用于控制肠道沙门氏菌的细菌素的制作方法

文档序号:29852948发布日期:2022-04-30 08:25阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种蛋白,其包含至少一个以下氨基酸序列区段:(a-vii)来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基195至319的区段,(a-viii)来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基195至319的区段,(a-ix)来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基193至317的区段,(a-x)来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基38至138的区段,(a-xi)来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基38至138的区段,或(a-xii)来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基38至138的区段;或(b-vii)与来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基195至319的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-viii)与来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基195至319的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-ix)与来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基193至317的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-x)与来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基38至138的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-xi)与来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基38至138的区段具有至少70%序列同一性的区段,或(b-xii)与来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基38至138的区段具有至少70%序列同一性的区段;或或(c-vii)与来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基195至319的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-viii)与来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基195至319的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-ix)与来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基193至317的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-x)与来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基38至138的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-xi)与来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基38至138的区段具有至少80%序列相似性的区段,或(c-xii)与来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基38至138的区段具有至少80%序列相似性的区段;或(d-vii)与来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基195至319的区段相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-viii)与来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基195至319的区段相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,
(d-ix)与来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基193至317的区段相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-x)与来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基38至138的区段相比具有1至30个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-xi)与来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基38至138的区段相比具有1至30个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,或(d-xii)与来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基38至138的区段相比具有1至30个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段。2.根据权利要求1所述的蛋白,其还包含具有以下活性中的任何一种或多种的细胞毒性或催化结构域:膜孔形成活性、dna酶活性、rna酶活性或细胞壁降解活性。3.根据权利要求1所述的蛋白,其包含含有任何一个以下氨基酸序列区段的细胞毒性或催化结构域:(a-vii)’来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基347至519的区段,(a-viii)’来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基347至519的区段,(a-ix)’来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基345至517的区段,(a-x)’来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基139至269的区段,(a-xi)’来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基139至269的区段,或(a-xii)’来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基139至269的区段;或(b-vii)’与来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基347至519的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-viii)’与来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基347至519的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-ix)’与来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基345至517的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-x)’与来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基139至269的区段具有至少70%序列同一性的区段,(b-xi)’与来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基139至269的区段具有至少70%序列同一性的区段,或(b-xii)’与来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基139至269的区段具有至少70%序列同一性的区段;或(c-vii)’与来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基347至519的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-viii)’与来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基347至519的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-ix)’与来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基345至517的区段具有至少80%序列相似性的区段,
(c-x)’与来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基139至269的区段具有至少80%序列相似性的区段,(c-xi)’与来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基139至269的区段具有至少80%序列相似性的区段,或(c-xii)’与来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基139至269的区段具有至少80%序列相似性的区段;或(d-vii)’与来自scole1c(seq id no:25)的氨基酸残基347至519的区段相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-viii)’与来自scole1d(seq id no:26)的氨基酸残基347至519的区段相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-ix)’与来自scole1e(seq id no:27)的氨基酸残基345至517的区段相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-x)’与来自scolma(seq id no:28)的氨基酸残基139至269的区段相比具有1至30个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,(d-xi)’与来自scolmb(seq id no:33)的氨基酸残基139至269的区段相比具有1至30个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段,或(d-xii)’与来自scolmc(seq id no:34)的氨基酸残基139至269的区段相比具有1至30个氨基酸取代、添加、插入或缺失的区段。4.一种蛋白,其包含任何一个以下氨基酸序列或由其组成:(a-vii)seq id no:25,(a-viii)seq id no:26,(a-ix)seq id no:27,(a-x)seq id no:28,(a-xi)seq id no:33,或(a-xii)seq id no:34;或(b-vii)与seq id no:25的氨基酸序列具有至少70%序列同一性的氨基酸序列,(b-viii)与seq id no:26的氨基酸序列具有至少70%序列同一性的氨基酸序列,(b-ix)与seq id no:27的氨基酸序列具有至少70%序列同一性的氨基酸序列,(b-x)与seq id no:28的氨基酸序列具有至少70%序列同一性的氨基酸序列,(b-xi)与seq id no:33的氨基酸序列具有至少70%序列同一性的氨基酸序列,或(b-xii)与seq id no:34的氨基酸序列具有至少70%序列同一性的氨基酸序列;或(c-vii)与seq id no:25的氨基酸序列具有至少80%序列相似性的氨基酸序列,(c-viii)与seq id no:26的氨基酸序列具有至少80%序列相似性的氨基酸序列,(c-ix)与seq id no:27的氨基酸序列具有至少80%序列相似性的氨基酸序列,(c-x)与seq id no:28的氨基酸序列具有至少80%序列相似性的氨基酸序列,(c-xi)与seq id no:33的氨基酸序列具有至少80%序列相似性的氨基酸序列,或
(c-xii)与seq id no:34的氨基酸序列具有至少80%序列相似性的氨基酸序列;或(d-vii)与seq id no:25的氨基酸序列相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的氨基酸序列,(d-viii)与seq id no:26的氨基酸序列相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的氨基酸序列,(d-ix)与seq id no:27的氨基酸序列相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的氨基酸序列,或(d-x)与seq id no:28的氨基酸序列相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的氨基酸序列,(d-xi)与seq id no:33的氨基酸序列相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的氨基酸序列,或(d-xii)与seq id no:34的氨基酸序列相比具有1至40个氨基酸取代、添加、插入或缺失的氨基酸序列;或(e-vii)包含seq id no:25的至少425个连续氨基酸残基或由其组成的氨基酸序列,(e-viii)包含seq id no:26的至少425个连续氨基酸残基或由其组成的氨基酸序列,(e-ix)包含seq id no:27的至少425个连续氨基酸残基或由其组成的氨基酸序列,(e-x)包含seq id no:28的至少215个连续氨基酸残基或由其组成的氨基酸序列,(e-xi)包含seq id no:33的至少215个连续氨基酸残基或由其组成的氨基酸序列,或(e-xii)包含seq id no:34的至少215个连续氨基酸残基或由其组成的氨基酸序列。5.根据权利要求1至4任一项所述的蛋白,其中所述蛋白是以下项中的蛋白:-(a-vii)、(b-vii)、(c-vii)或(d-vii),或-(a-vii)、(b-vii)、(c-vii)、(d-vii)或(e-vii);或其中所述蛋白是以下项中的蛋白:-(a-viii)、(b-viii)、(c-viii)或(d-viii),或-(a-viii)、(b-viii)、(c-viii)、(d-viii)或(e-viii);或其中所述蛋白是以下项中的蛋白:-(a-x)、(b-x)、(c-x)或(d-x),或-(a-x)、(b-x)、(c-x)、(d-x)或(e-x);或其中所述蛋白是以下项中的蛋白:-(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)或(d-xi),或-(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)、(d-xi)或(e-xi);或其中所述蛋白是以下项中的蛋白:-(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)或(d-xii),或

