Yap蛋白抑制多肽及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及肿瘤治疗领域，具体地，涉及新的YAP蛋白抑制多肽，用于治疗消化道 肿瘤。
【背景技术】
[0002] 肝癌是全球高发病率的癌症种类之一，特别是在中国，由于病毒性肝炎高发，慢性 病毒性肝炎的主要预后将发展成为肝硬化，以致肝癌。目前的医疗水平还没有掌握任何技 术和方法可以治愈肝癌，最主要的治疗方法是采取外科手术局部切除肿瘤，极少数可以进 行肝脏切除并接受肝脏移植。由于没有办法彻底清除潜在的病灶，接受手术后肝癌的复发 率极高，据统计，3年内的复发率约40%，七年内超过90%。
[0003] 近年来，虽然已经开发了各种不同的肿瘤治疗药物和手段，但对于肝癌等恶性肿 瘤，疗效并不理想。
[0004] 因此本领域迫切需要寻找一种有效的治疗消化道肿瘤，尤其是肝癌的方法。
【发明内容】
[0005] 本发明提供了一种创新的消化道肿瘤治疗药物，所述药物为多肽，可极其有效地 抑制YAP蛋白，进而抑制肿瘤。
[0006] 本发明提供了一种YAP蛋白抑制多肽及其用于治疗消化道肿瘤尤其是肝癌的用 途。
[0007] 本发明第一方面，提供了一种分离的多肽，所示的多肽具有式A所示的结构：
[0008] X0-Y1-Y2-Y3-Y4-Y5-Y6-Xa-Xe 式A [0009]式中，
[0010] X。或Xa为无，或1、2、3或4个氨基酸残基；
[0011] Y1SAPJP,或无；
[0012] Y2SX^X2-X2a，其中X1选自M、F、C或Hcy;X2为任意氨基酸残基（较佳地乂2为C、 Hey、L、M、F);以及X2aSL、Nle、C、Hey、K或R;
[0013] Y3为X3a-X3-X4,其中X3a为碱性氨基酸R或K;X3为任意氨基酸（较佳地X3为K、R、 此丫、(3、〇111或〇313);以及乂4为任意氨基酸（较佳地为1、犯6、扮^、〇，且￥ 3中至少一个氨 基酸为Hcy或C;
[0014] Y4SP;
[0015] \为父5，且乂5为任意氨基酸（较佳地乂5为4、0、或已） ；
[0016] \为S-X6a-x6，其中^为F、C、或Hcy;和X6为任意氨基酸残基（较佳地X6为C、 Hcy、F、K*R)
[0017] \为X7-P-X7a，其中X7为任意氨基酸残基（较佳地心为C、Hey、K、R或P);X C、Hcy或P;
[0018] XeS无或细胞穿透元件；
[0019] 且所述的多肽具有Yes相关蛋白（Yes-associatedprotein,YAP)活性抑制作用；
[0020] 在另一优选例中，YjP/或Y3中至少一个氨基酸为Hcy或C;和Y6或Y7中至少一 个氨基酸为Hcy或C。
[0021] 在另一优选例中，Y2中至少一个氨基酸为Hcy或C。
[0022] 在另一优选例中，Y3中的X%或X3为Hcy或C。
[0023] 在另一优选例中，Y5 (或X5)为Hcy或C，或任意氨基酸残基。
[0024] 在另一优选例中，Y6中的X63或X6为Hcy或C。
[0025] 在另一优选例中，Y7中的X7或X73为Hcy或C。
[0026] 在另一优选例中，所述的Xe为细胞穿透元件。
[0027] 在另一优选例中，所述的XpX2、X2a、X3、X3a、X5、X6、X6a、\和X7a之间任选地形成至 少一对二硫键。
[0028] 在另一优选例中，所述的XpX2、X2a、X3、X3a、X5、X6、X6a、\和X73之间任选地形成1 或2对二硫键。
[0029] 在另一优选例中，所述的二硫键在选自X2、X2a、X3、X3a的一个氨基酸与选自X5、 X6、X6a、\和X7a的一个氨基酸之间形成。
[0030] 在另一优选例中，所述的二硫键位于XJPX6a之间、XJPX6之间、X2JPX7之间、 XjPX7 之间、XJPX7a之间。
[0031] 在另一优选例中，所述的二硫键位于XgX6之间、X5%X7之间、X2%X7之间、或 x5%x6之间。
