在0℃下使吡嗪-2-甲酰肼(400mg，1当量，2.89mmol)溶于dcm中。加入tea(351.3mg，1.2当量，3.66mmol)。反应混合物保持在0℃下搅拌半小时。在0℃下加入2-氯-2-氧代基乙酸乙酯(397mg，1当量，2.89mmol)。反应混合物保持在0℃下搅拌一小时。反应用lcms监测。反应用冰淬灭。用dcm(2
×
100ml)进行萃取。将所获得的dcm层浓缩，获得粗物质，将其用己烷湿磨，获得所需产物(2.2gm浅黄色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.03(br.s.，1h)，10.91-10.98(m，1h)，9.08-9.26(m，1h)，8.93(d，j＝2.19hz，1h)，8.75-8.85(m，1h)，4.31(q，j＝7.02hz，2h)，1.31(t，j＝7.02hz，3h)。
[0952]
步骤4：合成5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯.在室温下向搅拌的2-氧代基-2-(2-(吡嗪-2-羰基)肼基)乙酸乙酯(100mg，1当量，和0.421mmol)于二噁烷(4ml)中的溶液中加入劳森试剂(426.16mg，2.5当量，和1.05mmol)。将反应混合物在110℃下加热24小时。反应用lcms监测。通过用饱和碳酸氢盐溶液(30ml)淬灭进行处理。通过乙醚(75ml
×
3)进行萃取，所获得的有机层在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，获得5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(80mg，浅黄色)，用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(56mg，浅黄色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.55(s，1h)，8.90-8.94(m，1h)，8.84-8.90(m，1h)，4.48(q，j＝7.02hz，2h)，1.38(t，j＝7.02hz，3h)。
[0953]
步骤5：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.向5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.210mmol，1当量)于甲苯(1ml)中的溶液中加入含1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(68.06mg，0.210mmol，1当量)的甲苯(1ml)。向混合物逐滴加入三甲基铝(30.25mg，0.840mmol，4当量)。反应混合物保持在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水
2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.212mmol，1当量)于甲苯(1ml)中的溶液中加入含1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(58.05mg，0.212mmol，1当量)的甲苯(1ml)。将混合物用三甲基铝(49.14mg，0.063mmol，3当量)逐滴处理。在室温下搅拌15分钟后，将混合物用溶液逐滴处理，反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得悬浮液滤出并将所获得的滤液用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取。将所获得的有机层真空浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，所获得的粗产物用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得n-(1-(1-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(6mg，灰白色固体)。lcms：462[m+h]
+
。1h nmr(500mhz，dmso-d6)d 11.58(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.35(d，j＝7.9hz，1h)，8.16(s，1h)，8.12-8.05(m，1h)，7.79(s，1h)，7.69-7.53(m，4h)，5.84(q，j＝6.9hz，1h)，1.84(d，j＝6.8hz，3h)。
[0960]
实例s76.合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物138)
[0961][0962]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.向搅拌的5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.210mmol，1当量)于甲苯(1ml)、1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(71.7mg，0.210mmol，1当量)于甲苯(1ml)中的溶液中逐滴加入2m三甲基铝的甲苯溶液(49.14mg，0.638mmol，3当量)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得悬浮液过滤，滤液用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取，所获得的有机层在减压下浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，所获得的粗产物用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得所需产物(8mg，浅黄色固体)。lcms：526[m+h]
+
。1h nmr(500mhz，dmso-d6)d 10.79(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.35(d，j＝7.9hz，1h)，8.16(s，1h)，8.10(q，j＝7.8hz，2h)，8.05(s，1h)，7.75(d，j＝8.3hz，1h)，7.66(dd，j＝7.6，4.9hz，1h)，5.84(q，j＝7.1hz，1h)，2.20(s，3h)，1.84(d，j＝6.9hz，3h)。
[0963]
实例s77.合成(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺(化合物139和140)
[0964][0965]
合成(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺.向吡啶甲酸(50mg，0.406mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(154.47mg，0.406mmol，1当量)。
在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入dipea(157.62mg，1.218mmol，3当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(145.93mg，0.406mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。粗物质通过combi快速色谱法来纯化，得到n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺。对映异构体(洗脱时间：10.2min和19.2min)通过手性hplc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用hplc级正己烷(0.2％dea)和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：18ml/min，异丙醇百分比：10％，获得(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺(6mg白色固体)和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺(10mg白色固体)。lcms：429[m+h]
+
。(化合物139)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 10.99(s，1h)8.71(d，j＝4.89hz，1h)8.26(s，1h)8.00-8.13(m，4h)7.86(s，1h)7.73(d，j＝8.31hz，1h)7.58-7.68(m，1h)5.91(d，j＝6.36hz，1h)1.87(d，j＝6.85hz，3h)。(化合物140)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 10.98(s，1h)8.71(d，j＝3.91hz，1h)8.26(s，1h)7.99-8.12(m，4h)7.86(s，1h)7.73(d，j＝8.31hz，1h)7.61-7.67(m，1h)5.91(d，j＝6.85hz，1h)1.87(d，j＝6.85hz，3h)。
[0966]
实例s78.合成(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺(化合物141和142)
[0967][0968]
合成(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺.向吡嗪-2-甲酸(50mg，0.403mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(153.21mg，0.403mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物逐滴加入dipea(156.34mg，1.209mmol，和3当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(144.75mg，0.403mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。粗物质通过combi快速色谱法来纯化，得到n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺。对映异构体(洗脱时间：20.1min和27.3min)通过手性hplc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用hplc级正己烷(0.2％dea)和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：18ml/min，异丙醇百分比：10％，获得(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺(15mg白色固体)和(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)吡嗪-2-甲酰胺(20mg白色固体)。lcms：430[m+h]
