本发明公开一类人参二醇衍生物，同时还提供了人参二醇衍生物的制备方法；本发明进一步提供了人参二醇衍生物的医用用途，属于化学医药领域。
背景技术：
人参二醇，是伞形目五加科人参属人参(panaxginsengc.a.mey)中分离的得到达玛烷人参皂苷，经水解后得到的四环三帖类化合物。人参二醇(panaxadiol，结构式如式i所示，以下简称pd)，化学名为(3s，8r，10r，12r，14r)-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲-3,12-二醇，分子式：c30h52o3，分子量460.74。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一类新的人参二醇衍生物以及制备方法。
本发明的另一目的是提供该类化合物在预防或治疗神经细胞损伤性疾病中的应用。
本发明所述的一种人参二醇衍生物，具有式ii所示结构：
其中，当x为氧时，r为以下基团：
(a)芳烃：苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-甲氧苯基、4-甲基苯基、3-氟苯基、苄基；
(b)烷烃：乙基、丙基、异丙基、庚基、己基、环己基、烯丙基：
当x为硫时，r为苯基：
具有上述通式ii所示的化合物为：
iia：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基苄基氨基甲酸酯；
iib：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基苯基氨基甲酸酯；
iic：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基(4-氯苯基)氨基甲酸酯；
iid：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基(4-甲氧基苯基)氨基甲酸酯；
iie：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲蒽-3-基(4-氟苯基)氨基甲酸酯；
iif：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基对甲苯基氨基甲酸酯；
iij：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基(3-氟苯基)氨基甲酸酯；
iih：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基氨基甲酸乙酯；
iii：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基庚基氨基甲酸酯；
iig：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基异丙基氨基甲酸酯；
iik：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基己基氨基甲酸酯；
iil：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊基[a]菲基-3-基环己基氨基甲酸酯；
iim：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基烯丙基氨基甲酸酯；
iin：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基丙基氨基甲酸酯；
iio：o-((3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基)苯基硫代氨基甲酸酯；
本发明还提供了通式ii化合物的合成路线如下：
称取人参二醇溶解于的溶剂中，低温搅拌下加入异氰酸酯或异硫氰酸酯，其中异氰酸酯或异硫氰酸酯的摩尔数至少为人参二醇的2倍，另加入催化剂，在氮气保护下，搅拌反应，tlc检测，反应后的溶剂系统蒸干溶剂，剩余固体硅胶柱层析分离(氯仿：甲醇＝100：1)或薄层制备，得到本发明通式ii的化合物；
所述的制备人参二醇衍生物的方法，所述催化剂为钠氢、三乙胺、n,n-二异丙基乙胺中的任何一种。所述溶剂为四氢呋喃、甲苯、氯仿中的一种，人参二醇与溶剂的摩尔数之比为0.05～0.2；
所述的制备人参二醇衍生物的方法，人参二醇的摩尔数与异氰酸酯或异硫氰酸酯的摩尔数之比为1～10：1，所述人参二醇与催化剂的摩尔数之比为1～10，其反应温度为80～120℃。
本发明所公开的衍生物采用mtt法测定了对aβ25-35诱导pc12细胞损伤的神经保护作用，结构表明受试的化合物均表现出了较好的神经细胞保护作用。
本发明还提供了上述人参二醇衍生物在制备治疗神经细胞保护药物中的应用。
本发明还提供了上述人参二醇衍生物在制备抗阿尔茨海默病药物或保健品中的应用。
本发明的制备上述人参二醇衍生物的方法简单、纯度高、成本低，适合工业化生产。
本发明的积极效果在于：
公开了一钟人参二醇衍生物，是一种类新的化合物。同时还提供了人参二醇类化合物的制备方法，该方法具有原料来源丰富，反应过程操作简单，所用试剂便宜易得的优点。本发明的化合物经体外抗aβ25-35诱导pc12细胞损伤的神经保护作用实验测试，结果显示本发明的人参二醇衍生物均有明显的神经细胞保护作用，可用于制备预防或治疗神经细胞损伤性疾病药物。
具体实施方式：
以下实施例对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此；其中，本发明所用试剂和原料均市售可得，无特别标注均为分析纯。
实施例1
iia:(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基苄基氨基甲酸酯的制备；
