技术特征：
1.禽流感h9n2亚型病毒毒株，其特征在于：其被命名为甲型流感病毒fz株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为cctcc no:v 202171，保藏日期为2021年9月26日。2.一种h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗，其特征在于，其包括抗原和疫苗佐剂。3.如权利要求2所述的h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗，其特征在于，所述抗原为灭活抗原，其包括灭活的甲型流感病毒fz株和灭活的滑液囊支原体ms-fj01；其中，甲型流感病毒fz株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为cctcc no:v 202171，保藏日期为2021年9月26日；滑液囊支原体ms-fj01已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为cctcc no:m 2021210，保藏日期为2021年3月8日。4.如权利要求3所述的h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗，其特征在于，所述甲型流感病毒fz株和滑液囊支原体ms-fj01采用甲醛灭活。5.如权利要求3或4所述的h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：1)将甲型流感病毒fz株用灭菌pbs做1000倍稀释接种于9～11日龄spf鸡胚尿囊腔中，置于37℃孵育，48h后收获鸡胚病毒尿囊液，利用1％鸡红细胞做血凝试验，无菌收集ha效价≥256的病毒尿囊液，再保存于-80℃环境下；然后取用ph值为7.6～7.8的鸡滑液囊支原体培养基，以10比1的比例加入滑液囊支原体ms-fj01，然后置于培养温度为37℃、振荡速度为180r/min的环境下，培养至对数期，即菌液变成橙黄后，再置于4℃保存；2)抗原灭活：向步骤1)制得的鸡胚病毒尿囊液中加入终浓度为0.1％的甲醛溶液，随加随摇，使其充分混合；然后置于37℃恒温摇床中以200～220r/min摇荡灭活12小时后取出，置4℃环境下保存备用；将含有滑液囊支原体ms-fj01的菌液置于超高数离心机中离心处理菌液，使其浓缩至每毫升活菌含量不低于5
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ccu，浓缩后立即在浓缩的菌液中加入终浓度0.2％的甲醛，并在培养温度为37℃、振荡速度为180r/min的条件下，震荡灭活24小时；3)以1：1：5.62的比例分别加入步骤2)灭活的甲型流感病毒fz株病毒液、滑液囊支原体ms-fj01菌液和疫苗佐剂，使用hr-500分散乳化机逐渐从a档到d档开始乳化，令其在低温条件下以15000r/min乳化30分钟。6.如权利要求3或4所述的h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述鸡滑液囊支原体培养基的制备方法为：取脑心浸出液肉汤21g、酵母浸出粉5.6g、1wt％的酚红溶液2ml、50mg/ml的l-半胱氨酸溶液2ml、50mg/ml的精氨酸溶液8ml和250mg/ml的辅酶i溶液0.4ml进行混合，然后定容至900ml，加入灭活的胎牛血清100ml、添加80万单位/l的青霉素，调整ph至7.6～7.8，最后使用0.22μm过滤器过滤至无菌的容器中完成制备。7.甲型流感病毒fz株和滑液囊支原体ms-fj01在制备禽流感病毒诊断用阳性血清试剂中的应用。8.一种禽类二联灭活疫苗，其特征在于，其包括权利要求2至4之一所述的h9n2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗。
技术总结
本发明公开了一种H9N2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的二联灭活疫苗，其包括抗原和疫苗佐剂，其中抗原为灭活的甲型流感病毒FZ株与滑液囊支原体MS-FJ01；FZ株与MS-FJ01株均属于福建省典型代表性毒株；本方案的二联灭活疫苗能够诱导鸡产生较高水平的H9N2亚型禽流感抗体和滑液囊支原体抗体，且抗体持续期长，免疫后可有效降低免疫鸡H9N2亚型禽流感病毒的排毒，可使鸡滑液囊支原体的发病率明显减少，能够同时且有效的预防H9N2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体的流行。目前国内尚无H9N2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体二联灭活疫苗上市，本方案的H9N2亚型禽流感和鸡滑液囊支原体二联灭活疫苗可以有效的防控这两种禽病，同时也能弥补当前禽类市场空缺。类市场空缺。类市场空缺。
技术研发人员：陈吉龙 颜世红 李训良 王松
受保护的技术使用者：福建农林大学
技术研发日：2021.10.12
技术公布日：2022/2/8