[0032] 本发明第二方面，提供了一种分离的多肽，所述的多肽具有式V所示的结构：
[0033]X0-Z-Xa-Xe (V)
[0034]式中，
[0035]Xc^Xa为无，或1、2、3或4个氨基酸残基；
[0036]XeS无或细胞穿透元件；
[0037]Z为具有引入的链内二硫键的YAP抑制多肽，
[0038] 并且所述Z中去除所述链内二硫键所对应的氨基酸之后具有式Va所示的基本序 列：
[0039]Z1-Z2-Z3-Z4-Z5-Z6-Z7-Z8-Z9-Z10-Z11-Z12-Z13-Z14-Z15-Z16
[0040]式Va
[0041]式中，
[0042]Zl为V、A 或无；
[0043]Z2 为P、A 或无；
[0044]Z3为M、F、L或氯苯丙氨酸；
[0045]Z4 为R、K、A或无；
[0046]Z5 为L、Nle、A或无；
[0047]Z6 为R、或K;
[0048] Z7SK、R、0rn、Dab、*A;
[0049]Z8 为L、或Nle;
[0050]Z9 为P;
[0051]ZlO为任意天然或非天然氨基酸，优选D、A、V、L、I或E;
[0052]Zll为S、或T;
[0053]Z12为F、L、或氯苯丙氨酸；
[0054]Z13为F、L、氯苯丙氨酸、或无；
[0055]Z14 为K、R、A或无；
[0056]Z15 为P、A或无；
[0057]Z16 为P、A或无；
[0058] 其中，所述的二硫键的第一氨基酸Bl位于所述基本序列中Zl至Z8所构成的第一 区段中任意两个氨基酸之间或位于所述第一区段的第一个氨基酸之前，而二硫键的第二 氨基酸B2位于所述基本序列中Z9至Z16所构成的第二区段中任意两个氨基酸之间或位于 所述第二区段的最后一个氨基酸之后。
[0059] 在另一优选例中，Z4和Z5不同时为无。
[0060] 在另一优选例中，第一氨基酸Bl位于Z2和Z3之间、Z3和Z4之间、Z3和Z5之间 (此时Z4为无）、Z4和Z5之间、Z7和Z8之间；和/或
[0061] 第二氨基酸B2位于Zll和Z12之间、Z12和Z13之间、Z13和Z14之间、Z14之后 (此时Z15和Z16为无）、Z15之后（此时Z16为无）、Z16之后。
[0062] 在另一优选例中，所述式Va中Z3至Z13所示序列与SEQIDNO. : 1中第3 - 13 位所示的序列相差不超过1、2、3、4、5个氨基酸，较佳地，不超过3、4个氨基酸。
[0063] 注：SEQIDNO. : 1中第3-13位或对应于的Z3至Z13所构成的序列为核心序列。
[0064] 在另一优选例中，第一氨基酸Bl和第二氨基酸B2之间间隔3-14个（较佳地4-12 个，更佳地4-10个，最佳地7、8、或9个）氨基酸。
[0065] 在另一优选例，所述的第一氨基酸Bl和第二氨基酸B2各自独立地选自Hcy或C。
[0066] 在另一优选例中，一个或多个选自Z1、Z2、Z14_Z16的氨基酸为无。
[0067] 在另一优选例中，所述的任意氨基酸包括天然或非天然氨基酸。
[0068] 在另一优选例中，所述二硫键之间的间隔距离为4、5、6、7、8、9、或10个氨基酸（不 含形成二硫键的氨基酸）。较佳地，间隔距离为5、6、7、8、或9个氨基酸。
[0069] 在另一优选例中，所述二硫键的数量为1对。
[0070] 在另一优选例中，所述式A或式V多肽含有至少一个非天然氨基酸。
[0071] 在另一优选例中，所述式A或式V多肽与SEQIDNo. :1的相同性（或同源 性）彡 50%，彡 60%，彡 70%，彡 80%，彡 90%。
[0072] 在另一优选例中，所述式A或式V多肽保留了SEQIDNo. :1的生物活性的至少 彡 50%，彡 60%，彡 70%，彡 80%，彡 90%、彡 100%，例如 80-500%，较佳地 100-400%。
[0073] 在另一优选例中，所述的生物活