酚糖酰基转移酶基因BtPMaT1、及其特异性dsRNA在烟粉虱防控中的应用的制作方法

文档序号:22175920发布日期:2020-09-11 21:30阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种烟粉虱酚糖酰基转移酶蛋白,其特征在于,该蛋白的氨基酸序列如seqidno.2所示。

2.根据权利要求1所述的烟粉虱酚糖酰基转移酶蛋白的编码基因。

3.根据权利要求2所述的烟粉虱酚糖酰基转移酶蛋白的编码基因,其特征在于,其核苷酸序列如seqidno.1所示。

4.一种烟粉虱酚糖酰基转移酶的dsrna靶向基因片段,其核苷酸序列如seqidno.3所示。

5.含有如权利要求2或3所示的编码基因的表达盒、表达载体、重组细胞系。

6.一种靶向如权利要求2或3所述的烟粉虱酚糖酰基转移酶蛋白的编码基因的dsrna。

7.如权利要求6所述的dsrna,其特征在于:其靶向位置是所述编码基因中的如seqidno.3所示的核苷酸序列代表的片段,优选所述dsrna与seqidno.3所示的核苷酸序列具有互补性。

8.如权利要求6或7所述的dsrna,其特征在于:它是由含有23-bp的t7启动子的特异性引物扩增得到的pcr产物在纯化后经体外反转录合成的。

9.一种制备防治烟粉虱的转基因植物的方法,其特征在于,在所述植物中导入含有如权利要求6、7或8所述的dsrna的表达载体,所述植物优选为单子叶,或双子叶植物,优选为农作物,更优选为番茄、烟草、棉花、木薯、黄瓜等。

10.根据权利要求6、7或8所述的dsrna在防治烟粉虱中的应用。


技术总结
本发明公开了烟粉虱酚糖酰基转移酶蛋白(蛋白序列如SEQ ID NO.2所示)和其编码基因BtPMaT1(核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示),以及其dsRNA的应用,dsRNA可特异性沉默BtPMaT1基因使烟粉虱对酚糖苷类植物次生代谢产物更加敏感,同时,转基因植物表达dsRNA能够特异性沉默烟粉虱BtPMaT1基因,并导致烟粉虱的死亡。本发明还公开了BtPMaT1基因片段,用于dsRNA的合成和转基因植物表达载体构建,该dsRNA的摄入能够使酚类物质对烟粉虱成虫致死作用增强,取食表达dsBtPMaT1的转基因植物能够导致烟粉虱成虫的死亡。本发明为RNA干扰和转基因的方式防治田间烟粉虱提供了新的靶标,具有良好的应用前景。

技术研发人员:张友军;夏吉星;郭兆将;杨泽众;吴青君;王少丽;谢文
受保护的技术使用者:中国农业科学院蔬菜花卉研究所
技术研发日:2020.04.13
技术公布日:2020.09.11
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