本发明涉及生物环境技术领域，尤其涉及一种三联复合除臭剂的制备及其应用方法。
背景技术：
当今，因人类活动影响，城市河道及相对开放的水域氨氮、硫化物指标高居不下，黑臭问题已严重影响城市环境。由此引发的生态环境问题已经对人类居家环境和城市形象。黑臭气体主要来源为氨气、硫化氢、甲烷、硫醚、有机酸等物质的挥发。这些气体不仅给居民生活带来诸多不便，而且对人体的健康产生重要影响。
现有除臭技术主要采取包含化学法、物理法、生物法。化学法除臭效率最高，但实际投入成本最高，其产出二次污染；物理法多为掩盖，不能从根本解决问题。微生物法是从根源上通过微生物代谢对臭味气体进行分解转化，从根本上达到脱臭效果。
复合微生物菌剂控制方案的优点在于实施简单，而且可去除多种黑臭物质。其实施的难点在如何寻找到高效脱臭菌株，保持其高效且适应条件广泛的菌株，以及如何复配菌种。
技术实现要素：
本发明目的在于提供一种三联复合除臭剂的制备及其应用方法，以解决筛选高活性可降低臭味的菌株及其复配，以及上述菌株在实践中的应用问题。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
设计一种三联复合除臭剂的制备方法，所述三联复合除臭剂以排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳酸菌组成，制备的具体步骤如下：
步骤1、菌株提取：从黑臭段水体分离得到排硫硫杆菌，从河底淤泥分离得到球形红螺菌，从河底淤泥分离得到植物乳杆菌，并均将上述菌株保存于lb固体平板中，保藏于4℃冰箱中；
步骤2、菌株活化：用接种环挑取步骤1中的三种菌株分别接种到液体培养基中，30℃，120rpm，摇床培养18-20h后，4℃保存待用；
步骤3、菌株一级发酵：将步骤2中备用的三种菌依次采用如下方式进行一级发酵培养，具体如下：
球形红螺菌培养基：
酵母粉2g/l，
醋酸钠2.5g/l，
磷酸氢二铵4g/l，
氯化钠4g/l，
磷酸氢二钾0.5g/l，
硫酸镁0.25g/l，培养基121℃灭菌20分钟；
排硫硫杆菌培养基：
氯化钠10g/l，
蛋白胨10g/l，
酵母提取物1g/l，
纯化水1l，ph7.5；
植物乳杆菌培养基：
葡萄糖60g/l，
蛋白胨30g/l，
酵母粉10g/l，
柠檬酸铵3g/l，
无水乙酸钠3g/l，
磷酸氢二钾3g/l，
硫酸锰0.2g/l，
硫酸镁0.2g/l，
t-800.1％，培养温度为37℃，培养过程稳定ph：5.5，培养时间为18h，接种量为3％；
步骤4、菌株二级发酵：将步骤3中得到的三种菌种复合后接种于盛有液体培养基的发酵罐中进行二级发酵培养，接种量为5％，30℃培养5天，使其终浓度为108-109cfu/ml,即可得到液态的三联复合除臭剂。
更进一步的，在步骤4中，三种菌种排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳酸菌比例为4：3：3。
本发明还提供了一种三联复合除臭剂的应用方法，以喷洒的方式向待除臭治理区域喷洒所述三联复合除臭剂。
本发明提出的一种三联复合除臭剂的制备及其应用方法，有益效果在于：
排硫硫杆菌在自然界广泛存在，对人体无害，不污染环境，存活率高。其可分解和降低水体中硫化物含量，具有除臭作用。
球形红螺菌是一种光合细菌，它与很多益生菌一样均能分解水体有机物、控制水体氮含量、硫化物含量，起到净化水质的作用，并且无污染、高效率，是比较理想的净化水质的生物制剂。目的是为了用最低的投资成本来达到最好的净化效果。
本发明是从生物互生共生的角度出发，将排硫硫杆菌、乳酸菌、光合细菌有机地结合，硫化细菌、乳酸菌确保养殖水体硫化物、氨氮水平的迅速降低，光合细菌的降亚硝酸盐作用能确保水体亚硝酸盐浓度的稳定降低，消除芽孢杆菌可能引起的亚硝酸盐含量反弹现象，充分发挥微生物的协同作用，弥补单一菌种的不足，快速、高效、不反弹地降低养殖水体中氨氮及亚硝酸盐氮浓度，维护养殖水体环境的自我修复能力。
同时植物乳酸菌具有较好的分泌蛋白酶和淀粉酶的能力，光合菌可以促进水体动物的生长，可有效降低水体硝酸盐和亚硝酸盐水平。
所使用菌种均经过特定环境条件的驯化筛选得到，能有效降低黑臭河、及垃圾渗滤液中臭味气体的产生。
具体实施方式
下面结合具体实施例来对本发明做进一步说明。
实施例1
一种三联复合除臭剂的制备方法，三联复合除臭剂以排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳酸菌组成，制备的具体步骤如下：
步骤1、分别由本实验室从南京市六合区滁河黑臭段水体分离得到排硫硫杆菌，从南京市城市景观河河底淤泥分离得到球形红螺菌和植物乳杆菌，并均将上述菌株保存于lb固体平板中，保藏于4℃冰箱中；
