嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法与流程

1.本发明属于降解菌剂制备技术领域，具体为嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法。


背景技术：

2.现有生活中，全国畜禽粪污年产生量约38亿吨，大规模的畜禽粪污，是巨大有机质和养分资源，但如处理不好，将会给环境和居民生活带来严重负面影响，而目前畜禽粪污处理与资源化利用主要有三种模式，即能源化利用、肥料化利用和工业化处理，其中能源化利用和肥料化利用是主要方向，近年来，我国畜禽养殖废弃物处理和资源化利用工作取得了一些成效，但全面实现畜禽粪污能源化、肥料化利用还面临不少实际困难，目前，将畜禽粪污通过好氧发酵制成有机肥为目前资源化利用畜禽粪污的主要方式之一，但畜禽粪便成分复杂，含蛋白质、脂肪类、有机酸、纤维素、半纤维素以及无机盐等成分组成，目前依靠单一菌种或简单组合的复合菌群，降解不充分且速度慢，因此，开发具有高效降解畜禽养殖废弃物功能的微生物复合菌群是目前研究的重点。
3.但是现有的畜禽粪污降解菌剂在进行使用时，大都不具有嗜高温的功能特点，在高温发酵的过程中极易破坏降解菌剂的内部组成结构，从而严重的影响了降解菌剂的使用效果，同时现有的畜禽粪污降解菌剂大都是依靠单一菌种或简单组合的复合菌群，无法达到预期的降解效果与降解速度，不利于实际的应用。