+
。(化合物141)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 11.14(s，1h)9.25(s，1h)8.91(d，j＝2.45hz，1h)8.79(s，1h)8.27(s，1h)8.03-8.11(m，2h)7.85(s，1h)7.73(d，j＝8.31hz，1h)5.92(d，j＝6.85hz，1h)1.87(d，j＝6.85hz，3h)。(化合物142)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 11.14(s，
1h)9.25(s，1h)8.91(d，j＝2.45hz，1h)8.79(s，1h)8.27(s，1h)8.00-8.13(m，2h)7.85(s，1h)7.73(d，j＝8.80hz，1h)5.92(d，j＝7.34hz，1h)1.87(d，j＝6.85hz，3h)。
[0969]
实例s79.合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物143)
[0970][0971]
步骤1：合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(50mg，0.239mmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入hatu(47.60mg，0.239mmol，1当量)。向混合物逐滴加入dipea(92.5mg，0.717mmol，2当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺(47.60mg，0.239mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。粗物质通过用dcm∶己烷(2∶8)湿磨来纯化，获得n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(30mg)。lcms：371[m+h]
+
。1h nmr(500mhz，dmso-d6)d 11.05(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.09(d，j＝7.9hz，1h)，8.04(d，j＝9.5hz，2h)，7.68(s，1h)，7.57(dd，j＝7.4，4.8hz，1h)，7.47(s，1h)，7.36(d，j＝7.7hz，1h)，7.29(t，j＝7.5hz，1h)，7.20(t，j＝7.5hz，1h)，7.08(d，j＝7.5hz，1h)，5.92(t，j＝7.1hz，1h)，3.12(ddd，j＝14.7，8.7，5.2hz，1h)，2.94(dt，j＝15.7，7.6hz，1h)，2.60(td，j＝8.4，4.9hz，1h)，2.36(h，j＝6.5hz，1h)。
[0972]
实例s80.合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物144)
[0973][0974]
步骤1：合成呋喃-2-甲酸乙酯.向搅拌的呋喃-2-甲酸(500mg)于乙醇(30ml)逐滴加入浓h2so4(1ml)中的溶液中并在100℃下回流2天。反应用nmr监测。反应混合物真空浓缩，获得粗物质，用饱和钠碳酸氢盐溶液稀释并用dcm(3
×
150ml)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，获得吡嗪-2-甲酸乙酯(420mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.88-8.04(m，1h)，7.29(d，j＝3.42hz，1h)，6.63-6.72(m，1h)，4.27(q，j＝7.17hz，2h)，1.28(t，j＝7.09hz，3h)。
[0975]
步骤2：合成呋喃-2-甲酰肼.向搅拌的呋喃-2-甲酸乙酯(400mg，1当量，2.85mmol)于乙醇(20ml)中的溶液中加入水合肼(171.4mg，1.2当量，和3.42mmol)。使反应混合物回流3小时。反应用nmr监测。反应混合物真空浓缩，获得粗物质，其通过使用己烷来湿磨，获得呋喃-2-甲酰肼(310mg，棕色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.62(br.s.，1h)，7.80(d，j＝0.98hz，1h)，7.07(d，j＝3.42hz，1h)，6.59(dd，j＝1.47，3.42hz，1h)，4.41(br.s.，2h)。
[0976]
步骤3：合成5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯.在0℃温度下向搅拌的呋
喃-2-甲酰肼(200mg，1当量，21.587mmol)和tea(192.38mg，1.2当量，1.904mmol)于dcm中的溶液中逐滴加入2-氯-2-氧代基乙酸乙酯(260.9mg，1当量，1.904mmol)。将反应混合物在0℃温度下搅拌一小时。反应用lcms监测。将反应用冰水淬灭并用dcm(2
×
100ml)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，获得粗物质，将其用己烷湿磨，获得所需产物。在室温下向搅拌的2-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-2-氧代基乙酸乙酯(300mg，1当量，和1.327mmol)于二噁烷(4ml)中的溶液中加入劳森试剂(1.6gm，3当量，和3.98mmol)。将反应混合物在110℃下加热24小时。反应用lcms监测。通过用饱和碳酸氢盐溶液(30ml)淬灭进行处理，用乙醚(76ml
×
3)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，获得粗产物，用dcm己烷(2∶8)湿磨，获得5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(260mg，浅黄色固体)。lcms：224[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.11(d，j＝0.98hz，1h)，7.53(d，j＝3.42hz，1h)，6.84(dd，j＝1.71，3.67hz，1h)，4.39-4.50(m，2h)，1.36(t，j＝7.09hz，3h)。
[0977]
步骤4：合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.在室温下向搅拌的5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.221mmol，1当量)和1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺(44.02mg，0.221mmol，1当量)于甲苯(2ml)中的混合物中加入三甲基铝(510mg，0.663mmol，3当量)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释，将所得悬浮液滤出并且滤液用乙酸乙酯(50ml
×
2)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，获得粗产物，将其用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得所需产物(15mg，浅黄色固体)。lcms：377[m+h]
+
。1h nmr(500mhz，dmso-d6)d 11.54(s，1h)，8.09(s，1h)，8.04(s，1h)，7.73(s，1h)，7.49(d，j＝3.5hz，1h)，7.36(d，j＝7.6hz，1h)，7.29(t，j＝7.4hz，1h)，7.20(t，j＝7.5hz，1h)，7.07(d，j＝7.6hz，1h)，6.85-6.80(m，1h)，5.92(t，j＝7.0hz，1h)，3.12(ddd，j＝14.8，8.7，5.1hz，1h)，2.94(dt，j＝15.6，7.5hz，1h)，2.66-2.56(m，1h)，2.35(q，j＝7.0hz，1h)。
[0978]
实例s81.合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物145)
[0979][0980]
步骤1：合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.在室温下向搅拌的5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.210mmol，1当量)和1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(50.84mg，0.210mmol，1当量)于甲苯(2ml)中的混合物中加入三甲基铝(30.37mg，0.843mmol，4当量)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释，将所得悬浮液滤出，滤液用乙酸乙酯(50ml
×
2)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，获得粗产物，用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得所需产物(3mg，浅黄色固体)。lcms：430[m+h]
+
。1h nmr(500mhz，dmso-d6)d 11.55(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.35(d，j＝7.9hz，
1h)，8.12-8.05(m，2h)，7.71(s，1h)，7.65(dd，j＝7.6，4.9hz，1h)，7.57(d，j＝8.1hz，2h)，7.46(t，j＝8.1hz，1h)，5.56(s，2h)。
[0981]
实例s82.合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物146)
[0982][0983]
步骤1：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(3).在室温下向搅拌的三苯基膦(4.44gm，0.0168mol，1.5当量)和diad(3.42gm，0.0168mol，1.5当量)于thf(20ml)中的溶液中加入(2，6-二氯苯基)甲醇(2gm，0.0112mol，1当量)和4-硝基-1h-吡唑(1.27gm，0.0112mol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。在反应完成后，反应混合物用乙酸乙酯和水萃取两次。收集有机层并在减压下蒸发，得到粗物质，其通过使用combi快速色谱法来纯化，获得所需产物。lcms：272[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 9.04(s，1h)8.23(s，1h)7.49-7.60(m，2h)7.34-7.49(m，1h)5.64(s，2h)。
