079] -种用于从发酵培养液中萃取安丝菌素的工艺，所述工艺包括：
[0080] 1)任选地使发酵培养液中产安丝菌素的微生物失活；以及
[0081] 2)用不相溶于水的非芳香族溶剂从发酵培养液中萃取安丝菌素。
[0082] 上述工艺还可以包括，在步骤2之前处理培养基以促进溶剂萃取安丝菌素。
[0083] 一种用于从发酵培养液中萃取安丝菌素的工艺，所述工艺包括：
[0084] 1)用不相溶于水的非芳香族溶剂从发酵培养液中萃取安丝菌素，以及
[0085] 2)过滤以除去固体，允许有机相分离。
[0086] 上述工艺可以任选地包括：
[0087] (i)化学灭活或热灭活发酵培养液中的微生物；和/或
[0088](ii)在步骤2之前，处理培养基以促进溶剂萃取安丝菌素。
[0089] -种用于从发酵培养液中萃取安丝菌素的工艺，所述工艺包括：通过各种离心技 术，用不相溶于水的非芳香族溶剂从培养基中萃取安丝菌素。
[0090] 上述工艺可以任选地包括：
[0091] (i)化学灭活或热灭活发酵培养液中的微生物；和/或
[0092](ii)在离心之前或在离心期间，处理培养基以促进溶剂萃取安丝菌素。
[0093] 一种用于从发酵培养液中除去固体残余物的工艺，所述工艺包括：
[0094] 1)在有水溶性有机溶剂存在的情况下，离心发酵培养液以除去固体，同时在溶液 中保留安丝菌素。
[0095] 上述工艺可以任选地包括：
[0096] (i)化学灭活或热灭活发酵培养液中的微生物；和/或
[0097] (ii)在离心之前或在离心期间，处理培养基以促进溶剂萃取安丝菌素。
[0098] 在上述方法中，优选产安丝菌素的微生物是束丝放线菌，进一步优选是珍贵橙 色束丝放线菌。产安丝菌素的微生物还可以是珍贵橙色束丝放线菌ATCC31565或其衍 生菌株，或者是珍贵橙色束丝放线菌PF4-4(ATCCPTA-3921)或其衍生菌株。如美国专 利No. 4, 450, 234所述，珍贵橙色束丝放线菌ATCC31565被保藏在如下单位：（i)发酵研 宄所，Osalca，17-85，Juso-honmachi2-chome，Yodogawa-ku，大阪 532-8686，日本，1979 年8月20日，保藏编号IFO13963 ;(ii)日本国家生命科学和人类技术研宄所（先前的 发酵研宄所），AgencyofIndustrialScienceandTechnology，国际贸易与工业部， 卜3，higashi1-chome，Tsukuba-shi，Ibaraki-ken305，日本，1979 年 8 月 29 日，保藏 编号FERM-PN0.5185;以及（iii)美国典型培养物保藏中心，10801UniversityBlvd.， Manassas，弗吉尼亚20110-2209,美国，1979年9月11日，保藏编号ATCC31565。此外，珍 贵橙色束丝放线菌PF4-4按布达佩斯条约被保藏在下述单位：美国典型培养物保藏中心， 10801UniversityBlvd.，Manassas，弗吉尼亚 20110-2209,美国，2001 年 12 月 11 日，保藏 编号ATCCPTA-3921。
[0099] 特别地，本发明涉及以下各项：
[0100] 1. 一种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：
[0101] 1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物；
[0102] 2)用不相溶于水的非芳香族溶剂从培养基中萃取安丝菌素；
[0103] 3)浓缩萃取的安丝菌素；以及
[0104] 4)通过a)和b)中的任何一个纯化安丝菌素：
[0105]a)析晶，和
[0106] b)先析晶，然后在硅胶或氧化铝上吸附层析。
[0107] 2.-种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：
[0108] 1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物；
[0109] 2)处理培养基以促进溶剂萃取安丝菌素；
[0110] 3)用不相溶于水的非芳香族溶剂从培养基中萃取安丝菌素；
[0111] 4)浓缩萃取的安丝菌素；以及
[0112] 5)通过a)和b)中的任何一个来纯化安丝菌素：
[0113]a)析晶，和
[0114] b)先析晶，然后在硅胶或氧化铝上吸附层析。
[0115] 3.-种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：
[0116] 1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物；
[0117]2)用不相溶于水的非芳香族溶剂从培养基中萃取安丝菌素；
[0118] 3)过滤以除去固体，从而允许有机相分离；
[0119] 4)从有机相中浓缩安丝菌素；以及
[0120] 5)通过a)、b)、c)和d)中的任何一个来纯化安丝菌素：
[0121] a)在硅胶或氧化铝上吸附层析，
[0122]b)析晶，
