一种蛹虫草朗姆酒的制备方法

1.本发明涉及酒类制备工艺技术领域，具体涉及一种蛹虫草朗姆酒的制备方法。


背景技术：

2.蛹虫草(cordyceps militaris)又称北冬虫夏草、北虫草，是一种珍稀的食药用真菌，含有虫草素、虫草酸和虫草多糖等多种功能有效物质，已经被医学界证实具有较高滋补和药用价值。
3.朗姆酒，是以甘蔗糖蜜或甘蔗汁为原料，经发酵、蒸馏和橡木桶陈酿而成，口感甜润、芬芳馥郁。根据不同的原料和酿制不同方法，朗姆酒可分为：白朗姆酒、金朗姆酒和黑朗姆酒等，酒精含量为38％～50％。朗姆酒(rum)是世界第三大蒸馏名酒，世界市场占有份额比例为10％以上。
4.大量以朗姆酒调制的酒品使消费者不断地进行尝试，推动了即饮渠道的增长。朗姆酒具有非常强的可调和性，人们可以选择朗姆酒直接净饮，也可以加冰，或调味朗姆酒及各式调制鸡尾酒。即饮渠道对于朗姆酒的流行非常有意义，朗姆酒的可调和性及其历史传承给了它无限的增长空间。
5.如何把朗姆酒改造提升为大众化的具有复合型营养的四季饮品，这就是将蛹虫草与朗姆酒结合，从而形成新型产品的原因所在。目前，市场上也存在一些将干草蛹虫草添加到酒类中制成蛹虫草酒，但该类蛹虫草酒通常存在虫草素含量偏低的问题，导致蛹虫草酒类不具备太高的营养价值，同时蛹虫草酒类制备成本较高。


技术实现要素：

6.本发明的目的是要解决现有蛹虫草酒类通常存在虫草素含量偏低以及制备成本较高的问题，而提供一种蛹虫草朗姆酒的制备方法。
7.一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，按以下步骤进行：
8.一、将菊芋粕水解液和5
‑
氨基乙酰丙酸母液加入到去离子水中，充分搅拌后，灭菌，冷却至室温，得到灭菌后的液体培养基；无菌条件下，将蛹虫草母种接种于灭菌后的液体培养基中，接种量为3～5块/0.5cm3，并在20～23℃的温度条件和170～200r/min的转速条件下培养4～6d，得到液体生产种子；将菊芋粕和糜子加入到营养液中，灭菌，然后冷却至室温，得到固体培养基；
9.二、无菌条件下，将液体生产种子接种于固体培养基上，接种量为8～12％；将接种后的固体培养基在20～23℃的温度条件下，避光培养6～8d；培养结束后，进行光照、温差刺激和通风，持续21～24d后，继续进行光照、温度刺激和通风，继续培养8～12d后，进行补水，再进行第二次光照、温度刺激和通风，继续培养10～15d后，得到即将进行成熟阶段的蛹虫草子实体，最后培养5～10d后，得到成熟的蛹虫草子实体；将成熟的蛹虫草子实体加入到朗姆酒中，密封后避光贮存28～35d，得到蛹虫草朗姆酒。
10.本发明的有益效果：
11.(1)本发明一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，酒产品兼顾功效成分的同时又保持比较好的朗姆酒风味与口感，同时也符合中国消费者对酒类的品尝习惯，经权威机构检测蛹虫草朗姆酒虫草素含量为125mg/l以上，是干草蛹虫草浸渍酒虫草素含量的2.5倍以上。同时，本发明在蛹虫草子实体培养过程中，不需要对培养环境的湿度进行人为干预，只需往栽培容器内注入纯水一次，即接种后的第40d时，减少了水电的成本，节能降耗。
12.(2)本发明一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，以菊芋粕水解液和5
‑
氨基乙酰丙酸母液(玉米淀粉的副产物)为原料制备蛹虫草液体菌种，菊芋粕水解液作为液体菌种的碳源，5
‑
氨基乙酰丙酸母液含有5
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氨基乙酰丙酸成分，5
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氨基乙酰丙酸是一种含氧和氮的碳氢化合物，它是一种非蛋白氨基酸，具有安全的活性物质，工业上可通过微生物发酵葡萄糖生产得到5
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氨基乙酰丙酸。同时它具有调节生物生长发育的功能，被看作是一种新的生物生长调节物质。蛹虫草固态栽培培养基采用菊芋粕和糜子为原料，采用菊芋粕水解液为营养液，简单且来源广泛、投资少、能耗低以及技术简单，方法具有可行性，增加了菊芋、玉米淀粉和糜子的附加值等优势，对菊芋产业和玉米深加工产业等具有很好的经济效益和社会效益。