技术实现要素：

4.本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法，解决了背景技术中提到的问题。
5.为了解决上述问题，本发明提供了一种技术方案：
6.嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法，包括以下步骤：
7.s1、按重量份称取菌类组合物原料；
8.s2、将称取的菌类组合物原料接种至液体培养基中，并在一定温度环境下以一定转速振荡通气持续培养一段时间后，得到培育菌液；
9.s3、将得到的培育菌液置于发酵室中进行发酵，发酵完成之后提取上清液；
10.s4、取发酵完成之后提取的上清液，用无菌水调od值，使各菌液的浓度都相同；
11.s5、按重量份称取12
‑
15份的米曲霉，并将其加入调od值之后的上清液中，同时进行充分搅拌，使其溶解，得到混合液一；
12.s6、按重量份称取3
‑
6份的嗜热脂肪土芽孢杆菌b5，并将其加入混合液一中充分搅拌，然后加入凝胶，冷却，即得嗜高温畜禽粪污降解菌剂。
13.作为优选，所述步骤s1中的菌类组合物原料通过如下重量份的原料制备而成：枯草芽孢杆菌12
‑
17份、解淀粉芽孢杆菌5
‑
8份、粪肠球菌10
‑
12份、硅酸盐细菌8
‑
12份、抗生菌2
‑
3份、圆褐固氮菌8
‑
11份、凝结芽孢杆菌3
‑
6份、放线菌1
‑
2份。
14.作为优选，所述步骤s2中的采用的液体培养基为lb液体培养基。
15.作为优选，所述步骤s2中培育菌液的制备过程为：在25
‑
31℃温度环境下以60
‑
95r/min的转速振荡通气持续培养12
‑
15小时。
16.作为优选，所述步骤s3中的发酵时间为36
‑
45小时，发酵室内温度为32
‑
43℃。
17.作为优选，所述步骤s4中使各菌液的浓度均在108‑
109cfu/m。
18.作为优选，所述步骤s5中充分搅拌的时间为5
‑
8min。
19.作为优选，所述步骤s6中充分搅拌的时间为2
‑
4min。
20.本发明的有益效果是：本发明通过采用多种菌类组合物作为基料，并配合嗜热脂肪土芽孢杆菌b5，从而使得制备得到的畜禽粪污降解菌剂具有嗜高温的功能特点，同时摆脱了传统降解菌剂降解不充分且降解速度慢的缺点，能够达到预期的降解效果与降解速度，有利于实际的应用。
具体实施方式：
21.本具体实施方式采用以下技术方案：
22.嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法，包括以下步骤：
23.s1、按重量份称取菌类组合物原料；
24.s2、将称取的菌类组合物原料接种至液体培养基中，并在一定温度环境下以一定转速振荡通气持续培养一段时间后，得到培育菌液；
25.s3、将得到的培育菌液置于发酵室中进行发酵，发酵完成之后提取上清液；
26.s4、取发酵完成之后提取的上清液，用无菌水调od值，使各菌液的浓度都相同；
27.s5、按重量份称取12
‑
15份的米曲霉，并将其加入调od值之后的上清液中，同时进行充分搅拌，使其溶解，得到混合液一；
28.s6、按重量份称取3
‑
6份的嗜热脂肪土芽孢杆菌b5，并将其加入混合液一中充分搅拌，然后加入凝胶，冷却，即得嗜高温畜禽粪污降解菌剂。
29.其中，所述步骤s1中的菌类组合物原料通过如下重量份的原料制备而成：枯草芽孢杆菌12
‑
17份、解淀粉芽孢杆菌5
‑
8份、粪肠球菌10
‑
12份、硅酸盐细菌8
‑
12份、抗生菌2
‑
3份、圆褐固氮菌8
‑
11份、凝结芽孢杆菌3
‑
6份、放线菌1
‑
2份。
30.其中，所述步骤s2中的采用的液体培养基为lb液体培养基。
31.其中，所述步骤s2中培育菌液的制备过程为：在25
‑
31℃温度环境下以60
‑
95r/min的转速振荡通气持续培养12
‑
15小时。
32.其中，所述步骤s3中的发酵时间为36
‑
45小时，发酵室内温度为32
‑
43℃。
33.其中，所述步骤s4中使各菌液的浓度均在108‑
109cfu/m。
34.其中，所述步骤s5中充分搅拌的时间为5
‑
8min。
35.其中，所述步骤s6中充分搅拌的时间为2
‑
4min。
36.实施例一、嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法，包括以下步骤：
37.s1、按重量份称取菌类组合物原料；
38.s2、将称取的菌类组合物原料接种至lb液体培养基中，并在25℃温度环境下以60r/min的转速振荡通气持续培养12小时后，得到培育菌液；
39.s3、将得到的培育菌液置于发酵室中进行发酵，发酵时间为36小时，发酵室内温度
为32℃，发酵完成之后提取上清液；
40.s4、取发酵完成之后提取的上清液，用无菌水调od值，使各菌液的浓度都相同，均在108cfu/m；
41.s5、按重量份称取12份的米曲霉，并将其加入调od值之后的上清液中，同时进行充分搅拌5min，使其溶解，得到混合液一；
42.s6、按重量份称取3份的嗜热脂肪土芽孢杆菌b5，并将其加入混合液一中充分搅拌2min，然后加入凝胶，冷却，即得嗜高温畜禽粪污降解菌剂。
43.其中，菌类组合物原料通过如下重量份的原料制备而成：枯草芽孢杆菌12份、解淀粉芽孢杆菌5份、粪肠球菌10份、硅酸盐细菌8份、抗生菌2份、圆褐固氮菌8份、凝结芽孢杆菌3份、放线菌1份。
[0044][0045]
实施例二、嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法，包括以下步骤：
[0046]
s1、按重量份称取菌类组合物原料；
[0047]
s2、将称取的菌类组合物原料接种至lb液体培养基中，并在31℃温度环境下以95r/min的转速振荡通气持续培养15小时后，得到培育菌液；
[0048]
s3、将得到的培育菌液置于发酵室中进行发酵，发酵时间为45小时，发酵室内温度为43℃，发酵完成之后提取上清液；
[0049]
s4、取发酵完成之后提取的上清液，用无菌水调od值，使各菌液的浓度都相同，均在109cfu/m；
[0050]
s5、按重量份称取15份的米曲霉，并将其加入调od值之后的上清液中，同时进行充分搅拌8min，使其溶解，得到混合液一；
[0051]
s6、按重量份称取6份的嗜热脂肪土芽孢杆菌b5，并将其加入混合液一中充分搅拌4min，然后加入凝胶，冷却，即得嗜高温畜禽粪污降解菌剂。
[0052]
其中，菌类组合物原料通过如下重量份的原料制备而成：枯草芽孢杆菌17份、解淀粉芽孢杆菌8份、粪肠球菌12份、硅酸盐细菌12份、抗生菌3份、圆褐固氮菌11份、凝结芽孢杆菌6份、放线菌2份。
[0053][0054]
实施例三、嗜高温畜禽粪污降解菌剂的制作方法，包括以下步骤：
[0055]
s1、按重量份称取菌类组合物原料；
[0056]
s2、将称取的菌类组合物原料接种至lb液体培养基中，并在28℃温度环境下以80r/min的转速振荡通气持续培养13小时后，得到培育菌液；
[0057]
s3、将得到的培育菌液置于发酵室中进行发酵，发酵时间为40小时，发酵室内温度为37℃，发酵完成之后提取上清液；
[0058]
s4、取发酵完成之后提取的上清液，用无菌水调od值，使各菌液的浓度都相同，均在109cfu/m；
[0059]
s5、按重量份称取14份的米曲霉，并将其加入调od值之后的上清液中，同时进行充分搅拌7min，使其溶解，得到混合液一；
[0060]
s6、按重量份称取5份的嗜热脂肪土芽孢杆菌b5，并将其加入混合液一中充分搅拌3min，然后加入凝胶，冷却，即得嗜高温畜禽粪污降解菌剂。
[0061]
其中，菌类组合物原料通过如下重量份的原料制备而成：枯草芽孢杆菌15份、解淀粉芽孢杆菌6份、粪肠球菌11份、硅酸盐细菌9份、抗生菌3份、圆褐固氮菌10份、凝结芽孢杆菌4份、放线菌2份。
[0062][0063]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。