人参二醇(55.00mg)，置于10ml无水甲苯中，在冰浴下，缓慢滴加苄基异氰酸酯或异硫氰酸酯(32mg)、tea或者diea(33μl)，然后撤去冰浴，在氮气保护下，于100℃，搅拌12-15小时。tcl检测反应至原料消失后，用甲苯(3×10ml)萃取三次，饱和nacl(2×10ml)溶液洗涤后，无水na2so4干燥，减压滤过，旋干，得粗产物。以甲醇/二氯甲烷(100：1)为洗脱剂，通过硅胶色谱法纯化，得到化合物iia。产率63％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.38–7.27(m,5h),6.70(s,1h),4.92(s,1h),4.49–4.28(m,3h),3.56(td,j＝10.0,4.9hz,1h),2.33(s,1h),1.99–1.85(m,2h),1.83–1.67(m,4h),1.66–1.35(m,11h),1.34–1.22(m,10h),1.19(s,3h),1.11–1.02(m,2h),0.98(s,3h),0.89(s,9h),0.80(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ156.79,138.78,128.65,127.54,127.42,81.46,76.66,73.10,69.89,56.02,54.73,51.21,49.84,49.19,45.05,39.82,38.60,38.10,37.04,36.46,35.75,34.84,33.03,31.14,30.57,27.99,27.15,25.17,24.17,19.43,18.20,17.07,16.52,16.29,16.18,15.64。
实施例2
iib：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基苯基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率57％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.32(d,j＝7.6hz,2h),7.24(d,j＝7.4hz,2h),6.97(t,j＝7.2hz,1h),6.49(s,1h),6.19(s,1h),4.41(dd,j＝11.4,4.7hz,1h),3.48(td,j＝10.1,4.8hz,1h),1.93–1.78(m,2h),1.78–1.60(m,5h),1.59–1.35(m,11h),1.32–1.22(m,2h),1.20(s,4h),1.15(s,4h),1.12(s,3h),1.08–0.96(m,2h),0.92(s,3h),0.86(s,3h),0.85(s,3h),0.82(s,3h),0.80(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ153.62,138.17,129.02,123.19,118.55,81.93,76.66,73.10,69.88,56.05,54.74,51.22,49.85,49.20,39.84,38.61,38.10,37.07,36.46,35.76,34.83,33.03,31.14,30.59,28.05,27.16,25.18,24.11,19.44,18.22,17.08,16.62,16.29,16.20,15.66。
实施例3
iic：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基(4-氯苯基)氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率64％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.35(d,j＝8.5hz,2h),7.28–7.22(m,2h),6.60(s,1h),6.27(s,1h),4.47(dd,j＝11.4,4.3hz,1h),3.54(td,j＝10.1,4.9hz,1h),2.01–1.85(m,2h),1.85–1.67(m,5h),1.67–1.39(m,11h),1.38–1.30(m,2h),1.27(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.14–1.03(m,2h),0.99(s,3h),0.92(s,3h),0.91(s,3h),0.89(s,3h),0.86(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ153.46,136.80,129.00,128.17,119.76,82.23,76.66,73.11,69.87,56.04,54.74,51.22,49.85,49.20,39.84,38.59,38.09,37.06,36.46,35.76,34.82,33.03,31.14,30.59,28.05,27.17,25.18,24.09,19.44,18.21,17.08,16.61,16.29,16.19,15.66。
实施例4
iid：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基(4-甲氧基苯基)氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率54％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.35(s,1h),7.65(d,j＝9.0hz,2h),7.04(d,j＝9.0hz,2h),6.27(s,1h),4.92–4.76(m,1h),3.88(s,3h),3.56(td,j＝10.8,5.4hz,1h),2.02–1.89(m,2h),1.87–1.74(m,5h),1.71–1.39(m,11h),1.39–1.31(m,2h),1.27(s,4h),1.23(s,4h),1.19(s,3h),1.17–1.13(m,1h),1.10–1.06(m,1h),1.05–1.02(m,3h),1.00(s,3h),0.96(s,3h),0.95(s,3h),0.90(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ155.83,153.94,131.28,120.39,114.23,81.76,76.66,73.10,69.88,56.05,55.52,54.74,51.22,49.85,49.20,39.84,38.61,38.10,37.06,36.47,35.76,34.84,33.03,31.14,30.59,28.05,27.16,25.18,24.13,19.44,18.22,17.08,16.61,16.29,16.19,15.66。