[0984]
步骤2：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(4).在室温下向搅拌的1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(3)(1gm，0.003mol，1当量)于15ml乙醇-水(1∶1)中的溶液中加入铁(1.03gm，0.0185mol，5当量)和氯化铵(0.98gm，0.0185mol，5当量)。在80℃下使反应混合物回流24小时。反应混合物经硅藻土床过滤。所获得的滤液用dcm和水萃取两次。收集有机层并在减压下蒸发，获得所需产物1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(4)。lcms：241[m+h]
+
。
[0985]
步骤3：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(5).向搅拌的1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(4)(1gm)于乙醇中的溶液中加入5ml hcl的乙醇溶液(3m)并保持搅拌过夜。所得反应混合物浓缩，得到所需产物1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(5)。lcms：241[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 9.98(br.s.，3h)7.98(s，1h)7.49-7.57(m，2h)7.45(d，j＝7.83hz，2h)5.56(s，2h)。
[0986]
步骤4：合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(34.35mg，0.179mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入hatu(68.32mg，0.197mmol，1当量)。在室温下搅拌15分钟后，向混合物加入dipea(93.95mg，0.537mmol，3当量)。在室温下搅拌15分钟后加入1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(50mg，0.179mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。所获得的粗物质通过combi快速色谱法来纯化，获得n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(4mg白色固体)。lcms：414[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)dppm 11.04(s，1h)8.76(d，j＝3.91hz，1h)7.98-8.12(m，3h)7.64(s，1h)7.57(d，j＝8.31hz，2h)7.39-7.49(m，3h)5.56(s，2h)。
[0987]
实例s83.合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺(化合物147)
[0988][0989]
步骤1：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(3).在室温下向搅拌的三苯基膦(4.44gm，0.0168mol，1.5当量)和diad(3.42gm，0.0168mol，1.5当量)于thf(20ml)中的溶液中加入(2，6-二氯苯基)甲醇(2gm，0.0112mol，1当量)和4-硝基-1h-吡唑(1.27gm，0.0112mol，1当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。在反应完成后，反应混合物用乙酸乙酯和水萃取两次。收集有机层并在减压下蒸发，得到粗物质，其通过使用combi快速色谱法来纯化，获得所需产物。lcms：272[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 9.04(s，1h)8.23(s，1h)7.49-7.60(m，2h)7.34-7.49(m，1h)5.64(s，2h)。
[0990]
步骤2：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(4).在室温下向搅拌的1-(2，6-二氯苯甲基)-4-硝基-1h-吡唑(3)(1gm，0.003mol，1当量)于15ml乙醇-水(1∶1)中的溶液中加入铁(1.03gm，0.0185mol，5当量)和氯化铵(0.98gm，0.0185mol，5当量)。在80℃下使反应混合物回流24小时。反应混合物经硅藻土床过滤。所获得的滤液用dcm和水萃取两次。收集有机层并在减压下蒸发，获得所需产物1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(4)。lcms：242[m+h]
+
。
[0991]
步骤3：合成1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(5).向搅拌的1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(4)(1gm)于乙醇中的溶液中加入5ml hcl的乙醇溶液(3m)并保持搅拌过夜。将所得反应混合物浓缩，得到所需产物1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(5)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 9.98(br.s.，3h)7.98(s，1h)7.49-7.57(m，2h)7.45(d，j＝7.83hz，2h)5.56(s，2h)。
[0992]
步骤4：合成2-溴-n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)噻唑-5-甲酰胺.向搅拌的2-溴噻唑-5-甲酸(500mg，2.403mmol，1当量)、hatu(913.14mg，2.403mmol，1当量)、dipea(929.96mg，7.209mmol，3当量)于dmf(1ml)中的溶液中加入1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(668.26mg，2.403mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出。粗物质通过combi快速色谱法来纯化，得到产物，将其用丙酮和己烷进一步湿磨，得到纯产物。lcms：431[m+h]
+
。
[0993]
步骤5：合成n-(1-(2,6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺.在室温下向搅拌的2-溴-n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)噻唑-5-甲酰胺(100mg，0.231mmol，1当量)、2-(呋喃-2-基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊环(44.90mg，0.231mmol，1当量)、磷酸钾(97.94mg，0.462mmol，2当量)和xantphos(13.35mg，0.0231，0.1当量)于3ml 1，4-二噁烷中的溶液中并用氮气净化30分钟。在净化后，加入pd(dppf)cl2.dcm(18.84mg，0.0231mmol，0.1当量)并在110℃下加热20小时。在反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯和水萃取两次。收集有机层并在减压下蒸发，得到粗产物，其通过
使用combi快速色谱法来纯化，得到n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-2-(呋喃-2-基)噻唑-5-甲酰胺(25mg浅黄色固体)。lcms：419[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 10.72(s，1h)8.50(s，1h)7.92-8.02(m，2h)7.51-7.62(m，3h)7.41-7.48(m，1h)7.24(d，j＝3.42hz，1h)6.72-6.78(m，1h)5.55(s，2h)。
[0994]
实例s84.合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物148)
[0995][0996]
合成n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1,3,4-噻二唑-2-甲酰胺.向搅拌的(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-胺(54.01mg，0.223mmol，1当量)和5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(50mg，0.223mmol，1当量)于甲苯(10ml)中的溶液中加入三甲基铝(0.17ml，0.892mmol，4当量)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取；收集有机层并在减压下蒸发，得到粗物质，其通过使用combi快速色谱法来纯化，得到n-(1-(2，6-二氯苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(8mg浅黄色固体)。lcms：420[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 11.52(br.s.，1h)8.08(s，2h)7.70(s，1h)7.51-7.62(m，2h)7.27-7.51(m，3h)6.82(d，j＝3.91hz，1h)5.56(s，2h)。
[0997]
实例s85.合成(r)-n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-（1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物149和150)
[0998][0999]
步骤1：合成2，3-二氢-1h-茚-1-醇.在0℃下向搅拌的2，3-二氢-1h-茚-1-酮(500mg，3.78mmol，1.0当量)于甲醇(5ml)中的溶液中逐份加入nabh4(228mg，5.68mmol，1.5当量)并搅拌10分钟。将反应混合物在室温下搅拌1小时。用tlc和lcms确认产物形成。在反应完成后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。将合并的有机萃取物用水(2
×
50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得2，3-二氢-1h-茚-1-醇(500mg)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ7.43(d，j＝5.38hz，1h)，7.19-7.28(m，4h)，5.20-5.35(m，1h)，3.07(ddd，j＝4.89，8.56，15.90hz，1h)，2.83(td，j＝7.70，15.90hz，1h)，2.43-2.55(m，1h)，1.88-2.02(m，1h)，1.70(d，j＝6.85hz，1h)。