[0123]c)先在硅胶或氧化铝上吸附层析，然后析晶，以及
[0124]d)先析晶，然后在硅胶或氧化铝上吸附层析。
[0125] 4.如第3项所述的工艺，其特征在于，还包括在过滤期间使用助滤剂。
[0126]5.-种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：
[0127]1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物；
[0128]2)采用离心技术，用不相溶于水的非芳香族溶剂从培养基中萃取安丝菌素；
[0129] 3)浓缩萃取的安丝菌素；以及
[0130] 4)通过a)、b)、c)和d)中的任何一个来纯化安丝菌素：
[0131]a)在硅胶或氧化铝上吸附层析，
[0132]b)析晶，
[0133]c)先在硅胶或氧化铝上吸附层析，然后析晶，以及
[0134]d)先析晶，然后在硅胶或氧化铝上吸附层析。
[0135]6.-种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：
[0136]1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物；
[0137] 2)在有水溶性有机溶剂存在的情况下，离心培养基以除去固体；
[0138] 3)添加不相溶于水的非芳香族溶剂，将安丝菌素萃取至有机层中；
[0139] 4)浓缩萃取的安丝菌素；以及
[0140]5)通过a)、b)、c)和d)中的任何一个来纯化安丝菌素：
[0141]a)在硅胶或氧化铝上吸附层析，
[0142] b)析晶，
[0143] c)先在硅胶或氧化铝上吸附层析，然后析晶，以及
[0144] d)先析晶，然后在硅胶或氧化铝上吸附层析。
[0145] 7.如第6项所述的工艺，其特征在于，在萃取期间将盐添加到所述有机相中。
[0146] 8.-种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：
[0147] 1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物；
[0148] 2)通过固相萃取，将安丝菌素从培养基中萃取到树脂上；
[0149] 3)使用有机溶剂或混有水的有机溶剂，从树脂中等度洗脱或梯度洗脱安丝菌素；
[0150] 4)浓缩经洗脱的安丝菌素；以及
[0151] 5)任选通过a)、b)、c)和d)中的任何一个来纯化安丝菌素：
[0152]a)在硅胶或氧化铝上吸附层析，
[0153] b)析晶，
[0154]c)先在硅胶或氧化铝上吸附层析，然后析晶，以及
[0155]d)先析晶，然后在硅胶或氧化铝上吸附层析。
[0156] 9.如第1-8项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述产安丝菌素的微生物是束 丝放线菌Actinosynnemaspp〇
[0157] 10.如第1-8项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述产安丝菌素的微生物是珍 贵授色束丝放线菌Actinosynnemapretiosum。
[0158] 11.如第1-8项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述产安丝菌素的微生物是珍 贵橙色束丝放线菌ATCC31565或其衍生菌株。
[0159] 12.如第1-8项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述产安丝菌素的微生物是珍 贵橙色束丝放线菌PF4-4(ATCCPTA-3921)或其衍生菌株。
[0160] 13.如第2项所述的工艺，其特征在于，所述处理包括通过加热发酵培养液或通过 向发酵培养液添加氯仿来使微生物失活。
[0161] 14.如第2项所述的工艺，其特征在于，所述处理包括加热、调节pH、酶催化处理或 化学处理。
[0162] 15.如第14项所述的工艺，其特征在于，所述化学处理包括添加聚硫酸铁、脱乳化 剂、气相法二氧化硅或助溶剂。
[0163] 16.如第14项所述的工艺，其特征在于，通过将所述培养液加热到约50~55°C， 使所述微生物失活。
[0164] 17.如第1-8项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述萃取在pH约为6~7处进 行。
[0165] 18.如第1-8项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述萃取在温度约为30~ 45 °C处进行。
[0166] 19.如第1-7项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述不相溶于水的非芳香族溶 剂选自于由烷基乙酸酯、二烃基酮、以及卤化溶剂所构成的组，所述烷基乙酸酯中的烷基链 是线性的或分支的并具有1~5个碳原子。
[0167] 20.如第1-7项中任一项所述的工艺，其特征在于，所述不相溶于水的非芳香族溶 剂选自于