一种益生菌组合物及其在制备共病便秘抑郁症药物中的应用

1.本发明属于益生菌技术领域，特别涉及一种益生菌组合物及其在制备共病便秘抑郁症药物中的应用。


背景技术：

2.抑郁症是一类常见且危害极大的精神疾病。根据世界卫生组织的报告，2015年抑郁症病人约占总人口的4.4%，总患病人数高达3.22亿。尽管抑郁和便秘均可以独立发生，但研究表明这两者之间有很高的共病率。据报道57.7%的抑郁病人伴随便秘症状，其遭受便秘困扰的几率是普通人的1.8倍。患胃肠道疾病的病人也更容易患抑郁症，慢性便秘病人中抑郁症的流行率高达33%。可见，抑郁症患者人数巨大，且与便秘之间存在联系。
3.作用于单胺类神经递质系统的药物是目前临床上使用最广泛的抗抑郁药。这类抗抑郁药总体上能够减轻抑郁症状，但是不同病人使用抗抑郁药的临床表现显著差异。约30%患者使用该药物却收效甚微，甚至是对同一患者不同时期也无法维持稳定的药效。因而有必要开发新型的药物或者治疗手段，或者作为现有抗抑郁治疗的辅助手段。


技术实现要素：

4.本发明的目的是为了克服现有技术存在的益生菌改善病人抑郁症状效果差异较大的问题，提供了一种益生菌组合物及其在制备共病便秘抑郁症药物中的应用，所述益生菌组合物能够有效缓解共病便秘的抑郁症人群的抑郁症状。
5.本发明的目的是通过以下技术方案实现的：本发明提供一种动物双歧杆菌乳亚种u9，该菌株于2015年11月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，分类命名为动物双歧杆菌乳亚种 bifidobacterium animalis subsp. lactis,保藏编号为cgmcc no. 11560。
6.本发明提供一种副干酪乳杆菌l55，该菌株于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，分类命名为副干酪乳杆菌 lactobacillus paracasei,保藏编号为cgmcc no. 13996。
7.本发明提供一种鼠李糖乳杆菌ll23，该菌株于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，分类命名为鼠李糖乳杆菌lactobacillus rhamnosus,保藏编号为cgmcc no. 13994。
8.本发明提供一种青春双歧杆菌bq23，该菌株于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，分类命名为青春双歧杆菌bifidobacterium adolescentis,保藏编号为cgmcc no. 13999。
9.本发明提供一种嗜酸乳杆菌ra15，该菌株于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc，地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，分类命名为嗜酸乳杆菌lactobacillus acidophilus,保藏编号为cgmcc no. 13993。
10.本发明提供一种益生菌组合物，包括动物双歧杆菌乳亚种u9，副干酪乳杆菌l55，鼠李糖乳杆菌ll23，青春双歧杆菌bq23，嗜酸乳杆菌ra15，按照重量份数计组成为：动物双歧杆菌乳亚种u9
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1~10副干酪乳杆菌l55
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1~10鼠李糖乳杆菌ll23
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1~10青春双歧杆菌bq23
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1~10嗜酸乳杆菌ra15
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1~10；所述动物双歧杆菌乳亚种u9（bifidobacterium animalis subsp. lactis，u9），于2015年11月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 11560；所述副干酪乳杆菌l55（lactobacillus paracasei，l55），于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.13996；所述鼠李糖乳杆菌ll23（lactobacillus rhamnosus，ll23），于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.13994；所述青春双歧杆菌bq23（bifidobacterium adolescentis，bq23），于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 13999；所述嗜酸乳杆菌ra15（lactobacillus acidophilus，ra15），于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 13993。