(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)、(d-xii)或(e-xii)。6.根据权利要求1至3任一项所述的蛋白,其中所述蛋白如(b-x)、(c-x)、(d-x)、(b-xi)、(c-xi)、(d-xi)、(b-xii)、(c-xii)、(d-xii)、(b-xi)’、(c-xi)’、(d-xi)’、(b-xii)’、(c-xii)’或(d-xii)’中任一项所定义,并且所述蛋白对应于seq id no:33的残基155的氨基酸残基是pro,和/或对应于seq id no:33的残基246的氨基酸残基是arg或lys,优选arg。7.根据权利要求4所述的蛋白,其中所述蛋白如(b-x)、(c-x)、(d-x)、(e-x)、(b-xi)、(c-xi)、(d-xi)、(e-xi)、(b-xii)、(c-xii)、(d-xii)或(e-xii)中任一项所定义,并且所述蛋白对应于seq id no:33的残基155的氨基酸残基是pro,和/或对应于seq id no:33的残基246的氨基酸残基是arg或lys,优选arg。8.根据权利要求6或7所述的蛋白,其中对应于seq id no:33的残基76和84的氨基酸残基均为gln。9.根据权利要求1至8任一项所述的蛋白,其能够对沙门氏菌(salmonella)发挥细胞毒性作用。10.根据权利要求1至9任一项所述的蛋白,其中权利要求1的蛋白、特别是权利要求1的(b)至(d)的蛋白针对肠道沙门氏菌(salmonella enterica)的毒性是这样的:在点样5微升所述(b)至(d)的蛋白和seq id no:1的蛋白的溶液于软琼脂覆盖的板上并随后在37℃下孵育琼脂板12小时,其和seq id no:1的蛋白产生相同直径的不含肠道沙门氏菌肠道亚种(salmonella enterica ssp.enterica)血清型纽波特菌株6962tm*的活菌的菌斑,所述软琼脂覆盖的板用0.14ml 1
×
107cfu/ml/cm2的敏感的肠道沙门氏菌菌株的细菌溶液接种,其中(b)至(d)的蛋白的浓度是seq id no:1的蛋白的比较溶液的至多5倍。11.一种组合物,其包含根据权利要求1至10任一项所定义的一种或更多种蛋白,优选包含根据权利要求4、7或8所述的一种或多种蛋白。12.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)或(d-iv)项和/或根据权利要求1的(a-v)、(b-v)、(c-v)或(d-v)项所述的蛋白;和-根据(a-i)、(b-i)、(c-i)或(d-i)项所述的蛋白;所述组合物还包含根据(a-vii)、(b-vii)、(c-vii)或(d-vii)项,和/或根据(a-viii)、(b-viii)、(c-viii)或(d-viii)项,和/或根据权利要求1的(a-ix)、(b-ix)、(c-ix)或(d-ix)项,和/或根据(a-x)、(b-x)、(c-x)或(d-x)项,和/或根据(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)或(d-xi)项,和/或根据(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)或(d-xii)项所述的蛋白。13.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)或(d-iv)项和/或根据(a-v)、(b-v)、(c-v)或(d-v)项所述的蛋白;和-根据(a-x)、(b-x)、(c-xi)或(d-x)项所述的蛋白。14.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)或(d-iv)项和/或根据(a-v)、(b-v)、(c-v)或(d-v)项所
述的蛋白;和-根据(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)或(d-xi)项所述的蛋白。15.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)或(d-iv)项和/或根据(a-v)、(b-v)、(c-v)或(d-v)项所述的蛋白;和-根据(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)或(d-xii)项所述的蛋白。16.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)、(d-iv)或(e-iv)项和/或根据权利要求4的(a-v)、(b-v)、(c-v)、(d-v)或(e-v)项所述的蛋白;和-根据(a-x)、(b-x)、(c-x)、(d-x)或(e-x)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的。17.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)、(d-iv)或(e-iv)项和/或根据权利要求4的(a-v)、(b-v)、(c-v)、(d-v)或(e-v)项所述的蛋白;和-根据(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)、(d-xi)或(e-xi)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的。18.根据权利要求11所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)、(d-iv)或(e-iv)项和/或根据权利要求4的(a-v)、(b-v)、(c-v)、(d-v)或(e-v)项所述的蛋白;和-根据(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)、(d-xii)或(e-xii)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的蛋白。19.一种组合物,其包含如权利要求4、7或8所定义的一种或多种蛋白。20.根据权利要求20所述的组合物,其包含根据(a-iii)、(b-iii)、(c-iii)、(d-iii)或(e-iii)项和/或根据(a-vii)、(b-vii)、(c-vii)、(d-vii)或(e-vii)项和/或根据(a-viii)、(b-viii)、(c-viii)、(d-viii)或(e-viii)项和/或根据(a-ix)、(b-ix)、(c-ix)、(d-ix)或(e-ix)项和/或根据(a-x)、(b-x)、(c-x)、(d-x)或(e-x)项或其任何组合所述的蛋白。21.根据权利要求20所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)、(d-iv)或(e-iv)项和/或根据权利要求4的(a-v)、(b-v)、(c-v)、(d-v)或(e-v)项所述的蛋白;和-根据(a-x)、(b-x)、(c-x)、(d-x)或(e-x)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的蛋白。22.根据权利要求19所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)、(d-iv)或(e-iv)项和/或根据权利要求4的(a-v)、(b-v)、(c-v)、(d-v)或(e-v)项所述的蛋白;和-根据(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)、(d-xi)或(e-xi)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的蛋白。23.根据权利要求19所述的组合物,其包含:-根据(a-iv)、(b-iv)、(c-iv)、(d-iv)或(e-iv)项和/或根据权利要求4的(a-v)、(b-v)、(c-v)、(d-v)或(e-v)项所述的蛋白;和