实施例5
iie：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲蒽-3-基(4-氟苯基)氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率59％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.34(s,2h),6.99(t,j＝8.6hz,2h),6.53(s,1h),6.26(s,1h),4.46(dd,j＝11.5,4.4hz,1h),3.54(td,j＝10.2,5.0hz,1h),2.00–1.84(m,2h),1.83–1.66(m,5h),1.65–1.41(m,11h),1.39–1.29(m,2h),1.26(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.14–1.02(m,2h),0.98(s,3h),0.92(s,3h),0.91(s,3h),0.89(s,3h),0.86(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ158.87(d,jcf＝242.2hz),153.76,134.17,120.25,115.69,82.09,76.66,73.11,69.87,56.03,54.73,51.21,49.85,49.20,39.83,38.59,38.09,37.06,36.46,35.76,34.82,33.03,31.14,30.59,28.05,27.16,25.17,24.11,19.44,18.21,17.07,16.60,16.29,16.19,15.66。
实施例6
iif：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基对甲苯基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率69％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.27(d,j＝5.4hz,2h),7.10(d,j＝8.3hz,2h),6.48(s,1h),6.26(s,1h),4.46(dd,j＝11.5,4.2hz,1h),3.54(td,j＝10.1,5.1hz,1h),2.30(s,3h),2.00–1.85(m,2h),1.83–1.69(m,4h),1.68–1.40(m,12h),1.39–1.30(m,2h),1.26(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.14–1.02(m,2h),0.98(s,3h),0.93(s,3h),0.91(s,3h),0.89(s,3h),0.86(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ153.72,135.57,132.71,129.49,118.64,81.77,76.66,73.10,69.88,56.05,54.73,51.21,49.85,49.20,39.83,38.61,38.09,37.06,36.46,35.76,34.83,33.03,31.14,30.58,28.05,27.16,25.18,24.12,20.73,19.44,18.21,17.08,16.62,16.29,16.19,15.66。
实施例7
iij：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基(3-氟苯基)氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率53％.1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.72(s,1h),7.40(d,j＝11.4hz,1h),7.28(dt,j＝17.3,8.6hz,2h),6.79(t,j＝7.8hz,1h),5.60(s,1h),4.47–4.27(m,1h),3.43–3.35(m,1h),1.90–1.61(m,8h),1.60–1.36(m,10h),1.34–1.22(m,3h),1.19(s,4h),1.11(s,6h),1.06–0.97(m,2h),0.92(s,3h),0.87(s,9h),0.84(s,3h).13cnmr(125mhz,dmso-d6)δ162.38(d,jcf＝240.8hz),153.53,141.27,130.33,114.01,108.71,108.54,80.73,76.23,72.51,69.16,55.27,54.14,50.74,49.01,48.94,40.19,38.10,37.82,36.55,35.94,35.18,34.38,32.79,30.66,30.36,27.77,27.12,24.60,23.79,19.28,17.79,16.89,16.60,16.00,15.80,15.45。
实施例8
iih：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基氨基甲酸乙酯的制备；
制备方法同实施例1；产率54％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.25(s,1h),4.56(s,1h),4.35(dd,j＝11.3,4.6hz,1h),3.53(td,j＝10.3,5.1hz,1h),3.30–3.12(m,2h),1.99–1.84(m,2h),1.83–1.66(m,4h),1.64–1.39(m,12h),1.38–1.28(m,2h),1.26(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.16–1.10(m,3h),1.09–1.01(m,2h),0.96(s,3h),0.93–0.85(m,9h),0.81(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ156.67,80.96,76.66,73.09,69.89,56.02,54.73,51.22,49.84,49.19,45.42,39.82,38.61,38.09,37.04,36.46,35.76,34.84,33.03,31.14,30.58,27.99,27.16,25.18,24.18,19.43,18.21,17.07,16.52,16.29,16.18,15.65,15.31。