[1000]
步骤2：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑(3).在0℃下向搅拌的2，3-二氢-1h-茚-1-醇(1)(300mg，2.238mol，和1当量)、4-硝基-1h-吡唑(2)(252.9mg，2.238mol，和1当量)和三苯基膦(538.66mg，2.666mol，和1.2当量)于thf(6ml)中的溶液中
逐滴加入diad(266.44gm，2.666mol，1.2当量)在thf(3ml)中稀释中的溶液。将反应混合物在微波中在140℃下加热15分钟。反应混合物真空浓缩，获得粗物质，其通过柱色谱法来纯化，获得所需产物1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑(351mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.97(s，1h)，8.26(s，1h)，7.26-7.39(m，2h)，7.10-7.23(m，2h)，5.93-6.03(m，1h)，3.16-3.24(m，1h)，2.88-2.98(m，1h)，2.57-2.75(m，2h)。
[1001]
步骤3：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺.向搅拌的1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-4-硝基-1h-吡唑(3)(350mg)于meoh(10ml)中的溶液中并用氮气净化，接着加入10％pd/c(70mg)并再用氮气净化另外5分钟，接着将所得反应混合物用氢气净化一小时。用tlc和lcms监测反应。反应混合物经硅藻土床过滤并用甲醇洗涤并减压浓缩，得到粗产物1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺(310mg)，其直接用于下一步。lcms：199[m+h]
+
。
[1002]
步骤4：合成1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐盐酸盐.在0℃下向搅拌的1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺(350mg)溶解于乙醇中的溶液中加入20ml hcl的乙醇溶液(15ml)并在室温下搅拌半小时。将所得悬浮液过滤并将滤液真空蒸发，获得粗物质，将其用乙醚湿磨，获得产物1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(320mg)。lcms：199[m+h]
+
。
[1003]
步骤5：合成n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(6).在室温下向搅拌的5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酸(200mg，1当量，1.111mmol)、hatu(423.33mg，1.111mmol，和1当量)和dipea(430mg，3当量，和3.33mmol)于5ml dmf中的溶液中加入1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(393.33mg，1当量，1.111mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得粗物质，将其用ipa∶己烷(1∶9)湿磨，获得n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。lcms：360[m+h]
+
。
[1004]
步骤6：合成(r)和(s)-n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-3-基)异噁唑-3-甲酰胺的互变异构体(洗脱时间：16.4min和19.7min)通过手性hplc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用hplc级正己烷(0.2％dea)和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：18ml/min，异丙醇百分比：30％，获得((r n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(12mg)(s)n-(1-(2，3-二氢-1h-茚-1-基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(15mg)。(化合物149)1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ10.99(s，1h)，7.99-8.03(m，2h)，7.67(s，1h)，7.34-7.38(m，1h)，7.26-7.32(m，2h)，7.20(t，j＝7.09hz，1h)，7.13(s，1h)，7.07(d，j＝7.34hz，1h)，6.77(dd，j＝1.96，3.42hz，1h)，5.87-5.94(m，1h)，3.07-3.18(m，1h)，2.94(td，j＝7.58，15.16hz，1h)，2.56-2.68(m，1h)，2.31-2.41(m，1h)。(化合物150)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.99(s，1h)，8.01(d，j＝2.93hz，2h)，7.67(s，1h)，7.33-7.38(m，1h)，7.27-7.32(m，2h)，7.20(t，j＝7.34hz，1h)，7.13(s，1h)，7.07(d，j＝7.34hz，1h)，6.77(d，j＝1.47hz，1h)，5.91(t，j＝6.85hz，1h)，3.05-3.19(m，1h)，2.89-3.00(m，1h)，2.57-2.69(m，1h)，2.31-2.40(m，1h)。
[1005]
实例s86.合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺(化合物151)
[1006][1007]
合成n-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酰胺.向搅拌的5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噁二唑-2-甲酸锂(120mg，0.61，1当量)、1-(2，4-双(三氟甲基)苯甲基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(210mg，0.61mmol，1当量)、edc.hcl(175mg，0.91，1.5当量)、hobt(124mg，0.91mmol，1.5当量)和tea(0.3ml，1.827mmol，3.0当量)于dmf(2ml)中的溶液中，在室温下过夜。向反应混合物加入冰水(50ml)，用etoac(2
×
40ml)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法使用etoac/己烷系统作为洗脱剂来纯化，得到标题化合物的游离碱(5mg)。lcms：483[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)d ppm 11.72(s，1h)8.84(d，j＝4.89hz，1h)8.39(s，1h)8.30(d，j＝7.83hz，1h)8.03-8.16(m，3h)7.84(s，1h)7.63-7.75(m，1h)7.06(d，j＝8.80hz，1h)5.69(s，2h)。
[1008]
实例s87.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物152和153)
[1009][1010]
合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.在室温下向搅拌的5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(100mg，0.421mmol，1当量)、1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(136.7mg，0.421mmol，1当量)于甲苯(2ml)中的溶液中加入2m三甲基铝的甲苯溶液(118.14mg，0.105mmol，4当量)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得悬浮液滤出，滤液用乙酸乙酯(50ml
×
2)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得粗物质，其通过combi-快速色谱法来纯化，获得粗产物用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得所需产物。lcms：513[m+h]
+
。
[1011]
合成(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺的互变异构体(洗脱时间：5.3min和5.8min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：20％，获得峰-1((s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(20mg)，峰-2(r)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(15mg)。(化合物152)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.65(s，
1h)，9.53(d，j＝1.32hz，1h)，8.91(d，j＝2.63hz，1h)，8.86-8.89(m，1h)，8.24(s，1h)，8.09(d，j＝8.33hz，1h)，8.06(s，1h)，7.83(s，1h)，7.75(d，j＝8.33hz，1h)，5.95(d，j＝7.02hz，1h)，1.88(d，j＝6.58hz，3h)。(化合物153)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.65(br.s.，1h)，9.53(d，j＝1.32hz，1h)，8.91(d，j＝2.63hz，1h)，8.85-8.88(m，1h)，8.24(s，1h)，8.09(d，j＝8.33hz，1h)，8.06(s，1h)，7.83(s，1h)，7.75(d，j＝8.33hz，1h)，5.91-5.98(m，1h)，1.88(d，j＝7.02hz，3h)。
[1012]
实例s88.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基.5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(化合物154和155)