步骤2、用接种环挑取步骤1中的三种菌株分别接种到液体培养基中，30℃，120rpm，摇床培养18h后，4℃保存待用。
步骤3、菌株一级发酵：将步骤2中备用的三种菌依次采用如下方式进行一级发酵培养，具体如下：
球形红螺菌培养基：酵母粉2g/l，醋酸钠2.5g/l，磷酸氢二铵4g/l，氯化钠4g/l，磷酸氢二钾0.5g/l，硫酸镁0.25g/l，培养基121℃灭菌20分钟；
排硫硫杆菌培养基：氯化钠10g/l，蛋白胨10g/l，酵母提取物1g/l，纯化水1l，ph7.5；
植物乳杆菌培养基：葡萄糖60g/l，蛋白胨30g/l，酵母粉10g/l，柠檬酸铵3g/l，无水乙酸钠3g/l，磷酸氢二钾3g/l，硫酸锰0.2g/l，硫酸镁0.2g/l，t-800.1％，培养温度为37℃，培养过程稳定ph：5.5，培养时间为18h，接种量为3％；
步骤4、将步骤3中得到的排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳酸菌按比例为4：3：3复合接种于盛有液体培养基的发酵罐中进行二级发酵培养，接种量为5％，30℃培养5天，使其终浓度为108cfu/ml,即可得到液态的三联复合除臭剂。
实施例2
一种三联复合除臭剂的制备方法，三联复合除臭剂以排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳酸菌组成，制备的具体步骤如下：
步骤1、分别由本实验室从南京市六合区滁河黑臭段水体分离得到排硫硫杆菌，从南京市城市景观河河底淤泥分离得到球形红螺菌和植物乳杆菌，并均将上述菌株保存于lb固体平板中，保藏于4℃冰箱中；
步骤2、用接种环挑取步骤1中的三种菌株分别接种到液体培养基中，30℃，120rpm，摇床培养20h后，4℃保存待用。
步骤3、菌株一级发酵：将步骤2中备用的三种菌依次采用如下方式进行一级发酵培养，具体如下：
球形红螺菌培养基：酵母粉2g/l，醋酸钠2.5g/l，磷酸氢二铵4g/l，氯化钠4g/l，磷酸氢二钾0.5g/l，硫酸镁0.25g/l，培养基121℃灭菌20分钟；
排硫硫杆菌培养基：氯化钠10g/l，蛋白胨10g/l，酵母提取物1g/l，纯化水1l，ph7.5；
植物乳杆菌培养基：葡萄糖60g/l，蛋白胨30g/l，酵母粉10g/l，柠檬酸铵3g/l，无水乙酸钠3g/l，磷酸氢二钾3g/l，硫酸锰0.2g/l，硫酸镁0.2g/l，t-800.1％，培养温度为37℃，培养过程稳定ph：5.5，培养时间为18h，接种量为3％；
步骤4、将步骤3中得到的排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳酸菌按比例为4：3：3复合接种于盛有液体培养基的发酵罐中进行二级发酵培养，接种量为5％，30℃培养5天，使其终浓度为109cfu/ml,即可得到液态的三联复合除臭剂。
实施例3
本发明还提供了一种三联复合除臭剂的应用方法，通过实验用于考察三联菌剂对臭味的去除效果。
在垃圾处理场内进行现场试验，温度20-30℃，在实验区中心及周边设5个采样点，按照1平方米喷洒150ml菌剂，喷洒后6h、12h、48h检测氨气和硫化氢的含量及降解率(取均值)，同时设置空白对照组，以考察除臭效果。
三联复合除臭剂降解效果测定：
在实验前期，实验组氨气降解速度较为缓慢，两天后出现快速降解，4天后降解率达到79％。其中对硫化氢的降解效果较为突出，48h后降解率达到88％。且现场气味从感官上得以较好改善。而对照组未出现明显变化。
结果表明，当排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳杆菌按照比例为4：3：3，随着时间的延长，氨气、硫化氢的残留浓度显著下降。
实施例4
本发明还提供了一种三联复合除臭剂的应用方法，通过实验用于考察三联除臭菌剂对黑臭河水体治理效果。
在某一黑臭河内进行现场试验，温度25℃，选取某一段黑臭较为突出的河段，按照1平方米喷洒100ml菌剂的使用方案进行喷洒，喷洒后12h、48h、72h检测氨氮和硫化氢的含量及降解率(取均值)，同时设置空白对照组，以考察除臭效果。期间每24h补投一次除臭剂。
三联复合除臭剂降解效果测定：
在实验前期，实验组氨氮降解速度较为缓慢，两天后出现快速降解，3天后降解率达到73％。其中对硫化氢的降解效果，48h后降解率达到92.5％。
结果表明，当排硫硫杆菌、球形红螺菌、植物乳杆菌按照比例为4：3：3，随着时间的延长，氨氮、硫化氢的残留浓度显著下降。
证明能有效降低黑臭河、及垃圾渗滤液中臭味气体的产生。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。