实施例9
iii：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基庚基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率57％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.24(s,1h),4.59(s,1h),4.36(dd,j＝10.3,3.6hz,1h),3.53(td,j＝10.3,5.1hz,1h),3.16(s,2h),2.01–1.84(m,2h),1.83–1.37(m,18h),1.27(s,15h),1.22(s,3h),1.18(s,3h),1.09–1.01(m,2h),0.98(s,3h),0.88(s,12h),0.81(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ156.79,80.94,76.65,73.08,69.89,56.02,54.73,51.21,49.84,49.20,40.99,39.82,38.61,38.10,37.04,36.46,35.76,34.84,33.03,31.75,31.14,30.58,30.07,28.96,27.98,27.16,26.73,25.17,24.18,22.59,19.43,18.21,17.07,16.53,16.29,16.18,15.65,14.07。
实施例10
iig：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基异丙基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率63％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.25(s,1h),4.51–4.28(m,2h),3.80(s,1h),3.53(td,j＝10.2,5.0hz,1h),2.01–1.84(m,2h),1.82–1.66(m,5h),1.65–1.28(m,13h),1.26(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.16(s,3h),1.14(s,3h),1.11–1.01(m,2h),0.98(s,3h),0.88(s,9h),0.82(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ155.97,80.80,76.65,73.08,69.89,56.03,54.73,51.21,49.84,49.19,42.89,42.10,39.82,38.61,38.10,37.04,36.46,35.75,34.84,33.03,31.13,30.58,27.99,27.16,25.17,24.17,23.15,19.43,18.21,17.07,16.55,16.29,16.18,15.64。
实施例11
iik：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基己基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率54％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.25(s,1h),4.59(s,1h),4.41–4.27(m,1h),3.53(td,j＝10.1,5.1hz,1h),3.16(s,2h),2.01–1.84(m,2h),1.83–1.35(m,19h),1.29(s,7h),1.27(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.11–1.01(m,2h),0.98(s,3h),0.88(s,12h),0.81(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ156.79,80.93,76.65,73.08,69.89,56.02,54.73,51.21,49.84,49.20,40.99,39.82,38.61,38.10,37.04,36.46,35.75,34.84,33.03,31.49,31.13,30.58,30.03,27.98,27.16,26.44,25.17,24.18,22.56,19.43,18.21,17.07,16.52,16.29,16.18,15.64,14.01。
实施例12
iil：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊基[a]菲基-3-基环己基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1，产率65％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.24(s,1h),4.48(s,1h),4.35(dd,j＝11.3,4.4hz,1h),3.53(td,j＝10.3,5.1hz,2h),2.00–1.83(m,4h),1.82–1.66(m,7h),1.65–1.29(m,15h),1.26(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,4h),1.16–1.00(m,5h),0.98(s,3h),0.88(s,9h),0.82(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ155.98,80.76,76.65,73.08,69.89,56.02,54.73,51.22,49.83,49.70,49.20,39.82,38.61,38.11,37.04,36.46,35.75,34.84,33.54,33.03,31.13,30.58,28.00,27.16,25.56,25.17,24.86,24.17,19.43,18.21,17.07,16.54,16.29,16.18,15.64。
