技术特征：
1.grin2a基因编码区域第2636位点突变c.2636a>g/p.k879r在构建认知障碍动物模型中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述grin2a基因编码区域第2636位为a/g杂合型。3.grin2a基因编码区域第2636位点突变c.2636a>g/p.k879r动物模型在认知障碍的药物筛选、治疗效果评估、诊断靶标发掘中的应用。4.一种认知障碍动物模型，其特征在于，grin2a基因编码区域第2636位为a/g杂合型。5.一种认知障碍动物模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)根据k879位点周边序列设计一对sgrna识别序列，构建sgrna；(2)根据sgrna构建相应的donor载体；(3)显微注射donor载体至受精卵并移植至超排的受体小鼠，得到founder鼠；(4)通过pcr基因鉴定及测序筛选出阳性founder鼠，将阳性founder鼠与c57bl6/j背景鼠回交得到f1代，f1代互相配繁后，通过pcr引物并测序得到纯合和杂合基因敲入突变鼠，从三个月大开始对突变鼠和对照野生鼠进行开放场实验、y迷宫实验、新物体识别、条件性恐惧、morris水迷宫和突触可塑性等实验，确定其认知障碍表型。6.根据权利要求5所述的一种认知障碍动物模型的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述sgrna的序列为seq id no.1和seq id no.2。7.根据权利要求5所述的一种认知障碍动物模型的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述donor载体中突变敲入位点周围序列如seq id no.3所示，所述donor载体中在突变位点上游内含子区域制作一个44bp的插入序列如seq id no.4所示。8.根据权利要求5所述的一种认知障碍动物模型的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述pcr引物包括正向引物和反向引物，所述正向引物序列如seq id no.5所示，所述反向引物序列如seq id no.6所示。
技术总结
本发明研究了已知对神经发育障碍有强烈影响基因的一个新突变及其对认知障碍的风险；本发明的目的是以临床发现GRIN2A基因编码区域第2636位基因位点突变致第879个氨基酸突变(K879R，赖氨酸突变为精氨酸)导致全面发育迟缓的家系数据作为基础，建立起一种新的认知障碍小鼠模型；该基因突变的模型小鼠的LTP和LTD均严重受损，突触可塑性受损，并表现出学习和记忆受损的表型；为认知障碍发生的神经生物学发病机制提供了合适的工具，并为临床开发和干预认知障碍的药物提供了新的思路。预认知障碍的药物提供了新的思路。预认知障碍的药物提供了新的思路。
技术研发人员：胡平 石云 许争峰 王艳 张沁欣 孙瑞红 乔凤昌 李晴晴 陈江 臧彦玉
受保护的技术使用者：南京市妇幼保健院
技术研发日：2022.01.19
技术公布日：2022/5/17