[1013][1014]
步骤1：合成4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯.搅拌的2-甲基丙二酸二乙酯(2g，0.011mol，1当量)、羟胺盐酸盐(0.965g，0.013mol，1.2当量)于etoh(20ml)中的溶液在80℃下12小时。反应混合物真空浓缩，获得粗物质，将其用水稀释并用etoac(600ml
×
5)萃取，有机层用饱和盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩成所获得的粗物质，将其用石油醚(100ml)湿磨，得到4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯(wt：1.2gm)。1h nmr(400mhz，氯仿-d)δ4.42(q，j＝7.02hz，2h)，2.12(s，3h)，1.32-1.46(m，3h)。
[1015]
步骤2：合成4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯.向搅拌的4-甲基-5-氧代基-4，5-二氢异噁唑-3-甲酸乙酯(1g，0.058mol，1.0当量)和氧溴化磷(8.39g，0.0292mol，5当量)的混合物中逐滴加入tea(1.181gm，0.0116mol，2当量)。将所得反应混合物加热至80℃并在室温下搅拌12小时。将反应混合物倾倒至冰水中并用etoac(600ml
×
5)萃取，有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩，获得粗物质，其通过使用硅胶上快速柱色谱法来纯化，获得所需产物(810mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ4.37(q，j＝7.16hz，2h)，2.10(s，3h)，1.32(t，j＝7.02hz，3h)。
[1016]
步骤3：合成4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯.向5-溴-4-甲基异噁唑-3-甲酸乙酯(500mg，2.127mmol，1当量)、2-(三丁基锡烷基)吡啶(834mg，2.553mmol，1当量)于无水甲苯(10ml)中的混合物中氮气净化15分钟，加入pd(dppf)cl2·
ch2cl2(173.8mg，0.212mmol，0.1当量)。将反应混合物在110℃下搅拌16小时。向反应混合物加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩，获得粗物质，通过柱色谱法来纯化，得到4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(150mg)。lcms：232[m+h]
+
。
[1017]
步骤4：合成4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸.向搅拌的4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸乙酯(40mg，0.169mmol，1当量)于thf(2ml)和水(2ml)中的溶液中缓慢加入氢氧化锂(8.1mg，0.203mmol，1.2当量)。将所得混合物搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩，获得粗物质，将其用1n hcl酸化并且冻干所获得的悬浮液并将粗物质用乙醚湿磨，获得4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(30mg)。lcms：204[m+h]
+
。
[1018]
步骤5：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.向搅拌的4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酸(25mg，0.121mmol，1当量)、hatu(46.01mg，0.121mmol，1当量)和dipea(47.195mg，.365mmol，3当量)于dmf(2ml)中的溶液中加入1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺盐酸盐(43.43mg，0.0.121mmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得沉淀滤出，获得粗物质，将其用dcm∶己烷(2∶8)湿磨，获得n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺。lcms：509[m+h]
+
。
[1019]
步骤6：合成(r)和(s)n n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺的互变异构体(洗脱时间：12.6min和19.2min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。用分析级液体二氧化碳和hplc级异丙醇进行等度程序，总流速：51g/min，共溶剂百分比：18％，获得ml(r)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(3mg)，(s)n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(吡啶-2-基)异噁唑-3-甲酰胺(6mg)。lcms：509[m+h]
+
.(化合物154)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.60(s，1h)，8.21(s，1h)，8.05(s，2h)，8.09(s，2h)，7.80(s，1h)，7.73(d，j＝8.33hz，1h)，7.50(d，j＝3.95hz，1h)，6.83(br.s.，1h)，5.94(d，j＝6.58hz，1h)，2.54(s，3h)1.87(d，j＝6.58hz，3h).(化合物155)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.60(s，1h)，8.21(s，1h)，8.05(s，2h)，8.09(s，2h)，7.80(s，1h)，7.73(d，j＝8.33hz，1h)，7.50(d，j＝3.95hz，1h)，6.83(br.s.，1h)，5.94(d，j＝6.58hz，1h)，2.54(s，3h)1.87(d，j＝6.58hz，3h)。
[1020]
实例s89.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物156和157)
[1021][1022]
步骤1：合成嘧啶-4-甲酸乙酯.向搅拌的嘧啶-4-甲酸(500mg)于etoh(30ml)中的溶液中加入浓h2so4(1ml)并使反应混合物在100℃下回流2天。反应混合物浓缩至干并用饱和碳酸氢钠溶液处理至ph 7。将产物用dcm(3
×
150ml)萃取。收集有机层，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，获得产物棕色固体嘧啶-4-甲酸乙酯(450mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.39(s，1h)，9.09(d，j＝4.82hz，1h)，8.04(dd，j＝1.53，5.04hz，1h)，4.39(q，j＝7.31hz，2h)，1.34(t，j＝7.24hz，3h)。
[1023]
步骤2：合成嘧啶-4-甲酰肼.使嘧啶-4-甲酸乙酯(450mg，3.260mmol，1当量)溶于乙醇(20ml)中。向其中加入水合肼(195.6mg，3.913mmol，1.2当量)。使反应混合物回流3小时。反应混合物浓缩至干。将沉淀用己烷湿磨。获得产物嘧啶-4-甲酰肼(327mg，棕色固体)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ10.30(br.s.，1h)，9.28(d，j＝1.32hz，1h)，9.04(d，j＝4.82hz，1h)，7.97(dd，j＝1.32，4.82hz，1h)，4.70(br.s.，2h)
[1024]
步骤3：合成2-氧代基-2-(2-(嘧啶-4-羰基)肼基)乙酸乙酯.在0℃下向搅拌的嘧啶-4-甲酰肼(250mg，1.811mmol 1当量)于dcm中的溶液中加入tea(219.5mg，1.2当量，2.17mmol)。反应混合物保持在0℃下搅拌30分钟。在0℃下加入2-氯-2-氧代基乙酸乙酯(248.1mg，1当量，1.811mmol)。反应混合物保持在0℃下搅拌一小时。反应用lcms监测。反应用冰淬灭。用dcm(2
×
100ml)进行萃取。将所获得的dcm层浓缩，获得粗物质。获得粗物质，用己烷湿磨，获得呈浅黄色固体状的标题产物(310mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.00(br.s.，1h)，9.31-9.44(m，1h)，9.08-9.18(m，1h)，7.99-8.13(m，1h)，4.20-4.39(m，2h)，1.07-1.24(m，3h)。
[1025]
步骤4：合成5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯.使2-氧代基-2-(2-(嘧啶-4-羰基)肼基)乙酸乙酯(200mg，0.843mmol，1当量)溶于二噁烷(4ml)中。向反应混合物加入劳森试剂(1.356gm，3.375mmoles，4当量)。反应混合物保持在1100℃下搅拌24小时。反应用lcms监测。通过用饱和碳酸氢盐溶液(30ml)淬灭进行处理。通过乙醚(3
×
75ml)ml进行萃取。将所获得的有机层浓缩，在减压下浓缩，获得粗物质，通过combi-快速色谱法(etoac/己烷)来纯化，获得呈浅棕色固体状的5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(130mg)。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.55(s，1h)，8.75-8.97(m，2h)，4.48(q，j＝7.02hz，2h)，1.38(t，j＝7.02hz，3h)。
[1026]
步骤5：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.向5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(100mg，0.421mmol，1当量)于甲苯(1ml)中的溶液中加入含1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-胺(136.7mg，0.421mmol，1当量)的甲苯(1ml)。将混合物用三甲基铝(86.60mg，1.26mmol，4当量)逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得悬浮液滤出并接着用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取。有机层浓缩，在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法(etoac/己烷)来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物。lcms：513[m+h]
