制备噻吩并嘧啶化合物的方法
【专利说明】制备噻吩并嘧啶化合物的方法
[0001] 相关申请的交叉参考
[0002] 按照37CFR§ 1.53(b)提交的本非临时申请要求按照35USC§ 119(e)于2012年10 月10日提交的美国临时申请系列号61/711，900的权益，其通过提述以整体并入。 发明领域
[0003] 本发明涉及制备PI3K抑制剂化合物⑶C-0980的方法。
[0004] 发明背景
[0005] 磷酸肌醇3-激酶（PI3K)是在肌醇环的3-羟基残基对脂质进行磷酸化的 脂质激酶（lipid kinase) (Whitman 等（1988)Nature，332:664) D 由 PI3-激酶生成 的3'-磷酸化磷脂（PIP3)充当第二信使，所述第二信使募集具有脂质结合域（lipid binding domain)(包括锤型同源性（PH)区）的激酶（如Akt和磷酸肌醇依赖性激 酶-l(phosphoinositide_dependent kinase-1， PDKl))。 Akt 与膜 PIP3 的结合引起 Akt向质膜的易位，使得Akt与TOKl接触，这是激活Akt的原因。肿瘤抑制因子磷酸酶 (tumor-suppressor phosphatase)PTEN对PIP3进行去磷酸化，因此充当Akt激活的负调 节物。PI3-激酶Akt和TOKl在许多细胞过程（包括细胞周期调节、增殖、存活、细胞凋亡 (apoptosis)和运动性（motility))的调节中是重要的，并且是疾病如癌症、糖尿病和免疫 炎症的分子机理的重要组成部分（Vivanco等（2002)Nature Rev. Cancer 2:489 ;Phillips 等（1998)Cancer 83:41)。
[0006] 癌症中主要的PI3-激酶同工型为I类PI3-激酶，pllO a (alpha) (US 5824492 ; US 5846824 ;US 6274327)。其它同工型牵涉在心血管疾病和免疫-炎症性疾病中（Workman P (2004)Biochem Soc Trans 32:393-396 ;Patel 等（2004)Proceedings of the American Association of Cancer Research(Abstract LB-247)95th Annual Meeting, March 27-31，Orlando,Florida，USA ;Ahmadi K 和 Waterfield MD(2004)Encyclopedia of Biological Chemistry (Lennarz W J，Lane M D 编）Elsevier/Academic Press) 〇 PI3 激 酶/Akt/PTEN途径对癌症药物开发而言是有吸引力的靶标，这是因为所述调节剂或者抑制 剂被预期在癌细胞中抑制增殖、逆转对细胞凋亡的阻抑以及克服对细胞毒素剂（cytotoxic agent)的抗药性（Folkes 等（2008) J. Med. Chem. 51:5522-5532 ;Yaguchi 等（2006) Jour, of the Nat. Cancer Inst. 98(8) :545-556)。PI3K-PTEN-AKT 信号传导途径在众多癌症中失去 调节（Samuels Y，Wang Z，Bardellil A 等 High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers. (2004) Science ;304 (5670) : 554 ;Carpten J，Faber AL, Horn CA transforming mutation in the pleckstrin homology domain of AKTlin cancer"(2007) Nature ;448:439-444)。
[0007] ⑶C-0980 (Genentech，Inc.，Roche，RG-7422)在临床前异种移植物癌症模 型、乳腺癌、卵巢癌、肺癌和前列腺癌中证实了广泛的活性，且正在针对癌症包括实体 瘤和非何杰金淋巴瘤的潜在口服治疗进行开发（Wagner AJ;Burris III HA;de Bono JS 等 AACR-NCI-E0RTC International Congress (2009)，21st:November 17 (Abs B137) "Pharmacokinetics and Pharmacodynamic biomarkers for the dual PI3K/mT0R inhibitor ⑶C-0980:initial phase I evaluation" ；US7888352;US 2009/0098135 ;US 2010/0233164)。在2009年3月，在具有实体瘤或者NHL的患者中开始进行I期试验；在 2009年4月，开始进行第二次I期试验；这些试验在2010年4月仍在进行。在2010年12月， 开始在转移性乳腺癌中进行Ib期组合试验。在2010年7月，计划在2011年前半年在转移性 乳腺癌中进行II期试验；患者将接受与激素疗法组合的GDC-0980。迄今为止的临床结果表 明⑶C-0980可使具有实体瘤或者血液恶性肿瘤的患者受益（Sutherlin DP, Belvin M，Bao L等，American Association for Cancer Research Annual Meeting, (2011)102nd:April 04(Abs 2787)) 〇
[0008] ⑶C-0980是I类P13K和mTOR激酶的一种有效的、选择性的口服抑制剂，其对 PI3K 的 I 类亚型具有以下体外生化 IC50 :pll0a(alpha)4. 8ηΜ ;ρ110β (beta)26. 8nM ; pll0(gamma)13.8nM;pll0d(delta)6.7nM;mT0R Ki 17·3ηΜ。⑶C-0980 对于 PI3K 相较于大 量的激酶（>145)(包括磷脂酰肌醇激酶家族的其它成员）具有选择性。在PC3和MCF7-neo/ HER2细胞系中，该化合物分别表明307和320nM的IC50值。GDC-0980在人类微粒体和肝细 胞中是稳定的，展现出对hERG的低活性，IC50>100yM(微摩尔）并且在受体筛选实验中不 引发显著的反应（n = 68 ;⑶C-0980 = 10 μΜ)。在啮齿动物（60ml/min/kg)和狗（12ml/min/ kg)中观测到中至高清除率。该化合物的终末半衰期为6至18h，在单次口服给药后AUC和 Cmax值呈剂量比例增加。⑶C_0980(25至150mg/kg qdpo)在多种异种移植物模型（包括小 鼠 PC3PTEN-前列腺和MCF7. 1E545K乳腺异种移植物模型）中是有效的。在MDA-MB-361. 1 乳腺癌异种移植物模型中，⑶C-0980在最小剂量I. 0mg/kg QD产生显著的生长抑制。
【发明内容】
[0009] 本发明涉及制备双重mT0R/PI3K抑制剂⑶C-0980及其立体异构体、几何异 构体、互变异构体和药用盐的方法，所述⑶C-0980名为（S) -1- (4- ((2- (2-氨基嘧 啶-5-基）-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3, 2-d]嘧啶-6-基）甲基）哌嗪-1-基）-2-羟基 丙-1-酮，其具有以下结构：
[0010]
【主权项】
1. 制备具有以下