脂肪干细胞制备培养瓶的制作方法

1.本实用新型属于培养瓶技术领域，更具体地说，是涉及一种脂肪干细胞制备培养瓶。


背景技术：

2.脂肪干细胞(adipose-derived stem cells，简写为adscs)是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。脂肪组织在人体内储量丰富，通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞，有自我更新增殖及多向分化潜能，是目前干细胞临床研究及组织工程学的重要研究对象和实验材料，在临床治疗及医疗整形行业都有着广泛的应用前景。
3.目前，传统的脂肪干细胞制备方法如下：
4.分装：在脂肪无菌采集后，将样本液分装于密闭容器中；
5.震荡清洗：在密闭容器中以缓冲液震荡清洗，清洗后静置分层，再用移液管吸去下层的洗液，多次重复以上步骤以获得较为纯净的脂肪组织；
6.组织消化：组织移入摇瓶或其他密闭容器，加足量胶原酶，恒温摇床震荡消化1-1.5h，由于脂肪组织密度较小，震荡期间需每间隔10min左右剧烈震荡摇瓶确保胶原酶与组织充分接触，确保消化效率。消化后组织悬液离心，保留底层细胞沉淀，弃掉其他液相，即可获得脂肪干细胞原代细胞，培养基重悬后即可置于培养瓶内培养，经传代培养即可获得大量脂肪干细胞。
7.上述制备过程操作繁琐，制备及培养过程分离，容器更换频繁，大大增加了因操作过程导致污染的风险。