13.本发明可获得一种蛹虫草朗姆酒的制备方法。
附图说明
14.图1为蛹虫草菌丝培养结束；
15.图2为蛹虫草原基萌发态；
16.图3为2
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4cm的小子实体；
17.图4为成熟的蛹虫草子实体；
18.图5为灌装好的蛹虫草朗姆酒。
具体实施方式
19.具体实施方式一：本实施方式一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，按以下步骤进行：
20.一、将菊芋粕水解液和5
‑
氨基乙酰丙酸母液加入到去离子水中，充分搅拌后，灭菌，冷却至室温，得到灭菌后的液体培养基；无菌条件下，将蛹虫草母种接种于灭菌后的液体培养基中，接种量为3～5块/0.5cm3，并在20～23℃的温度条件和170～200r/min的转速条件下培养4～6d，得到液体生产种子；将菊芋粕和糜子加入到营养液中，灭菌，然后冷却至室温，得到固体培养基；
21.二、无菌条件下，将液体生产种子接种于固体培养基上，接种量为8～12％；将接种后的固体培养基在20～23℃的温度条件下，避光培养6～8d；培养结束后，进行光照、温差刺激和通风，持续21～24d后，继续进行光照、温度刺激和通风，继续培养8～12d后，进行补水，再进行第二次光照、温度刺激和通风，继续培养10～15d后，得到即将进行成熟阶段的蛹虫草子实体，最后培养5～10d后，得到成熟的蛹虫草子实体；将成熟的蛹虫草子实体加入到朗姆酒中，密封后避光贮存28～35d，得到蛹虫草朗姆酒。
22.本实施方式的有益效果：
23.(1)本实施方式一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，酒产品兼顾功效成分的同时又保持比较好的朗姆酒风味与口感，同时也符合中国消费者对酒类的品尝习惯，经权威机构检测蛹虫草朗姆酒虫草素含量为125mg/l以上，是干草蛹虫草浸渍酒虫草素含量的2.5倍以
上。同时，本实施方式在蛹虫草子实体培养过程中，不需要对培养环境的湿度进行人为干预，只需往栽培容器内注入纯水一次，即接种后的第40d时，减少了水电的成本，节能降耗。
24.(2)本实施方式一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，以菊芋粕水解液和5
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氨基乙酰丙酸母液(玉米淀粉的副产物)为原料制备蛹虫草液体菌种，菊芋粕水解液作为液体菌种的碳源，5
‑
氨基乙酰丙酸母液含有5
‑
氨基乙酰丙酸成分，5
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氨基乙酰丙酸是一种含氧和氮的碳氢化合物，它是一种非蛋白氨基酸，具有安全的活性物质，工业上可通过微生物发酵葡萄糖生产得到5
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氨基乙酰丙酸。同时它具有调节生物生长发育的功能，被看作是一种新的生物生长调节物质。蛹虫草固态栽培培养基采用菊芋粕和糜子为原料，采用菊芋粕水解液为营养液，简单且来源广泛、投资少、能耗低以及技术简单，方法具有可行性，增加了菊芋、玉米淀粉和糜子的附加值等优势，对菊芋产业和玉米深加工产业等具有很好的经济效益和社会效益。
25.具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同点是：步骤一中将菊芋粕水解液和5
‑
氨基乙酰丙酸母液加入到去离子水中，充分搅拌后，在121℃下灭菌15min，冷却至室温，冷却至室温，得到灭菌后的液体培养基，所述菊芋粕水解液和5
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氨基乙酰丙酸母液与去离子水的体积比为10ml：0.5ml：1l。
26.其他步骤与具体实施方式一相同。
27.具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同点是：所述菊芋粕水解液按以下步骤制备：将菊芋粕加入到浓度为1.5％的硫酸溶液中，固液比为1：10，然后在121℃的温度条件下反应2.5h，固液分离后，得到初始水解液；将初始水解液经碳酸钙乳液中和至ph为3.0，再经0.5％活性炭脱色15min后，得到菊芋粕水解液，菊芋粕水解液中可溶性固形物的质量分数为10.0％，总还原糖的质量分数为8.5％；总还原糖由85％果糖、10％葡萄糖和5％木糖组成。