实施例13
iim：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基烯丙基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率59％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.25(s,1h),5.96–5.76(m,1h),5.19(dd,j＝17.2,1.3hz,1h),5.12(dd,j＝10.2,1.0hz,1h),4.69(s,1h),4.37(dd,j＝11.3,4.8hz,1h),3.81(s,2h),3.53(td,j＝10.3,5.1hz,1h),2.00–1.84(m,2h),1.83–1.66(m,5h),1.64–1.35(m,11h),1.34–1.28(m,2h),1.26(s,4h),1.22(s,4h),1.18(s,3h),1.11–1.01(m,2h),0.98(s,3h),0.92–0.85(m,9h),0.82(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ156.61,134.83,115.82,81.29,76.66,73.09,69.88,56.02,54.73,51.21,49.84,49.20,43.42,39.83,38.60,38.10,37.04,36.46,35.76,34.84,33.02,31.13,30.58,27.98,27.16,25.17,24.15,19.43,18.21,17.07,16.52,16.29,16.17,15.65。
实施例14
iin：(3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r)-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基丙基氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率61％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ6.27(s,1h),4.62(s,1h),4.37(dd,j＝11.8,4.4hz,1h),3.55(td,j＝10.3,5.1hz,1h),3.15(s,2h),2.03–1.85(m,2h),1.84–1.72(m,3h),1.70–1.41(m,15h),1.40–1.31(m,2h),1.28(s,4h),1.24(s,4h),1.20(s,3h),1.13–1.03(m,2h),0.99(s,3h),0.97–0.86(m,12h),0.83(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ156.82,80.94,76.66,73.08,69.89,56.02,54.73,51.21,49.84,49.20,42.66,39.82,38.61,38.10,37.04,36.46,35.75,34.84,33.02,31.13,30.58,27.98,27.16,25.17,24.17,23.29,19.43,18.21,17.07,16.52,16.29,16.18,15.64,11.23。
实施例15
iio:o-((3s，8r，10r，12r，14r)-12-羟基-4,4,8,10,14-五甲基-17-((r-2,6,6-三甲基四氢-2h-吡喃-2-基)十六氢-1h-环戊[a]菲基-3-基)苯基硫代氨基甲酸酯的制备；
制备方法同实施例1；产率61％.1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.30(s,1h),7.33(t,j＝7.2hz,3h),7.18(d,j＝7.5hz,2h),6.27(s,1h),5.20(dd,j＝11.7,4.2hz,1h),3.54(td,j＝10.1,5.1hz,1h),2.04–1.87(m,3h),1.84–1.70(m,4h),1.68–1.39(m,11h),1.27(s,7h),1.22(s,3h),1.18(s,3h),1.15–1.09(m,1h),1.07–1.02(m,1h),0.98(s,3h),0.92(s,6h),0.89(s,3h),0.85(s,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.89,136.93,128.98,125.47,122.06,91.00,76.66,73.11,69.86,55.87,54.73,51.21,49.75,49.17,39.83,38.49,37.08,36.46,35.76,34.78,33.04,31.13,30.58,29.70,27.92,27.15,25.19,23.29,19.43,18.14,17.39,17.02,16.29,16.18,15.64。
试验例1
体外抗aβ25-35诱导pc12细胞损伤的神经保护作用实验测试
使用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(mtt)分析法去评估了目标化合物对pc12细胞存活率的影响。将pc12细胞以1×105细胞/ml的密度接种在96孔板中的完全培养基中，并孵育24小时(100μl/孔)。然后，给药组加入不同浓度的目标化合物(50μl/孔)，其余组给予培养基50μl继续培养4小时。随后，给药组和模型组给予aβ25-35(20μm)，培养24小时。将20μlmtt(5g/l，pbs缓冲液)添加到每个孔中，并将细胞进一步孵育4小时。去除上清液后，加dmso(150μl/孔)并震荡15min。使用酶标仪(thermoscientific，ma，美国)，在波长570nm处测量光密度。
表1为人参二醇衍生物抑制aβ25-35诱导pc12细胞损伤的保护作用：
注：结果表示为平均值±标准差(n＝5)。#p<0.05、##p<0.01和###p<0.001与空白组相比较；*p<0.05、**p<0.01和***p<0.001与aβ诱导组相比较。