技术实现要素：

8.本实用新型的目的在于提供一种脂肪干细胞制备培养瓶，能够减少样本液的转移过程，便于提高制备效率，保证制备质量。
9.为实现上述目的，本实用新型采用的技术方案是：提供一种脂肪干细胞制备培养瓶，包括：
10.瓶体，上端设有瓶口，瓶体具有用于容纳样本液的容纳腔，容纳腔的下部为锥形腔；
11.瓶盖，可拆卸连接于瓶口上；
12.排液管，连接于瓶体的下部，且与容纳腔连通，排液管的出口端设有封盖。
13.在一种可能的实现方式中，瓶体具有两个相对设置且互相平行的平面侧壁，瓶体在平面侧壁上投影面积大于瓶体的横截面面积。
14.一些实施例中，锥形腔自上而下向靠近其中一个平面侧壁的一侧倾斜。
15.一些实施例中，瓶体内还设有位于锥形腔下方的空置腔，空置腔内设有向锥形腔一侧延伸、并与锥形腔的外底壁相连的支撑梁。
16.一些实施例中，瓶口自下而上向远离锥形腔的一侧倾斜延伸。
17.在一种可能的实现方式中，瓶体的水平投影为长方形，瓶体的两侧壁及其中一个平面侧壁的下部分别向另一个平面侧壁的中轴倾斜并形成四棱锥形腔，排液管连接于四棱锥形腔的上缘。
18.在一种可能的实现方式中，瓶体具有两个向外弧形起拱的弧形壁，弧形壁位于两个平面侧壁之间，两个弧形壁及其中一个平面侧壁分别向另一个平面侧壁的中轴倾斜并形成半圆锥形腔，排液管连接于半圆锥形腔的上缘。
19.在一种可能的实现方式中，瓶体的侧壁上设有用于收拢并容纳排液管的放置腔，排液管能够弯折收拢并卡接于放置腔内。
20.一些实施例中，排液管上还设有用于控制排液管打开或截断的排液夹。
21.在一种可能的实现方式中，瓶盖为透气盖或者密封盖。
22.本技术实施例所示的方案，与现有技术相比，本技术实施例提供的脂肪干细胞制备培养瓶，向瓶体内的容纳腔中注入样本液后加入缓冲液进行震荡清洗后，锥形腔内可聚集下层洗液，倾斜瓶体以借助排液管排出洗液，省去了传统操作中反复移液的繁琐，后续加入胶原酶进行组织消化处理并利用锥形腔进行底层细胞的收集，上层液体可通过排液管方便地排出，上述结构省去了样本液在多个容器中转移的繁琐操作，降低了转移造成的污染几率，保证了脂肪干细胞的制备质量。
附图说明
23.为了更清楚地说明本实用新型实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
24.图1为本实用新型实施例提供的脂肪干细胞制备培养瓶实施例一的结构示意图；
25.图2为本实用新型实施例图1中a-a的剖视结构示意图；
26.图3为本实用新型实施例图1中ⅰ的局部放大结构示意图；
27.图4为本实用新型实施例图1中脂肪干细胞制备培养瓶躺卧状态的局部剖视结构示意图；
28.图5为本实用新型实施例图4中b-b的旋转剖视结构示意图(旋转至直立状态)；
29.图6为本实用新型实施例提供的脂肪干细胞制备培养瓶实施例二的结构示意图；
30.图7为本实用新型实施例图6中c-c的剖视结构示意图；
31.图8为本实用新型实施例图6中脂肪干细胞制备培养瓶躺卧状态的局部剖视结构示意图；
32.图9为本实用新型实施例图8中d-d的旋转剖视结构示意图(旋转至直立状态)。
33.其中，图中各附图标记：
34.1、瓶体；11、瓶口；12、容纳腔；13、四棱锥形腔；14、空置腔；15、支撑梁；16、半圆锥形腔；17、弧形壁；18、放置腔；2、瓶盖；3、排液管；31、封盖；32、排液夹。
具体实施方式
35.为了使本实用新型所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以
下结合附图及实施例，对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。
36.需要说明的是，当元件被称为“设置于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者间接在另一个元件上。需要理解的是，术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更若干个该特征。在本实用新型的描述中，“若干个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
37.请一并参阅图1及至图9，现对本实用新型提供的脂肪干细胞制备培养瓶进行说明。脂肪干细胞制备培养瓶，包括瓶体1、瓶盖2以及排液管3；瓶体1的上端设有瓶口11，瓶体1具有用于容纳样本液的容纳腔12，容纳腔12的下部为锥形腔；瓶盖2可拆卸连接于瓶口11上；排液管3连接于瓶体1的下部，且与容纳腔12连通，排液管3的出口端设有封盖31。
38.需要说明的是，在制备脂肪干细胞时，瓶体1内容纳的是脂肪组织悬液，为了便于描述后续统称为样本液。样本液置入瓶体1内后，加入缓冲液进行震荡清洗，然后静置分层，洗液位于容纳腔12的下部，样本液悬浮在洗液上方，通过倾斜瓶体1，借助排液管3将洗液排出瓶体1外部。之后，向瓶体1内加入胶原酶，并放置瓶体1至恒温摇床上进行震荡，实现组织消化处理过程，利用瓶体1底部的锥形腔进行离心处理，离心后组织细胞沉淀在瓶体1内的锥形腔内，通过排液管3将上层的样本液排出，完成整个操作过程。上述清洗、组织消化和离心处理多个工序在瓶体1内顺次完成，省去了更换容器的繁琐，降低了样本液污染的几率。
39.本实施例提供的脂肪干细胞制备培养瓶，与现有技术相比，本实施例提供的脂肪干细胞制备培养瓶，向瓶体1内的容纳腔12中注入样本液后加入缓冲液进行震荡清洗后，锥形腔内可聚集下层洗液，倾斜瓶体1以借助排液管3排出洗液，省去了传统操作中反复移液的繁琐，后续加入胶原酶进行组织消化处理并利用锥形腔进行底层细胞的收集，上层液体可通过排液管3方便地排出，上述结构省去了样本液在多个容器中转移的繁琐操作，降低了转移造成的污染几率，保证了脂肪干细胞的制备质量。