11.一种益生菌产品，其包括上述的益生菌组合物以及食品、保健品或医学上可接受的载体、辅料或添加剂。
12.进一步的，所述益生菌产品中包括益生元。
13.进一步的，所述益生菌产品的剂型包括胶囊、片剂、颗粒剂、粉剂或缓释剂。
14.本发明的另一方面：所述益生菌组合物在制备共病便秘抑郁症药物中的应用。
15.本发明相比现有技术的有益效果为：虽然现有技术研究结果发现，益生菌可以改善病人的抑郁症状，但各个研究的效果差异很大，并且不同菌种间也存在很大区别。造成这些益生菌对抑郁症状作用效果差异的原因，一方面可能是益生菌自身的特点导致的，虽然某些健康相关的作用机制在多个益生菌属和物种中很常见，但一些功能可能是物种特异性的，甚至是菌株特异性的，或者也可能需要不同菌株之间的相互作用才能产生效果。另一方面，抑郁症本身是异质性很大的一类疾病，不同患者发作的病因或病理生理不尽相同，甚至同一患者在不同时间发作的原因也可能不同，社会心理应激和生理应激（例如产后抑郁）都可能导致不同的发病机制。本发明在现有研究的基础上，通过多种益生菌复配获得的益生菌组合物，能够有效缓解共病便秘的抑郁人群的抑郁症状。
具体实施方式
16.在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
17.本发明的发明人在研究的过程中巧妙地发现，采用动物双歧杆菌乳亚种u9，副干酪乳杆菌l55，鼠李糖乳杆菌ll23，青春双歧杆菌bq23和嗜酸乳杆菌ra15五种益生菌混合获得的益生菌组合物，替代现有单一益生菌干预抑郁症患者，能够有效缓解共病便秘的抑郁人群的抑郁症状。
18.以下将通过实施例对本发明进行详细描述。应当能够理解的是，以下实施例仅用于示例性地进一步详细解释和说明本发明的内容，而不用于限制本发明。
19.以下实施例中，动物双歧杆菌乳亚种u9，副干酪乳杆菌l55，鼠李糖乳杆菌ll23，青春双歧杆菌bq23和嗜酸乳杆菌ra15均由北京和益源生物技术有限公司提供。五株菌均保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。五株菌均来源与人体肠道。其他采用的化学试剂均购自正规化学试剂供应商，纯度为分析纯。
20.实施例1本实施例提供了一种益生菌组合物，所述组合物由动物双歧杆菌乳亚种（bifidobacterium animalis subsp. lactis）u9、副干酪乳杆菌副干酪乳杆菌（lactobacillus paracasei）l55、鼠李糖乳杆菌（lactobacillus rhamnosus）ll23、青春双歧杆菌（bifidobacterium adolescentis）bq23、和嗜酸乳杆菌（lactococcus acidophilus）ra15组成，每份菌粉重2g，每种菌含量为3
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cfu；所述动物双歧杆菌乳亚种u9，于2015年11月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 11560；所述副干酪乳杆菌l55，于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.13996；所述鼠李糖乳杆菌ll23，于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.13994；所述青春双歧杆菌bq23，于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 13999；所述嗜酸乳杆菌ra15，于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 13993。
21.测试例为了探究实施1所述益生菌组合物对共病便秘的抑郁人群的作用，本测试例开展了随机双盲试验对抑郁病人进行益生菌干预。
22.参照国际医药法规协和会制定的良好临床操作规范，通过了中国农业大学人体研究伦理委员会的审查，并在该伦理委员会监督下完成。该研究应该按照操作指导完成。本研究的实验方案和受试者知情同意书等材料都在研究开始之前得到伦理委员的批准（伦理审批号：cauhr
