技术特征：
1.一种靶向球虫mic3基因的sgrna，其特征在于，所述靶向球虫mic3基因的sgrna的靶点位于mic3基因。2.一种球虫mic3基因编辑系统，其特征在于，所述球虫mic3基因编辑系统包括权利要求1所述的靶向球虫mic3基因的sgrna。3.根据权利要求2所述的球虫mic3基因编辑系统，其特征在于，所述球虫mic3基因编辑系统还包括cas9。4.根据权利要求2所述的球虫mic3基因编辑系统，其特征在于，所述球虫mic3基因编辑系统还包括同源重组质粒。5.根据权利要求4所述的球虫mic3基因编辑系统，其特征在于，所述同源重组质粒中包括筛选标记基因；优选地，所述筛选标记基因包括荧光标记基因。6.一种敲除球虫mic3基因的重组球虫载体，其特征在于，所述重组球虫载体含有权利要求1所述的靶向球虫mic3基因的sgrna。7.根据权利要求6所述的敲除球虫mic3基因的重组球虫载体，其特征在于，所述重组球虫载体含有权利要求2～5任一项所述的球虫mic3基因编辑系统。8.根据权利要求7所述的敲除球虫mic3基因的重组球虫载体，其特征在于，所述重组球虫载体为经过权利要求2～5任一项所述的球虫mic3基因编辑系统编辑后，在球虫mic3基因中整合了所述荧光标记基因的球虫载体。9.一种权利要求6～8任一项所述的重组球虫载体的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括pcr扩增检测和/或荧光检测。10.根据权利要求9所述的重组球虫载体的检测方法，其特征在于，所述pcr扩增检测的靶点基因包括荧光标记基因；优选地，所述荧光检测包括根据所述重组球虫载体的荧光进行检测。
技术总结
本发明提供一种敲除MIC3基因的重组球虫载体及其检测方法，属于基因工程技术领域。本发明提供一种靶向球虫MIC3基因的sgRNA，所述靶向球虫MIC3基因的sgRNA的靶点位于MIC3基因；由sgRNA、Cas9和同源重组质粒建立基因编辑系统，可精确地敲除球虫MIC3基因并同源重组荧光标记蛋白于MIC3基因，构建一种表达荧光标记蛋白的重组球虫载体。所述重组球虫载体的DNA经过PCR检测和测序，表明荧光标记基因已成功重组于MIC3基因，且重组球虫载体在荧光显微镜下具有明显的荧光信号，表明其已成功敲除MIC3基因并表达荧光标记蛋白。基因并表达荧光标记蛋白。基因并表达荧光标记蛋白。
技术研发人员：林瑞庆 方园婷 周德荣 翁亚彪 陆肖 蔡晓懿 孟甜 王瑞珍
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：2021.12.09
技术公布日：2022/3/11