一种纯化穿心莲内酯的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药提取物提取纯化加工领域，涉及一种制备纯化的穿心莲内酯的方法。
【背景技术】
[0002]穿心莲内酯为爵床科植物穿心莲中提取得到的二萜内酯类化合物，分子式为C2tlH3tlO5，是中药穿心莲的主要有效成分之一。现代药理研宄表明穿心莲内酯具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫调节、治疗心脑血管疾病、保肝利胆等作用，并有毒性低、价格便宜的特点。最近研宄报道穿心莲内酯对食道癌、前列腺癌、结肠癌和白血病等具有较好的抗肿瘤作用，有望成为一种新的抗癌药物。
[0003]传统的穿心莲内酯的提取纯化方法为乙醇提取，活性炭脱色除杂，过滤除去活性炭，浓缩回收乙醇，经过多步重结晶的制备方法。这种方法造成穿心莲内酯的大量损失，且活性炭不可重复利用，后期处理较复杂且污染环境。
[0004]目前已有很多专利描述了穿心莲内酯的提取纯化方法，例如编号为CN1935798B的中国专利提出的利用AB-8型大孔树脂分离纯化穿心莲内酯的方法，彭梦薇等利用HPD100型大孔树脂纯化穿心莲提取液(彭梦薇，韦藤幼，陈晓光等所著大孔树脂纯化穿心莲内部沸腾提取液的工艺研宄[J]中成药，2012，34(1):172-175)，但是均采用的单柱吸附，该方法大孔树脂利用率低，上样量小，且洗脱液使用量大，造成物料的很大浪费。
【发明内容】
[0005]本发明主要解决的技术问题是提供一种纯化穿心莲内酯的方法，利用该方法能够达到简便连续化生产、提高树脂利用率、减少洗脱剂使用量、提高穿心莲内酯纯度的目的。
[0006]为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是:提供一种纯化穿心莲内酯的方法，通过以下步骤实现:
(1)取穿心莲的地上生长部分为原料进行干燥并粉碎，将干燥粉碎后的穿心莲原料加入乙醇溶液进行浸提、过滤，得到含有穿心莲内酯的提取液，然后将所述提取液浓缩回收乙醇，再向所述提取液中加水以调节其中的乙醇浓度和穿心莲内酯浓度，使乙醇的浓度为15%~30% (v/v)，穿心莲内酯的浓度为0.5-2 mg/mL，此时的提取液即为上柱液；
(2)将所述上柱液以0.5-5 BV/h的流速通过第一根大孔树脂柱进行上样吸附，当上样的上柱液体积达到第一根大孔树脂柱的饱和吸附量时，切换使用第二根大孔树脂柱继续上样，当第二根大孔树脂柱上样时，饱和吸附的第一根大孔树脂柱开始洗脱，洗脱完成并经过再生处理后该第一根大孔树脂柱可以继续用于上样。
[0007]步骤(2)中所述上柱液体积达到第二根大孔树脂柱的饱和吸附量时，可以继续使用第三根以及多根大孔树脂柱进行所述上柱液的上样吸附。
[0008]步骤(I)中的乙醇溶液浸提时所用的乙醇浓度为90%~100% (v/v),所述提取料液的体积为所加干穿心莲原料重量的5~10倍，浸提提取次数为2~3次，浸提温度为15~50°C。
[0009]步骤(2)中所述的大孔树脂柱的装柱径高比为1:5~1:10。
[0010]步骤(2)中所述的上样吸附与大孔树脂柱切换过程为第一大孔树脂柱上样达到20-25 BV(柱床体积)时，第一大孔树脂柱达到饱和吸附状态，此时切换到第二大孔树脂柱继续上样，第二大孔树脂柱继续上样至5~10 BV,后续切换其他的大孔树脂柱上样量均为5~10BV0
[0011]步骤(2)中所述的大孔树脂柱上样吸附还包括以下步骤:首先使用1.0-3.0 BV的去离子水清洗大孔树脂柱，然后用1.0-3.0 BV的浓度为10%~30% (v/v)的乙醇溶液除去大孔树脂柱上杂质，最后使用4~8 BV的浓度为35%~60% (v/v)的乙醇溶液以1.0-4.0 BV/h的流速洗脱大孔树脂柱上的穿心莲内酯。
[0012]所述的上样和洗脱过程中的大孔树脂柱温度为20~40°C。
[0013]本发明应用多级膜纯化技术，通过多个大孔树脂柱以串联形式连续进行多次上样吸附，对穿心莲内酯吸附量大且解析率高，取代活性炭脱色除杂，减少了废物排放；大孔树脂柱可以连续使用，提高了树脂的利用率，且饱和吸附洗脱节省了洗脱剂的使用量；能够实现连续化生产，树脂再生容易，经济效益较好。
【具体实施方式】
[0014]下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0015]实施例一:
称取穿心莲的地上生长部分干燥并粉碎药材1.0 kg，加入10.0 L的90% (v/v)乙醇溶液浸提，重复提取两次，浸提温度为50°C，合并滤液，得到穿心莲醇提液。醇提液减压浓缩2倍，加水稀释，使乙醇浓度为15% (v/v),穿心莲内酯浓度为0.5mg/mL，即为上柱液；DM130大孔树脂的预处理:分别称取200.0 g树脂，用95% (v/v)的乙醇溶液浸泡24小时，分别将树脂装柱，径高比为1:10，用去离子水洗至无醇味，备用；上样与树脂柱的切换:将上柱液以5 BV/h的流速流经多个串联的大孔树脂柱，当上样20 BV时第一个大孔树脂柱达到饱和吸附，切换到第二个大孔树脂柱继续上样。第二个大孔树脂柱继续上样7 BV，后续切换上样均为7 BV0同时，切换后前一个大孔树脂柱开始洗脱；穿心莲内酯洗脱，步骤为:首先使用2.0 BV去离子水洗柱，然后用3.0 BV的浓度为20% (v/v)的乙醇水溶液除杂，最后使用
8.0 BV的浓度为35% (v/v)的乙醇水溶液以4.0 BV/h的流速洗脱穿心莲内酯，即得到高纯度的穿心莲内酯溶液；上样和洗脱过程中保持柱温20°C ;将吸附后的大孔树脂采用浓度为95% (v/v)的乙醇水溶液洗脱再生，后水洗至无醇味，将大孔树脂串联至大孔树脂柱组继续上样。检测制得的穿心莲内酯纯度达到73.85%溶液，总收率86.02%。
[0016]实施例二:
称取穿心莲的地上生长部分干燥并粉碎药材1.0 kg，加入7.0 L的95% (v/v)的乙醇溶液浸提，重复提取