+
。
[1027]
步骤6：合成(r)和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺甲酰胺的互变异构体(洗脱时间：15.4min和11.4min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。利用分析级液体二氧化碳和hplc级[异丙醇∶乙腈(1∶1)]进行等度程序，总流速：51g/min，共溶剂百分比：15％，获得峰-1(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(20mg)和峰-2(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(18mg)。lcms：513[m+h]
+
.(化合物156)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.69(s，1h)，9.41(s，1h)，9.12(d，j＝5.26hz，1h)，8.36(d，j＝4.82hz，1h)，7.96-8.17(m，2h)，7.83(s，1h)，7.74(d，j＝8.33hz，1h)，5.95(d，j＝6.14hz，1h)，1.88(d，j＝6.58hz，3h)。(化合物157)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.61(s，1h)，9.42(s，1h)，9.12(d，j＝5.26hz，1h)，8.36(d，j＝4.82hz，1h)，7.96-8.17(m，2h)，7.83(s，1h)，7.75(d，j＝8.33hz，1h)，5.95(d，j＝6.14hz，1h)，1.89(d，j＝6.58hz，3h)。
[1028]
实例s90.合成(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺和(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(嘧啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(化合物158和159)
[1029][1030]
步骤1：合成n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-基)-5-(吡啶-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.向5-(吡嗪-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酸乙酯(100mg，0.423mmol，1当量)于甲苯(1ml)中的溶液中加入含1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-3-甲基-1h-吡唑-4-胺(142.79mg，0.423mmol，1当量)的甲苯(1ml)。将混合物用2m三甲基铝的甲苯溶液(59.29mg，1.694mmol，4当量)逐滴处理。反应混合物保持搅拌24小时。反应混合物保持搅拌24小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。将所得悬浮液滤出并接着用乙酸乙酯(2
×
50ml)萃取。有机层浓缩，在减压下浓缩，获得粗物质，其通过快速色谱法(etoac/己烷)来纯化，获得呈游离碱形式的标题化合物。lcms：526[m+h]
+
。1h nmr(500mhz，dmso-d6)δ10.79(s，1h)，8.76(d，j＝4.7hz，1h)，8.35(d，j＝7.9hz，1h)，8.16(s，1h)，8.10
5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺.对映异构体n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(洗脱时间：4.28min和8.03min)通过手性sfc(daicel250
×
20mm，5μm)来分离。利用分析级液体二氧化碳和hplc级甲醇进行等度程序，总流速：56g/min，共溶剂百分比：40％，获得峰-1(r)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(5mg)和峰-2(s)-n-(1-(1-(2，4-双(三氟甲基)苯基)乙基)-1h-吡唑-4-基)-5-(呋喃-2-基)-1，3，4-噻二唑-2-甲酰胺(5mg)。(化合物160)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.58(br.s.，1h)，8.21(s，1h)，8.05(s，1h)，8.09(s，1h)，7.80(s，1h)，7.73(d，j＝8.33hz，1h)，7.50(d，j＝3.07hz，1h)，6.83(br.s.，1h)，5.94(d，j＝6.14hz，1h)，1.87(d，j＝7.02hz，3h)。(化合物161)1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.58(br.s.，1h)，8.21(s，1h)，8.05(s，1h)，8.09(s，1h)，7.80(s，1h)，7.73(d，j＝8.33hz，1h)，7.50(d，j＝3.07hz，1h)，6.83(br.s.，1h)，5.94(d，j＝6.14hz，1h)，1.87(d，j＝7.02hz，3h)。
[1036]
生物实例
[1037]
实例b1.erse atf6-荧光素酶分析
[1038]
人骨肉瘤(u2-os)细胞是从美国菌种保存中心获得(atcc htb-96，atcc manassas，va)并且与生长培养基一起培养，所述生长培养基含有杜氏改良伊格尔培养基(modified eagle
′
s medium，dmem)(目录号：sh30023.02，hyclone)，补充有胎牛血清(fbs)10％(目录号：16000044，gibco)和1％青霉素(penicillin)-链霉素(streptomycin)抗生素混合物(目录号：sv30010，hyclone)。
[1039]
cignal lenti atf6 luc报告体(qiagen#cls-6031l)用于在u2-os细胞中产生稳定细胞系。lenti atf6报告体是复制功能不全的vsv-g假模式化慢病毒颗粒制剂，其在最低(m)cmv启动子和atf6转录反应元件(tre)的串联重复序列的控制下表达萤火虫荧光素酶基因。已经通过实验优化反应元件数目以及反应元件之间的中间序列以最大化信噪比。
[1040]
化合物制备成10mm储备溶液并存储在-80℃下。
[1041]
使u2-os atf6 luc报告细胞解冻3-4天并且在分析之前分开一次。对于初步筛选，将40,000个u2-os atf6 luc细胞以每孔100μl涂铺于用聚-d-赖氨酸(目录号：p2636，sigma)预先涂布的白色96孔板(thermo scientific nunc#136101)中，并且在潮湿腔室中温育24小时。在实验当天，将细胞用50μl含有媒剂(二甲亚砜(dmso))(目录号：d2650，sigma-aldrich)或1μm测试化合物的生长培养基预处理30分钟。在预先温育时间之后，将50μl含有0.2μm毒胡萝卜素(tg)(一种er应力诱导剂)的溶液加入至对应的孔中。这个tg溶液还含有媒剂或1μm测试化合物。每个孔中的dmso的最终浓度保持在0.3％下。将平板在潮湿腔室中温育8小时。
[1042]
最终，在8小时之后，使平板冷却到室温，历时10分钟，然后进行荧光素酶分析。使用荧光素酶分析系统(目录号：e4550，promega)进行荧光素酶反应。简单来说，将每个孔用100μl pbs1x洗涤，并接着将20μl溶解试剂加入至每个孔中。将平板震荡10分钟，然后将50μl荧光素酶分析试剂加入至每个孔，并且在synergy 4微板读数仪中在1s整合时间和110的增量下读取发光。
[1043]
为在各天之间进行比较，使用未受应力的(dmso，100％抑制)和受er应力的(毒胡萝卜素，0％抑制)对照将每个板标准化并计算每种化合物的对er应力诱导的荧光素酶的抑
制百分比。
[1044]
针对化合物1-37和ceapin-a4、ceapin-a7和ceapin-a8，确定在1μm下在atf6-luc细胞报告体中对毒胡萝卜素诱导的er应力的抑制百分比，并在表2中示出。
[1045]
表2-atf6-1uc细胞报告体中对毒胡萝卜素诱导的er应力的抑制
[1046]
[1047]
[1048][1049]
ceapin-a4、ceapin-a7和ceapin-a8是指gallagher等人elife 2016；5：e11878中所述的化合物；对于抑制％：+++是指在1μm测试化合物下＞50％抑制；++是指在1μm测试化合物下25％＜抑制％＜50％；+是指在1μm下＜25％抑制；inh：抑制。对于ic
50
：+++是指ic
50
＜1μm；++是指1μm＜ic
50
＜10μm；+是指ic
50
＞10μm。
[1050]
为评估所选化合物的半最大抑制浓度(ic
50
)，进行剂量反应分析。使用dmso，以30μm开始，对化合物进行连续稀释，直至1nm。如上所述进行分析。化合物1-37以及ceapin-a4、ceapin-a7和ceapin-a8的抑制活性ic50值也在表2中示出。
[1051]
实例b2：口服生物利用率和pk参数
[1052]
在以下媒剂中将测试化合物以1mg/ml配制成给药溶液，用于经口施用：媒剂a，10％二甲基乙酰胺(dmac)、20％丙二醇和40％peg-400；或媒剂b，10％el和10％乙醇(etoh)。
[1053]
从饲养室fundaci
ó
n ciencia&vida chile(智利圣地亚哥(santiago，chile))获得约9-10周龄的balb/c小鼠并维持在具有12/12小时亮/暗时程并任意取用食物和水的温度受控房间中。在到达测试机构后，使动物适应最短4天时间。
[1054]
在研究当天，将小鼠称重，通过使用无毒的永久标记将尾巴标上数目来鉴定，并指定至十个实验组中(每组n＝3)。通过使用馈送管20g(目录号：tp-2038；instech salomon公司)经口管饲，来自所有实验组的每个小鼠接受10mg/kg测试化合物的单个口服剂量。
[1055]
在不同时间点(在给药之后0.083、0.167、0.25、0.5、1、2、4、6、8和24小时)通过co
2-窒息处死实验组，并通过末端心脏穿刺收获血液样品。使用未给药的小鼠收集零时间点的样品。将全血收集至含(k2)edta的微量采血管(目录号：#365974，bectondickinson&co.)中。将血液样品立即在4℃下以9,000g离心5分钟，并接着分离血浆。将血浆样品放至个别标记的冷冻管中并存储于-80℃冷冻机中，直至lc/ms/ms生物分析。
[1056]