28.其他步骤与具体实施方式一或二相同。
29.具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同点是：步骤一中菊芋粕与糜子的质量比为1：9。
30.其他步骤与具体实施方式一至三相同。
31.具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同点是：步骤一中所述的营养液按以下步骤制备：将1g菊芋粕水解液和0.5g 5
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氨基乙酰丙酸母液加入到100ml蒸馏水中，混合均匀，得到营养液。
32.其他步骤与具体实施方式一至四相同。
33.具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同点是：步骤一中将菊芋粕、栎木木屑和麸皮加入到营养液中，在121℃下灭菌1.5h，然后冷却至室温，得到固体培养基。
34.其他步骤与具体实施方式一至五相同。
35.具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一不同点是：步骤二中所述的光照、温差刺激和通风：光照刺激为每天不少于10小时的光照，光照强度为150lx～250lx；温差刺激为：昼夜温差5℃，白天21℃，晚上16℃；通风为每天通风两次，上、下午各一次，每次30min。
36.其他步骤与具体实施方式一至六相同。
37.具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一不同点是：步骤二中所述的光照、温度刺激和通风：光照刺激为每天不少于10小时的光照；温度刺激为温度18℃；通风为每天通风两次，上、下午各一次，每次30min。
38.其他步骤与具体实施方式一至七相同。
39.具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同点是：步骤二中所述的第二次光照、温度刺激和通风：第二次光照刺激为每天不少于10小时的光照；第二次温度刺激为温度18℃；通风为每天通风两次，上、下午各一次，每次30min。
40.其他步骤与具体实施方式一至八相同。
41.具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式一至九之一不同点是：步骤二中成熟的蛹虫草子实体的质量与朗姆酒的体积的比为1g：20ml。
42.其他步骤与具体实施方式一至九相同。
43.采用以下实施例验证本发明的有益效果：
44.实施例1：一种蛹虫草朗姆酒的制备方法，按以下步骤进行：
45.一、液体菌种的制备：
46.1.液体培养基
47.菊芋粕水解液10ml，5
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氨基乙酰丙酸母液0.5ml，去离子水1l。
48.菊芋粕水解液制备过程及成分组成：
49.将菊芋粕加入到浓度为1.5％的硫酸溶液中，固液比为1：10，然后在121℃的温度条件下反应2.5h，固液分离后，得到初始水解液；将初始水解液经碳酸钙乳液中和至ph为3.0，再经0.5％活性炭脱色15min后，得到净化后的菊芋粕水解液，菊芋粕水解液中可溶性固形物的质量分数为10.0％，总还原糖的质量分数为8.5％；经高效液相色谱检测，总还原糖由85％果糖、10％葡萄糖和5％木糖组成。
50.2.培养基灭菌
51.按液体菌种培养基的配方精确称取各物质，充分搅拌后分装于培养瓶中，装液量为500ml，瓶口用聚丙烯塑料薄膜封好在121℃下灭菌15min，冷却至常温，备用。
52.3.种子培养
53.无菌条件下，用接种铲取蛹虫草斜面母种0.5cm3菌种块4块，接入灭完菌的液体培养基的培养瓶中，于恒温摇床中在22℃的温度条件和180r/min的转速条件下培养5d，得到澄清透明、菌丝均匀一致的液体生产种子，备用。
54.二、固态培养基：
55.将菊芋粕和糜子(二者干基质量比为1：9)混合物共25g放置于栽培容器中，并加营养液25ml于耐高温高压的透明玻璃栽培容器中。
56.营养液按以下步骤制备：将1g菊芋粕水解液和0.5g 5
‑
