一种高效二联检测口蹄疫和小反刍兽疫的引物以及试剂盒的制作方法

文档序号:25588652发布日期:2021-06-22 17:04阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种高效二联检测口蹄疫和小反刍兽疫的引物,其特征在于,具体为:

fmdv-f3:aggtttccacaactgacaca;

fmdv-b3:gttaggacgtggctttcgg;

fmdv-fip:

cgagcgtggagtcaaacacagt-gtgcaatttgaaactccgcc;

fmdv-bip:

agcgagtgctagtagcagcac-cgggtccttgtcaccaag;

pprv-f3:ggtctccttcctccagca;

pprv-b3:gcctcacgagggttttgac;

pprv-fip:tcccttccttcggacccatttg-ggagagtcgcctacacca;

pprv-bip:

aacacgctcaggaaagcccag-tctcgcgagagttcatcctc。

2.一种高效二联检测口蹄疫和小反刍兽疫的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述引物以及反应液,所述反应液的组成为:

20mmtris-hcl0.2μl

40mmkcl6.8μl

100mm(nh4)2so41.8μl

80mmmgso41.8μl

1%tween-201.8μl

28mmdntps0.9μl

8000u/mlbst酶1.8μl

10000u/mlinvitrogensuperscriptiv反转录酶0.1μl

10mmreversetranscriptaseinhibitors0.1μl

1mmsybrgreen荧光染料0.9μl

4.0×10-6mol/l金纳米颗粒1.8μl。

3.根据权利要求2所述的高效二联检测口蹄疫和小反刍兽疫的试剂盒,其特征在于,所述口蹄疫引物的浓度和体积为:90μm的fmdv-f3引物0.5μl、90μm的fmdv-b3引物0.5μl、180μm的fmdv-fip引物2μl、180μm的fmdv-bip引物2μl;所述小反刍兽疫引物的浓度和体积为:90μm的pprv-f3引物0.5μl、90μm的pprv-b3引物0.5μl、180μm的pprv-fip引物2μl、180μm的pprv-bip引物2μl。


技术总结
本发明公开高效二联检测口蹄疫和小反刍兽疫的引物以及试剂盒,本发明以改良后的LAMP技术为基因扩增反应原理,在反应体系里加入金纳米颗粒,吸附ssDNA和蛋白酶,抑制升温过程中的非特异性反应,达到热启动的目的,避免在升温过程中的非特异性反应;结合改良后的LAMP技术与微流控芯片技术,既可以快速、准确的检测区分口蹄疫与小反刍兽疫,同时,反应试剂预埋于微流控芯片上,实现一样双指标检测,又使用户操作简便。

技术研发人员:禹思宇;胡忆文;胡仕凤;谭建锡;朱忠武;孟芳;江杰;安家雯;卢先东;刘艳红
受保护的技术使用者:长沙海关技术中心;宁波爱基因科技有限公司
技术研发日:2021.03.12
技术公布日:2021.06.22
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