技术特征：
1.一种工程化的mrna，所述工程化的mrna包含：第一核酸序列，所述第一核酸序列包含rps27a 5
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非翻译区(5
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utr)序列或工程化的5
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非翻译区(5
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utr)序列；第二核酸序列，所述第二核酸序列包含异源核酸序列；和第三核酸序列，所述第三核酸序列包含rps27a 3
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非翻译区(3
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utr)序列。2.如权利要求1所述的工程化的mrna，其中所述rps27a 5
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utr序列或所述工程化的5
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utr序列选自包括以下的组：seq id no：1、seq id no：2、seq id no：3、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：6、seq id no：7、seq id no：8、seq id no：9、seq id no：10、seq id no：11、seq id no：12、seq id no：13、seq id no：14、seq id no：15、seq id no：16、seq id no：17、seq id no：18、seq id no：19、seq id no：20、seq id no：21、seq id no：22、seq id no：23、seq id no：81、seq id no：82、seq id no：83、seq id no：84、seq id no：85、或seq id no：86。3.如权利要求1或2所述的工程化的mrna，其中所述异源核酸序列编码靶蛋白。4.如权利要求3所述的工程化的mrna，其中所述靶蛋白包括荧光蛋白。5.如权利要求4所述的工程化的mrna，其中所述荧光蛋白包括gfp或mcherry。6.如权利要求3所述的工程化的mrna，其中所述靶蛋白包括病毒蛋白。7.如权利要求6所述的工程化的mrna，其中所述病毒蛋白是covid-19蛋白。8.如权利要求3所述的工程化的mrna，其中所述靶蛋白包含共刺激分子。9.如权利要求8所述的工程化的mrna，其中所述共刺激分子选自icos、cd28、cd27、hvem、light、cd40l、4-1bb、ox40、dr3、gitr、cd30、slam、cd2、cd226、半乳凝素9、tim1、lfa1、b7-h2、b7-1、b7-2、cd70、light、hvem、cd40、4-1bbl、ox40l、tl1a、gitrl、cd30l、slam、cd48、cd58、cd155、cd112、cd80、cd86、icosl、tim3、tim4、icam1或lfa3。10.如权利要求1至9中任一项所述的工程化的mrna，其中所述rps27a 3
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utr序列选自包括以下的组：seq id no：24、seq id no：25、seq id no：26、seq id no：87、seq id no：89、或seq id no：91。11.如权利要求1至10中任一项所述的工程化的mrna，所述工程化的mrna包括选自包括以下的组的rna序列：seq id no：27、seq id no：28、seq id no：29、seq id no：30、seq id no：31、seq id no：32、seq id no：33、seq id no：34、seq id no：35、seq id no：36、seq id no：37、seq id no：38、seq id no：39、或seq id no：40。12.如权利要求1至10中任一项所述的工程化的mrna，所述工程化的mrna包括选自包括以下的组的rna序列：seq id no：93、seq id no：94、seq id no：95、seq id no：96、或seq id no：97。13.如权利要求1至12中任一项所述的工程化的mrna，其中所述工程化的mrna包含至少一种经化学修饰的核苷酸。14.如权利要求13所述的工程化的mrna，其中所述至少一种经化学修饰的核苷酸是经化学修饰的核碱基。15.如权利要求14所述的工程化的mrna，其中所述经化学修饰的核碱基是假尿苷。16.一种载体，所述载体包含编码如权利要求1至15中任一项所述的工程化的mrna的核酸。
17.一种细胞，所述细胞包含如权利要求16所述的载体。18.一种增加蛋白质表达的方法，所述方法包括以下步骤：将工程化的mrna导入细胞中，所述工程化的mrna包含：第一核酸序列，所述第一核酸序列包含rps27a 5
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utr序列或工程化的5
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非翻译区(5
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utr)序列；第二核酸序列，所述第二核酸序列包含异源核酸序列；和第三核酸序列，所述第三核酸序列包含rps27a 3
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utr序列。19.如权利要求18所述的方法，其中所述rps27a 5
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utr序列或所述工程化的5
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utr序列选自包括以下的组：seq id no：1、seq id no：2、seq id no：3、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：6、seq id no：7、seq id no：8、seq id no：9、seq id no：10、seq id no：11、seq id no：12、seq id no：13、seq id no：14、seq id no：15、seq id no：16、seq id no：17、seq id no：18、seq id no：19、seq id no：20、seq id no：21、seq id no：22、seq id no：23、seq id no：81、seq id no：82、seq id no：83、seq id no：84、seq id no：85、或seq id no：86。20.如权利要求18或19所述的方法，其中所述异源核酸序列编码靶蛋白。21.如权利要求20所述的方法，其中所述靶蛋白包括荧光蛋白。22.如权利要求21所述的方法，其中所述荧光蛋白包括gfp或mcherry。23.如权利要求20所述的方法，其中所述靶蛋白包括病毒蛋白。24.如权利要求23所述的方法，其中所述病毒蛋白是covid-19蛋白。25.如权利要求20所述的方法，其中所述靶蛋白包含共刺激分子。26.如权利要求25所述的方法，其中所述共刺激分子选自icos、cd28、cd27、hvem、light、cd40l、4-1bb、ox40、dr3、gitr、cd30、slam、cd2、cd226、半乳凝素9、tim1、lfa1、b7-h2、b7-1、b7-2、cd70、light、hvem、cd40、4-1bbl、ox40l、tl1a、gitrl、cd30l、slam、cd48、cd58、cd155、cd112、cd80、cd86、icosl、tim3、tim4、icam1或lfa3。27.如权利要求18至26中任一项所述的方法，其中所述rps27a 3
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utr序列选自包括以下的组：seq id no：24、seq id no：25、seq id no：26、seq id no：87、seq id no：89、或seq id no：91。28.如权利要求18至27中任一项所述的方法，其中所述工程化的mrna包括选自包括以下的组的rna序列：seq id no：27、seq id no：28、seq id no：29、seq id no：30、seq id no：31、seq id no：32、seq id no：33、seq id no：34、seq id no：35、seq id no：36、seq id no：37、seq id no：38、seq id no：39、或seq id no：40。29.如权利要求18至27中任一项所述的方法，其中所述工程化的mrna包括选自包括以下的组的rna序列：seq id no：93、seq id no：94、seq id no：95、seq id no：96、或seq id no：97。30.如权利要求18至29中任一项所述的方法，其中所述工程化的mrna包含至少一种经化学修饰的核苷酸。31.如权利要求30所述的方法，其中所述至少一种经化学修饰的核苷酸是经化学修饰的核碱基。32.如权利要求31所述的方法，其中所述经化学修饰的核碱基是假尿苷。
技术总结
本公开涉及一系列工程化的mRNA序列及使用其来改善蛋白质表达的方法。用其来改善蛋白质表达的方法。用其来改善蛋白质表达的方法。
技术研发人员：董一洲 曾春曦 赵伟煜
受保护的技术使用者：俄亥俄州国家创新基金会
技术研发日：2020.03.25
技术公布日：2022/3/18