利用qtrap 4500三重四极杆质谱仪(applied biosystems sciex)进行血浆样品的生物分析，所述质谱仪呈正离子模式并与ekspert ultra lc100 uplc系统(eksigent)接合。由未处理小鼠血浆，且并行地用小鼠血浆研究样品(60μl)，通过用三体积冰冷的内标溶液(含有20μm茶碱的乙腈)沉淀，制备出校准标准品(0.01至10μm)和qc(0.02μm、0.2μm和2.0μm)。将沉淀的样品以6,100g离心30分钟。离心之后，将每个上清液的等分试样转移至自动进样器板中并用二体积的水性流动相(含0.1％甲酸的水)稀释。将样品注射至反相分析柱(ymc triart c18；2.0
×
50mm；1.9μm；ymc co)上并用含0.1％甲酸的乙腈梯度洗脱。使用analyst软件(v1.6.2，applied biosystems sciex)，通过多反应监测(mrm)实验监测所分析的测试化合物和内标。定量是使用multiquant软件(v2.1，applied biosystems sciex)进行并在线性回归和1/x权重下拟合所得校准曲线。定量下限为1＜llq＜5ng/ml。
[1057]
使用phoenix winnonlin软件(v6.4，certara，princeton，nj)，通过非房室模型分析，以稀少取样模式，从浓度-时间数据计算化合物的口服pk参数，如表3中所示。
[1058]
表3：药物动力学参数
[1059][1060]
ceapin-a7是指gallagher等人elife 2016；5：e11878中所述的化合物；pk：药物动力学；n：数目；cmax：最大浓度；tmax：最大时间；auc：曲线下面积；inf：无限制；extr：外推；vz：分布体积；cl：清除；mrt：平均停留时间；t1/2：半衰期；rsq：用于计算λz的确定系数；f：生物利用率。
[1061]
实例b3：人、大鼠和小鼠中体外微粒体稳定性分析
[1062]
将化合物以1μm的最终浓度与0.5mg/ml人肝微粒体(hlm)(#hmmcpl；thermo)、小鼠肝微粒体(mlm)(#msmcpl；thermo)或大鼠肝微粒体(rlm)(#rtmcpl；thermo)和1mm还原二氢烟酰胺-磷酸腺嘌呤二核苷酸(nadph)(#n1630；sigma)一起在100mm磷酸盐缓冲液(ph 7.4)中在37℃下温育。通过加入含有50ng/ml普萘洛尔(propranolol)作为内标的冷乙腈，使反应在0、5、15和30分钟终止。通过在15,000rpm下离心15分钟来分割反应混合物，并且通过lc-ms/ms(shimadzu nexera uplc，具有ab sciex 4500检测剂)分析所得到的上清液的剩余百分比、半衰期(t
1/2
，min)和无限下的清除率或内在清除率(cl
int
)。维拉帕米盐酸盐(verapamil hydrochloride，#v4369 aldrich)用作所有研究中的阳性对照。
[1063]
计算特定化合物的在反应30分钟之后的剩余分数和体外pk参数，如表4中所示。
[1064]
表4：体外微粒体稳定性分析
[1065][1066]
ceapin-a7是指gallagher等人elife 2016；5：e11878中所述的化合物；对于微粒体稳定性hlm：人肝微粒体；mlm：小鼠肝微粒体；rlm：大鼠肝微粒体；rem.：剩余分数；cl
int
：内在清除率；t
1/2
：半衰期；f。
[1067]
实例b4：动力学溶解性
[1068]
在96孔v形底稀释板(#3363costar)中在dmso中对化合物进行连续稀释，浓度范围为10mm至0.78mm。将1μl化合物从每个孔转移至含有99μl pbs ph-7.4的96孔平底透明板(#655101greiner)中以使得dmso浓度不应超过＞1％。将样品在37℃下温育一小时，接着利用基于激光的微量板式浊度计在625nm下测量光散射。然后通过分段回归计算浓度(μm)。胺碘酮(amiodarone，#a8423 aldrich)用作阳性对照。计算特定化合物的参数，如表5中所示。
[1069]
表5-动力学溶解性
[1070]
化合物编号动力学溶解性(μm)ceapin-a727.712.70实例s5的“对映异构体a”4.68实例s6的“对映异构体a”27.00
98.90119.411237.21435.2199.37222.301141.171231.17992.341012.341042.341362.34932.92972.921213.511004.681104.68767.031039.3715228.1315437.50
[1071]
ceapin-a7是指gallagher等人elife 2016；5：e11878中的所述的化合物。
[1072]
实例b5：血浆稳定性分析
[1073]
将化合物在1μm的最终浓度下与人、大鼠和小鼠纯血浆一起在37℃下温育。通过加入含有普萘洛尔(50ng/ml)作为内标的冷乙腈，使反应在开始后0、1、2、3、4和5小时终止。通过在15,000rpm下离心15分钟来分割反应混合物，并且通过lc-ms/ms(shimadzu nexera uplc，具有ab sciex 4500检测剂)分析所得到的上清液的剩余化合物。普鲁卡因盐酸盐(procaine hydrochloride，#46608 aldrich)用作人血浆的对照，依那普利(enalpril，#e6888 aldrich)用作大鼠血浆的对照，并且丙硫啉(propentheline，#p8891 aldrich)用作小鼠血浆的对照。
[1074]
实例b6：血浆蛋白结合
[1075]
使用平衡渗析测定小鼠和人血浆中化合物的血浆蛋白结合(ppb)。将含有2μm化合物的血浆等分至渗析器插入物(#89809 thermo)的腔室之一中。渗析器插入物含有两个各250μl体积的腔室，由半可渗透膜分隔开。第二腔室填充有磷酸盐缓冲盐水(pbs)ph 7.4。将所述装配件在水浴中在37℃下温育4小时。在温育结束时，使用冷乙腈使血浆和pbs的等分试样沉淀。使样品涡动30分钟，在4℃下在3500rpm下离心20分钟。通过lc/ms/ms(shimadzu nexera uplc，具有ab sciex 4500检测剂)分析上清液。使用以下等式确定％ppb：％ppb＝总药物％-游离药物％。咪康唑(miconazole，#m3512 aldrich)用作阳性对照。
[1076]
实例b7：cyp450抑制
[1077]
评估人肝微粒体(hlm)中测试化合物对七种主要cyp450同种型cyp1a2、cyp2c9、cyp2d6、cyp2b6、cyp2c8、cyp2c19和cyp3a4的cyp抑制。通过将在＜1％dmso中浓度为0.02、0.070、0.21、0.62、1.85、5.56、16.67和50μm的测试化合物与hlm(cyp1a2为0.2mg/ml，和cyp3a4为0.03mg/ml，cyp2c19、cyp2d6和cyp2c9为0.2mg/ml)一起在0.1m磷酸盐缓冲液、1mm nadph和个别同种型的选择性探针底物中在37℃下温育来进行反应。50μm非那西汀(phenacetin)、2μm咪达唑仑(midazolam)、5μm双氯芬酸(diclofenac)、50μm美芬妥英(mephenytoin)、80μm安非他酮(bupropiaon)和5μm右甲吗喃(dextromethorphan)分别用作cyp1a2、cyp3a4、cyp2c9、cyp2c19、cyp2b6和cyp2d6的探针底物。cyp1a1、cyp2d6、cyp2c9、cyp2b6和cyp2c8的温育时间为20分钟；cyp2c19是40分钟；以及cyp 3a4是10分钟。在温育后，用含有内标的乙腈终止反应。将样品离心并通过lc/ms/ms分析上清液的代谢物(1-羟基咪达唑仑(1-hydroxymidazolam，cyp3a4)、4-羟基双氯芬酸(4-hydroxydiclofenac，cyp2c9)、4-羟基美芬妥英(4-hydroxymephenytoin，cyp2c19)和右羟吗喃(cyp2d6)、羟基安非他酮(hydroxybupropion，cyp2b6)、乙酰胺苯酚(acetaminophen，cyp1a2)、脱乙基阿莫地喹(desethylamodiaquine，cyp2c8)的形成。在旁边筛选所有同种型的选择性抑制剂，作为阳性对照。与媒剂对照(100％)相比代谢物形成的减少用于估计抑制％，并且从浓度-反应曲线估计ic
50
。计算特定化合物的参数，如表6中所示。
[1078]
表6：cyp抑制
[1079][1080][1081]
ceapin-a7足指gallagher等人elife 2016；5：e11878甲所还的化合物。
[1082]
实例b8：细胞增殖分析
[1083]
将胰腺癌和结肠癌细胞系维持在含有补充有10％fbs和1％青霉素-链霉素抗生素混合物的dmem的生长培养基中。从sigma-aldrich获得化学治疗剂奥沙利铂、5-氟尿嘧啶和吉西他滨。
[1084]
通过和mtt分析测量细胞增殖。简单来说，将2,000个细胞接种在96
孔板中过夜。将细胞用单一化学治疗剂奥沙利铂、5-氟尿嘧啶和吉西他滨处理或用测试化合物与奥沙利铂、5-氟尿嘧啶或吉西他滨的组合处理。在处理后72小时，使用cell-titer glo(ctg)分析，根据制造商的说明书(目录号：g7573，promega)测定基于发光的细胞活力。通过相对于未处理的对照孔将发光信号标准化来确定细胞活力/增殖百分比。所有处理均一式三份地进行并且报告为活力％
±
sd和增殖％
±
sd。在graphpad prism 6.07版中产生剂量反应曲线以计算半最大生长抑制浓度(gi
50
)。
[1085]
实例b9：癌症(gdsc)细胞系筛选中药物敏感性的基因组学
[1086]
在处理后72小时使用一组来自不同恶性病的癌细胞系，通过细胞活力分析来测试所选化合物的作用，如yang等人《核酸研究(nucleic acids research)》，2013，41(d1)：d955-d961中所述。在graphpad prism 6.07版中使用剂量反应曲线计算ic
50
。
[1087]
实例b10：体外管形成分析
[1088]
将huvec细胞用100ng/ml veg预处理2小时，并借助与不同浓度的测试化合物一起温育24小时。不具有vegf或用媒剂加vegf处理的细胞用作对照。将细胞脱离并使用体外血管生成分析试剂盒(merck)，根据制造商说明书，接种(介于5
×
10
3-1
×
104之间)于覆盖有ec-matrix
tm
的96孔板中，并培养过夜。通过光学显微镜评估管形成。评估图案识别并且数值与血管生成进展程度(表7)相关，每孔检查数个任意的视场(3-10)并将所述值平均化。
[1089]
表7：血管生成进展程度的评估
[1090]
图案值单独的细胞，很好地分开0细胞开始迁移并自身对准1毛细管可见。未萌芽。2新毛细管的萌芽可见。3开始形成闭合多边形。4出现复杂的网状结构5
[1091]
评估在设定时间量之后形成的毛细管分枝点的计数(分枝点计数)(端点分析)。还确定新形成的毛细管的长度。计数每孔数个任意的视场(3-10)中的分枝点并将所述值平均化。在每孔数个任意的视场(3-10)中测量总毛细管长度并将所述值平均化。另外，通过用马松三色法(masson
′
s trichrome)将管染色来目测细胞管。
[1092]
实例b11：体内panc-1肿瘤模型
[1093]