根据(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)、(d-xii)或(e-xii)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的蛋白。24.根据权利要求19所述的组合物,其包含:-根据(a-x)、(b-x)、(c-x)、(d-x)或(e-x)项和/或根据(a-xi)、(b-xi)、(c-xi)、(d-xi)或(e-xi)项和/或(a-xii)、(b-xii)、(c-xii)、(d-xii)或(e-xii)项所述的蛋白,任选地,如权利要求7或8所进一步定义的蛋白;和-根据(a-viii)、(b-viii)、(c-viii)、(d-viii)或(e-iii)项所述的蛋白。25.根据权利要求11至24任一项所述的组合物,其中所述组合物是植物材料或其提取物,其中所述植物材料是来自具有表达的所述蛋白的植物的材料;或其中所述组合物是含有所述蛋白的水溶液。26.一种预防或减少沙门氏菌对目标物的感染或污染的方法,其包括将所述目标物与如权利要求1或4所定义的、任选地如其从属权利要求所进一步定义的蛋白或如权利要求11或25所定义的组合物接触。27.根据权利要求26所述的方法,其中用所述水溶液喷洒所述目标物或将所述目标物浸入所述水溶液中,或所述目标物浸入所述蛋白的水溶液至少10秒钟,优选至少1分钟,优选至少5分钟。28.根据权利要求26或27所述的方法,其中所述目标物是食物或动物饲料;或所述食物是整个动物躯体、肉、蛋、生的水果或蔬菜。29.一种治疗有此需要的受试者的沙门氏菌感染的方法,其包括向所述受试者施用权利要求1或4所定义的、任选地如其从属权利要求所进一步定义的蛋白或权利要求11或25所定义的组合物。30.根据权利要求26或29所述的方法,其中所述沙门氏菌是肠道沙门氏菌。

技术总结
本发明涉及用于控制肠道沙门氏菌的细菌素(沙门菌素)。该细菌素来自沙门氏菌。该沙门菌素可在植物中表达,并且可用于预防或减少目标物被沙门氏菌感染或污染的方法中。标物被沙门氏菌感染或污染的方法中。标物被沙门氏菌感染或污染的方法中。


技术研发人员:S
受保护的技术使用者:诺麦生物科学有限公司
技术研发日:2020.09.21
技术公布日:2022/4/29
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