40.一些可能的实现方式中，上述特征瓶体1采用如图2和图7所示结构。参见图2和图7，瓶体1具有两个相对设置且互相平行的平面侧壁，瓶体1在平面侧壁上投影面积大于瓶体1的横截面面积。
41.在利用恒温摇床对样本液进行低速震荡消化时，为了增大恒温摇床的容纳能力，利将瓶体1横卧放置，瓶体1上两个互相平行的平面侧壁可以提高叠放的层数，实现多层码放，提高了摇床的空间利用率。
42.进一步的，瓶体1直立时的纵向截面的面积大于瓶体1的横截面面积，在瓶体1借助平面侧壁躺卧时，能够增大脂肪层与胶原酶溶液层的接触面积，提高消化效率，省去中间剧烈震荡的操作，有效简化操作过程。
43.在一些实施例中，上述特征锥形腔可以采用如图4和图8所示结构。参见图4和图8，锥形腔自上而下向靠近其中一个平面侧壁的一侧倾斜。锥形腔的下端收拢至其中一个平面
侧壁上，不仅可以满足样本液离心分离、细胞收集的要求，在瓶体1躺卧状态下还可以借用锥形腔较大的截面积，使得样本液尽可能的靠近恒温摇床的下部，避免低速震荡中瓶体1因重心不稳造成的掉落，保证操作的顺利进行。
44.在一些实施例中，参见图4和图5，瓶体1内还设有位于锥形腔下方的空置腔14，空置腔14内设有向锥形腔一侧延伸、并与锥形腔的外底壁相连的支撑梁15。
45.为了减少瓶体1制作时材料的消耗量，在瓶体1底部也就是在四棱锥形腔13的下部设置了空置腔14，该中空结构可节省材料耗用，同时，为了保证瓶体1下部的整体强度，还在空置腔14内设置了支撑梁15，支撑梁15可对四棱锥形腔13的底壁进行有效支撑，避免样本液重量过大造成的锥形腔的底壁变形，保证了瓶体1储存样本液的能力。
46.在一些实施例中，上述特征瓶口11可以采用如图4和图9所示结构。参见图4和图9，瓶口11自下而上向远离锥形腔的一侧倾斜延伸，在瓶体1躺卧时，使得瓶口11处于向上延伸的状态，能够最大限度的避免震荡过程中样本液从瓶体1内漏洒出来，避免样本液的损耗，同时也避免对恒温摇床造成污染。
47.另外，瓶口11向上倾斜延伸的结构，可使瓶口11在震荡过程中对样本也具有一定的缓冲效果，避免瓶盖2所受冲击力过大造成的漏液问题，保证了消化过程的顺利进行。
48.一些可能的实现方式中，上述特征瓶体1采用如图2所示结构。参见图2，瓶体1的水平投影为长方形，瓶体1的两侧壁及其中一个平面侧壁的下部分别向另一个平面侧壁的中轴倾斜并形成四棱锥形腔13，排液管3连接于四棱锥形腔13的上缘。
49.本实施例中，瓶体1的投影水平投影为长方形，也就是瓶体1为长方体结构。形成锥形腔的三个相邻侧壁收拢至其中一个平面侧壁的竖向中轴处，使得锥形腔形成四棱锥形腔13，便于清洗过程中洗液的聚集，可以利用排液管3方便的排出洗液。
50.四棱锥形腔13用于容纳分离后的细胞，为了避免细胞进入排液管3造成损耗，将排液管3设置在四棱锥形腔13的上缘，在排放洗液时，可将瓶体1倾斜，使得下层洗液聚集在四棱锥形腔13和容纳腔12的衔接处，并靠近排液管3的拐点位置，可方便地将洗液排出，提高操作效率。
51.一些可能的实现方式中，上述特征瓶体1采用如图6和图7所示结构。参见图6和图7，瓶体1具有两个向外弧形起拱的弧形壁17，弧形壁17位于两个平面侧壁之间，两个弧形壁17及其中一个平面侧壁分别向另一个平面侧壁的中轴倾斜并形成半圆锥形腔16，排液管3连接于半圆锥形腔16的上缘。
52.本实例中，瓶体1具有两个平行设置的平面侧壁，两个平面侧壁通过两个弧形壁17相连，使瓶体1的上部横截面形成长圆形结构，该结构满足瓶体1躺卧的需求，同时也能够与离心杯相适配，便于后续的离心操作。
53.进一步的，两个弧形壁17和其中一个平面侧壁向另一个平面侧壁的纵向中轴出聚拢，形成半圆锥形腔16，该半圆锥形腔16的倾斜方向与瓶口11的倾斜方向相反，使瓶体1躺平时样本也处于贴近与恒温摇床的下部，便于保证震荡过程中瓶体1的稳定性。上述半圆锥形腔16的设置便于实现后续的离心分离，能够有效容纳底层沉淀，上部液体则可通过排液管3轻松排出。
54.一些可能的实现方式中，为了便于进行排液管3的放置。参见图6，瓶体1的侧壁上设有用于收拢并容纳排液管3的放置腔18，排液管3能够弯折收拢并卡接于放置腔18内。
55.排液管3连接在瓶体1的外侧，与容纳腔12相连通，便于洗液向外排放。在瓶体1的侧壁上设置了可以收拢并安置排液管3的放置腔18，放置腔18位于瓶体1的下部外侧。由于下部的锥形腔占用的空间较小，所以在瓶体1的外侧形成较大的空间，瓶体1的下部侧壁可以向瓶体1内侧凹陷形成用于放置排液管3的放置腔18。
56.瓶体1在恒温摇床上进行消化反应时，可将排液管3收拢在放置腔18内，避免多个瓶体1在叠层放置时造成的位置干涉。此时，排液管3可采用弯折收拢的放置放置在放置腔18内，减少空间的占用。
57.在一些实施例中，在利用排液管3进行洗液排放的基础上，参见图6，排液管3上还设有用于控制排液管3打开或截断的排液夹32。
58.排液管3设置在瓶体1的侧部，排液管3采用能够弯折软管，清洗过程中的下层洗液可通过倾斜瓶体1的方式方便地排出，避免了反复移液更换容器的过程，大大降低了因操作过程导致污染的几率；便于调节排液管3的方向以便于向其他容器中导送，设置在排液管3上的排液夹32，可有效控制液体排出量，确保样本有效保留。
59.一些可能的实现方式中，瓶盖2为透气盖或者密封盖31。瓶盖2可采用密封盖31的结构，在利用排液管3排出洗液或在离心后排出上层液体时，需要将密封盖31旋松，以使瓶体1内部和外部连通，保证瓶体1内外的压力平衡，实现洗液或组织悬液的顺利排出。
60.另外，作为一种并列的实施方式，还可以采用透气盖对瓶口11进行封堵，透气盖采用透气不透水的透气膜结构，既可以保证恒温摇床进行样本液的震荡时瓶体1的密封性，避免样本液从瓶口11流出造成的漏洒，又能够在排液管3排液时实现泄压作用。
61.以上仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。