技术特征：
1.一种猪圆环病毒3型cap重组蛋白的编码基因，其特征是：将pcv3 orf2基因中表达第60-120位氨基酸的基因片段删除而得。2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白的编码基因，其特征是：该基因的序列如seq id no.2所示。3.一种重组质粒，其特征是：含有权利要求1或2所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白的编码基因；优选的，所述重组质粒由权利要求1或2所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白的编码基因和pet32a载体重组而得。4.一种猪圆环病毒3型cap重组蛋白，其特征是：由权利要求3所述的重组质粒表达而得；优选的，所述猪圆环病毒3型cap重组蛋白通过将权利要求3所述的重组质粒转化至rosseta感受态细胞，然后iptg诱导表达而得。5.根据权利要求4所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白，其特征是：其氨基酸序列如seq id no.4所示。6.一种pcv3猪多克隆抗体，其特征是按照下述方法制得：（1）以纯化的权利要求4或5所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白为抗原，用其对猪进行免疫，每隔3周加强免疫一次；（2）待猪血清中抗体的效价大于1:10000时取猪血，分离血清，将血清离心后取上清液，即为pcv3猪多克隆抗体。7.根据权利要求6所述的pcv3猪多克隆抗体，其特征是：将纯化的猪圆环病毒3型cap重组蛋白先用pbs稀释成2 mg/ml，然后与等体积的isa-206佐剂混合后充分乳化，然后再对猪进行免疫。8.根据权利要求6所述的pcv3猪多克隆抗体，其特征是：每头猪的免疫剂量为1mg猪圆环病毒3型cap重组蛋白。9.一种pcv3 间接elisa抗体检测试剂盒，其特征是：包括包被权利要求4或5所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白的酶标板。10.一种pcv3 的间接elisa抗体检测方法，其特征是：包括采用纯化的权利要求4或5所述的猪圆环病毒3型cap重组蛋白包被酶标板的步骤。
技术总结
本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用，本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60-120aa的基因片段删除，得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因，将该编码基因克隆至pET32a，再转化至Rosseta感受态细胞，经IPTG诱导表达，可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达，可与His标签抗体结合，采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫，可以得到多克隆抗体，该多克隆抗体效价高，与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板，对PCV3进行间接ELISA抗体检测，具有敏感性、特异性和重复性好等优势。性和重复性好等优势。性和重复性好等优势。
技术研发人员：白娟 李勇 姜辰龙 姜平 周而璇
受保护的技术使用者：南京农业大学
技术研发日：2019.01.18
技术公布日：2022/2/8