从taconic(hudson，ny)购买六至七周龄的雌性无胸腺nu/nu小鼠，并且在开始体内研究之前，使小鼠在到达动物设施后适应1周。为了确保小鼠中的高肿瘤获取，使所有细胞以指数生长速率生长。经由胰蛋白酶-edta收集panc-1细胞，并通过台盼蓝拒染(trypan blue exclusion)来测定活力。接着，将细胞悬浮液的浓度调整至所需密度以进行注射。将一百万个细胞(含有基质胶加panc-1细胞，体积＝100μl)皮下注射至6-7周龄的无胸腺balb/c裸小鼠中。持续监测注射部位以确定肿瘤的建立。使用数字测径规测量肿瘤。当肿瘤体积达到100-150cm3的平均值时，将小鼠随机分配至单一药剂化学治疗剂对照组、单一药剂化合物组或组合组。通过经口管饲，递送在10％el和10％乙醇溶液中的化合物。通过腹膜内注射来施用化学治疗剂。使用数字测径规，一周测量肿瘤的长度(l)和宽度
(w)1-2次，并且使用下式计算肿瘤体积：0.5
×
l
×
w2。还将小鼠一周称重一次以监测药物毒性的迹象。在最后剂量之后，对小鼠实施安乐死，并通过心脏穿刺收集全血样品，并且切除组织以供进一步分析。去除肿瘤组织并称重。将所关注的所有其它组织快速冷冻，并浸入rnalater中或放在10％nbf中以保持组织结构。
[1094]
实例b12：基质胶塞血管生成分析
[1095]
使用四至六周龄的雄性c57bl/6小鼠，利用基质胶塞分析(birdsey等人，《血液(blood)》，2008，111：3498-3506)分析血管生成。将补充有vegf(250ng/ml)和肝素(50u/ml)的冷基质胶(bd)与不同浓度的测试化合物混合。在每个实验组中，使用异氟醚将五个小鼠轻微麻醉，并沿着腹膜中线将含有以上提及的加入物的冷基质胶(0.5ml)注射至腹部皮下组织中。在7天之后，处死小鼠，并且去除基质胶塞并固定在4％三聚甲醛中，包埋于石蜡中，切片，并进行苏木精和伊红(h&e)染色。使用cd31染色定性鉴定组织学组织切片中的内皮细胞。
[1096]
实例b13：异种移植物研究
[1097]
如所描述(schewe，d.m.等人，《美国国家科学院院刊》，2008，105(30)：10519-10524)使细胞在绒毛尿囊膜(cam)上生长。对于裸小鼠实验，在2至3月龄的雌性balb/c裸小鼠的肩胛间区域中皮下(s.c.)接种0.5
×
106个细胞。每日通过使用测径规测量肿瘤生长。
[1098]
实例b14：mm细胞系中er蛋白内稳态网络的调节
[1099]
因为mm细胞类似于其正常的对应部分，会产生大量的经过er处理的蛋白质，所以已经提出，这些细胞可能对蛋白质降解的扰动敏感，其将激活upr。upr诱导的标志之一是er分子伴侣蛋白的转录与翻译提高。这些基因由upr转录因子xbp1和atf6诱导。虽然xbp1剪接和其所引起的激活已经显示在经过pi处理的mm细胞中受到抑制，但已经证明2种xbp1目标基因产物grp78和grp94的高组成性表达未因pi处理而减少，并且xbp1依赖性upr目标基因erdj4通常被pi诱导的观测结果表明了upr在经过pi处理的mm细胞中仍然具有功能。因为xbp1和atf6都可以结合于upr目标基因的启动子中的er应力反应元件，所以提出atf6可弥补经过pi处理的mm细胞中xbp1活性的降低。与此相一致的是，已经证明在xbp1-/-b细胞中grp78和grp94的诱导只是略微受损，并且grp94的表达需要atf6或xbp1中的任一个，而不是两个。
[1100]
为了确定本发明的示例性化合物是否能够调节er蛋白内稳态网络，在mm细胞系中在缺乏或存在tg诱导的er应力下研究包括grp78/bip、grp94等atf6依赖性分子组分。
[1101]
从leibniz-institut dsmz(德国)获得u-266、opm-2和jjn-3细胞。将u-266和opm-2细胞系在补充有10％(v/v)fbs(目录号：16000044，gibco)和1％青霉素-链霉素抗生素混合物的rpmi-1640培养基中培养。将jjn-3细胞系在补充有10％(v/v)fbs和1％青霉素-链霉素抗生素混合物的45％(v/v)dme/f-12培养基和45％(v/v)伊思考夫改良杜尔贝可培养基(iscove
′
s modified dulbecco
′
s medium，imdm)(目录号：12440046，thermo fisher scientific)中培养。
[1102]
在实验当天，将u-266、opm-2和jjn-3细胞(每孔1.5
×
106)于750μl生长培养基中接种在6孔板中并通过加入含有媒剂(二甲亚砜(dmso))(目录号：d2650，sigma-aldrich)或10μm本发明的示例性化合物的750μl生长培养基预处理30分钟。在预先温育时间之后，将含有0.2μm tg的500μl生长培养基加入至对应的孔中。此tg溶液也含有媒剂或10μm的测试化
合物。每个孔中的dmso的最终浓度保持在0.3％下。将平板在潮湿腔室中温育16小时。在温育之后，使用29g注射器(目录号：326770，bd ultra-fine)将细胞在含有蛋白酶(目录号：4693159001，roche)和磷酸酶抑制剂(目录号：4906837001，roche)的1x细胞溶解缓冲液(目录号：9803s，cell signaling technology)中机械溶解。通过在水浴中进行声波处理来破坏细胞溶解物，并接着通过在13,500rpm下离心15分钟来清除。收获含有蛋白质样品的上清液并接着使用bca蛋白质分析试剂盒(目录号：23225，thermofisher scientific)定量。将等量的总蛋白(15μg)上样并由sds-page分开，电转移至pvdf膜(目录号：162-0177，bio-rad)并在3％bsa溶液中封闭1小时。利用以下抗体探测膜：bip(c50812)(目录号：3177s，cell signaling technology)、herpud1(目录号：26730s，cell signaling technology)、hyou1(目录号：13452s，cell signaling technology)、p58
ipk
(目录号：2940s，cell signaling technology)、erdj3(目录号：sc-271240，santa cruz biotechnology)、grp94(目录号：pa5-27866，thermofisher scientific、β-肌动蛋白(目录号：a5441，sigma-aldrich)。使用适当辣根过氧化酶(hrp)缀合的二抗兔igg hpr缀合的抗体(目录号：611-1322，rockland immunochemicals公司)或小鼠igg hrp缀合的抗体(目录号：610-1302，rockland immunochemicals公司)检测一抗。bip、erdj3、herpud1、hyou1和p58
ipk
抗体是以1∶1,000稀释使用，而grp94抗体是以1∶2,000稀释使用，用于在4℃下杂交过夜。β-肌动蛋白是以1∶10,000使用，用于在4℃下杂交24小时。使用1∶10,000稀释，在室温下进行与辣根过氧化酶(hrp)缀合的二抗的温育2小时。最终，使用pierce ecl蛋白质印迹底物(目录号：32106，thermo fisher scientific)在制造商建议的条件下显示印迹。使用chemidoc-mp成像系统(bio-rad)捕集图像并用image lab软件(bio-rad)分析。
[1103]
图1中示出了在100和1000nm的本发明的示例性化合物与val-boropro之间比较在体外抑制rhfap对rhfgf21的蛋白水解加工的功效。如免疫印迹成像和光密度测定法分析所示，在本发明的一种示例性化合物存在下，即使是在低浓度下，也保留rhfgf21的完整形式。
[1104]
实例b15：mm细胞系中的细胞毒性分析
[1105]
研究在缺乏er应力下由本发明的示例性化合物介导的er蛋白内稳态网络的重塑对mm细胞系的细胞活力的影响。
[1106]
u-266、opm-2和jjn-3细胞如上所述进行培养。在实验当天，将u-266(2
×
104个细胞/孔)、opm-2(1
×
104个细胞/孔)、jjn3(4
×
103个细胞/孔)细胞于含有媒剂(dmso)或1、3或10μm本发明化合物的100μl生长培养基中接种在白色96孔板中。在处理后72小时后，使用cell-titer glo(ctg)分析，根据制造商的说明书(目录号：g7573，promega)测定基于发光的细胞活力。通过相对于来自经过媒剂处理的孔的平均值(假定为活力最大值(100％))将发光信号标准化，计算细胞活力百分比。在每个实验中，所有处理均一式三份地进行并报告为活力
±
标准偏差(sd)的抑制％。图2所示的曲线图表示两个独立实验的平均值。
[1107]
实例b16：多发性骨髓瘤模型中的皮下异种移植物生长和功效研究
[1108]
对于肿瘤生长研究，将细胞系(包括rpmi-8226、h929、kms-11、u-266、opm-2和jjn-3)皮下注射在雄性nod scid小鼠的右侧腰窝中。监测肿瘤，直至其达到大约100至150mm3的平均肿瘤体积，并接着随机化至以下各组之一：(i)给予媒剂的对照组；(ii)经口给予的本发明的示例性化合物；(iii)硼替佐米(0.75mg/kg，总共100μl，静脉内，每周两次)或来那度胺(50mg/kg，总共100μl，腹膜内，每天一次，连续5天)；和(iv)示例性化合物与硼替佐米或
来那度胺组合。每周测量肿瘤大小和体重两次。使用数字测径规在二维(长度和宽度)上手动测量皮下肿瘤体积，并使用excel 11.2版(microsoft)或prism 6(graphpad software公司)分析。通过下式计算肿瘤体积：
[1109]
肿瘤大小(mm3)＝(较长测量结果
×
较短测量结果2)
×
0.5
[1110]
还使用天平测量动物体重。使用下式计算重量变化百分比：
[1111]
组的重量变化百分比＝[(新重量-初始重量)/初始重量]
×
100
[1112]
对于直系转移异种移植物模型，经由未被辐照的8周龄nod/scid/il2rγ-/-小鼠的尾静脉静脉内注射mm细胞系(rpmi-8226、h929、kms-11、u-266、opm-2和jjn-3)。在用200μl 25mg ml-1 d-荧光素(invitrogen)进行腹膜内荧光素注射之后，在异氟醚麻醉5分钟下每周将动物成像一次，并在光子成像器(biospace laboratory)上成像。在图像采集期间，动物继续接受来自鼻锥递送系统的麻醉，同时其体温在恒温控制平台上维持。计算每分钟每cm2观测面积的光子数并使用m3 vision软件(biospace laboratory)比较。在6周之后，小鼠被分至以下处理组：(i)给予媒剂的对照组；(ii)经口给予的本发明的示例性化合物；(iii)硼替佐米(0.75mg/kg，总共100μl，静脉内，每周两次)或来那度胺(50mg/kg，总共100μl，腹膜内，每天一次，连续5天)。在14天之后，通过颈椎脱臼法处死小鼠，并收获骨，以使用kodak体内fx系统(carestream health molecular imaging，new haven，connecticut)和carestream分子成像(mi)软件进行荧光成像。激发和发射波长分别固定在550nm和600nm下。使用opensource软件图像j(http：//rsbweb.nih.gov/ij/)将荧光图像与x射线图像共同登记。
[1113]
通篇的所有参考文献，如出版物、专利、专利申请和公布的专利申请，都以全文引用的方式并入本文中。
[1114]
尽管出于清楚理解的目的通过说明和实例相当详细地描述了前述发明，但是对于本领域技术人员来说显而易见的是，可以进行某些较小的变化和修改。因此，不应将描述和实例理解为限制本发明的范围。