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2018029）。
23.参与本研究的患者符合以下条件：
a)18至60岁，性别不限；b)符合中国精神疾病分类方案与诊断标准（ccmd）抑郁发作诊断标准；c)汉密尔顿抑郁量表（hamd，17项）≥8分；d)理解并自愿参加本试验，签署知情同意书。
24.且参与本研究的患者无以下情况：a)有严重的或不稳定的心、肝、肾、内分泌、消化、血液等躯体疾病；b)在过去的一年药物或酒精滥用；c)妊娠、哺乳期妇女或近期计划妊娠者本研究拟招募抑郁症患者60名，实际招募抑郁症患者63名，共53人完成实验，全部来自北京市平谷中医医院。
25.根据筛选标准招募符合《中国精神疾病分类方案与诊断标准》（ccmd）诊断标准抑郁症患者。符合条件的受试者签署知情同意书后入组，随机分为益生菌组（益生菌组）和安慰剂组（安慰剂组）。入组的患者需进行为期1周的排空期，排空期间不能食用任何益生菌产品（包括酸奶，益生菌片剂、粉剂、胶囊）。排空期结束后，对受试者进行汉密尔顿抑郁量表（hamilton's depression scale, hamd）评估其抑郁程度，进行便秘患者自评量表（pac
‑
sym）的评价，评估受试者便秘症状，筛查共病便秘人群，同时记录受试者的人口资料、病史、以及药物治疗情况。
26.干预期共2个月，期间每天服用实施例1所述由5种益生菌菌粉形成的益生菌组合物或者安慰剂。干预期间受试者将继续正常的饮食但不能食用其它发酵乳制品。受试者每天填写日志，内容包括服用情况、排便情况。干预期结束时，再次对受试者进行hamd和pac
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sym，评估其抑郁和便秘症状的程度。
27.为研究益生菌对便秘相关的抑郁人群的影响，开展了用益生菌干预共病便秘的抑郁人群的随机设盲人群实验。共有63人符合条件参与研究，人群随机分入益生菌组或安慰剂组，53人完成实验。两组间年龄、性别构成无显著差异（表1）。其中有27人满足rome iii便秘诊断标准（符合以下两项或以上可诊断为便秘：至少25%的排便感到费力；至少25%的排便为干球状便或硬便；至少25%的排便有不尽感；至少25%的排便有肛门直肠梗阻感；至少25%的排便需要帮助；每周排便小于3次）。
28.表1 人群基本情况1、益生菌对共病便秘的抑郁人群抑郁症状的作用在进行干预后，安慰剂组和益生菌组汉密尔顿抑郁量表（hamd）评分比基线期有显著降低。在基线期，益生菌组hamd评分与安慰剂组无差异；而干预后益生菌组hamd评分显著低于安慰剂组（15.6
±
8.5 vs 20.5
±
8.6，p<0.05）（表2）。进一步分析便秘和非便秘抑郁人群对益生菌干预的响应。可以看到基线期，便秘的抑郁人群hamd评分显著高于非便秘人群，但是益生菌组和安慰剂组无显著差异，因此这种差异不影响实验的质量。共病便秘抑郁病
人益生菌干预后hamd评分较安慰剂组显著降低（14.2
±
8.0 vs 22.9
±
9.9，p<0.05），而不共病便秘的抑郁病人益生菌干预后hamd评分较安慰剂组无显著差异。
29.表2 益生菌对共病便秘抑郁患者hamd抑郁评分的影响注：*与安慰剂组相比有显著差异，p<0.05。
30.2、益生菌对共病便秘的抑郁病人便秘症状的作用对共病便秘的人群，本研究还用便秘患者自评量表（pac
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sym）评价了便秘症状。pac
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sym共有12项，可分为3类症状：腹部症状（4项，包括腹部不适；腹部疼痛；腹部肿胀；胃痉挛），直肠症状（3项，包括排便疼痛；排便期间或之后直肠灼烧；大便后直肠撕裂或出血）和粪便症状（5项，包括排便不尽感；排便困难；大便过少；用力或挤压以排便；有便意但排不出），是临床上常用的量表，能有效评价便秘的程度。益生菌干预对于抑郁便秘病人pac
‑
sym评分如表3所示。益生菌干预后，粪便症状评分低于安慰剂组（7.17
±
4.38 vs 11.33
±
3.21，p<0.05），较干预前也由明显降低；益生菌组腹部症状和直肠症状较安慰剂组无显著差异；益生菌组pac
‑
sym总评分较安慰剂组差异显著（8.8
±
5.47vs 15.33
±
5.03，p<0.05）。可见益生菌对合并便秘的抑郁病人便秘症状有明显的改善作用，特别是对粪便症状有显著效果。
31.表3 益生菌对共病便秘的抑郁人群pac
‑
sym便秘评分的影响注：*与安慰剂组相比有显著差异，p<0.05。
32.以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。