由泰乐菌素发酵物滤液直接合成替米考星的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种由泰乐菌素发酵物滤液直接合成替米考星的方法，属于生物化学技术领域。
【背景技术】
[0002]替米考星(Tilmicosin)是一种较新的由泰乐菌素半合成的大环内酯类畜禽专用抗生素，八十年代由英国Elanco动物保健品公司开发成功。由于其特殊的抗菌活性和药动学特征，该药已被批准临床用于牛、山羊、绵羊、奶牛、猪、鸡等动物感染性疾病的防治，特别是畜禽呼吸道疾病，如家畜放线杆菌性胸膜肺炎、巴氏杆菌病和鸡霉形体病等及泌乳动物乳房炎的治疗。但传统合成工艺是由磷酸泰乐菌素开始合成，生产成本较高。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题在于在于克服替米考星的现有工艺中的不足之处，设计一种提取收率高，环境污染少以及成本低廉的合成方法。
[0004]本发明提供了一种由泰乐菌素发酵物滤液直接合成替米考星的方法，该方法包括下列步骤:
(一)发酵液预处理
1.发酵液加入1%硅聚合氯化铝处理后，板框过滤，待滤液较少流出时，向板框里顶水洗滤饼。
[0005]2.顶洗至滤液效价500，停止顶洗。
[0006]3.压榨至基本没有滤液流出。
[0007]( 二 )除杂
1.用截留分子量20000的陶瓷膜进行除杂操作。
[0008]2.待滤液剩余原滤液体积的10%时，向剩余滤液中加入原滤液10%的清水
3.继续除杂操作
4.待滤液又剩余原滤液体积的10%时，再向剩余滤液中加入原滤液10%的清水
5.继续除杂操作
6.待滤液又剩余原滤液体积的10%时，再向剩余滤液中加入原滤液10%的清水
7.继续除杂操作至虑出液效价低于500。
[0009]8.放掉剩余残留杂质 9.清洗陶瓷膜系统。
[0010](三)浓缩
1.用截留分子量300?500的纳滤膜进行浓缩操作。
[0011]2，打开物料进料阀，待分离料液进入物料罐，使罐内料液能够满足连续分离时的流量值和缓冲体积。打开料分离管道上所有阀门，使液体能够流经阀、泵、浮子流量计流到浓缩罐。低频率启动保安泵和输料泵(若有)，并调节频率控制电磁流量计满足设定值，物料流过进料管至浓缩液罐(此时应为系统内的存水)。
[0012]3，当物料流动稳定后，逐级打开进入组件的阀门，使物料进入膜组件，同时低频率启动组件循环泵。在满足内外循环流量的前提下调节各泵频率和调压阀，使滤液从渗透液管中透出，流经浮子流量计和转换阀，流到滤液罐。物料罐内液面下降时需及时补充保持液面高度，直至待分离物料全部加完。
[0013]4，溶液开始浓缩，继续调节各泵频率和调压阀，使滤液流量满足设定值(当压力达到设计值而滤液流量未达到时，以压力值为操作点)。
[0014]5，系统正在浓缩，排出渗透液及浓缩液，直至被分离物料过滤完成，关机停止运行。
[0015]6，当浓缩结束时，打开清洗进水阀并启动清洗泵，停止保安泵和进料泵(若有) 并关闭进料阀，用CIP罐内的纯水将系统中的浓缩液顶出系统至物料罐中
7，当系统内浓缩液已被顶出系统，阀门转入水循环状态。
[0016]8，当系统中的浓缩液尚未顶净，而CIP罐内的纯水不足时，要及时补充纯水，防止空气进入系统中。
[0017](四)转相
将醋酸丁酯，液碱，浓缩液经混合器混合后，PH在10.5?11.0，直接进入碟片式分离机，收集丁酯相，水洗后干燥。
[0018](五)胺化反应
在醋酸丁酯相中，搅拌状态下加入定量的3，5—二甲基哌啶和甲酸。然后保持该温度搅拌反应2小时，取样经HPLC分析。泰乐菌素含量< 1.5%视为反应完全，将反应液降温到22?26如果泰乐菌素含量>1.5%，则继续保温反应，多次取样分析，直到泰乐菌素含量〈1.5%为止。氨化结束，加入药用活性炭，脱色40分钟，经钛棒过滤器过滤。
[0019](六)水解反应
搅拌状态下，向浓缩液中缓慢滴加15%的盐酸调PH值，温度保持在20?25 '调好pH后缓慢升温至60°C，保温反应4小时，取样经液相分析。如果泰乐菌素B组分氨化物含量^ 1.5% (峰面积计)，则继续保持60°C反应，直到泰乐菌素B组分氨化物含量小于1.5%然后把反应液降到22?26
[0020](七)结晶离心
保持22?26 ，搅拌状态下滴加氢氧化钠溶液，调节pH值至有少量结晶物出现，保温20分钟，继续滴加液碱至ρΗΙΟ.5?11.0，调好pH后保温搅拌60分钟，经转鼓离心机离心分离，然后用纯化水洗涤，甩干，晶体烘干后粉碎包装。
[0021]本发明的有益好处是:合成效果好，产品纯度高，收率高，可以大量减少有机溶剂的使用，降低了生产成本，减轻了环保压力，适合于规模化工业生产。
[0022]【具体实施方式】:
一，发酵液预处理
1.发酵液加入1%硅聚合氯化铝处理后，板框过滤，待滤液较少流出时，向板框里顶水洗滤饼。
[0023]2.顶洗至滤液效价500，停止顶洗。
[0024]3.压榨至基本没有滤液流出。
[0025]二，除杂
1.用截留分子量20000的陶瓷膜进行除杂操作。
[0026]2.待滤液剩余原滤液体积的10%时，向剩余滤液中加入原滤液10%的清水
3.继续除杂操作
4.待滤液又剩余原滤液体积的10%时，再向剩余滤液中加入原滤液10%的清水
5.继续除杂操作
6.待滤液又剩余原滤液体积的10%时，再向剩余滤液中加入原滤液10%的清水
7.继续除杂操作至虑出液效价低于500。
[0027]8.放掉剩余残留杂质 9.清洗陶瓷膜系统。
[0028]三，浓缩
1.用截留分子量300?500的纳滤膜进行浓缩操作。
[0029]2.打开物料进料阀，待分离料液进入物料罐，使罐内料液能够满足连续分离时的流量值和缓冲体积。打开料分离管道上所有阀门，使液体能够流经阀、泵、浮子流量计流到浓缩罐。低频率启动保安泵和输料泵(若有)，并调节频率控制电磁流量计满足设定值，物料流过进料管至浓缩液罐(此时应为系统内的存水)。
[0030]3.当物料流动稳定后，逐级打开进入组件的阀门，使物料进入膜组件，同时低频率启动组件