定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系中培养神经元细胞的基础培养基的制作方法

文档序号:22587030发布日期:2020-10-20 17:55阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种定向诱导hipsc分化为神经细胞体系中培养神经元细胞的基础培养基,其特征在于,所述的基础培养基为添加有:15-30ng/mlbfgf、15-30ng/mlegf、1-3%b27添加剂、8-12μm佛司可林和0.1-0.3mm抗坏血酸的neurobasal培养基,所述百分比为体积百分比。

2.如权利要求1所述的基础培养基,其特征在于,所述基础培养基还包括0.5-1.5%n2添加剂和0.5-1.5%胎牛血清,所述百分比为体积百分比。

3.如权利要求2所述的基础培养基,其特征在于,所述的基础培养基为添加有20ng/mlbfgf、20ng/mlegf、2%b27添加剂、1%n2添加剂、1%胎牛血清、10μm佛司可林和0.2mm抗坏血酸的neurobasal培养基,所述百分比为体积百分比。


技术总结
本发明公开了一种定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系中培养神经元细胞的基础培养基。本发明方法包括分阶段培养所述hiPSC诱导其神经分化,所述阶段包括:阶段a.共培养所述hiPSC与骨髓基质细胞HS5于诱导培养基;阶段b.用HS5条件培养基连续培养所述hiPSC;阶段c.用培养神经元细胞的基础培养基继续培养所述hiPSC。本发明的方法诱导人类hiPSC细胞定向分化为神经系统细胞,同时抑制非神经系统细胞的生成,从而获得成熟、广谱的神经细胞群。该神经细胞群不仅经过体外验证为具有电冲动发放的成熟神经元,而且这类神经细胞群在小鼠体内实验中也被证实,具有有效的治疗神经系统疾病(如脑卒中、脑损伤)的作用。

技术研发人员:杨涛;隋昳
受保护的技术使用者:杨涛
技术研发日:2017.07.28
技术公布日:2020.10.20
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