技术特征：
1.一种生物絮凝剂，其特征在于，所述生物絮凝剂包括阳离子羟乙基纤维素以及胞外多糖；所述胞外多糖由分类学命名为农杆菌属lhzjx.a07(agrobacterium sp.lhzjx.a07)发酵产生，该菌株已保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no:62125，保藏日期为2022年3月17日，保藏单位地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所。2.权利要求1所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)从土壤中分离筛选出一株农杆菌属，经纯化后接入斜面培养基中保存；在无菌的条件下，用无菌水将斜面的菌苔清洗下来，取菌液接种于种子培养基中培养；(2)将步骤(1)中培养的种子液接种至发酵培养基中培养；(3)将步骤(2)中的发酵液离心，收集上清液即为胞外多糖粗液；(4)对步骤(3)得到的胞外多糖粗液进行浓缩、纯化、干燥后得到胞外多糖；(5)将羟乙基纤维素分散在异丙醇和水的混合液中，搅拌均匀，再加入25wt％naoh溶液以及65wt％3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵溶液进行反应；反应结束后，用丙酮进行提纯后洗涤、冷冻干燥，过筛即得阳离子羟乙基纤维素；(6)取步骤(5)制备的阳离子羟乙基纤维素，搅拌均匀后，再加入步骤(4)制备的农杆菌属胞外多糖，搅拌均匀后静置得到所述生物絮凝剂。3.根据权利要求2所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述种子培养基配方为：蔗糖(4～6g/l)、na2hpo4(1～4g/l)、mgso4·
7h2o(0.2～1g/l)、caco3(0.05～0.15g/l)、fecl3(0.001～0.01g/l)，ph＝6.5～7.5。4.根据权利要求2所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述发酵培养基配方为：kh2po4(0.1～0.5g/l)、mgso4·
7h2o(0.1～0.5g/l)、caco3(2～5g/l)、caso4(0.05～0.2g/l)、nacl(0.1～0.5g/l)、甘露醇(8～10g/l)，ph＝6.8～7.0。5.根据权利要求2所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述菌液接种于种子培养基中培养的条件为：30～40℃、125～150r/min培养12～24h；步骤(2)所述种子液接种至发酵培养基中培养的条件为：30～40℃、120～150r/min培养1～5d。6.根据权利要求2所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述对胞外多糖粗液进行浓缩、纯化、干燥得到胞外多糖，具体包括如下步骤：(a)将胞外多糖粗液用透析袋浓缩后得到胞外多糖浓缩液；将胞外多糖浓缩液加入乙醇，使用磁力搅拌器匀速搅拌5～10min后，静置12～24h，1
×
104～1.6
×
104r/min离心，弃上清液，收集沉淀；(b)向步骤(a)中收集到的沉淀中加入步骤(a)胞外多糖浓缩液1/3体积的纯水，37～45℃水浴溶解20～60min，离心收集上清液；(c)将步骤(b)收集的上清液加入乙醇，使用磁力搅拌器匀速搅拌5～10min后，静置12～24h，1
×
104～1.6
×
104r/min离心，弃上清液，收集沉淀、冷冻干燥、过60～100目筛即获得农杆菌属胞外多糖。7.根据权利要求6所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(a)所用透析袋的截留量为3～8kda，透析时间为48～72h；步骤(c)所述冷冻干燥的温度0～4℃；步骤(a)和步骤(c)所述乙醇的质量分数为95％～100％；步骤(a)所述胞外多糖浓缩液与乙醇的体积比为1:2～1:6，步骤(c)所述上清液与乙醇的体积比为1:2～1:6。
8.根据权利要求2所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述25wt％naoh溶液的加入量为3～8ml，65wt％3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵溶液的加入量为3～10ml，过筛目数为60～100。9.根据权利要求2所述的一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述反应的温度为60℃～70℃，反应的时间为2h～8h。10.一种由权利要求2-9任一项所述的制备方法得到的生物絮凝剂在蓝藻治理中的应用。
技术总结
本发明提供一种生物絮凝剂及其制备方法与在蓝藻治理中的应用。生物絮凝剂包括阳离子羟乙基纤维素和胞外多糖，胞外多糖是由分类学命名为农杆菌属LHZJX.A07(Agrobacterium sp.LHZJX.A07)发酵产生，该菌株已保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62125，保藏日期为2022年3月17日。胞外多糖制备方法包括从土壤富集培养稀释涂板筛选出农杆菌属；纯化后接入培养基培养，通过发酵出胞外多糖粗液，经过浓缩、纯化、干燥后得到。将制备好的阳离子羟乙基纤维素与胞外多糖相互配合得到所述生物絮凝剂，对蓝藻絮凝率达99.8％。同时，对蓝藻的叶绿素清除率达73％。对蓝藻的叶绿素清除率达73％。对蓝藻的叶绿素清除率达73％。
技术研发人员：周锦霞 刘浩
受保护的技术使用者：华南理工大学
技术研发日：2022.05.07
技术公布日：2022/8/12