氨基乙酰丙酸母液加入到100ml蒸馏水中，混合均匀，得到营养液。
57.装完培养料后，栽培容器套上聚丙烯薄膜，在121℃下灭菌1.5h，放入无菌室，冷却至常温，备用。
58.三、接种：
59.无菌条件下，用自动可调节接种枪进行接种，接种量为10％(即液体种子的质量占固体培养料干基质量的百分比)，接种完毕，送入栽培室，等待避光培养。
60.四、菌丝培养管理：
61.时间节点：从接种开始计算至接种后的第7d。
62.具体操作：将接种完毕的培养料放在培养架上，避光培养(栽培架子用遮光布进行遮盖)。栽培室内的温度控制在22℃(利用空调)。第7d时，栽培容器内的蛹虫草白色菌丝完全吃透培养料，准备见光培养管理，如图1所示。
63.五、子实体培养阶段：
64.1.原基萌发阶段
65.时间节点：接种后的第30d出现原基。
66.具体操作要点：从接种后的第7d开始，用一次性注射器针头对栽培容器的聚丙烯薄膜进行刺孔10个，然后进行光照(每天不少于10小时的光照，光照强度为150lx～250lx)、温差(昼夜温差5℃，白天21℃，晚上16℃)刺激和通风(每天通风两次，上、下午各一次，每次30min)，持续23d后，米粒状的原基萌发，如图2所示。
67.2.小子实体阶段
68.时间节点：从原基萌发起，至小子实体高2
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4cm，这一时期为蛹虫草的小子实体阶段，即从接种后的第30d至接种后的第40d。
69.具体操作过程：继续进行光照(每天不少于10小时的光照)、温度(18℃)刺激和通风(每天通风两次，上、下午各一次，每次30min)，继续培养10d后，原基变粗变长，小子实体高为2
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4cm，长圆锥型，呈橙色、橙黄、橙红色，进入子实体正常稳定的成长阶段，如图3所示。
70.3.子实体稳定成长阶段、成熟阶段
71.时间节点：小子实体继续培养10
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15天。即接种后的第40d至接种后第55d
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65d。
72.具体操作过程：接种40d时往栽培容器内注入纯水，水刚好没过培养基表面即可，再进行第二次光照(每天不少于10小时的光照)、温度(18℃)刺激和通风(每天通风两次，上、下午各一次，每次30min)；
73.经过10
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15d，子实体不再增粗伸长，头部膨大呈棒形，顶端呈钝圆或扁圆形或呈叶尖形的。子实体的上部略小，呈长圆柱形或扁圆形，有的柄中间具明显纵陷纹，全株呈橙色或橙红色。株高5～8cm，头部粗2～3mm，中部粗粗3～6mm，基部粗4～7mm，全株呈橙色或橙红色。从此子实体即进人成熟阶段，即接种后的第40d至接种后的第50d
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第55d。
74.再经过5
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10d，即接种后第55d
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第65d，蛹虫草子实体柄一般不再增粗伸长，顶端出现乳头状小突起并出现龟背状花纹，至此，子实体完全成熟，全株呈橙色或橙红色，如图4所示。
75.4.灌装酒液，制备蛹虫草朗姆酒
76.栽培容器内的蛹虫草灌入51％vol的白色朗姆酒(购自广西甘纳酒业有限公司)，并封盖静止避光贮存30d，获得蛹虫草朗姆酒(如图5所示)，成熟的蛹虫草子实体的质量与朗姆酒的体积的比为1g：20ml。
77.本实施例蛹虫草朗姆酒，经检测蛹虫草朗姆酒虫草素含量为125mg/l(采用的检测标准为ny/t2116
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2012)以上，是干草蛹虫草浸渍酒虫草素含量的2.5倍以上；同时，在蛹虫草子实体培养过程中，不需要对培养环境的湿度进行人为干预，只需往栽培容器内注入纯水一次，即接种后的第40d时，减少了水电的成本，节能降耗。